溫育
- 特應(yīng)性皮炎患兒482例血清過敏原檢測結(jié)果分析
測所需膜條放置于溫育槽中,分別加入1.0 mL已稀釋的通用緩沖液進行預(yù)處理,溫育5 min后吸去液體;在溫育槽中加入1.0 mL未稀釋的樣本,在搖床上溫育60 min;吸去槽內(nèi)血清,用1.0 mL的通用緩沖液清洗膜條3次,然后在溫育槽中加入1.0 mL酶結(jié)合物(堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE,單克隆),于搖床上溫育60 min;如上述步驟清洗后加入1.0 mL底物液,于搖床上溫育10 min;清洗3次后將膜條放置在結(jié)果判定模塊中,風(fēng)干后判斷結(jié)果。(2)總IgE
現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生 2023年19期2023-10-26
- 靶向CD30的CAR-T細胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)條件優(yōu)化研究
on，MOI）、溫育密度、轉(zhuǎn)導(dǎo)前活化時間和轉(zhuǎn)導(dǎo)體系高度等［18-20］。本實驗旨在優(yōu)化抗CD30 CAR-T細胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)參數(shù)，以制備出高質(zhì)量的抗CD30 CAR-T細胞，以期為臨床試驗所需的大量細胞的制備提供依據(jù)，同時也為其他靶點CAR-T細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化提供參 考。1 材料和方法1.1 試劑抗CD30 CAR慢病毒和CD30檢測蛋白為武漢波睿達生物科技有限公司贈予，人原代T細胞從人外周血中提取，人CD3磁珠和人T cell TransAct購自德國Mi
中國癌癥雜志 2023年7期2023-08-17
- 自制糖化血紅蛋白質(zhì)控品及其臨床應(yīng)用
葡萄糖,37 ℃溫育48 h,HbA1c達到預(yù)期目標(biāo)濃度(13.0%～16.0%)后將血紅蛋白液放入透析袋中,置于0.05 mol/L pH 6.80磷酸鹽緩沖液中,4 ℃透析24 h,中間換緩沖液1次。1.3.2不同水平糖化血紅蛋白質(zhì)控品配制 分別配制3個濃度水平質(zhì)控品,水平1(目標(biāo)值:5.0%～6.0%),體檢健康者血紅蛋白混合而成;水平2(目標(biāo)值:9.0%～10.5%)和水平3(目標(biāo)值:13.0%～16.0%),分別用水平1與1.3.1過程中生成的高
臨床檢驗雜志 2023年2期2023-05-18
- 淺析口蹄疫阻斷ELISA 試驗中易出現(xiàn)的問題及其糾正措施
速完成。3.2 溫育過程常出現(xiàn)的問題3.2.1 溫育板上不加蓋 抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育。溫育過程在ELISA 檢測中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。溫育常采用的溫度有43 ℃、37 ℃、室溫等。37 ℃ 是實驗室中常用的溫育溫度，為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋或用塑料貼紙覆蓋板孔（FMD-3ABC 和CSFV 試劑盒）。在試驗操作過程中往往板上不加蓋。3.2.2 反應(yīng)板疊放 溫育過程中，若要求室溫溫育，則一般
山東畜牧獸醫(yī) 2022年11期2022-12-31
- 固相阻斷ELISA法檢測口蹄疫病毒O型抗體的不確定度評定
0542.2.3溫育時間的不確定度(B類) 試驗中，孵育時間分別為1 h(±2 min)、1 h(±2 min)、15 min(±1 min)，根據(jù)均勻統(tǒng)計分布計算，其標(biāo)準差分別為2 min/31/2=1.1547 min，2 min/31/2=1.1547 min，1 min/31/2=0.5774 min。u(T1)=[1.15472/602+1.15472/602+0.57742/152]1/2=0.0471溫育溫度的不確定度(B類) 試驗共需孵育3
浙江畜牧獸醫(yī) 2022年5期2022-11-01
- 免疫印跡法檢測ENA抗體在診斷自身免疫性疾病中的應(yīng)用價值
。將檢測膜條放入溫育槽中，并在每槽中加入1.5 mL 的樣本緩沖液，搖擺搖床溫育5 min。在裝有膜條的測定槽中加入1 mL 的洗滌劑和10 μL的血清，置于37℃的溫水中洗滌30 min。取出后連續(xù)洗滌4 次，每間隔1 min 需通過濾紙進行吸干處理。之后行第一步溫育處理：吸去槽內(nèi)液體，在溫育槽中分別加入1.5 mL 已稀釋（1:101）的血清，搖擺搖床溫育30 min。清洗：吸去槽內(nèi)液體，在搖擺搖床上用1.5 mL工作濃度的清洗緩沖液清洗膜條3 次，每
當(dāng)代醫(yī)藥論叢 2022年16期2022-10-23
- 基于連續(xù)監(jiān)測法快速檢測HBsAg*
行混合，37 ℃溫育反應(yīng)17 min(溫育1)后，加入175 μL通用液再37 ℃溫育反應(yīng)15 min(溫育2)，其cut off值為0.05 IU/mL，即按照該程序所得結(jié)果大于0.05 IU/mL時判斷為陽性。選取該方法檢測HBsAg陽性樣本128份，無明顯溶血、脂血和膽紅素血。其中，87例為0.05～0.5 IU/mL范圍內(nèi)的弱陽性樣本，陰性樣本157例。1.2.2確定連續(xù)監(jiān)測法檢測程序(方案2) (1)確定“溫育1”反應(yīng)時間。取3例陽性樣本(濃度范
臨床檢驗雜志 2022年5期2022-07-11
- Vitek MS快速檢測產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌目細菌的效果評估
血平板，35 ℃溫育過夜。取復(fù)蘇后的新鮮單菌落，用紙片擴散法復(fù)核亞胺培南和美羅培南的藥敏結(jié)果，抑菌圈的判讀標(biāo)準參照2021年CLSI M100-S31文件。1.2.2Vitek MS鑒定 以大腸埃希菌ATCC 8739作為質(zhì)控菌株，通過Vitek MS對試驗菌株進行鑒定。鑒定操作參考Vitek MS標(biāo)準操作規(guī)程。1.2.3碳青霉烯酶基因檢測 采用PCR方法對A組和B組菌株進行blaKPC、blaVIM、blaIMP、blaNDM和blaOXA-48碳青霉烯
臨床檢驗雜志 2022年2期2022-03-30
- 肝癌患者化療栓塞術(shù)后早期外周血免疫細胞的變化
，混勻后室溫避光溫育15 min。再加入0.5 mL溶血素混勻，避光溫育10 min后加0.5 mL鞘液上流式細胞儀檢測。（3）CD45modCD11b+CD14-CD15-細胞的檢測：于流式管中加入單克隆抗體CD11b FITC和CD15 RD1 20 μL，CD14 PC5 和 CD45 PC7 10 μL，加入100 μL血液，混勻后室溫避光溫育15 min。再加入0.5 mL溶血素裂解紅細胞，避光溫育10 min后，用鞘液洗滌1次，加0.5 mL鞘
浙江臨床醫(yī)學(xué) 2022年1期2022-03-02
- 金屬抗菌肽SIF4對大腸桿菌的抑菌機制
30 r/min溫育3 h,間隔0.5 h吸取5 mL菌懸液于6 500 r/min離心10 min,取上清液與0.5 mL 1 g/L PNPP溶液混勻,37 ℃暗處理30 min,加入0.2 mL 1 mol/L NaOH終止反應(yīng),測定OD405 nm值[11]。1.2.4 胞內(nèi)K+泄露的測定取對數(shù)生長期菌液6 500 r/min離心10 min,用無菌去離子水洗滌菌體3次并重懸(OD600 nm=0.5),加入SIF4使終濃度為1/2 MIC、MIC
食品與發(fā)酵工業(yè) 2022年1期2022-01-24
- 淺談影響ELISA試驗結(jié)果的因素
溫度與時間的控制溫育是 ELISA至關(guān)重要的一步。只有在適宜的溫度下抗體和抗原才能充分反應(yīng)結(jié)合，每個試劑盒都有規(guī)定的溫育溫度，一般溫育溫度是37℃。不同的溫育環(huán)境對檢測結(jié)果有影響，在試驗開始之前應(yīng)提前將電熱恒溫箱開啟，并按照試劑說明書上的要求設(shè)置好溫育溫度，以確保能在規(guī)定的溫度下進行反應(yīng)，同時不要反復(fù)開關(guān)恒溫箱門，以免溫度過低影響酶的反應(yīng)，從而影響試驗結(jié)果的準確性。除此之外，溫育時間也是影響檢測結(jié)果的一大因素，在ELISA檢測中，要嚴格按照說明書的要求控制
當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè) 2021年3期2021-12-03
- 41 ℃溫浴對高效價冷凝集素樣本血常規(guī)檢測結(jié)果的影響
℃)及37 ℃溫育不同時間混勻后，以手動進樣方式用Sysmex XN- 9000血液分析儀進行血常規(guī)分析，另一管41 ℃溫育30 min后以同樣方式上機檢測。血細胞分析儀配套稀釋液、溶血劑均為原廠試劑。同時將上述標(biāo)本分別用預(yù)熱玻片制作外周血涂片進行瑞氏染色，用顯微鏡觀察紅細胞分布情況。為了評估孵育本身對結(jié)果的影響，收集門診和住院患者的血常規(guī)標(biāo)本共74例，排除冷凝集素、溶血、黃疸和乳糜血的干擾，所有標(biāo)本在室溫下檢測完成后，置于41 ℃水浴箱水浴30、60
中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報 2021年4期2021-09-08
- 基于新城疫病毒NP蛋白的間接ELISA抗體檢測方法的建立
L/孔)，37℃溫育2 h，洗滌3次；用1%的脫脂乳稀釋待檢血清，加至酶標(biāo)板(100 μL/孔)，37℃溫育1 h，洗滌3次；加入1%脫脂乳稀釋的HRP標(biāo)記羊抗雞IgG，37℃溫育1 h，洗滌3次,加底物,加入TMB顯色液(100 μL/孔)，避光37℃溫育15 min后，加入終止液終止反應(yīng)；以酶標(biāo)儀測定各孔的D630值。1.6 NDV NP蛋白間接ELISA反應(yīng)條件的優(yōu)化該模塊在市場上已有許多成熟的系統(tǒng)，需要從系統(tǒng)技術(shù)先進性、可擴展性、需求符合度等方面對
中國獸醫(yī)學(xué)報 2021年3期2021-04-12
- 影響ELISA試驗檢測結(jié)果的環(huán)節(jié)及試驗成功的關(guān)鍵
致。1.4.5 溫育: 溫育是ELISA試驗的一個重要環(huán)節(jié)，必須按照說明書規(guī)定的時間、溫度進行溫育，實踐中常采用的溫育溫度有室溫或37℃，通常抗原抗體在37℃經(jīng)過規(guī)定的溫育時間產(chǎn)物的生成達到頂峰。封板溫育時若陽性標(biāo)本蒸發(fā)，會出現(xiàn)“花板”現(xiàn)象。1.4.6 洗板: 洗板在ELISA試驗中雖算不上一個反應(yīng)步驟，但卻決定著試驗的成敗，洗板的目的是為了去除反應(yīng)體系中未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗板不干凈易導(dǎo)致試驗結(jié)果假陽性，而過度
今日畜牧獸醫(yī) 2021年11期2021-03-28
- 奇異變形桿菌不同溫育時間對呋喃妥因的MIC值影響
在顯著不同，不同溫育時間也影響著藥敏結(jié)果的準確判斷，因此，篩選最適溫育時間才能獲得合理準確的藥敏判斷結(jié)果，提供臨床合理規(guī)范用藥。本實驗通過不同的溫育時間判斷呋喃妥因?qū)ζ娈愖冃螚U菌的不同MIC值。1 材料和方法1.1 實驗試劑 湖南天地人腸桿菌細菌生化藥敏實驗卡 型號 TDR ONE-961.2 實驗菌株 臨床分離出奇異變形桿菌株及質(zhì)控大腸埃希菌J01010101-21.3 實驗器材 湖南天地人自動加樣儀 規(guī)格型號 TDR-J100 湖南天地人自動微生物分析
特別健康·下半月 2020年11期2020-12-15
- 動物性食品中氟苯尼考檢測的電化學(xué)免疫傳感器構(gòu)建
養(yǎng)箱中在37 ℃溫育1 h，得到anti-FF/GR-CS/GCE。再移取10 μL的5% BSA溶液，垂直滴涂于anti-FF/GR-CS/GCE表面，37 ℃繼續(xù)溫育1 h，得到BSA/anti-FF/GR-CS/GCE，并用CV法對修飾電極進行表征。將含有FF的待測樣液取10 μL垂直滴涂在BSA/anti-FF/GR-CS/GCE表面，37 ℃進行溫育。采用三電極體系，以BSA/anti-FF/GR-CS/GCE為工作電極，鉑絲電極為輔助電極，飽和
食品科學(xué) 2020年20期2020-10-28
- 骨肉瘤中O-GlcNAc糖基轉(zhuǎn)移酶的表達及其對增殖和順鉑敏感性的影響
%的細胞培養(yǎng)箱中溫育。經(jīng)磷酸鹽緩沖液（phosphate-buffered saline，PBS）清洗后，用2.5%的胰酶消化細胞，計數(shù)后以每孔5×105個細胞接種于6孔板中。實驗分為shOGT質(zhì)粒組和shNC空轉(zhuǎn)質(zhì)粒組，過表達OGT組及過表達空轉(zhuǎn)質(zhì)粒組。待細胞貼壁生長至60%～70%，按照LipofectamineTM3000試劑盒說明，分別將OGT沉默及過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至骨肉瘤細胞中，并檢測其轉(zhuǎn)染效率。1.4 實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real-time
中國癌癥雜志 2020年9期2020-10-15
- ANA及ANAs在原發(fā)性血小板減少癥患者診斷中的應(yīng)用
待測標(biāo)本后才開始溫育。使用聚苯乙烯加樣板；(4)將載片蓋在加樣板對應(yīng)的凹槽里，反應(yīng)即開始。確保每個標(biāo)本均能夠與生物薄片相接觸，而標(biāo)本之間不相互接觸。室溫(18 ℃～25 ℃)溫育30 min；(5)將20 μL熒光標(biāo)記的抗人球蛋白加入潔凈加樣板的每個反應(yīng)區(qū)。完全加完所有的二抗后，方可繼續(xù)溫育。從PBS-Tween清洗緩沖液中取出一張載5 s內(nèi)用吸水紙擦一下背面和邊緣后，立即將載片覆有生物薄片的一面朝下，蓋在加樣板的凹槽里。注意避免陽光直射載片。室溫(18
錦州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2020年4期2020-09-10
- ELISA 法檢測家禽活疫苗中禽白血病病毒污染的測量不確定度評估
是移液器加樣量、溫育時間、溫育溫度、酶標(biāo)儀測量。1.2.3 測量不確定評定1.2.3.1 測量樣品重復(fù)性引入的不確定度評定利用ALV ELISA 檢測試劑盒檢測各樣品的OD650nm值，每批疫苗的連續(xù)3 代細胞培養(yǎng)物P1、P2、P3樣品分別重復(fù)測定6 次[5]，按照文獻[3]計算標(biāo)準不確定度相對標(biāo)準不確定度。其中，為樣品平均值，Sxi為樣品重復(fù)檢測的標(biāo)準差，xi為每次重復(fù)的測量值，n為重復(fù)次數(shù)。1.2.3.2 移液器加樣引入的不確定度評定 移液器加樣產(chǎn)生的
中國動物檢疫 2020年9期2020-09-07
- PFKFB3在胃癌中的表達及對胃癌細胞生長和凋亡的影響研究
的抗體進行4 ℃溫育過夜，經(jīng)洗膜緩沖液（TRIS-buffered saline Tween，TBST）洗膜3次，根據(jù)一抗的來源種屬，與對應(yīng)二抗室溫溫育1～2 h，再經(jīng)TBST洗膜3次，將電化學(xué)發(fā)光（electrochemical luminescence，ECL）試劑滴加于條帶上，通過凝膠成像分析儀分析胃癌組織及細胞中PFKFB3的表達，每次實驗重復(fù)3次，取平均值。1.5 免疫組織化學(xué)檢測新鮮的胃癌及癌旁組織立即置于4%中性多聚甲醛固定，經(jīng)石蠟包埋后切成
中國癌癥雜志 2020年4期2020-05-19
- 酶聯(lián)免疫試驗兩步法檢測乙型肝炎病毒表面抗原的影響因素研究
，混合均勻，進行溫育，并且封板后放置，溫度為(37±1.1)℃，溫育時間為(60±1.3) min[5]；進行加酶，除空白孔之外每個孔中加入酶標(biāo)準試劑50 μL，也需要混合均勻；溫育—封板后放置，溫度為(37±1.1)℃，溫育時間為(30±1.4) min[3]；洗板—利用洗板機進行洗滌，不少于5遍，并將其扣干；顏色顯露時間的變化—在每個孔中加入顯色劑A、B液為50 μL，混合均勻，溫度為(37±1.1)℃，顏色顯露的時間為(30±1.4) min；進行最
山西衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院學(xué)報 2020年5期2020-03-23
- 環(huán)狀RNA hsa_circ_0005320在三陰性乳腺癌中的表達及其對細胞增殖的影響
胃蛋白酶37 ℃溫育30 min，并用4%多聚甲醛固定20 min，然后加入雜交液55 ℃溫育2 h；將探針與雜交液按1∶200的比例稀釋，于PCR儀上85 ℃ 2 min變性，37 ℃2 min平衡后加入探針37℃避光溫育過夜；加入DAPI復(fù)染20 min，抗熒光淬滅劑封片，置于熒光顯微鏡下拍照。hsa_circ_0005320探針序列為5'-AGATCTTTTCAAGGCCTCCTGGCT-3'。1.2.5 EdU實驗檢測細胞增殖接種至24孔板的各組細
中國癌癥雜志 2019年11期2019-12-13
- 水產(chǎn)品中孔雀石綠BA-ELISA檢測方法的建立及應(yīng)用
作濃度、封閉液、溫育時間、鹽離子強度及pH等參數(shù)。其中，包被原和抗體的最佳工作濃度采用棋盤法優(yōu)化，封閉液組成、溫育時間、助溶劑濃度及鹽離子強度等實驗條件通過單因素實驗優(yōu)化。用CBS將包被原稀釋至5個濃度梯度，分別為1∶500、1∶1 000、1∶2 000、1∶4 000及1∶8 000，用PBS將抗體稀釋至7個濃度梯度，分別為1∶500、1∶1 000、1∶2 000、1∶4 000、1∶8 000、1∶16 000及1∶32 000。在封閉液優(yōu)化實驗中
中國漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準 2019年4期2019-09-16
- 自身抗體對乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎的診斷和預(yù)測價值
的一面接觸，室溫溫育30 min；(2)用PBS吐溫緩沖液流水沖洗載片，立即將其浸入裝有PBS吐溫緩沖液的燒杯中浸泡至少5 min；(3)滴加20 μL FITC標(biāo)記的抗人IgG至潔凈的加樣板，將浸泡后的載片蓋在加樣板上與抗人IgG接觸，室溫溫育30 min；(4)重復(fù)步驟(2)；(5)滴加約10 μL封片介質(zhì)至蓋玻片，將浸泡后的載片蓋在蓋玻片上，顯微鏡下觀察熒光模型。免疫印跡法檢測血清自身抗體譜，包括nRNP、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、Scl
國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2019年9期2019-05-17
- 肺隱球菌病標(biāo)本在六胺銀染色中的最佳溫育時間
采用水溫箱60℃溫育40～60min，作者實踐發(fā)現(xiàn)該溫育條件存在過染現(xiàn)象。為了尋求一種染色效果好、操作簡便、染色時間短、污染少、染色方法可重復(fù)性高的六胺銀染色方法，我們對最佳孵育時間進行了摸索。資料與方法1 標(biāo)本收集廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科2017年1月—2017年12月確診的30例肺隱球菌感染病例，每例病例選取最具代表意義的一個蠟塊連續(xù)切片3張，厚度為4μm，不同蠟塊為區(qū)組因素，將每個蠟塊切取的3張切片簡單隨機化分為3組，每組1張，通過區(qū)組隨機化將90
中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志 2019年1期2019-04-22
- 820例抗核抗體陽性臨床標(biāo)本檢測結(jié)果回顧性分析
抗原基質(zhì)于室溫下溫育反應(yīng)30 min，使用磷酸鹽緩沖液沖洗浸泡至少5 min后滴加熒光標(biāo)記的抗體IgG并避光溫育30 min，沖洗浸泡至少5 min后吸干邊緣水分，放到滴加甘油的蓋玻片上進行封片。使用熒光顯微鏡進行結(jié)果判讀。1.2.2 ELISA/IIF檢測抗dsDNA 均采用歐蒙相應(yīng)方法的抗雙鏈DNA抗體IgG檢測試劑盒。標(biāo)本使用ELISA進行篩查，標(biāo)本1:201倍稀釋后加100后加到相應(yīng)微孔，同時加入陰陽性對照及校準品，室溫溫育30 min后使用稀釋后
當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2018年31期2018-11-20
- 應(yīng)用ELISA法檢測HPRRS抗體的幾個影響因素分析
果的因素有很多，溫育時間、溫度、洗板次數(shù)等是其中的重要環(huán)節(jié)[1]。本文以檢測高致病性豬藍耳病抗體為例，就不同溫育時間、溫度、洗板次數(shù)，對比、分析可能引起ELISA試驗數(shù)據(jù)不成立（即試驗失?。┑脑蚣坝绊?。1 材料與方法1.1 樣本與試劑 樣本選取經(jīng)過高致病性豬藍耳病疫苗免疫后呈現(xiàn)不同抗體效價的豬血清12份。試劑為豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測試劑盒（法國LSI）。1.2 儀器 生化培養(yǎng)箱、微量移液器、酶標(biāo)儀。1.3 方法 將經(jīng)過高致病性豬藍耳病疫苗免疫后呈現(xiàn)不
福建畜牧獸醫(yī) 2018年3期2018-06-14
- 電化學(xué)DNA傳感器制備及用于花椰菜花葉病毒35S啟動子快速檢測
合后在37 ℃下溫育16 h，隨后13 000 r/min下離心水洗3次，用PBS緩沖液（pH 7.4）定容至1 mL，得到Thi-AuNPs-cDNA納米復(fù)合物[15]。1.2.3 AuNPs-HRP-SA制備。取1 mL制備好的AuNPs溶液于離心管中，10 000 r/min下離心10 min，棄去上清液，用PBS（pH 7.4）緩沖液重新定容至300 μL，完成AuNPs溶液的濃縮，加入20 μL SA-HRP（0.1 mg/mL）溶液，4 ℃振蕩
安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年17期2018-05-14
- 烯酰嗎啉對土壤呼吸及微生物多樣性的影響
表征)時，選擇的溫育時間分別為96，120，144和168 h[17]。故本研究選擇以上溫育時間進行分析。1)McIntosh指數(shù)(U)[18]。其計算公式為：式中：ni是第i孔的相對吸光值，Ci為第i孔在590 nm的吸光值，R為對照孔在590 nm的吸光值。2)Simpson優(yōu)勢度指數(shù)(D)[19]。其計算公式為：式中：ni是第i孔的相對吸光值，N是相對吸光值總和，Ci為第i孔在590 nm的吸光值，R為對照孔在590 nm的吸光值。3)Shannon
- 一種快速提取土壤微生物DNA的方法
的SDS裂解細胞溫育時間、PEG沉淀DNA時間、CTAB溶解DNA沉淀溫育時間、異丙醇沉淀DNA放置時間、SDS裂解細胞離心條件以及異硫氰酸胍試劑的加入與否等實驗條件進行了優(yōu)化，旨在建立一種經(jīng)濟、快速、簡單的土壤微生物DNA提取方法。1 材料與方法1.1 土壤樣品土壤樣品分為2種：一種采自潛江某油田作業(yè)油井及廢棄老井附近，共采集7個土樣，分別記為：1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#；另一種是采自長江大學(xué)西校區(qū)農(nóng)學(xué)院實驗基地：麥田、草地、大豆田、玉米田
長江大學(xué)學(xué)報(自科版) 2018年2期2018-02-08
- 淺談如何提高EELLIISSAA測定的準確性
叉污染。3.2 溫育溫育是ELISA測定中的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，只有在一定適宜的溫度和與之相對應(yīng)的特定時間，液相中的抗原（抗體）才能與固相載體上的特異抗體（抗原）充分結(jié)合。不同試劑盒有不同的溫育溫度和時間的要求，應(yīng)嚴格按試劑盒說明操作，不能人為改變。此外，微孔板溫育時要加貼封片，這樣可以防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)或水珠等雜質(zhì)滴入孔內(nèi)影響檢測結(jié)果。3.3 洗板洗板是將溫育過程中液相非特異性成分與反應(yīng)中固相載體的抗原（抗體）結(jié)合產(chǎn)生的抗原抗體清除出去，從而保證ELISA測定的
糧油與飼料科技 2017年6期2018-01-09
- 凝沉型及交聯(lián)型淀粉微球的水包水乳液法制備及理化特性比較研究
包水乳液法在不同溫育溫度下制備了凝沉型和交聯(lián)型淀粉微球，并對微球的產(chǎn)率和理化特性進行比較研究。隨著溫育溫度的提高，凝沉型淀粉微球的產(chǎn)率降低，但交聯(lián)型淀粉微球的產(chǎn)率提高。溫育溫度為6℃時，凝沉型淀粉微球產(chǎn)率最高，達到79.8%。交聯(lián)型淀粉微球的溶脹率和亞甲基藍吸附量明顯大于凝沉型淀粉微球。掃描電鏡照片顯示，凝沉型和交聯(lián)型淀粉微球基本均為球形，但凝沉型淀粉微球表面較粗糙且有多個小凹坑，而交聯(lián)型淀粉微球表面較致密。X射線衍射圖譜顯示凝沉型淀粉微球為部分結(jié)晶結(jié)構(gòu)，
- 如何提高ELISA測定的準確性
防交叉污染。2.溫育。溫育是ELISA測定中的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，只有在一定適宜的溫度和與之相對應(yīng)的特定時間，液相中的抗原（抗體）才能與固相載體上的特異抗體（抗原）充分結(jié)合。不同試劑盒有不同的溫育溫度和時間的要求，應(yīng)嚴格按試劑盒說明操作，不能人為改變。此外，微孔板溫育時要加貼封片，這樣可以防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)或水珠等雜質(zhì)滴入孔內(nèi)影響檢測結(jié)果。3.洗板。洗板是將溫育過程中液相非特異性成分與反應(yīng)中固相載體的抗原（抗體）結(jié)合產(chǎn)生的抗原抗體清除出去，從而保證ELISA測定的
獸醫(yī)導(dǎo)刊 2017年17期2017-04-04
- 卡式配血法常見原因分析及應(yīng)對措施
7.27%）；⑤溫育時間縮短，4例（36.36%）。結(jié)論 操作不標(biāo)準是導(dǎo)致卡式配血法出現(xiàn)假陽性結(jié)果的主要原因，實驗室應(yīng)建立標(biāo)準化規(guī)定，并建立復(fù)檢程序，以提高試驗結(jié)果的準確率?？ㄊ脚溲?；假陽性；常見原因；應(yīng)對措施卡式配血法在1988年被發(fā)明出來，用于鑒定血型與交叉配血，在卡式配血法應(yīng)用到臨床領(lǐng)域后，抗人球蛋白應(yīng)用輸血檢測得以實現(xiàn)，這種方法有效克服了其他傳統(tǒng)方法的既有缺陷，令試驗檢測出現(xiàn)了質(zhì)的飛躍，在輸血發(fā)展史上，卡式配血法可謂是一座重要的里程碑[1]。但是
臨床醫(yī)藥文獻雜志(電子版) 2017年33期2017-03-08
- 基于STM32F103的BV自動檢測系統(tǒng)設(shè)計
工操作完成，采樣溫育后由人工讀取結(jié)果，不同操作員讀取數(shù)據(jù)常存在差異[2-3].本文設(shè)計的自動檢測系統(tǒng)可自動完成溫育、結(jié)果讀取和記錄工作，簡化了操作流程，避免了人工判讀帶來的差異，也為其他采用類似方法的試劑檢測提供了很好的自動檢測系統(tǒng)設(shè)計參考.1 系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖本文設(shè)計的系統(tǒng)結(jié)構(gòu)圖如圖 1所示，以STM32F103為處理器[4]，用戶通過串口液晶屏的觸摸功能輸入指令，由主控芯片控制溫育平臺的加熱進行恒溫溫育，溫育結(jié)束后啟動光電檢測模塊由硅光電池將樣本顏色信息轉(zhuǎn)化
赤峰學(xué)院學(xué)報·自然科學(xué)版 2017年1期2017-03-03
- 獸醫(yī)實驗室酶聯(lián)免疫吸附試驗操作要點
液方法。3.2 溫育溫育是講抗原與抗體混合，在一定條件下進行的抗原抗體反應(yīng)。實驗室一般在4℃、37℃以及43℃的情況下，開展ELISA反應(yīng)的溫育操作。溫育過程中，除了確保反應(yīng)溫度及時間，同時還要注意反應(yīng)樣品在溫育溫度下要快速達到平衡，一次不能增加太多反應(yīng)板疊塊在培養(yǎng)箱中。并根據(jù)ELISA規(guī)定的要求，室溫進行溫育反應(yīng)，嚴格控制溫度，確保試驗結(jié)果的精確度。試驗中溫育的溫度與時間要嚴格控制，確保試驗精確性，溫育避免發(fā)生有蒸發(fā)的情況，并采用的塑料貼紙或者是保鮮膜將
中國畜牧獸醫(yī)文摘 2017年9期2017-01-16
- 淺析影響口蹄疫O型液相阻斷ELISA實驗的因素
板，震蕩，37℃溫育90分鐘；移板，封板，37℃溫育60分鐘；洗板，加豚鼠抗體工作液，37℃溫育30分鐘；洗板，加兔抗豚鼠IgG-HRp工作液，37℃溫育30分鐘；洗板，加底物溶液，37℃溫育15分鐘，再加終止液終止反應(yīng)，讀取D490nm。2.3 結(jié)果判定2.3.1 試驗成立標(biāo)準：病毒抗原對照D490nm值應(yīng)該在1.5±0.5范圍內(nèi)。陽性對照抗體效價應(yīng)在1∶1024±1滴度以內(nèi)，陰性對照血清抗體效價應(yīng)＜1∶8。2.3.2 抗體效價的判定：被檢血清D490n
中獸醫(yī)學(xué)雜志 2017年1期2017-01-15
- 癌抗原15-3酶促化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的建立
/孔，置于37℃溫育。2h后，甩棄封閉液，將包被板自然晾干。3.2 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體的制備 參照郭春祥等［5］簡易高碘酸鈉法制備辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的 CA15-3抗體。將0.5 mg HRP溶于0.25 mL蒸餾水中，向其中緩慢滴加100 μL NaIO4（0.1mol/L）溶液，4℃攪拌20min后在HAc-NaAc緩沖液（1 mmol/L，pH 4.4）中透析過夜。次日，將碳酸緩沖液（0.0 5 mol/L，pH 9.6）透析的 CA1
標(biāo)記免疫分析與臨床 2016年11期2016-12-10
- 不同樣品前處理對轉(zhuǎn)基因棉Bt蛋白含量測定的影響
品前處理方式以及溫育時間、顯色時間等影響因子進行分析。[結(jié)果]自制抗體法較試劑盒更為靈敏，其同一時期同一組織的Bt蛋白含量顯著高于試劑盒，但不同方法對Bt蛋白含量的檢測結(jié)果在時空表達變化的趨勢上基本一致。樣品在液氮研磨后抽提5或8 h，對檢測結(jié)果影響較小，差異未達顯著水平；勻漿機研磨過濾后離心與否，對檢測結(jié)果影響較小。從樣品前處理方式看，勻漿機較液氮研磨對樣品組織蛋白的萃取效率更高，其檢測結(jié)果顯著高于液氮研磨處理的樣品，差異達顯著水平。溫育時間和顯色時間的
安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年8期2016-06-15
- ELISA試驗中常出現(xiàn)的問題及解決方法
0 min。3.溫育時間不足或培養(yǎng)箱溫度不足37℃，在ELISA試驗中一定要注意溫育時間和溫度的重要性，在溫育的過程中盡量不要打開溫箱，僻免溫度忽上忽下。溫育時間不足，溫度過低都會影響顯色。4.嚴格按照試劑說明書要求的洗滌方法洗滌，洗滌時加洗滌液不能沖擊過大，浸泡時間過長，要按照說明書上要求的洗滌次數(shù)洗滌。5.加樣不足，加樣時要按照加樣量調(diào)整好移液器的刻度，使用配套，內(nèi)壁光滑清潔的吸頭，吸頭不能交叉使用，同時要對移液器進行校準，僻免加樣不足使顯色不足。6.
獸醫(yī)導(dǎo)刊 2016年15期2016-04-06
- 酶聯(lián)免疫法做抗體檢測時應(yīng)注意的事項
現(xiàn)誤差。2.4在溫育反應(yīng)時，溫育30 min誤差應(yīng)控制在±2 min以內(nèi)，溫育10 min誤差應(yīng)控制在±1 min以內(nèi)，避免因反應(yīng)時間縮短或延長而造成整體顯色降低或升高。2.5每次洗板時，不管是手洗還是洗板機洗，洗完后都要把反應(yīng)板拍干。2.6每次試驗溫育反應(yīng)所用的封板膜不能重復(fù)使用，試劑瓶蓋也不能交叉使用，以免造成交叉污染，從而影響試驗數(shù)據(jù)的準確性。2.7試驗中所用的終止液屬于強腐蝕性物質(zhì)，一定要做好個人防護，避免其掉到身體或衣物上。2.8在使用酶標(biāo)儀前，
現(xiàn)代農(nóng)村科技 2016年2期2016-03-29
- 超聲波溫育處理提取水稻種子DNA方法探討
65℃恒溫下常規(guī)溫育，進行樣品前處理，作者曾研究過樣品顆粒細度與CTAB細胞裂解緩沖液溫育時間對DNA提取與轉(zhuǎn)基因成分熒光PCR檢測靈敏度的影響[11－13].超聲波振蕩處理能使樣品與CTAB細胞裂解緩沖液充分作用，能提高生物DNA提取的產(chǎn)量與純度[14－15]，但在超聲波環(huán)境中以CTAB裂解緩沖液65℃溫育提取水稻種子DNA，迄今未見報道.為提高水稻種子DNA提取效率，在保證檢測結(jié)果準確的前提下，縮短DNA提取時間，本研究以3種不同顆粒細度的水稻種子粉末
- 水稻種子樣品前處理對轉(zhuǎn)基因成分熒光PCR檢測的影響
AB)裂解緩沖液溫育時間等進行分析，以期篩選出優(yōu)化的前處理措施組合，提高稻谷轉(zhuǎn)基因成分實時熒光PCR檢測結(jié)果的準確性，為建立水稻種子轉(zhuǎn)基因精準檢測方法提供依據(jù).1 材料與方法1.1 供試材料非轉(zhuǎn)基因水稻“汕優(yōu)63”種子與轉(zhuǎn)基因水稻科豐6號種子(轉(zhuǎn)基因稻谷質(zhì)量分數(shù)為100%)由福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，科豐6號轉(zhuǎn)基因大米陽性參照物質(zhì)(轉(zhuǎn)基因大米質(zhì)量分數(shù)為0.01%)由中國檢驗檢疫科學(xué)研究院提供.1.2 試劑TE緩沖液(pH 8.0)、超純水、蛋白酶K、RNA分解
- 延長不同實驗步驟溫育時間對HBsAg酶免結(jié)果的影響
的因素較多，其中溫育時間是影響測定結(jié)果的最關(guān)鍵因素，本研究對加酶前、加酶后、顯色等步驟的溫育時間進行對比分析，旨在探討ELISA 法檢測不同強弱程度HBsAg 陽性標(biāo)本的部分影響因素。1 材料與方法1.1 材料 陽性對照、陰性對照(試劑盒自帶)，0.5 IU/ml質(zhì)控血清(康徹思坦生物有限公司提供)，HBsAg 陽性標(biāo)本36 份，其中HBsAg 弱陽性標(biāo)本12 份、HBsAg 中陽性標(biāo)本12 份、HBsAg 強陽性標(biāo)本12份，HBsAg 陰性標(biāo)本32 份(
河南醫(yī)學(xué)研究 2015年5期2015-11-18
- 耐熱乳酸菌的篩選及其β-半乳糖苷酶性質(zhì)分析
乳糖苷酶在55℃溫育1 h，仍保持51.2%的酶活力。分析菌株MF1567的β-半乳糖苷酶氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)該菌株中β-半乳糖苷酶LacZ存在22個氨基酸替代，其二級結(jié)構(gòu)α-螺旋的比例較高（26.5%）。結(jié)果顯示，蛋白質(zhì)一級和二級結(jié)構(gòu)的改變可能是該酶具有較好耐熱性的原因。乳酸菌，β-半乳糖苷酶，耐熱，氨基酸序列乳糖是乳及乳制品中特有的糖類，是人體正常代謝和生長發(fā)育的能量來源之一。人體攝入乳糖后，存在于小腸粘膜絨毛膜表面的β-半乳糖苷酶（betag
食品工業(yè)科技 2015年18期2015-11-04
- 不同溫育條件對酶聯(lián)免疫吸附試驗法測定乙型肝炎表面抗原結(jié)果的影響研究
準確，以及溫度及溫育、洗板、顯色時間及溫度等［1］。其中，不同溫度及溫育是實際操作中影響結(jié)果的重要因素之一。我們對不同溫度及溫育條件下ELISA法測定HbsAg 的陽性結(jié)果進行系統(tǒng)研究，現(xiàn)報告如下。1 資料與方法1.1 一般資料:選擇2014 年1 月～2014 年5 月我院住院患者HbsAg 陽性標(biāo)本60 份，分離血清后置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?.2 方法:采用DR-200BS 酶標(biāo)儀、DRW-320 洗板機、HHW21-600BS 型數(shù)顯恒溫水浴鍋
吉林醫(yī)學(xué) 2015年11期2015-05-15
- 涼州區(qū)規(guī)模場豬繁殖障礙性疫病疫苗免疫效果監(jiān)測分析
被板中，經(jīng)37℃溫育半小時，洗板后加入酶標(biāo)二抗，37℃溫育半小時，洗板加入底物，37℃溫育10分鐘后，加入終止液，于450nm波長測定OD值。在陰陽性對照成立的情況下，按公式S/P=樣品孔A值/陽性對照孔平均A值計算，S/P≥0.18為陽性，S/P＜0.15為陰性，0.15≤S/P＜0.18為可疑。1.2.5豬偽狂犬病gE抗體檢測試驗按豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）使用說明書檢測：待檢血清1:100稀釋，加入抗原包被板中，經(jīng)37℃溫育半小
中獸醫(yī)學(xué)雜志 2015年7期2015-04-20
- 影響米粉干轉(zhuǎn)基因成分熒光PCR檢測的若干因素分析
00目的顆粒，對溫育時間要求一般是1h(如大豆)或以上(如大米等)，由于這些條件往往無法穩(wěn)定滿足對深加工產(chǎn)品轉(zhuǎn)基因成分檢測的準確性。為此，本文針對影響深加工米制品轉(zhuǎn)基因成分檢測的實時熒光PCR［14-16］結(jié)果準確性的各種因素進行研究，建立了規(guī)范的技術(shù)操作程序，為保障我國進出口米制品安全提供了科學(xué)檢測依據(jù)。1 材料與方法1.1 材料與儀器非轉(zhuǎn)基因大米與米制品米粉干(線狀)為企業(yè)送檢留樣，科豐6號轉(zhuǎn)基因大米樣品(含CaMV35S、Nos、Cry1Ab、Ub-
食品工業(yè)科技 2014年21期2014-12-16
- 如何正確進行ELISA操作
試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報告及解釋等方面，其中任一步驟的不當(dāng)都會影響測定結(jié)果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚?，F(xiàn)分述如下。1 臨床標(biāo)本的收集和保存用于ELISA測定的臨床標(biāo)本最為常用的是血清(漿)，有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集
當(dāng)代臨床醫(yī)刊 2014年6期2014-08-15
- 296名變態(tài)反應(yīng)性皮膚病患兒血清過敏原檢測分析
ml通用緩沖液的溫育槽中；②樣本溫育：吸去液體，在溫育槽內(nèi)加入1.0 ml未稀釋樣本，60 min后吸去液體，每次用1 ml通用緩沖液清洗3次，每次5 min；③酶結(jié)合物溫育：吸去液體，在溫育槽內(nèi)加入1.0 ml酶結(jié)合物，在搖擺床上用1.0 ml通用緩沖液清洗膜條3次，酶促5 min；④底物溫育：吸去液體，在溫育槽內(nèi)加入1.0 ml色原/底物液，于搖擺床上室溫溫育10 min；⑤終止反應(yīng)：吸去液體，用蒸餾水沖洗；⑥判斷結(jié)果：將檢測膜條放置在結(jié)果判定模板中，
中國優(yōu)生優(yōu)育 2014年4期2014-08-03
- 微型絲網(wǎng)印刷電極快速檢測克侖特羅的方法
L/孔，37 ℃溫育2.0 h[18-19]。1.3.4 間接競爭免疫反應(yīng)將克侖特羅抗原標(biāo)準品原液倍比稀釋后加入酶標(biāo)板孔內(nèi)，加入量為50 μL/孔；再將1/8 000倍稀釋的克侖特羅單克隆抗體加入到酶標(biāo)板孔內(nèi)（50 μL/孔），混勻，37 ℃溫育。1.3.5 抗體與酶標(biāo)二抗反應(yīng)使用洗板機將含抗原抗體反應(yīng)混合物的酶標(biāo)板清洗3 次，拍干后加入1/10 000倍稀釋的HRP標(biāo)記的羊抗鼠酶標(biāo)二抗（100 μL/孔），混勻，37 ℃溫育。1.3.6 酶促反應(yīng)及酶反應(yīng)
食品科學(xué) 2014年8期2014-03-09
- 熒光聚合酶鏈式反應(yīng)檢測白粿干模擬轉(zhuǎn)基因樣品前處理優(yōu)化
化銨裂解緩沖液中溫育時間等因素進行優(yōu)化。結(jié)果表明：提取的DNA量在樣品顆粒細度與十六烷基三甲基溴化銨緩沖液溫育時間的9種處理組合間都有極顯著差異，其中最優(yōu)條件為樣品顆粒細度＞100目、十六烷基三甲基溴化銨緩沖液溫育時間＞8 h（過夜）。采用最優(yōu)前處理組合，樣品的主要轉(zhuǎn)基因成分檢出限從公認的轉(zhuǎn)基因含量0.01%（m/m）降到0.001%（m/m），檢測靈敏度提高10倍，有效提高了米制品轉(zhuǎn)基因成分檢測結(jié)果的準確性。米制品（白粿干）；轉(zhuǎn)基因成分；實時熒光聚合酶鏈
食品科學(xué) 2014年2期2014-01-17
- The Uptake and Membrane Transport of Cesium in Human Erythrocytes
胞外Cs+濃度，溫育時間、溫育溫度、介質(zhì)pH值對人紅細胞攝取Cs+過程的影響。選用不同離子通道或離子載體的特異性抑制劑進一步探討Cs+的跨膜途徑和機理。結(jié)果顯示，各實驗參數(shù)對人紅細胞攝取Cs+均有一定的促進作用。Cs+主要借助Na+/K+-泵的主動運輸方式跨膜；少量的Cs+能“漏入”細胞，微量的Cs+可以模擬Na+/Li+-反向協(xié)同運輸?shù)姆绞娇缒?；在允許HCO3-存在的pH環(huán)境下，少量Cs+以Cl-/CsCO3-交換的形式通過膜上帶3蛋白進入人紅細胞；Ca
無機化學(xué)學(xué)報 2013年12期2013-09-29
- 不同放置水浴時間對人血漿甲胎蛋白(AFP)放射免疫分析方法的影響分析
觀察不同放置水溶溫育時間對放免檢測甲胎蛋白(AFP)結(jié)果的影響分析。方法我們通過80例患者，每個分別用兩種相同采血管同時進行采血，用放免方法進行檢測，得到兩組數(shù)據(jù)，進行統(tǒng)計分析。結(jié)果經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析，兩種方法差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 放免分析中兩種不同放置水浴時間對人血漿甲胎蛋白(AFP)檢測結(jié)果無影響。放置時間;甲胎蛋白;放免分析甲胎蛋白(AFP)由胚胎干細胞合成，它是血清球蛋白，在胎兒的發(fā)育中，由卵黃囊和胎兒肝產(chǎn)生，在妊娠13周時，胎兒血液中的AFP達到最
中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2013年8期2013-01-25
- IGF-1R抑制劑AG1024對頭頸鱗癌FaDu細胞放射敏感性的影響
L AG1024溫育處理細胞24 h后，6 MV X線分別照射0、2、4、6、8、10 Gy，1 h后按不同濃度梯度接種于6 cm培養(yǎng)皿中培養(yǎng)2周。細胞集落經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定以及0.1%結(jié)晶紫染色后，顯微鏡下觀察細胞集落形成情況。以含>50個細胞的集落計為1個存活克隆，計數(shù)各組細胞的克隆數(shù)。應(yīng)用Sigma plot多靶單擊模型擬和存活曲線。1.4 AnnexinⅤ-FITC/PI 雙標(biāo)記法分析細胞凋亡取對數(shù)生長期FaDu細胞接種于6孔板。培養(yǎng)24 h后
中國癌癥雜志 2012年7期2012-05-30
- 滲透壓沖擊法提取大腸桿菌周質(zhì)中的人生長激素
r?min－1，溫育20 min，4℃ 14 000 ×g離心20 min，棄高滲液，向菌泥中加入60 mL的4℃ RO水，輕輕攪勻，冰浴20 min，4℃14 000×g離心20 min，得60 mL上清液即為周質(zhì)蛋白，試驗重復(fù)兩次.蛋白含量測定:采用Bradford法［2］.以對照品溶液濃度與其相對應(yīng)的吸光度計算線性回歸方程.另精密量取待測樣品溶液適量，同法測定，從線性回歸方程計算待測樣品溶液中的蛋白濃度，并乘以稀釋倍數(shù).SDS－PAGE分析:取周質(zhì)蛋
藥學(xué)研究 2012年7期2012-02-02
- 可再生使用的磁性納米修飾C反應(yīng)蛋白電流型免疫傳感器*
的BSA中37℃溫育反應(yīng)1 h，以封閉GMPs剩余的活性位點，防止其對CRP抗原產(chǎn)生非特異性吸附。將制備的HRP-anti-CRP/GMPs納米探針分散在20 mL pH 6.5 PBS 中，4 ℃儲存，備用。1.5 免疫傳感器的制備將SPCE表面依次用無水乙醇和蒸餾水沖洗幾次，晾干備用，取 5 μL上述制備的 MCNTs-Thi-Nafion溶液滴在SPCE工作電極表面，紅外燈下晾干，作為基底電極。再取5 μL濃度為0.83 mg/mL的磁性納米探針懸浮
傳感技術(shù)學(xué)報 2011年10期2011-10-20
- 青海省玉樹地區(qū)牛病毒性腹瀉-黏膜病血清學(xué)調(diào)查
生物素標(biāo)記的抗體溫育，洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物溫育，最后加入終止液，在450 nm波長處測定各孔OD值。2 結(jié)果對6個縣的571份牛血清進行了抗體水平檢測。檢測出陽性43份，陽性率7.5%，結(jié)果見表1。3 討論3.1 本次檢測結(jié)果與2006年檢測結(jié)果相比較（2006年在玉樹共檢測30份血清，未檢出陽性數(shù)），表明牛病毒性黏膜病在我省牛群中的感染率和感染范圍均在不斷擴大，對養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展構(gòu)成了潛在的威
中國動物檢疫 2011年10期2011-08-16
- 對186例流產(chǎn)孕婦及其配偶血清弓形蟲抗體檢測分析
l封閉，置37℃溫育1 h，同前法洗滌后加入稀釋為1∶100的血清，每孔500 ml，置37℃溫育1 h，同前法洗滌后加入稀釋為1∶1 000稀釋的羊抗人IgG辣根過氧化物酶標(biāo)記物，每孔500 ml，置37℃溫育1 h，洗滌后加入新鮮配制的底物液，每孔 0.1 ml，置室溫 0.5 h 后，加 2 mol/L H2SO4終止反應(yīng)，于30 min內(nèi)測定A值，所用波長450 nm。①目測:根據(jù)臨界孔顯色來進行判斷樣本孔顯色比臨界孔深判為陽性，否則判為陰性;②讀
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2010年12期2010-11-15