周月宏，田　堅(jiān)，沈靜雪，趙曉偉

(沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110024)

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論著

過(guò)表達(dá)SOCS2體外抑制人腎小球系膜細(xì)胞炎癥反應(yīng)及纖維化的研究

周月宏，田堅(jiān)，沈靜雪，趙曉偉

(沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110024)

[摘要]目的研究過(guò)表達(dá)SOCS2對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞(HMCs)模型的影響及作用機(jī)制。方法通過(guò)腺病毒感染的方法使HMCs細(xì)胞模型中過(guò)表達(dá)SOCS2，實(shí)驗(yàn)分為正常糖培養(yǎng)組、感染SOCS2后正常糖培養(yǎng)組、感染空載體后正常糖培養(yǎng)組、高糖培養(yǎng)組、感染SOCS2后高糖培養(yǎng)組、感染空載體后高糖培養(yǎng)組。Western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞模型中JAK/STAT信號(hào)通路的活化情況及TGF-β、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、纖維連接蛋白(FN)的表達(dá)量。ELISA方法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6、TNF-α表達(dá)水平。結(jié)果高糖誘導(dǎo)后的各組中p-JAK2、p-STAT3、TGF-β、Ⅳ-C、FN、IL-6、TNF-α的表達(dá)量均明顯高于正常糖培養(yǎng)組(P均<0.05)；感染SOCS2后高糖培養(yǎng)組中這些指標(biāo)與高糖培養(yǎng)組相比均顯著下降(P均<0.05)，而與感染空載體后高糖培養(yǎng)組比較則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。結(jié)論SOCS2通過(guò)抑制JAK/STAT信號(hào)通路來(lái)降低HMCs細(xì)胞模型中纖維化相關(guān)蛋白TGF-β、Ⅳ-C、FN及炎性因子IL-6、TNF-α的表達(dá)。

[關(guān)鍵詞]SOCS2；糖尿病腎?。籎AK/STAT；人腎小球系膜細(xì)胞

糖尿病腎病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病引起的嚴(yán)重和危害性最大的一種慢性并發(fā)癥，其發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為DN是多種因素作用的結(jié)果，其中包括血流動(dòng)力學(xué)因素、代謝因素、炎癥因素、氧化應(yīng)激因素及遺傳因素等[1]。腎小球基底膜增厚、細(xì)胞外基質(zhì)的擴(kuò)張、腎小管間質(zhì)纖維化是DN典型的病理改變。腎小球系膜細(xì)胞作為DN的主要效應(yīng)細(xì)胞，是腎小球內(nèi)產(chǎn)生炎性因子及細(xì)胞外基質(zhì)的主要固有細(xì)胞，在DN的發(fā)病進(jìn)程中具有重要的作用。因此，有效抑制腎小球系膜細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度生成和抗炎治療[2]對(duì)防止DN具有重要意義。近年來(lái)關(guān)于細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子(suppressor of cytokine signaling，SOCS)抑制細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的機(jī)制研究已取得重大進(jìn)展，特別是對(duì)JAK/STAT信號(hào)通路的負(fù)反饋?zhàn)饔靡驯欢囗?xiàng)研究證實(shí)。JAK/STAT信號(hào)通路已被證實(shí)與多種腎臟疾病的足細(xì)胞、腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞、系膜細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞以及炎癥相關(guān)細(xì)胞的病理改變密切相關(guān)[3]。SOCS家族成員中，關(guān)于SOCS1和SOCS3對(duì)DN的保護(hù)作用已經(jīng)有報(bào)道[1，4]。而SOCS2是否對(duì)DN具有保護(hù)作用尚不清楚。本課題組前期研究結(jié)果已證實(shí)SOCS2參與糖尿病大鼠早期發(fā)病過(guò)程，并證明SOCS2在糖尿病發(fā)病早期表達(dá)下調(diào)，過(guò)表達(dá)SOCS2對(duì)STZ誘導(dǎo)的DN大鼠具有保護(hù)作用[5]。因此本部分進(jìn)行體外研究，觀察腎小球系膜細(xì)胞中過(guò)表達(dá)SOCS2是否可以抑制高糖誘導(dǎo)的JAK2/STAT信號(hào)途徑的活化，進(jìn)而調(diào)控下游基因TGF-β、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、纖維連接蛋白(FN)及IL-6、TNF-α的表達(dá)，從而抑制腎臟組織的炎癥反應(yīng)及纖維化反應(yīng)，以明確SOCS2對(duì)細(xì)胞模型保護(hù)作用的機(jī)制。

1實(shí)驗(yàn)資料

1.1材料人腎小球系膜細(xì)胞(HMCs)、SOCS2、Ⅳ-C、p-JAK2、JAK2、p-STAT3及STAT3抗體購(gòu)于沈陽(yáng)萬(wàn)類生物科技有限公司；TGF-β抗體購(gòu)于美國(guó)Santa Cruz公司；胎牛血清購(gòu)于美國(guó)Hyclone公司；FN抗體購(gòu)于武漢博士德生物工程公司；DMEM低糖培養(yǎng)基購(gòu)于美國(guó)Gibco公司；Polybrene購(gòu)于美國(guó)sigma公司；SOCS2腺病毒套裝購(gòu)買于恒生物科技(上海)有限公司。PMSF、BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒、一抗二抗去除液、羊抗兔IgG-HRP、NP-40裂解液購(gòu)于碧云天生物技術(shù)研究所；β-actin和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鼠單克隆抗體購(gòu)于康成生物工程有限公司；ECL發(fā)光液(碧云天生物技術(shù)研究所)。人IL-6 和TNF-α ELISA試劑盒購(gòu)于武漢博士德生物工程公司。

1.2方法實(shí)驗(yàn)分為6組：正常糖培養(yǎng)組(CG組)正常培養(yǎng)，感染SOCS2后正常糖培養(yǎng)組(CG+Ad-SOCS2組)是在感染SOCS2后繼續(xù)正常糖培養(yǎng)，感染空載體后正常糖培養(yǎng)組(CG+Ad-null組)是在感染空載體后繼續(xù)在正常糖中培養(yǎng)，高糖培養(yǎng)組(HG組)采用高糖培養(yǎng)，感染SOCS2后高糖培養(yǎng)組(HG+Ad-SOCS2組)是在感染SOCS2后改為高糖培養(yǎng)，感染空載體后高糖培養(yǎng)組(HG+Ad-null組)是在感染空載體后改為高糖培養(yǎng)。

1.2.1HMCs細(xì)胞培養(yǎng)HMCs細(xì)胞用正常糖培養(yǎng)液(將0.9 g甘露醇溶解在200 mL含有10%胎牛血清、1%青鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中，過(guò)濾后使用，濃度即為5.5 mmol/L D-葡萄糖+24.5 mmol/L D-甘露醇)培養(yǎng)至密度為90%左右，PBS清洗。棄上清，加入適當(dāng)體積的0.25%胰酶消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓后，輕輕拍打瓶壁側(cè)面，并加入正常培養(yǎng)基終止反應(yīng)。用5 mL槍頭吹打細(xì)胞瓶?jī)?nèi)各處細(xì)胞，15 mL試管收集混合液，800 r/min離心3 min。去上清，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按實(shí)驗(yàn)內(nèi)容接種細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。一般HMCs的接種密度為1∶2，生長(zhǎng)2～3 d傳代。

1.2.2HMCs細(xì)胞高糖處理細(xì)胞培養(yǎng)至密度為70%左右，用PBS清洗2次。棄去上清后，PBS清洗1次，加入高糖培養(yǎng)基(將0.9 g葡萄糖溶解在200 mL含有10%胎牛血清、1%青鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中，過(guò)濾后使用，濃度即為30 mmol/L D-葡萄糖)。

1.2.3腺病毒感染HMCs細(xì)胞將HMCs細(xì)胞接種于6孔板中，置37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過(guò)夜，24 h后進(jìn)行感染，細(xì)胞密度一般在70%。更換含有8 g/mL Polybrene的新鮮培養(yǎng)基(加入Polybrene可以提高病毒的感染效率)，在目的細(xì)胞和對(duì)照細(xì)胞中分別用移液器加入計(jì)算好的病毒液(病毒數(shù)與細(xì)胞數(shù)比值為10∶1)。加完病毒后置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱內(nèi)孵育過(guò)夜。24 h后將含有腺病毒的培養(yǎng)液更換成正常培養(yǎng)液或高糖培養(yǎng)液，37 ℃、5% CO2繼續(xù)培養(yǎng)24 h。

1.3檢測(cè)項(xiàng)目

1.3.1Western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞模型中JAK/STAT信號(hào)通路的活化情況及TGF-β、Ⅳ-C、FN的表達(dá)量收集細(xì)胞，用NP-40裂解液(含1%PMSF)裂解細(xì)胞，離心后取上清，用BCA法測(cè)定蛋白濃度，同時(shí)加5×上樣緩沖液，煮沸變性5 min，-80 ℃保存?zhèn)溆谩１緦?shí)驗(yàn)的上樣體積20 μL，含40 μg蛋白。最后加入5 μL蛋白Marker電泳，半干轉(zhuǎn)至PVDF膜，5%脫脂奶粉室溫封閉1.5 h，隨后用特異性抗體將膜4 ℃孵育過(guò)夜，再以相應(yīng)的二抗(1∶5 000)孵育2 h。免疫復(fù)合物使用ECL法檢測(cè)。蛋白條帶使用Gel-Pro-Analyzer軟件分析條帶灰度值，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3.2ELISA方法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6、TNF-α表達(dá)水平將細(xì)胞培養(yǎng)液1 000 r/min離心5 min，收集上清，后續(xù)操作按ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，在酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零，直接測(cè)定其吸光值(A)，并由標(biāo)準(zhǔn)曲線公式換算成各蛋白的濃度值，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差方式表示，組間的差異比較采用T檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組HMCs細(xì)胞SOCS2蛋白表達(dá)情況HG+Ad-SOCS 2組、HG+Ad-null組、HG組HMCs細(xì)胞SOCS2蛋白表達(dá)量分別為0.634±0.012，0.241±0.009，0.242±0.011，HG+Ad-SOCS2組明顯高于其他2組(P均<0.05)，HG組和HG+Ad-null組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CG+Ad-SOCS2組、CG+Ad-null組、CG組HMCs細(xì)胞SOCS2蛋白表達(dá)量分別為0.443±0.009，0.152±0.013，0.166±0.019，CG+Ad-SOCS2組明顯高于其他2組(P均<0.05)，CG組和CG+Ad-null組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)的3組細(xì)胞對(duì)應(yīng)正常培養(yǎng)基培養(yǎng)的3組細(xì)胞SOCS2 蛋白表達(dá)水平均明顯提高(P均<0.05)。Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞SOCS2蛋白表達(dá)情況見(jiàn)圖1。

2.2各組HMCs細(xì)胞中TGF-β、Ⅳ-C及FN蛋白表達(dá)情況高糖培養(yǎng)后的各組中TGF-β、IV-C及FN表達(dá)水平均明顯高于正常糖培養(yǎng)各組(P均<0.05)，HG-Ad-SOCS2組各指標(biāo)表達(dá)水平均明顯低于HG-Ad-null組和HG組(P均<0.05)，HG-Ad-null組和HG組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，正常糖培養(yǎng)各組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見(jiàn)圖2及表1。

圖1　Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞SOCS2蛋白表達(dá)情況

圖2　Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中TGF-β、Ⅳ-C及FN表達(dá)情況

組別TGF-βⅣ-CFNHG-Ad-SOCS2組0.663±0.012①0.580±0.023①0.687±0.009①HG-Ad-null組1.234±0.017①②1.015±0.014①②1.484±0.011①②HG組1.199±0.022①②0.913±0.021①②1.353±0.012①②CG+Ad-SOCS2組0.363±0.0220.246±0.0280.391±0.027CG+Ad-null組0.402±0.0360.236±0.0170.418±0.024CG組0.371±0.0270.241±0.0210.458±0.018

注：①與CG組比較，P<0.05;②與HG-Ad-SOCS2組比較，P<0.05。

2.3各組HMCs細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6和TNF-α表達(dá)水平比較高糖培養(yǎng)后的各組中TNF-α和IL-6表達(dá)水平均明

顯高于正常糖培養(yǎng)各組(P均<0.05)，HG-Ad-SOCS2組各指標(biāo)表達(dá)水平均明顯低于HG-Ad-null組和HG組(P均<0.05)，HG-Ad-null組和HG組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，正常糖培養(yǎng)各組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　各組HMCs細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6 和TNF-α表達(dá)

注：①與CG組比較，P<0.05; ②與HG-Ad-SOCS2組比較，P<0.05。

2.4各組HMCs細(xì)胞中JAK/STAT信號(hào)通路活化情況各組細(xì)胞間總JAK2、STAT3表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；高糖培養(yǎng)后的各組中p-JAK2、p-STAT3蛋白表達(dá)水平均明顯高于正常糖培養(yǎng)各組(P均<0.05)，HG-Ad-SOCS2組各指標(biāo)表達(dá)水平均明顯低于HG-Ad-null組和HG組(P均<0.05)，HG-Ad-null組和HG組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，正常糖培養(yǎng)各組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見(jiàn)圖3及表3。

圖3　Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中JAK、STAT及

組別JAK2p-JAK2STAT3p-STAT3HG-Ad-SOCS2組0.738±0.0120.557±0.009①0.620±0.0230.342±0.018①HG-Ad-null組0.652±0.0170.882±0.011①②0.710±0.0140.593±0.026①②HG組0.614±0.0220.831±0.012①②0.663±0.0210.551±0.009①②CG+Ad-SOCS2組0.610±0.0220.282±0.0270.647±0.0280.210±0.014CG+Ad-null組0.615±0.0360.350±0.0240.719±0.0170.246±0.021CG組0.736±0.0270.353±0.0180.658±0.0210.244±0.019

注：①與CG組比較，P<0.05;②與HG-Ad-SOCS2組比較，P<0.05。

3討論

SOCS家族是一類對(duì)細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)起負(fù)性調(diào)控，從而抑制其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白分子。研究證實(shí)SOCS參與癌癥、肝纖維化、腎臟纖維化和各種炎癥反應(yīng)等多種疾病[6-8]。SOCS主要通過(guò)JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的負(fù)性調(diào)節(jié)作用抑制相關(guān)細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而參與了多種疾病生理與病理的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。JAK/STAT與多種腎臟疾病所聯(lián)系的足細(xì)胞、腎小球血管內(nèi)皮細(xì)胞、系膜細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞以及炎癥相關(guān)細(xì)胞的病理改變密切相關(guān)。目前對(duì)于SOCS家族的研究多集中于SOCS1和SOCS3。研究表明，腎小球系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及腎小管細(xì)胞中均有SOCS蛋白的表達(dá)[9]。在STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型中檢測(cè)到SOCS1和SOCS3的高表達(dá)，體外研究表明過(guò)表達(dá)SOCS1和SOCS3可以抑制高糖誘導(dǎo)的MCP-1、IL-6、TGF-β、IV-C、FN等的表達(dá)，且在體內(nèi)過(guò)表達(dá)SOCS1和SOCS3可以減輕腎臟損傷(包括基底膜增厚、纖維化和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)等)，改善腎臟功能，證實(shí)SOCS1和SOCS3在DN的發(fā)展進(jìn)程中具有保護(hù)作用[10]。此外，腎小球系膜細(xì)胞中過(guò)表達(dá)SOCS1可以抑制高糖誘導(dǎo)的JAK2/STAT信號(hào)途徑的活化，從而抑制TGF-β和FN的合成[11]。在腫瘤中，SOCS2能抑制JAK2的激活以及JAK2與STAT3的結(jié)合，SOCS2的過(guò)表達(dá)對(duì)阻止STAT3的激活及抑制c-Src所影響的細(xì)胞毒性[12]。有研究表明SOCS2在STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠腎臟中表達(dá)量下調(diào)，體外研究顯示胰島素可以誘導(dǎo)腎小球系膜細(xì)胞中SOCS2表達(dá)量增加，且上調(diào)的SOCS2可以抑制IGF-1誘導(dǎo)的ERK1/2的激活，從而抑制Ⅳ-C的合成[9]。但SOCS2與DN的關(guān)系尚未明確。

在DN的早期發(fā)病階段，炎性應(yīng)答主要是單核/巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)，聚集到腎臟的單核細(xì)胞活化后會(huì)增殖為巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞會(huì)誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子如TNF-α、IL-6等的產(chǎn)生。因此，一系列的炎癥因子如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α等在DN中的表達(dá)量都會(huì)增加[13]，并且這些因子與尿液中微量白蛋白的產(chǎn)生和DN的進(jìn)展密切相關(guān)[14]。TNF-α的增加可直接對(duì)腎小球和腎小管造成損傷，從而引起蛋白尿的產(chǎn)生，同時(shí)也可以促進(jìn)ICAM-1的表達(dá)。IL-6可調(diào)節(jié)黏附分子及其他細(xì)胞因子如TNF-α的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)，血管內(nèi)皮損傷可使TNF-α釋放增加，而TNF-α又促進(jìn)IL-6的釋放增加，兩者協(xié)同作用，形成免疫復(fù)合物沉積于血管內(nèi)皮造成血栓形成，加速腎臟的損害。而TGF-β是高血糖以及一些導(dǎo)致腎臟損傷的生化因素的重要遞質(zhì)，與DN腎臟細(xì)胞的增殖、腎小球肥大等密切相關(guān)，同時(shí)也與腎間質(zhì)的纖維化有關(guān)[15-16]。腎小球基底膜的膠原成分中最重要的是Ⅳ-C，它是典型的基質(zhì)膠原，可由活化的腎小球系膜細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞等合成和分泌。所以， Ⅳ-C合成和降解平衡的失調(diào)是導(dǎo)致DN腎小球病理改變的主要因素之一[17]。FN是重要的細(xì)胞外基質(zhì)組成成分，正常情況下其由系膜細(xì)胞產(chǎn)生，病理狀態(tài)下系膜細(xì)胞大量表達(dá)FN等細(xì)胞外基質(zhì)成分。

本研究通過(guò)腺病毒感染成功構(gòu)建了過(guò)表達(dá)SOCS2的HMCs細(xì)胞模型，且腺病毒基因組自身并沒(méi)有影響細(xì)胞內(nèi)SOCS2的表達(dá)；高糖處理的3組細(xì)胞對(duì)應(yīng)正常糖培養(yǎng)的3組細(xì)胞，SOCS2的表達(dá)均上調(diào)，再次驗(yàn)證了SOCS2參與高糖處理HMCs細(xì)胞的反應(yīng)。高糖培養(yǎng)后的各組中TGF-β、Ⅳ-C、FN、TNF-α、IL-6及p-JAK2、p-STAT3蛋白表達(dá)水均明顯高于正常糖培養(yǎng)各組，HG-Ad-SOCS2組各指標(biāo)表達(dá)水平均明顯低于HG-Ad-null組和HG組，HG-Ad-null組和HG組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，正常糖培養(yǎng)各組各指標(biāo)表達(dá)水平比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示高糖誘導(dǎo)的HMCs細(xì)胞模型中，纖維化相關(guān)蛋白表達(dá)量、炎癥因子水平顯著升高，JAK/STAT信號(hào)通路被激活，而SOCS2的過(guò)表達(dá)可以使纖維化相關(guān)蛋白表達(dá)量、炎癥因子水平顯著降低，且可抑制JAK/STAT信號(hào)通路的激活。這說(shuō)明與SOCS1和SOCS3相同，SOCS2能通過(guò)抑制JAK/STAT信號(hào)通路及其調(diào)控的炎癥因子及纖維化相關(guān)蛋白的活化與表達(dá)，從而對(duì)DN的進(jìn)展起到延緩作用，為DN的藥物治療找到了新的靶點(diǎn)，同時(shí)也為該病的防控提供了理論依據(jù)。

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Study on the inhibition of overexpression of SOCS2 on inflammatory response and fibrosis of human glomerular mesangial cells in vitro

ZHOU Yuehong, TIAN Jian, SHEN Jingxue， ZHAO Xiaowei,

(The Center Hospital Affiliated to Shenyang Medical College, Shenyang 110024, China)

Abstract:Objective It is to explore the effect of overexpression of SOCS2 on inflammatory response and fibrosis of human glomerular mesangial cells(HMCs) in vitro. Methods The expression of SOCS2 in the cell model was expressed by the method of adenovirus infection，the cells were divided into CG group, CG+Ad-null group, CG+Ad-SOCS2 group, HG group, HG+Ad-null group, HG+Ad-SOCS2 group. The activation of JAK/STAT signaling pathway and the expression of Collagen IV, FN and TGF-β in the cell model of each group were detected by Western blot method. The expressions of IL-6 and TNF-α in culture supernatant of each group were detected by ELISA. Results Compared with CG group, the expressions of p-JAK2, P-STAT3, TGF-β, Collagen IV, FN,IL-6 and TNF-α were significantly increased in HG group, HG+Ad-null group and HG+Ad-SOCS2 group cells (P<0.01). And the expression of these factors in HG+Ad-SOCS2 group were significantly decreased compared with HG group(P<0.01), and those of HG+Ad-null group had no significant difference. Conclusion SOCS2 can reduce the expressions of fibrosis-related protein TGF-β, Collagen IV, FN and inflammatory cytokines IL-6 and TNF-α by inhibiting JAK/STAT signaling pathway in cell model.

Key words:SOCS2; diabetic nephropathy; JAK/STAT; glomerular mesangial cell

[收稿日期]2015-09-25

[中圖分類號(hào)]R-33

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)04-0343-05

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.04.001

[基金項(xiàng)目]沈陽(yáng)市科技計(jì)劃基金項(xiàng)目(F13-220-9-10)

[作者簡(jiǎn)介]周月宏，女，博士，副主任醫(yī)師，副教授，主要從事糖尿病及其相關(guān)并發(fā)癥的研究。