蘇悅興，張滿娥，陳梅英，陳淮林，張園滿（福建省龍巖市第二醫(yī)院檢驗科 364000）

白帶檢查主要觀察清潔度及有無滴蟲、念珠菌、淋病奈瑟菌、加德納菌等。本院常用方法為鹽水法和革蘭染色法，文獻(xiàn)報道改良方法有生理鹽水＋5%冰醋酸［1］和生理鹽水＋10%氫氧化鉀（KOH）［2］。4種方法對念珠菌檢出率如何，作者將所在醫(yī)院婦科門診300份白帶分別采用以上4種方法對比分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采集2012年1～12月院婦科門診患者白帶標(biāo)本300份，患者年齡16～61歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 用無菌棉拭子采集患者陰道后穹窿處、宮頸口等處分泌物，直接放進裝有生理鹽水的試管立刻送檢。

1.2.2 檢測方法 每份標(biāo)本涂片4張，1張用鹽水涂片法鏡檢，1張用革蘭染色法，1張用生理鹽水＋5%冰醋酸法，另一張用生理鹽水＋10%KOH法涂片法鏡檢。（1）生理鹽水涂片法：取標(biāo)本直接涂片，鏡檢，顯微鏡下見卵圓形孢子或假菌絲與出芽細(xì)胞相連接，即可報告陽性結(jié)果。（2）革蘭染色法：干燥，加入染色龍膽紫液染色10s之后水洗、甩干；加入染液碘溶液染色10s之后水洗、甩干；加入染液脫色液脫色10～15s之后水洗、甩干；最后加沙黃溶液復(fù)染10s之后水洗，以濾紙吸干或在空氣中干后鏡檢。（3）5%冰醋酸法：將生理鹽水涂片后加1滴5%冰醋酸溶液溶解透明后再鏡檢，顯微鏡下見卵圓形孢子或假菌絲與出芽細(xì)胞相連接，可報告陽性結(jié)果。（4）10%KOH溶液透明法：將生理鹽水涂片后加1滴10%KOH溶液溶解透明后再鏡檢，顯微鏡下見卵圓形孢子或假菌絲與出芽細(xì)胞相連接，可報告陽性結(jié)果。

2 結(jié) 果

4種白帶涂片檢查方法對念珠菌的檢出率結(jié)果見表1。由表1可見，其他3種方法與鹽水法比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 300份白帶標(biāo)本念珠菌檢出率比較

3 討 論

3.1 正常生理狀態(tài)下，陰道本身有自凈作用，形成自然防御功能。假如自然防御功能遭到破壞，則易受病原微生物的侵襲，導(dǎo)致陰道炎癥如非特異性陰道炎、真菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎等［3］。本文述及的念珠菌即為陰道炎的常見病原微生物。

3.2 300份陰道棉拭子標(biāo)本生理鹽水涂片法檢測念珠菌檢出率為21.0%，革蘭染色法為33.0%，與生理鹽水涂片法相比檢出率提高12.5%，與文獻(xiàn)［1］報道真菌檢出率17.6%（52／296）提高到30.1%（89／296）一致。生理鹽水＋10%KOH法、生理鹽水＋5%冰醋酸法檢出率分別為31.3%、32.7%，與生理鹽水涂片法相比檢出率分別提高10.3%、11.7%，與文獻(xiàn)［1－2］報道一致，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。革蘭染色法與冰醋酸法、10%KOH法結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果顯示4種方法檢測念珠菌臨床可根據(jù)各實驗條件選擇應(yīng)用。

3.3 陰道分泌物中念珠菌孢子常附著于上皮細(xì)胞邊緣，量少時觀察效果佳。當(dāng)發(fā)生炎性反應(yīng)時標(biāo)本背景較雜，細(xì)胞成分較多，生理鹽水涂片法不易觀察到芽生孢子和假菌絲，易造成漏檢，所以檢出率不高。生理鹽水＋5%冰醋酸涂片法是根據(jù)陰道正常pH值保持在4.0～4.5，而5%醋酸的pH值約為5，可以溶解白帶中的紅細(xì)胞和不定形成分，而上皮細(xì)胞和白細(xì)胞、念珠菌、滴蟲、桿菌、球菌不被溶解，因此視野清晰，各種成分易直接涂片觀察［1］。生理鹽水＋10%KOH法可以溶解白帶中的紅細(xì)胞和白細(xì)胞，上皮細(xì)胞等不定形成分，而念珠菌不被溶解，因此視野清晰，更易直接涂片觀察。革蘭染色法染色后念珠菌呈深藍(lán)色，可見芽生孢子，菌絲長而直、有分枝、著色不均，能清晰辨認(rèn)念珠菌。

3.4 從試驗結(jié)果來看生理鹽水涂片法念珠菌的檢出率較低，與文獻(xiàn)［4］報道一致，其他3種方法檢出率較高且相近。由于染色法操作復(fù)雜、費時、成本高，患者費用大［5］，因此在實際工作中，可采用操作簡單、快捷、成本低的鹽水法＋酸、堿法替代。

［1］ 林鳳金.白帶生理鹽水涂片改良法在婦科白帶檢查中的臨床價值［J］.上海煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2009，12（11）：1741.

［2］ 任愛英.如何提高白帶涂片檢查念珠菌陽性率［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2010，17（2）：119.

［3］ 郭素芳，張文坤.婦女生殖道感染的控制［J］.國外醫(yī)學(xué)：婦幼保健分冊，2001，12（1）：3－5.

［4］ 俞碧霞.婦科白帶涂片快速染色法與鹽水法的比較［J］.上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2001，16（1）：51，53.

［5］ 徐旭娟，張建林.白帶多項檢查快速染色技術(shù)在婦科白帶檢查中的應(yīng)用［J］.南通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2007，27（2）：66－67.