劉宇棲
【中圖分類號】R859.79 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851(2020)11--01
前言
奇異變形桿菌已經(jīng)成為醫(yī)院的主要感染菌群之一,藥物治療任然是控制其感染的主要途徑,但因臨床存在長期大量以及缺乏合理用藥,導(dǎo)致抗生素的使用已嚴重影響臨床用藥療效同時易產(chǎn)生多重耐藥問題,因此對臨床分離出的致病奇異變形桿菌進行及時有效的藥敏試驗勢在必行,但不同細菌的培養(yǎng)時間存在顯著不同,不同溫育時間也影響著藥敏結(jié)果的準確判斷,因此,篩選最適溫育時間才能獲得合理準確的藥敏判斷結(jié)果,提供臨床合理規(guī)范用藥。本實驗通過不同的溫育時間判斷呋喃妥因?qū)ζ娈愖冃螚U菌的不同MIC值。
1 材料和方法
1.1 實驗試劑 湖南天地人腸桿菌細菌生化藥敏實驗卡 型號 TDR ONE-96
1.2 實驗菌株 臨床分離出奇異變形桿菌株及質(zhì)控大腸埃希菌J01010101-2
1.3 實驗器材 湖南天地人自動加樣儀 規(guī)格型號 TDR-J100 湖南天地人自動微生物分析系統(tǒng) 規(guī)格型號 TDR-300B 天地人細菌濁度儀 型號TDR-2200 標準菌株比濁管 接種環(huán) 安全生物柜
1.4 細菌的分離培養(yǎng) 從臨床標本中分離到致病菌在安全生物柜中進行純化分離培養(yǎng),接種于BA培養(yǎng)皿37度恒溫孵育18h-20h,校正細菌比濁儀,建立標準曲線,用接種環(huán)挑取變形桿菌遷徙生長菌膜研磨至生化培養(yǎng)液中進行比濁,調(diào)整細菌濁度到0.45-0.5麥氏單位,放入TDR自動加樣儀中,自動加樣至藥敏培養(yǎng)液中調(diào)整濃度至5×105CFU/ml,同時自動完成目標菌株的生化藥敏加樣,完成的生化藥敏板放入37度恒溫箱進行孵育培養(yǎng)。
2 結(jié)果
2.1 不同時間對呋喃妥因MIC值的影響 根據(jù)天地人腸桿菌科細菌檢測(TDR ONE-96)規(guī)范16至20小時培養(yǎng)時間,作者分別取10h和14h和20h進行比較觀察結(jié)果判定,其中54株奇異變形桿菌呋喃妥因在10h溫育后MIC值是64mg/l,延長溫育時間至14h和20h觀察結(jié)果MIC≥128mg/l,其中9株奇異變形桿菌呋喃妥因在10h溫育后MIC值是≤32mg/l,延長溫育時間至14h和20h觀察結(jié)果MIC≥128mg/l,見下表:
3 討論
3.1 MIC變化規(guī)律
由圖表可知,呋喃妥因不同溫育時間對奇異變形桿菌的藥敏MIC值不一樣,其中14h至20hMIC值已達到最大值且無明顯變化而縮短溫育時間采取10h觀察藥敏結(jié)果的MIC值是正常溫育時間藥敏結(jié)果的1/2甚者1/4倍。
3.2 從細菌生長特點及藥物作用機理方面分析溫育時間對MIC值的影響
奇異變形桿菌運動活潑遷徙性生長,菌落之間能形成抱團式生長菌膜,菌膜是細菌粘附于接觸表面,通過胞外多糖基質(zhì)網(wǎng)分泌的多糖,纖維蛋白等;呋喃妥因藥理作用機理是作用于細菌的氧化還原酶,破壞其生化系統(tǒng),當實驗調(diào)試均等麥氏濃度菌液放入同等藥物濃度的相同PH、溫度培育條件下反應(yīng),縮短培育時間影響細菌生長,藥物易順利進入胞內(nèi)影響酶活力,延長培育時間奇異變形桿菌形成菌落之間菌膜,藥物達不破壞程度,產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象,但確切原因有待進一步研究。
4 結(jié)語
微生物臨床工作中,縮短細菌的藥敏培育時間觀察結(jié)果,個別藥物的MIC無明顯變化,但不同細菌生長特點和藥物的作用機理不盡相同,《抗微生物藥敏敏感性試驗執(zhí)行標準》早以備注奇異變形桿菌對呋喃妥因天然耐藥,但培育時間不到位會產(chǎn)生假陰性易會給臨床工作帶來誤導(dǎo),而呋喃諾因也是泌尿道感染的首選用藥,更因該重視其時間的培育性,給規(guī)范用藥提供參考指導(dǎo)作用。
奇異變形桿菌在自然界中分布廣泛,可寄生在人體、土壤、食物中等,正常情況下不致病,當人體免疫力低下時,其遷徙性生物膜,造成久治難愈困擾,特別是久臥在床的老人,奇異變形桿菌在感染處傷口軟組織分離出占的比例較高,是褥瘡標本繼銅綠假單胞菌后又一主要感染菌群,同時是臥床排尿困難患者的主要尿道感染來源。
參考文獻
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