親和柱
- 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定全麥粉中的赭曲霉毒素A
比較不同的免疫親和柱，鑒于赭曲霉毒素A 本身的特性?xún)?yōu)化不用的洗脫溶劑，結(jié)合高靈敏度的超高液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（Ultra High Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS），建立快捷高效準(zhǔn)確的分析方法，為實(shí)際生活中測(cè)定全麥粉中赭曲霉毒素A 提供參考。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)材料全麥粉樣品購(gòu)自國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院，分別為全麥粉A、全麥粉B、全麥粉C，全麥粉陰性樣品、質(zhì)控樣
食品安全導(dǎo)刊 2023年28期2023-11-11
- 小麥粉中嘔吐毒素檢測(cè)能力驗(yàn)證及關(guān)鍵點(diǎn)分析
特曼公司；免疫親和柱：Romer 公司。1.2 標(biāo)準(zhǔn)品與試劑實(shí)驗(yàn)嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品（CAS：51481-10-8）：100.0 μg/mL，Romer。聚乙二醇：天津光復(fù)研究所；甲醇：色譜純，德國(guó)默克公司；磷酸緩沖鹽溶液：由氯化鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、超純水按一定比例配置，用鹽酸將pH值調(diào)至7.0，涉及藥品試劑均來(lái)自天津科密歐公司。1.3 能力驗(yàn)證及質(zhì)控樣品能力驗(yàn)證考核樣品：由鋁塑袋真空包裝含未知濃度嘔吐毒素的小麥粉樣品2 份，計(jì)劃編號(hào)ACASPT
現(xiàn)代食品 2023年10期2023-08-08
- 植物油中黃曲霉毒素B1均勻性和穩(wěn)定性分析
，稀釋液過(guò)免疫親和柱，收集洗脫液經(jīng)氮吹流動(dòng)相定容，上機(jī)測(cè)定。均勻性試驗(yàn)：分別測(cè)定10組A、B、C（A、B、C為三個(gè)不同濃度的樣品）的平行樣中的AFB1。穩(wěn)定性試驗(yàn)：在均勻性試驗(yàn)后，分3次間隔5～7 d后測(cè)定A、B、C各10個(gè)樣中的AFB1含量。1.1 材料與試劑乙腈、水、吐溫20、甲醇。1.2 儀器與設(shè)備高效液相色譜儀，日本島津，型號(hào)LC-20AD，配有熒光檢測(cè)器、分析天平、光化學(xué)衍生器、全自動(dòng)固相萃取儀[5]、氮吹儀。1.3 前處理方法稱(chēng)取5 g試樣于5
食品工業(yè) 2023年3期2023-03-29
- 免疫親和柱凈化-高效液相色譜技術(shù)檢測(cè)食品中嘔吐毒素的方法優(yōu)化
；嘔吐毒素免疫親和柱：3 mL/支，美國(guó)Romer labs 公司；934-AH玻璃纖維濾紙，英國(guó)Whatman 公司。1.1.2 試劑甲醇、乙腈，色譜純，默克；聚乙二醇，化學(xué)純，國(guó)藥；氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鉀，分析純，國(guó)藥；超純水，由Milli-Q 超純水機(jī)制備；嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液（197.2 mg·L-1）；溶劑（甲醇），色譜級(jí)，安譜。1.2 儀器與設(shè)備1260 高效液相色譜儀（配置DAD 檢測(cè)器），美國(guó)Agilent 公司；Milli
食品安全導(dǎo)刊 2023年6期2023-03-19
- 快速凈化柱在植物油黃曲霉毒素B1測(cè)定中的應(yīng)用
提取方法為免疫親和柱凈化提取法。隨著復(fù)合型快速凈化柱的問(wèn)世，凈化柱法也逐漸得到重視和應(yīng)用。本文采用免疫親和柱-同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法以及快速凈化柱-同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)植物中黃曲霉毒素B1進(jìn)行了檢出限、加標(biāo)回收率等實(shí)驗(yàn)比對(duì)，分析了兩種方法特點(diǎn)和適用條件。1 材料與方法1.1 主要標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及試劑黃曲霉毒素B1內(nèi)標(biāo)，0.511 μg/mL,ANPLE公司)；黃曲霉毒素B1，100.2 μg/mL,阿爾塔公司；乙腈，色譜純, Merck公司；甲醇
糧食與食品工業(yè) 2022年2期2022-04-21
- 優(yōu)化的免疫親和柱凈化-高效液相色譜法檢測(cè) 食品中的玉米赤霉烯酮
膠中制備的免疫親和柱具有易于制備和儲(chǔ)存、無(wú)需激活等優(yōu)點(diǎn)[5]。已有研究表明[6]，上樣、淋洗和洗脫條件都會(huì)影響免疫親和柱的柱回收率，雖然國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了免疫親和柱的通用凈化方法[4]，但在具體應(yīng)用中，為了實(shí)現(xiàn)痕量真菌毒素的準(zhǔn)確檢測(cè)，對(duì)商品化的免疫親和柱的使用仍有進(jìn)一步優(yōu)化的必要。本文對(duì)玉米粉、玉米油、醋和黃酒中的玉米赤霉烯酮的提取和凈化方法進(jìn)行優(yōu)化，通過(guò)色譜柱分離以及熒光檢測(cè)器檢測(cè)，建立了一種靈敏、準(zhǔn)確的食品中玉米赤霉烯酮的檢測(cè)方法。1 材料與方法1.1 材
食品安全導(dǎo)刊 2022年33期2022-03-23
- 不同前處理方法對(duì)糧油中黃曲霉毒素B1檢測(cè)效果對(duì)比
化。目前，免疫親和柱凈化處理其具有基質(zhì)干擾少、特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)已得到廣泛的應(yīng)用[5-8]，并且大部分實(shí)驗(yàn)室對(duì)樣品中黃曲霉毒素檢測(cè)前處理時(shí)常采用手動(dòng)凈化處理。隨著科技的進(jìn)步，為了簡(jiǎn)化前處理過(guò)程，提高檢測(cè)的自動(dòng)化水平和檢測(cè)效率，一些學(xué)者已研制全自動(dòng)親和純化儀、免疫磁珠-全自動(dòng)凈化儀等前處理儀器應(yīng)用于食品中真菌毒素的檢測(cè)[9-11]。針對(duì)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)還沒(méi)有系統(tǒng)地對(duì)比研究這3種前處理方法測(cè)定糧油中黃曲霉毒素的凈化效果，本研究通過(guò)優(yōu)化色譜條件后，建立柱后光化學(xué)
中國(guó)糧油學(xué)報(bào) 2022年1期2022-02-20
- 糧食中嘔吐毒素的檢測(cè)能力驗(yàn)證結(jié)果分析
；嘔吐毒素免疫親和柱（ROMER DON StarTM)；磷酸鹽緩沖溶液（以下簡(jiǎn)稱(chēng)PBS）：稱(chēng)取8.00 g氯化鈉、1.20 g磷酸氫二鈉、0.20 g磷酸二氫鉀、0.20 g氯化鉀，用900 mL水溶解，調(diào)pH=7.0，用水定容到1 000 mL；標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)品：嘔吐毒素（1ST7213-100A-S070305，F(xiàn)irst Standand）。1.2 儀器與設(shè)備液相色譜儀配二極管陣列檢查器（Agilent 1200，美國(guó)安捷倫）；C18色譜柱（4.6
現(xiàn)代食品 2021年24期2022-01-21
- 高效液相色譜法測(cè)定嬰幼兒乳粉中乳鐵蛋白含量
性好，肝素免疫親和柱處理后目標(biāo)峰明確，干擾峰少，且具有前處理簡(jiǎn)單、用時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)。嬰幼兒配方乳粉成分復(fù)雜，有脂肪、碳水化合物、蛋白質(zhì)含量高，其中乳鐵蛋白含量低，各種雜蛋白干擾大，且單一儀器往往難以滿(mǎn)足檢測(cè)需求，多儀器聯(lián)用是乳鐵蛋白檢測(cè)方法建立的研究方向。建立嬰幼兒配方乳粉中乳鐵蛋白含量測(cè)定相應(yīng)的檢測(cè)方法，并對(duì)不同主流品牌嬰幼兒配方乳粉進(jìn)行篩查，為嬰幼兒配方乳粉中乳鐵蛋白含量分析提供基礎(chǔ)參考數(shù)據(jù)，為國(guó)家出臺(tái)相關(guān)檢測(cè)方法及添加限量要求提供技術(shù)支持。1 材料與方法
現(xiàn)代食品 2021年19期2021-11-24
- 免疫親和凈化－超高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定食品中玉米赤霉烯酮類(lèi)真菌毒素
簡(jiǎn)便，利用免疫親和柱進(jìn)行凈化及液標(biāo)法進(jìn)行定量，能夠同時(shí)測(cè)定6種玉米赤霉烯酮類(lèi)真菌毒素。除了谷物以外，本檢測(cè)方法還能應(yīng)用于肉、蛋、乳等食品的檢測(cè)。一、材料和儀器1.材料和試劑。（1）樣品：在市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)大米、麥片、牛肉、豬肉脯、雞蛋、牛奶等當(dāng)作樣品，大米和麥片研磨成粉，牛肉和豬肉脯搗碎，雞蛋和牛奶混勻。（2）試劑：乙腈，色譜純;乙酸鈉，分析純;玉米赤霉酮標(biāo)準(zhǔn)品、α-玉米赤霉烯醇標(biāo)準(zhǔn)品、β-玉米赤霉醇標(biāo)準(zhǔn)品、α-玉米赤霉醇標(biāo)準(zhǔn)品、β-玉米赤霉烯醇標(biāo)準(zhǔn)品、玉米赤霉烯
中國(guó)食品 2021年21期2021-11-07
- 免疫親和柱凈化-HPLC光化學(xué)柱后衍生法測(cè)定玉米中黃曲霉毒素B1的含量
。本文采用免疫親和柱凈化-HPLC光化學(xué)柱后衍生法建立一種快速、準(zhǔn)確檢測(cè)玉米中AFB1的方法。1 材料與方法1.1 儀器與試劑高效液相色譜儀-熒光檢測(cè)器，島津LC-20A、RF-20A；光化學(xué)衍生器，北京華安麥科生物科技有限公司；水浴恒溫振蕩器，常州國(guó)華電器有限公司；BS1254電子天平，德國(guó)賽多利斯股份有限公司；Maxi Mix Ⅱ渦旋振蕩器，賽默飛世爾科技有限公司；超純水機(jī)，密理博中國(guó)有限公司；0.22 μm針式濾膜，天津津騰實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司；玻璃纖
現(xiàn)代食品 2021年15期2021-10-14
- 免疫親和柱凈化-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水環(huán)境中微囊藻毒素
收率較低。免疫親和柱(IAC)是利用抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性的原理制作而成的SPE 柱，由于抗原抗體的高度選擇性，使得免疫親和柱具有良好的吸附凈化性能和高度的特異性。本實(shí)驗(yàn)利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的靈敏性和準(zhǔn)確性，結(jié)合免疫親和柱的特異性和專(zhuān)一性，建立一套高效、快捷、靈敏度高的微囊藻毒素檢測(cè)方法。1 材料與方法1.1 儀器和試劑ACQUITY 超高效液相色譜-質(zhì)譜儀Quattro Premier XE(美國(guó)Waters 公司)；MS2 漩渦混合器(德國(guó)IKA公
- 高效液相色譜-柱后光化學(xué)衍生法測(cè)定變性淀粉中黃曲霉毒素含量的研究
，提取液經(jīng)免疫親和柱或多功能凈化柱凈化處理，用HPLC光化學(xué)衍生-熒光檢測(cè)器檢測(cè)樣品中黃曲霉毒素G2、G1、B2和B1含量，快速可靠。1 材料與方法1.1 材料與試劑樣品：市售羥丙基二淀粉磷酸酯。美國(guó)Beacon黃曲霉毒素總量免疫親和柱(上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)；MycoSep 226多功能凈化柱(Romer國(guó)際貿(mào)易(北京)有限公司)；黃曲霉標(biāo)準(zhǔn)品(G1：1.00 μg/mL；G2：0.300 μg/mL；B1：1.00 μg/mL；B2：0.300
工業(yè)微生物 2021年3期2021-06-30
- 雞飼料及原料中玉米赤霉烯酮污染的檢測(cè)及分布研究
次研究使用免疫親和柱、色譜純、甲醇、乙腈等材料，親和柱選用的是helix玉米赤霉烯酮免疫親和柱，并選用10 mg的玉米赤霉烯酮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在分析提出方面采用廣州市廣聯(lián)津化工有限公司的去離子水、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀等物品。試劑制作的步驟：明確試劑提取標(biāo)準(zhǔn)，試劑提取標(biāo)準(zhǔn)為乙腈與水的比例為9:1。制作磷酸鹽緩沖液，制作標(biāo)準(zhǔn)為pH 7.4(50 mm PBS)，需要使用磷酸氫二鉀7.27 g、磷酸二氫鉀1.24 g、氯化鈉8.76 g進(jìn)行溶解，離子水的含量為1L。
畜禽業(yè) 2021年6期2021-06-23
- 花生油中黃曲霉毒素B1高效液相色譜 檢測(cè)方法的探索與研究
霉毒素總量免疫親和柱。甲醇-水（70+30）；磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：8.00 g氯化鈉、1.20 g磷酸氫二鈉、0.20 g磷酸二氫鉀、0.20 g氯化鉀，用900 mL水溶解，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至7.4，用水定容至1 000 mL；1% Triton X-100（或吐溫-20）的PBS： 取10 mL Triton X-100， 用PBS定 容 至1 000 mL。所用試劑均為分析純。黃曲霉毒素B1（AFTB1）標(biāo)準(zhǔn)溶液，標(biāo)準(zhǔn)值2.0 μg·mL-1，由
現(xiàn)代食品 2021年7期2021-06-16
- 糧食中黃曲霉毒素B1檢測(cè)的免疫磁珠法樣本前處理應(yīng)用研究
方法主要為免疫親和柱凈化法、固相萃取柱凈化法、液液萃取、Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe法(QuEChERS)[13-18]。這些提取方式不僅操作繁瑣，效率不高，而且需要大量使用包括正己烷、乙酸乙酯、石油醚等在內(nèi)的各種有機(jī)溶劑，此類(lèi)有機(jī)溶劑易對(duì)環(huán)境產(chǎn)生二次污染，也會(huì)對(duì)操作人員的健康產(chǎn)生傷害。免疫磁珠為磁性微球和免疫配基結(jié)合而成的納米級(jí)材料，表面通常帶有氨基、羧基、羥基或巰基等化學(xué)官能團(tuán)，該官能團(tuán)與不同的免疫配基如
糧食與飼料工業(yè) 2021年2期2021-04-27
- 小麥粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇測(cè)定方法比較與分析
萃取柱法和免疫親和柱法對(duì)小麥粉樣品進(jìn)行前處理，采用高效液相色譜法測(cè)定小麥粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量，并對(duì)這3種前處理方法進(jìn)行了比較分析。1 實(shí) 驗(yàn)1.1 材料與試劑甲醇(色譜純)，默克公司；磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、鹽酸均為分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；聚乙二醇(相對(duì)分子質(zhì)量8000)，Sigma-Aldrich；乙腈中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL)，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；Poly-Sery HLB Pro固相萃取
廣州化工 2020年23期2020-12-16
- HPLC 檢測(cè)植物油中黃曲霉毒素B1 含量的不確定度評(píng)價(jià)
C 技術(shù)（免疫親和柱凈化法）、SPE 技術(shù)（固相萃取凈化法））、液相色譜-質(zhì)譜法（IAC 技術(shù)，SPE 技術(shù)），檢測(cè)方法品種多，適用范圍不同，使得黃曲霉毒素檢測(cè)選擇繁瑣，效率低下，同時(shí)一些檢測(cè)方法的重復(fù)性差，引入的不確定度分量多，導(dǎo)致結(jié)果在置信區(qū)間的范圍寬。針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)缺點(diǎn)，本文做了采用ICA 技術(shù)的高效液相色譜法對(duì)植物油中的黃曲霉毒素B1 進(jìn)行測(cè)定，并進(jìn)行不確定度評(píng)價(jià)，分析各不確定度分量對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，從而在試驗(yàn)過(guò)程中控制各分量的輸入，使測(cè)試結(jié)果更加可
廣州化學(xué) 2020年5期2020-11-02
- 原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法合成分子印跡聚合物及其吸附性能的研究
層色譜法、免疫親和柱-高效液相色譜法等[4 - 6]。樣品前處理技術(shù)對(duì)于分析檢測(cè)至關(guān)重要，而且在復(fù)雜樣品中痕量赭曲霉毒素A的分析中要求更為嚴(yán)格[7]。近年來(lái)，分子印跡聚合物(Molecularly Imprinted Polymers，MIPs)以其精確、特異性的吸附能力、高重復(fù)性、低檢出限、又不易受復(fù)雜樣品基體干擾的特點(diǎn)，正被逐漸應(yīng)用于痕量物質(zhì)的前處理中，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)固相萃取和免疫分析的不足[8 - 10]。圖1 赭曲霉毒素A(OTA)和氯霉素的結(jié)構(gòu)式Fi
分析科學(xué)學(xué)報(bào) 2020年4期2020-09-17
- 全自動(dòng)免疫親和固相萃取超高效液相色譜法測(cè)定糧油中黃曲霉毒素
成本較高。免疫親和柱具有有機(jī)溶劑消耗少、基質(zhì)干擾少、特異性強(qiáng)、靈敏度高和適用于各種復(fù)雜基質(zhì)的樣品等特點(diǎn)[12,13]，因此免疫親和層析凈化高效液相色譜法是目前國(guó)際上普遍采用的黃曲霉毒素精確定量和確認(rèn)的方法[14-16]。大部分實(shí)驗(yàn)室對(duì)樣品中黃曲霉毒素檢測(cè)前處理時(shí)采用手動(dòng)凈化。而手動(dòng)凈化由于過(guò)程繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)等因素制約，導(dǎo)致每天處理樣本量少。當(dāng)樣品量較大時(shí)，存在時(shí)效性差、人為因素影響大等問(wèn)題。S. Jinap等[17,18]建立了免疫親和柱在線(xiàn)凈化高效液相色譜
中國(guó)糧油學(xué)報(bào) 2020年7期2020-09-03
- 神經(jīng)性貝類(lèi)毒素免疫親和柱的制備與應(yīng)用
-13]。免疫親和柱(immunoaffinity column，IAC)是一種基于抗原抗體反應(yīng)的新型層析柱，可選擇性吸附樣品提取液中的目標(biāo)化合物，在特異性富集毒素的同時(shí)凈化樣品基質(zhì)，凈化效果好。作為新型高效的前處理凈化技術(shù)，免疫親和柱凈化技術(shù)正在不斷改進(jìn)發(fā)展，在生物毒素檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用越來(lái)越廣泛[14-16]。試驗(yàn)擬以PbTX-2為研究對(duì)象，研制NSP免疫親和柱的裝柱，并建立NSP的免疫親和柱凈化—液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜分析方法，以期經(jīng)免疫親和柱凈化的樣品提取液
食品與機(jī)械 2020年2期2020-04-13
- 免疫親和柱在果蔬有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定前處理中的應(yīng)用研究
種多功能的免疫親和柱（MycoSep 226 AflaZon+）可直接應(yīng)用于水果、蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)中凈化有機(jī)磷的乙腈提取液。免疫親和柱是一種特殊的SPE 柱，以極性、非極性及離子交換等幾類(lèi)基團(tuán)組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類(lèi)、蛋白類(lèi)等雜質(zhì)，現(xiàn)主要被用于黃曲霉毒素含量測(cè)定的前處理凈化過(guò)程中[8-9]。應(yīng)用該柱對(duì)果蔬中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留提取液進(jìn)行凈化處理，可有效去除脂類(lèi)、蛋白類(lèi)等雜質(zhì)，有機(jī)磷農(nóng)藥則可順利通過(guò)。該方法凈化速度快，省時(shí)省力，有望在今后農(nóng)藥殘留
浙江林業(yè)科技 2019年4期2019-12-13
- 免疫親和柱凈化結(jié)合高效液相色譜法測(cè)定小麥粉中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇
譜測(cè)定法、免疫親和柱結(jié)合高效液相色譜法、同位素稀釋液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是檢測(cè)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇常用的方法[2]。本文使用免疫親和柱結(jié)合高效液相色譜法檢測(cè)小麥粉中的嘔吐毒素，能很好地滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)分析標(biāo)準(zhǔn)。1 儀器及試劑脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和柱、紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器（Agilent高效液相色譜儀）、超聲波、渦旋振蕩器、離心機(jī)、真空壓力泵與玻璃注射器。2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液及標(biāo)準(zhǔn)工作溶液標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（25 μg/mL）：移取1 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于10 mL容量
食品安全導(dǎo)刊 2019年18期2019-09-23
- 超速離心法與QIAGEN膜親和柱法提取前列腺癌細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體的方法學(xué)比較*
、磁珠法以及膜親和柱法等[7-8]，超速離心法是外泌體提取的金標(biāo)準(zhǔn)，但超速離心法耗時(shí)耗力，并且提取率低；沉淀法雖然簡(jiǎn)單，但會(huì)同時(shí)沉淀許多雜蛋白，并且商品化試劑成本高；磁珠法適用于提取血液等起始量要求較低的生物樣本來(lái)源的外泌體，用途有限；膜親和柱法適用于提取包括細(xì)胞上清、血液及尿液等多種生物體液來(lái)源的外泌體，且操作相對(duì)簡(jiǎn)便?；诖耍狙芯客ㄟ^(guò)常規(guī)的外泌體鑒定方法，對(duì)比了超速離心法和QIAGEN膜親和柱法提取外泌體的特點(diǎn)，為外泌體的基礎(chǔ)和臨床研究提供方法學(xué)參考
現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志 2019年3期2019-06-21
- 肝素親和柱在乳鐵蛋白檢測(cè)中的應(yīng)用優(yōu)化
1 mL）肝素親和柱作為目標(biāo)化合物純化和濃縮的前處理步驟[19-20]，由于是首次將該親和柱應(yīng)用到乳鐵蛋白的檢測(cè)中，故對(duì)應(yīng)用條件進(jìn)行了摸索和優(yōu)化，包括：肝素親和柱的承載量、淋洗液和洗脫液的濃度、pH值等參數(shù)的優(yōu)化等，建立一種適合乳鐵蛋白檢測(cè)的前處理凈化方法。1 材料與方法1.1 試劑與儀器乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（批號(hào)：SP113101）：Tatua公司提供；乙腈為（色譜純）：美國(guó)默克公司；無(wú)水乙醇、氯化鈉、磷酸、磷酸氫二鈉、三氟乙酸（均為分析級(jí)）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試
食品研究與開(kāi)發(fā) 2019年6期2019-03-19
- 膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)飼料中黃曲霉毒素B1殘留
；AFB1免疫親和柱（Romer公司）；玻璃纖維濾紙（Whatman公司）；ROSA黃曲霉毒素B1膠體金快速定量檢測(cè)條（Charm公司）。Waters 2695高效液相色譜儀（Waters公司）；孵育器、讀數(shù)儀（Charm公司）。1.2 快速定量膠體金免疫層析法準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品5.0g試樣于50ml具塞錐形瓶中，加入20ml試樣提取液，密閉，振蕩10min，8000 r/min離心5min，取離心后上清液100μl于另一離心管中，加 入1.0 ml稀釋緩沖液，
獸醫(yī)導(dǎo)刊 2019年4期2019-02-12
- 鄰苯二甲酸酯類(lèi)污染物雌激素結(jié)合活性篩查
2競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合受體親和柱（受體蛋白通過(guò)6×His標(biāo)簽與親和柱（Ni-NTA-Sefinose Column）上的Ni通過(guò)配位結(jié)合得到受體親和柱）上的雌激素受體（Estrogen receptor，ER），剩余未結(jié)合的游離態(tài)E2通過(guò)離心分離后，與熒光標(biāo)記E2抗體結(jié)合。剩余游離熒光標(biāo)記E2抗體與傳感界面上固定的E2-BSA結(jié)合，在倏逝場(chǎng)激發(fā)下產(chǎn)生熒光，熒光強(qiáng)度與外源化合物的雌激素結(jié)合活性呈負(fù)相關(guān)，由此可以定性考察化合物的雌激素結(jié)合活性大小。1 材料與方法1.1 材
生物技術(shù)通報(bào) 2019年1期2019-01-23
- 高效液相色譜測(cè)定乳制品、谷物粉及飼料中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物
ADON）免疫親和柱（產(chǎn)品編號(hào)：HCM30508，柱容量≥1 000 ng） 北京華安麥科生物技術(shù)有限公司；Agilent 1260高效液相色譜儀（配備紫外檢測(cè)器）美國(guó)Agilent公司；AB265-S分析天平 瑞士Mettler-Doledo公司；3k30高速離心機(jī) 德國(guó)Sigma公司；GM 200高速粉碎機(jī)（轉(zhuǎn)速10 000 r/min） 德國(guó)Retsch公司；篩網(wǎng)（孔徑1～2 mm） 安平縣鴻凱金屬絲網(wǎng)制品廠(chǎng)；TurboVapLV氮吹儀 瑞典Biot
乳業(yè)科學(xué)與技術(shù) 2019年1期2019-01-23
- 免疫親和柱在真菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用
建立了復(fù)合免疫親和柱－在線(xiàn)光化學(xué)衍生－高效液相色譜同時(shí)測(cè)定谷物及其制品中9種真菌毒素的檢測(cè)方法，該方法重現(xiàn)性好、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確。真菌毒素免疫親和柱主要利用真菌毒素抗體作為配基來(lái)吸附真菌毒素，具有較好的靶標(biāo)識(shí)別性和特異性，可以去除樣品基質(zhì)干擾，降低真菌毒素凈化的損失，提高結(jié)果的準(zhǔn)確性，適用于混合糧食和油料基質(zhì)中低濃度真菌毒素的檢測(cè)[2]。本文對(duì)免疫親和柱在真菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行了相關(guān)的總結(jié)與分析，為免疫親和柱的應(yīng)用與發(fā)展提供一定的理論基礎(chǔ)。2 真菌毒素
食品安全導(dǎo)刊 2019年21期2019-01-05
- 中藥飲片中真菌毒素前處理方法進(jìn)展
凈化方式為免疫親和柱凈化法，但并未對(duì)其余中藥材及真菌毒素進(jìn)行限量規(guī)定。真菌毒素種類(lèi)繁雜，且在不同種類(lèi)和不同基質(zhì)中藥之間都存在著很大的差異，使檢測(cè)難度增大。其前處理方法的好壞在很大程度上決定了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此為了提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，研究不同的基質(zhì)的中藥和不同的毒素的前處理方法尤為重要。1 分類(lèi)綜述1.1 提取方法表1 各國(guó)對(duì)真菌毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)一種好的提取方法不僅要求提取充分，而且要求提取的物質(zhì)中含有盡量少的非目標(biāo)組分，這將有利于之后毒素的分離和純化。
世界中醫(yī)藥 2018年12期2018-12-25
- 復(fù)合免疫親和柱-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定谷物及其制品中9種真菌毒素
-19]或免疫親和柱串聯(lián)[20]的方式對(duì)提取的樣品溶液進(jìn)行凈化處理,但是前兩種方法受樣品基質(zhì)效應(yīng)影響較大,凈化不夠徹底,容易產(chǎn)生干擾;當(dāng)需要測(cè)定的真菌毒素種類(lèi)較多時(shí),免疫親和柱串聯(lián)的方式也難以適用。近些年,復(fù)合免疫親和柱成了研究的熱點(diǎn)[21-23],然而受到抗體種類(lèi)的影響,商品化復(fù)合免疫親和柱的使用仍有一定的局限性。本實(shí)驗(yàn)有針對(duì)性地從商品化免疫親和柱中獲取所需填料,混勻并重新裝填后制成真菌毒素復(fù)合免疫親和柱,在此基礎(chǔ)上,建立了在線(xiàn)光化學(xué)衍生-高效液相色譜同
色譜 2018年12期2018-12-06
- 小麥中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的液相色譜檢測(cè)與膠體金試紙法分析比較
信公司）、免疫親和柱（美國(guó)Vicam公司）。色譜純甲醇（中國(guó)國(guó)藥）、色譜純乙腈（中國(guó)國(guó)藥）、聚乙二醇PEG8000（美國(guó)Vicam公司）、超純水（美國(guó)Millipore公司）。嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（純度大于99.5%）：200 μg/mL。嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別取0.1mL嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，氮?dú)鈨x吹干后，用流動(dòng)相（甲醇+乙腈+水=10+10+80）分別配制濃度為100、300、500、1 000、2 000、4 000 μg/L以及6 000 μg/L
現(xiàn)代食品 2018年19期2018-12-05
- 免疫親和柱凈化-高效液相色譜法檢測(cè)兩種飲料中雙酚A含量
究首次采用免疫親和柱凈化-高效液相色譜法聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)豆奶和橙汁飲料中雙酚A含量,對(duì)檢測(cè)飲料類(lèi)復(fù)雜基質(zhì)食品中雙酚A含量具有參考作用。1 材料與方法1.1 材料與儀器雙酚A免疫親和柱 柱容量500 ng/支 美國(guó)VICAM公司;1.5 μm玻璃纖維濾紙 美國(guó)3M公司;0.22 μm有機(jī)相濾膜 上海安譜公司;乙腈 色譜純，德國(guó)Merck公司;甲醇 色譜純，德國(guó)Merck公司;氯化鈉 分析純，廣州化學(xué)試劑廠(chǎng);磷酸氫二鈉 分析純，廣州化學(xué)試劑廠(chǎng);磷酸二氫鉀 分析純，
食品工業(yè)科技 2018年20期2018-10-24
- 高效液相色譜-柱后衍生法檢測(cè)大米中黃曲霉毒素B1方法分析
方法大多用免疫親和柱來(lái)凈化、分離，其凈化效果優(yōu)異。本文主要采用高效液相色譜-柱后衍生法檢測(cè)大米樣品中的黃曲霉毒素B1，用乙腈-水溶液的混合溶液提取，提取液經(jīng)免疫親和柱凈化和富集，凈化液濃縮、定容和過(guò)濾后經(jīng)液相色譜分離，柱后（碘試劑衍生），經(jīng)熒光檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。1 試劑和材料甲醇（CH3OH），色譜純；乙腈（CH3CN），色譜純；氯化鈉（NaCI）；磷酸氫二鈉（Na2HPO4）；磷酸二氫鉀（KH2PO4）；氯化鉀（KCI）；鹽酸（HCI）；Trito
現(xiàn)代食品 2018年15期2018-09-21
- 我國(guó)主導(dǎo)制修訂的《玉米規(guī)格》等兩項(xiàng)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)正式發(fā)布
量的測(cè)定一免疫親和柱凈化高效液相色譜法》（IS0 15141：2018）兩項(xiàng)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）批準(zhǔn)，于2018年7月正式出版。玉米是世界三大主糧之一，2017/18年全球貿(mào)易量達(dá)到1.45億噸?！队衩滓?guī)格》（IS0 19942）標(biāo)準(zhǔn)是糧食領(lǐng)域重要的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定了國(guó)際貿(mào)易中玉米的最低質(zhì)量要求。該標(biāo)準(zhǔn)在充分考慮進(jìn)口國(guó)和出口國(guó)利益的基礎(chǔ)上，統(tǒng)一了玉米質(zhì)量指標(biāo)的術(shù)語(yǔ)定義和檢測(cè)方法，并參照我國(guó)玉米標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定了水分和雜質(zhì)含量要求。赭曲霉毒素A （OT
中國(guó)食品 2018年16期2018-09-10
- 免疫親和柱—超高效液相色譜法測(cè)定維生素飲料中維生素B12
色譜法結(jié)合免疫親和柱對(duì)樣品進(jìn)行分析，免疫親和柱對(duì)維生素B12具有較高的選擇性，可以對(duì)樣品維生素B12進(jìn)行純化和富集，再經(jīng)超高效液相色譜法檢測(cè)樣品從而達(dá)到分析準(zhǔn)確、快速、成本低、操作簡(jiǎn)單的目的。因此，將免疫親和柱—超高效液相色譜法運(yùn)用到成分復(fù)雜的飲料中低含量維生素B12的測(cè)定具有重大的意義。1 試驗(yàn)與材料1.1 儀器與試劑超高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司)；超聲波清洗儀，美國(guó)Auto science公司；氮吹儀，中國(guó)安譜公司；固相萃取儀，美國(guó)CNW公司
中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng) 2018年3期2018-04-04
- 免疫親和柱凈化-HPLC法測(cè)定植物油中黃曲霉毒素
0203)免疫親和柱凈化-HPLC法測(cè)定植物油中黃曲霉毒素賴(lài)宣丞，廖長(zhǎng)儒，曾德斌(海南省疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)檢測(cè)所理化科,海南 ?？?570203)目的： 建立一種免疫親和柱凈化-高效液相色譜同時(shí)測(cè)定植物油中黃曲霉毒素B1,B2,G1，G2的方法。方法： 試樣用甲醇水(55+45，體積比)提取，提取液經(jīng)離心、過(guò)濾、稀釋后，用免疫親和柱凈化，采用高效液相色譜-大體積流通池?zé)晒鈾z測(cè)器檢測(cè)。結(jié)果： 在優(yōu)化條件下，黃曲霉毒素B1,G1的檢出限分別為0.067μg/
山東化工 2017年14期2017-09-16
- 不同凈化柱處理對(duì)小麥粉中4 種鐮刀菌毒素的凈化效果
-PREP免疫親和柱和實(shí)驗(yàn)室制備聚苯乙烯-二乙烯苯樹(shù)脂免疫親和柱在檢測(cè)小麥粉中4 種鐮刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）過(guò)程中的前處理效果。選擇MycoSep?226多功能凈化柱、DZT MS-PREP免疫親和柱和實(shí)驗(yàn)室制備聚苯乙烯-二乙烯苯樹(shù)脂免疫親和柱，通過(guò)不同的提取和前處理方法，以及建立高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)法，對(duì)小麥粉中的4 種鐮刀菌毒素進(jìn)行測(cè)定。DZT MS-PREP免疫親和柱處理小麥粉樣品所得的回收率為8
食品科學(xué) 2017年14期2017-07-20
- 黃曲霉毒素免疫親和柱性能評(píng)價(jià)方法及應(yīng)用
黃曲霉毒素免疫親和柱性能評(píng)價(jià)方法及應(yīng)用徐文遠(yuǎn)1，倪新1，崔淑華2，朱萬(wàn)燕1（1.臨沂出入境檢驗(yàn)檢疫局，山東臨沂276034；2.山東出入境檢驗(yàn)檢疫局食品農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中心，山東青島266002）探索建立一種簡(jiǎn)便可靠的黃曲霉毒素免疫親和柱性能評(píng)價(jià)方法并利用該方法對(duì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上5個(gè)主流品牌產(chǎn)品進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)。依據(jù)評(píng)價(jià)結(jié)果進(jìn)行產(chǎn)品采購(gòu)使用，經(jīng)3年多實(shí)用經(jīng)驗(yàn)證明了方法的可靠性。該性能評(píng)價(jià)方法不僅能夠從確保檢測(cè)質(zhì)量和降低檢測(cè)成本兩方面指導(dǎo)親和柱的采購(gòu)還能夠協(xié)助倒逼生產(chǎn)商不斷
食品研究與開(kāi)發(fā) 2017年14期2017-07-18
- 針對(duì)糧油產(chǎn)品略析其真菌毒素的檢測(cè)工作
速均質(zhì)器、免疫親和柱等，其中黃曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮免疫親和柱都屬于ToxinFast產(chǎn)品。AflaTest顯色劑；玉米赤霉烯酮顯色劑；甲醇；乙腈；苯；冰乙酸；Tween-20溶液；PBS緩沖液；3種真菌毒素檢測(cè)質(zhì)控樣品全部為國(guó)家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心產(chǎn)品。黃曲霉毒素B1測(cè)定黃曲霉毒素B1提取與凈化。隨機(jī)選取50g研磨好的樣品備用，在攪拌容器中加10gNaCl，然后按4：1的比例加入總量為100ml的甲醇/水，進(jìn)行快速攪拌1min。然后把提取到
食品界 2017年3期2017-04-19
- 不同免疫親和柱對(duì)飼料中黃曲霉毒素檢測(cè)結(jié)果的影響研究
G2的測(cè)定免疫親和柱凈化——高效液相色譜法》（GB/T 30955—2014）的發(fā)布實(shí)施，更促進(jìn)了免疫親和柱在飼料霉菌毒素檢測(cè)的廣泛推廣。國(guó)際、國(guó)內(nèi)的生物技術(shù)公司也紛紛推出各自的免疫親和層析柱，但不同品牌柱子的特異性、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性也良莠不齊，故筆者選取兩家公司的黃曲霉毒素免疫親和柱進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。1 儀器與材料1.1 儀器與設(shè)備Waters2695高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司）、熒光檢測(cè)器（美國(guó)Agilent公司）、光化學(xué)衍生系統(tǒng)（美國(guó)Romer公
飼料工業(yè) 2017年14期2017-01-08
- 醬油中黃曲霉毒素B1含量的檢測(cè)
該方法采用免疫親和柱凈化提取，利用熒光檢測(cè)器（帶柱后光化學(xué)衍生系統(tǒng)）檢測(cè)，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單快捷、線(xiàn)性好，回收率高。醬油；黃曲霉毒素B1；免疫親和柱；熒光檢測(cè)器；光化學(xué)衍生試劑和溶液 除非另有規(guī)定，所用水為蒸餾水或去離子水；乙腈（色譜純）；乙腈-水溶液（8+2）：取80ml乙腈加20ml水；氯化鈉（分析純）吐溫-20（分析純）；黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)溶液（3ug/ml）,保存于4℃?zhèn)溆?；黃曲霉毒素B1系列標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確移取適量的黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇稀釋成
食品安全導(dǎo)刊 2016年29期2016-11-18
- 以聚苯乙烯-二乙烯苯為載體的多目標(biāo)免疫親和柱的制備及應(yīng)用
體的多目標(biāo)免疫親和柱的制備及應(yīng)用張家寧，丁軻*，韓濤，陳湘寧（北京農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，食品質(zhì)量與安全北京實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)產(chǎn)品有害微生物及農(nóng)殘安全檢測(cè)與控制北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206）選取3 種不同聚苯乙烯-二乙烯苯基材，通過(guò)硝基化、氨基化、活化、偶聯(lián)抗體等步驟制備免疫親和柱，用于4 種鐮刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）的同時(shí)純化，并將3 種基材制備的免疫親和柱進(jìn)行比較。以Cleanert PS型聚苯乙烯-二乙
食品科學(xué) 2016年20期2016-11-07
- 談食品中黃曲霉毒素B1的檢測(cè)
液的處理、免疫親和柱等方面做了歸納分析?！娟P(guān)鍵詞】黃曲霉毒素B1的測(cè)定 注意事項(xiàng) 免疫親和層析法高效液相色譜法黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1簡(jiǎn)寫(xiě)為AFB1)是二氫呋喃氧雜萘鄰?fù)难苌铮幸粋€(gè)雙呋喃環(huán)和一個(gè)氧雜萘鄰?fù)?香豆素)。黃曲霉毒素B1是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素B1對(duì)包括人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。B1是最危險(xiǎn)的致癌物，經(jīng)常在玉米，花生，棉花種子，一些干果中常能檢測(cè)到。它們?cè)谧贤饩€(xiàn)照射下能
中國(guó)科技縱橫 2016年1期2016-06-02
- 超濾濃縮-HPLC法測(cè)定乳中乳鐵蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)及功能性評(píng)價(jià)
先通過(guò)肝素免疫親和柱凈化、磷酸氫二鈉-氯化鈉溶液洗脫，然后采用超濾濃縮后直接測(cè)定。采用紫外檢測(cè)器檢測(cè)。本方法檢出限為0.01 mg/100 g。該法具有樣品處理簡(jiǎn)單方便，靈敏度高，重現(xiàn)性好，分析時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。該方法測(cè)定的為具有活性功能的乳鐵蛋白含量，解決了乳鐵蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低的生乳及各類(lèi)液態(tài)乳只采用肝素親和柱凈化后測(cè)定靈敏度不能滿(mǎn)足測(cè)定要求的問(wèn)題，對(duì)評(píng)價(jià)乳的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。超濾濃縮；乳；乳鐵蛋白；高效液相色譜0 引言乳鐵蛋白（Lf）是乳中特有的功能性
中國(guó)乳品工業(yè) 2016年11期2016-02-20
- 免疫親和柱凈化-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定海洋生物中河豚毒素
回收率低。免疫親和柱(IAC)是一種基于抗原抗體反應(yīng)的新型層析柱，利用生物大分子具有對(duì)一類(lèi)生物大分子特異識(shí)別和可逆結(jié)合的特性制作而成，具有獨(dú)特的選擇專(zhuān)一性和良好的吸附凈化性能。目前，尚未見(jiàn)以免疫親和柱作為前處理凈化手段檢測(cè)河豚毒素的相關(guān)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)基于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的高靈敏性和精確性，利用免疫親和柱的獨(dú)特選擇識(shí)別性，建立一種快速、簡(jiǎn)便、高效測(cè)定海洋生物中河豚毒素的分析方法。2 實(shí)驗(yàn)部分2.1 儀器與試劑ACQUITY 超高效液相色譜-質(zhì)譜儀Quattro
分析化學(xué) 2015年2期2015-06-21
- 基于蛋白A-瓊脂糖凝膠黃曲霉毒素B1免疫親和柱的制備
霉毒素B1免疫親和柱的制備龔 燕1，楊婷婷1，莫曉嵩2，張海濤1，黃 偉2，陸廷瑾1，張東升1,*，汪海峰3（1.江蘇省蘇微微生物研究有限公司，江蘇 無(wú)錫 214063；2.江蘇省糧食局糧油質(zhì)量監(jiān)測(cè)所，江蘇 南京 210011；3.南京財(cái)經(jīng)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，江蘇 南京 210011）將初步純化的抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體，定向偶聯(lián)于蛋白A-瓊脂糖凝膠，制備成免疫親和層析柱。結(jié)果顯示，辛酸-飽和硫酸銨純化后的單抗質(zhì)量濃度為17.5 mg/mL，純度為4
食品科學(xué) 2015年10期2015-01-03
- 黃曲霉毒素免疫親和柱重復(fù)利用的探討
魚(yú) 劉英慧免疫親和柱是20世紀(jì)90年代在分析領(lǐng)域得到應(yīng)用的一種新技術(shù)，它是將一定量的單克隆抗體偶聯(lián)在合適的擔(dān)體上，制成相應(yīng)的免疫親和柱。該柱具有高選擇性吸附和抗干擾的特性，凈化效果好，檢測(cè)靈敏度高，是目前國(guó)際上較為常用的檢測(cè)真菌毒素樣品前處理方法之一[1]?！吨袊?guó)藥典》2010年版一部[2]、《歐洲藥典》7.0[3]、GB/T 18979-2003[4]中均采用該方法進(jìn)行黃曲霉毒素的測(cè)定。隨著《中國(guó)藥典》中收載需檢測(cè)黃曲霉毒素的中藥材和制劑的品種的增加，以
中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2014年1期2014-03-27
- 葡萄酒中赭曲霉毒素A檢測(cè)方法優(yōu)化
樣品時(shí)再用免疫親和柱凈化后用高效液相色譜檢測(cè)進(jìn)行確證，方 法具有快捷、靈敏、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，回收率、精密度都能達(dá)到檢測(cè)要求。赭曲霉毒素A；葡萄酒；高效液相色譜法；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法；方法優(yōu)化赭曲霉毒素是曲霉菌屬和青霉菌屬的某些菌種產(chǎn)生的二級(jí)有毒代謝產(chǎn)物，包含7種結(jié)構(gòu)類(lèi)似的化合物，其中赭曲霉毒素A(ochratoxi n A，OTA)在自然界中分布最廣泛，毒性最強(qiáng)，對(duì)人類(lèi)和動(dòng)植物影響最大。OTA是一種穩(wěn)定的無(wú)色結(jié)晶化合物，具有耐熱性，易溶于稀 的碳酸氫鈉溶液和極
食品科學(xué) 2013年24期2013-10-27
- 免疫親和柱的制備及在真菌毒素檢測(cè)中應(yīng)用的研究進(jìn)展
理[5]。免疫親和柱凈化處理方法可選擇性地將真菌毒素從提取液中分離出來(lái)，提高了熒光分析的靈敏性，降低檢測(cè)限[2]。與其他提取方法比較，免疫親和柱的前處理凈化技術(shù)還有其他優(yōu)勢(shì)。主要表現(xiàn)：a.提取時(shí)避免使用有毒有機(jī)溶劑，減少對(duì)操作人員的損害；b.方便快捷，簡(jiǎn)化了前處理步驟；c.由于凈化處理徹底，減少了基質(zhì)中的雜質(zhì)干擾，數(shù)據(jù)更加可靠。本文對(duì)免疫親和柱的原理和制備方式進(jìn)行了介紹，并且針對(duì)幾種常見(jiàn)的真菌毒素，綜述了免疫親和柱凈化技術(shù)在這幾種真菌毒素檢測(cè)分析上的應(yīng)用。
食品工業(yè)科技 2013年24期2013-08-15
- 免疫親和柱同時(shí)凈化 HPLC 法測(cè)定植物油中黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮
［4］應(yīng)用免疫親和柱凈化-光化學(xué)柱后衍生-高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測(cè)器測(cè)定了植物油中的黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2，隋凱等［5］應(yīng)用免疫親和柱凈化-高效液相色譜法熒光法測(cè)定了玉米中的玉米赤霉烯酮，李軍等［6］應(yīng)用免疫親和柱同時(shí)凈化-高效液相色譜法測(cè)定了谷物中的黃曲霉毒素、赭曲霉毒素A 和玉米赤霉烯酮。免疫親和柱作為樣品前處理的方法能有效地將干擾物質(zhì)去除。采用免疫親和柱作為樣品前處理手段，減少了有機(jī)溶劑的使用和目標(biāo)分析物的損失，具有結(jié)合容量大、回收率高、
食品工業(yè)科技 2013年9期2013-08-07
- 免疫親和柱凈化-高效液相色譜法測(cè)定乳粉中游離葉酸含量
驗(yàn)擬以葉酸免疫親和柱凈化、己烷磺酸鈉為離子對(duì)試劑，無(wú)需柱后衍生，建立了反相高效液相色譜法測(cè)定乳粉中葉酸含量的方法。其中將免疫親和柱凈化用液相色譜分析用于乳粉樣品中葉酸測(cè)定是一個(gè)創(chuàng)新，目前文獻(xiàn)中還未見(jiàn)有類(lèi)似的報(bào)道。此方法可以滿(mǎn)足乳品企業(yè)出廠(chǎng)檢驗(yàn)與品控及質(zhì)監(jiān)部門(mén)監(jiān)督的需要。1 材料與方法1.1 材料與儀器甲醇 色譜純；pH7.4磷酸鹽緩沖液 分別稱(chēng)取1.24g KH2PO4（分析純）、7.27g K2HPO4（分析純）和8.76g NaCl（分析純）溶解于1L
食品工業(yè)科技 2013年6期2013-05-18
- 膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)飼料中嘔吐毒素
疫法[12]和親和柱凈化-高效液相色譜法[13]。但這些分析方法需要大型的儀器設(shè)備、操作過(guò)程復(fù)雜、時(shí)間長(zhǎng)，無(wú)法在現(xiàn)場(chǎng)和基礎(chǔ)中小型實(shí)驗(yàn)室使用。近年來(lái)膠體金免疫層析技術(shù)在真菌毒素快速檢測(cè)中得到應(yīng)用[14-15]，但主要以定性檢測(cè)為主[15-17]，存在顯色模糊，人為判斷有誤差，假陽(yáng)性假陰性比例高等問(wèn)題。本文建立并驗(yàn)證了膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)飼料中嘔吐毒素的分析方法。1 試驗(yàn)材料和方法1.1 試劑和材料除注明外,試劑均為分析純,試驗(yàn)用水均為超純水。iChe
飼料工業(yè) 2013年14期2013-02-20
- 蘇丹紅Ⅰ免疫親和柱的研制與鑒定
)蘇丹紅Ⅰ免疫親和柱的研制與鑒定朱立鑫1,2，裘雪梅1，陳興龍1,2，劉仁榮1,*，徐 玲1，徐富勇1,2(1.江西科技師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，江西 南昌 330013；2.南昌大學(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院，江西 南昌 330047)以羧基化的瓊脂糖凝膠4FF為載體，采用碳化二亞胺法偶聯(lián)抗蘇丹紅Ⅰ(SudanⅠ)單克隆抗體，制備蘇丹紅Ⅰ免疫親和柱(IAC)。將SudanⅠ樣品過(guò)免疫親和柱，乙腈洗脫后以高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為478nm，流
食品科學(xué) 2012年15期2012-10-27
- 花生及其制品中多種霉菌毒素殘留同時(shí)測(cè)定方法*
分析法(有免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術(shù)-HPLC法、酶聯(lián)免疫吸附法、微柱篩選法和一步式檢測(cè)金標(biāo)試紙法)等檢測(cè)手段[6]，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中也有相關(guān)測(cè)定方法規(guī)定，但對(duì)多種霉菌毒素的同時(shí)測(cè)定尚沒(méi)有相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)方法。國(guó)外報(bào)道Veronica Maria Teresa Lattanzio等[7]利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)玉米中多種霉菌毒素及其代謝產(chǎn)物同時(shí)檢測(cè)，但提取凈化手段繁瑣或效果不佳，基質(zhì)單一，不適合于開(kāi)展日常的檢測(cè)。筆者利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)
化學(xué)分析計(jì)量 2012年6期2012-08-21
- 飼料中伏馬毒素的檢測(cè)方法
檢測(cè)方法，免疫親和柱-熒光儀檢測(cè)法的原理為：將飼料樣品與提取液混合、均勻、過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)鍵合有伏馬毒素特殊抗體的分離柱。用淋洗液通過(guò)分離柱，將伏馬毒素從抗體上分離下來(lái)。最后，將淋洗液注入熒光計(jì)進(jìn)行測(cè)定。檢測(cè)范圍為0～10 mg/kg，檢測(cè)限為0.25 mg/kg，檢測(cè)時(shí)間約為15 min，回收率大于80%，變異系數(shù)小于15%。免疫親和柱-HPLC法的原理為：經(jīng)甲醇-水(4∶1)提取，提取液通過(guò)FumoniTest免疫親和柱凈化，凈化液經(jīng)柱前衍生、Sp
化學(xué)分析計(jì)量 2011年4期2011-04-12
- 免疫親和柱-高效液相色譜法檢測(cè)乳制品中氯霉素
0044）免疫親和柱-高效液相色譜法檢測(cè)乳制品中氯霉素李應(yīng)國(guó)1，3，趙旭博2，張雷3，李賢良3，郗存顯3，王國(guó)民1，3，王雄4，果旗4，李正國(guó)1（1.重慶大學(xué)生物工程學(xué)院，重慶 400044；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)，陜西楊凌 712100；3.重慶市進(jìn)出口食品安全工程技術(shù)研究中心，重慶 400020；4.北京中檢維康技術(shù)有限公司，北京 100044）建立免疫親和柱富集凈化、高效液相色譜-紫外法快速測(cè)定牛奶和奶粉中氯霉素殘留物。樣品用乙酸乙酯提取，經(jīng)免疫親和色
中國(guó)乳品工業(yè) 2011年4期2011-01-08
- 免疫親和柱——高效液相色譜法檢測(cè)乳制品中玉米赤霉醇及其類(lèi)似物
0044）免疫親和柱 ——高效液相色譜法檢測(cè)乳制品中玉米赤霉醇及其類(lèi)似物張清杰1，謝潔1，果旗2，江帆2，王彥斐2，王雄2，聶長(zhǎng)明1（1.南華大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院，湖南 衡陽(yáng) 421001；2.北京中檢維康技術(shù)有限公司，北京 100044）采用高效液相色譜法檢測(cè)牛奶和奶粉中的6種玉米赤霉醇及其類(lèi)似物，該方法準(zhǔn)確、可靠、靈敏度高。樣品用乙腈提取，經(jīng)免疫親和柱凈化后，用高效液相色譜-紫外檢測(cè)器檢測(cè)。結(jié)果表明，牛奶和奶粉中添加6種玉米赤霉醇及其類(lèi)似物回收率均為80
中國(guó)乳品工業(yè) 2011年12期2011-01-04
- 高效液相色譜法測(cè)定谷物及其制品中赭曲霉毒素A
毒素A,用免疫親和柱凈化高效液相色譜法進(jìn)行了驗(yàn)證。關(guān)鍵詞赭曲霉毒素A;高效液相色譜法;谷物及其制品;OchraTest免疫親和柱中圖分類(lèi)號(hào)O657.7+2;TS207.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739(2009)14-0322-01赭曲霉毒素A是曲霉屬和青霉屬一些菌種的有毒產(chǎn)物,動(dòng)物毒性試驗(yàn)表明,赭曲霉毒素A具有免疫抑制毒性、神經(jīng)毒性、致畸性及致癌性。1993年,國(guó)際癌癥研究中心已將赭曲霉毒素A列為可能的人類(lèi)致癌物。被赭曲霉毒素A污染的谷物及其制
現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技 2009年14期2009-06-25