劉艷飛， 高蕊， 徐鳳芹， 劉玥

血管衰老相關(guān)細(xì)胞模型的研究進(jìn)展*

劉艷飛1， 高蕊2， 徐鳳芹1， 劉玥3△

（1中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)二科，北京 100091；2中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院臨床藥理研究所，北京 100091；3中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院國家中醫(yī)心血管病臨床醫(yī)學(xué)研究中心，北京 100091）

血管衰老；細(xì)胞模型；衰老相關(guān)分泌表型

近年來，人類壽命顯著增加，人口老齡化現(xiàn)象越來越嚴(yán)重，以糖尿病、心血管疾病、癡呆和阿爾茨海默病為代表的增齡性疾病的發(fā)病率和死亡率逐年上升，人口老齡化嚴(yán)重影響了人類的身體健康和生活質(zhì)量。衰老是生物體的必然結(jié)局，深入研究衰老及衰老相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展的機(jī)制，延緩衰老、減少衰老相關(guān)疾病的發(fā)生對(duì)人類健康事業(yè)具有重要意義。血管衰老是機(jī)體衰老的始動(dòng)環(huán)節(jié)，而血管細(xì)胞衰老是血管衰老的病理基礎(chǔ)［1-2］，血管平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞均參與了血管衰老的過程［3］。構(gòu)建血管衰老模型，模擬人類衰老表型是完善衰老機(jī)制和藥物研發(fā)等研究的重要工具。本文就近年來血管衰老相關(guān)細(xì)胞模型的建立方法進(jìn)行綜述，為血管衰老相關(guān)研究提供參考。

1 細(xì)胞衰老的特征

細(xì)胞衰老是細(xì)胞在有限的分裂次數(shù)后，喪失合成DNA及增殖能力，細(xì)胞進(jìn)入不可逆的生長(zhǎng)停滯過程中，主要分為復(fù)制衰老和應(yīng)激誘導(dǎo)的早熟衰老兩種類型。細(xì)胞在有限次數(shù)的分裂后，逐漸喪失合成DNA及增殖能力，但其基本代謝過程仍能維持，這種現(xiàn)象稱為復(fù)制衰老，又稱為生理性衰老，是正常細(xì)胞的必然結(jié)局［4］。細(xì)胞受到炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、DNA損傷和線粒體功能障礙等各種外界因素刺激造成永久的、不可逆的增殖停滯，稱為應(yīng)激誘導(dǎo)的早熟衰老。細(xì)胞衰老的基本特征為細(xì)胞周期停滯、細(xì)胞間隙增寬、細(xì)胞體積增大、形狀扁平、凋亡抵抗等。細(xì)胞衰老時(shí)，衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶（senescence-associated β-galactosidase， SA-β-Gal）活性升高，衰老相關(guān)蛋白p53、p21、p16等細(xì)胞周期抑制蛋白表達(dá)增加，它們可視為細(xì)胞衰老的主要標(biāo)志物［5］。與凋亡細(xì)胞不同的是，衰老細(xì)胞仍有代謝活性，可分泌炎癥因子、生長(zhǎng)因子、趨化因子、蛋白酶等衰老相關(guān)分泌表型（senescence-related secretory phenotype， SASP），這些SASP介質(zhì)可誘導(dǎo)該細(xì)胞本身和周圍細(xì)胞進(jìn)一步衰老，從而放大和擴(kuò)散細(xì)胞衰老［6］。短期內(nèi)衰老細(xì)胞的產(chǎn)生有助于機(jī)體胚胎發(fā)育、修復(fù)損傷和抑制腫瘤等，而衰老細(xì)胞長(zhǎng)期積聚會(huì)導(dǎo)致機(jī)體衰老和衰老相關(guān)疾病的發(fā)生［7］。

2 血管衰老相關(guān)細(xì)胞模型

血管細(xì)胞衰老模型多種多樣，其建立方法主要為采用不同的誘導(dǎo)劑，如葡萄糖、棕櫚酸（palmitic acid， PA）、葡萄糖聯(lián)合PA、D-半乳糖（D-galactose， D-Gal）、過氧化氫（hydrogen peroxide， H2O2）、血管緊張素II（angiotensin II， Ang II）、氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein， Ox-LDL）等進(jìn)行誘導(dǎo)，可根據(jù)研究?jī)?nèi)容的不同選擇不同的研究模型，使研究更具科學(xué)性。

2.1葡萄糖誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老葡萄糖是人體必需的物質(zhì)，正常生理狀態(tài)下參與機(jī)體的各種生理過程，但過量的葡萄糖可加重細(xì)胞功能障礙、引起細(xì)胞衰老。Khemais-Benkhiat等［8］建立血管細(xì)胞衰老模型時(shí)應(yīng)用葡萄糖誘導(dǎo)的方法，高糖增加了內(nèi)皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激水平，誘導(dǎo)組織因子和局部血管緊張素的表達(dá)，局部血管緊張素通過氧化還原作用上調(diào)鈉依賴性葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（sodium-dependent glucose transporter 1， SGLT1）和SGLT2的表達(dá)，增加糖毒性，進(jìn)而加速內(nèi)皮細(xì)胞的衰老和功能障礙。將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells， HUVECs）暴露于高濃度（25 mmol/L）和低濃度（1.5mmol/L）葡萄糖時(shí)會(huì)加速衰老標(biāo)志物的出現(xiàn)，降低內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase， eNOS）的活性，當(dāng)HUVECs交替暴露于低濃度和高濃度葡萄糖時(shí)，衰老標(biāo)記物和eNOS活性的降低會(huì)更快地出現(xiàn)［9］，該發(fā)現(xiàn)將有助于闡明與葡萄糖耐受不良相關(guān)的內(nèi)皮功能障礙以完善糖尿病患者的治療方案。HUVECs在高糖條件下端粒長(zhǎng)度縮短［10］，細(xì)胞在基底膜上形成小管網(wǎng)絡(luò)的能力受損［11］，從而誘導(dǎo)細(xì)胞衰老的發(fā)生。高糖處理的HUVECs后細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species， ROS）水平及炎癥相關(guān)因子腫瘤壞死因子α和白細(xì)胞介素6的表達(dá)增加，高糖可通過增加細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和炎癥水平誘導(dǎo)細(xì)胞衰老［12］。除此之外，高糖具有神經(jīng)系統(tǒng)毒性作用，可誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞衰老，加速與增齡相關(guān)的神經(jīng)元損傷。研究者選擇高濃度葡萄糖作為高糖應(yīng)激條件誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞后，神經(jīng)細(xì)胞中ROS的產(chǎn)生增加，細(xì)胞活力降低，SA-β-Gal染色的衰老細(xì)胞增多，高糖培養(yǎng)液刺激下成功制備神經(jīng)細(xì)胞衰老模型［13］。血管內(nèi)皮功能障礙是糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生的始動(dòng)因素，是糖尿病血管病變的早期標(biāo)志。血糖代謝異常與細(xì)胞內(nèi)皮功能障礙有關(guān)，在高糖環(huán)境中，血管內(nèi)皮功能易發(fā)生紊亂，細(xì)胞活力降低，細(xì)胞增殖被抑制，內(nèi)皮細(xì)胞逐漸衰老，高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞衰老和功能障礙亦是心血管風(fēng)險(xiǎn)增加的原因之一，高糖可通過誘導(dǎo)組織因子和局部血管緊張素的表達(dá)、加速端粒長(zhǎng)度縮短、增加細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激、促進(jìn)炎癥因子分泌等途徑促進(jìn)血管細(xì)胞衰老。因此，基于糖代謝紊亂與血管內(nèi)皮功能障礙之間的關(guān)系，高糖誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老成為研究血管細(xì)胞衰老及相關(guān)疾病發(fā)生機(jī)制的重要模型。

2.2PA誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老PA是人類血漿中常見的飽和脂肪酸，過量的PA可促進(jìn)內(nèi)皮功能障礙，誘導(dǎo)細(xì)胞損傷，加速細(xì)胞衰老［14］。PA處理胰島內(nèi)皮細(xì)胞后細(xì)胞的SA-β-Gal染色的衰老細(xì)胞增多，衰老相關(guān)基因和的表達(dá)增加，細(xì)胞核體積增大、亮度增加，胰島內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)衰老狀態(tài)與PA抑制Akt活化，Akt下游信號(hào)FoxO4的磷酸化降低有關(guān)［15］。棕櫚酸鈉孵育HUVECs后HUVECs表現(xiàn)出衰老相關(guān)特點(diǎn)，p62的表達(dá)水平增高，自噬體和溶酶體的融合降低可能是HUVECs衰老的原因［16］。PA誘導(dǎo)的高脂狀態(tài)可損傷血管內(nèi)皮功能，加速細(xì)胞衰老，衰老的血管內(nèi)皮細(xì)胞較正常細(xì)胞在形態(tài)和功能上更易于形成動(dòng)脈粥樣硬化，促進(jìn)血管衰老的發(fā)生。PA誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老適用于研究體內(nèi)高脂狀態(tài)與血管衰老及血管衰老相關(guān)疾病之間的關(guān)系。

2.3葡萄糖聯(lián)合PA誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老臨床上，高糖、高脂環(huán)境加速血管內(nèi)皮衰老和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。D-葡萄糖聯(lián)合PA培養(yǎng)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞后細(xì)胞活力降低，SA-β-Gal染色細(xì)胞數(shù)量增加，p16和p21表達(dá)增加，線粒體ROS的產(chǎn)生增加，細(xì)胞增殖能力和線粒體膜電位水平降低，提示高糖聯(lián)合高脂可降低細(xì)胞線粒體膜電位，增加ROS生成引起的DNA損傷累積，加速血管內(nèi)皮細(xì)胞的衰老進(jìn)程［17-18］。同時(shí)，高糖和高脂可加重細(xì)胞內(nèi)的炎癥狀態(tài)，促進(jìn)細(xì)胞衰老［19］。高糖和高脂刺激可造成血管內(nèi)皮完整性喪失和功能紊亂，加速血管衰老，促進(jìn)血管并發(fā)癥的形成。體外高葡萄糖和PA聯(lián)合模擬人類體內(nèi)糖脂代謝異常誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老，探索高糖高脂與血管衰老之間的關(guān)系及可能機(jī)制，有助于尋找延緩血管衰老的方法。

2.4D-Gal誘導(dǎo)細(xì)胞衰老正常狀態(tài)下，D-Gal經(jīng)肝臟代謝成葡萄糖；當(dāng)D-Gal濃度較高時(shí)，細(xì)胞活力降低，衰老細(xì)胞增加。D-Gal廣泛應(yīng)用于構(gòu)建實(shí)驗(yàn)性細(xì)胞衰老模型，是經(jīng)典的衰老細(xì)胞模型構(gòu)建方法。用含D-Gal的培養(yǎng)液孵育血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells， VSMCs）后，SA-β-Gal陽性染色衰老細(xì)胞增多，衰老相關(guān)蛋白p16、p21和p53表達(dá)增加，細(xì)胞停滯于G1期不能進(jìn)入S期，提示D-Gal可使細(xì)胞周期停滯并引起VSMCs衰老［20］。D-Gal處理H9c2細(xì)胞后SA-β-Gal陽性染色衰老細(xì)胞增多，細(xì)胞中CD38表達(dá)和ROS含量顯著增加，提示D-Gal可增加心肌細(xì)胞的氧化應(yīng)激并促進(jìn)細(xì)胞衰老［21］。

2.5H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞衰老氧化損傷是細(xì)胞衰老模型常用的方法，H2O2作為小分子氧化劑可通過生物膜系統(tǒng)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激引起細(xì)胞的衰老，因而可用于氧化損傷致血管細(xì)胞衰老模型的建立。H2O2作用于HUVECs后細(xì)胞體積增大、邊界不清，SA-β-Gal染色細(xì)胞增多；H2O2引起HUVECs衰老的機(jī)制與下調(diào)自噬活性［22］、自噬相關(guān)蛋白beclin-1和LC3-II表達(dá)減少［23］、SIRT1蛋白表達(dá)減少［24］等相關(guān)。H2O2預(yù)處理HUVECs后炎癥因子分泌增多，氧化應(yīng)激增加，即H2O2通過誘導(dǎo)慢性炎癥和氧化應(yīng)激促進(jìn)細(xì)胞衰老［25-26］。

2.6Ang II誘導(dǎo)細(xì)胞衰老Ang II作為刺激因素可加速細(xì)胞衰老［27］。含Ang II的完全培養(yǎng)液作用于HUVECs后，SA-β-Gal染色陽性細(xì)胞明顯增多，ROS生成增多，p53和發(fā)動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1（dynamin-related protein 1， Drp1）表達(dá)增加，其機(jī)制是Ang II增加乙?；揎?，從而誘導(dǎo)Drp1表達(dá)，最終導(dǎo)致HUVECs衰老［28］。Ang II可誘導(dǎo)血管細(xì)胞線粒體裂變和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，促進(jìn)炎性表型分泌，抑制p53的泛素化和降解，加速血管細(xì)胞衰老［29-30］。有研究報(bào)道，Ang II可使α7煙堿型乙酰膽堿受體（α7 nicotinic acetylcholine receptor， α7 nAChR）活性降低，激活α7 nAChR可緩解Ang II誘導(dǎo)的VSMCs衰老，α7 nAChR可能是治療Ang II相關(guān)血管衰老疾病的潛在靶點(diǎn)［31］。Ang II在血管衰老中的作用得到越來越多的重視，衰老機(jī)體組織中Ang II分泌增多，使用Ang II受體拮抗劑或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑后可逆轉(zhuǎn)血管增齡的改變［32］。Ang II與血管衰老關(guān)系密切，Ang II是衰老相關(guān)性血管疾?。ㄈ绺哐獕?、冠心病等）發(fā)生發(fā)展的重要病理因素，Ang II可通過誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞衰老引起內(nèi)皮功能失調(diào)。深入研究Ang II在血管衰老中的作用，有望為延緩Ang II相關(guān)血管衰老疾病提供策略。

2.7Ox-LDL誘導(dǎo)細(xì)胞衰老生理狀態(tài)下機(jī)體含有豐富的低密度脂蛋白（low-density lipoprotein， LDL），LDL在多重因素作用下易被氧化成Ox-LDL，過多的Ox-LDL可引起內(nèi)皮功能障礙，從而誘導(dǎo)細(xì)胞衰老［33］。Ox-LDL可降低人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞活力，衰老相關(guān)蛋白p53和p16的表達(dá)顯著增加，在此過程中，細(xì)胞自噬及清除能力均顯著降低，Ox-LDL可通過抑制自噬誘導(dǎo)細(xì)胞衰老［34］。另有研究報(bào)道，Ox-LDL使ROS生成增加，提示Ox-LDL可通過氧化應(yīng)激誘導(dǎo)血管細(xì)胞衰老［35］。血管衰老與動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis， AS）密切相關(guān)。AS是以血管壁脂質(zhì)沉積為特征的慢性血管疾病，從循環(huán)攝取的LDL在動(dòng)脈壁轉(zhuǎn)變?yōu)镺x-LDL；Ox-LDL可損傷血管內(nèi)皮功能而誘導(dǎo)細(xì)胞衰老，促進(jìn)AS，加速血管衰老；Ox-LDL被認(rèn)為是AS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與易損斑塊密切相關(guān)［34］。Ox-LDL誘導(dǎo)可建立血管細(xì)胞衰老模型，深入研究Ox-LDL在血管細(xì)胞衰老中的作用有助于臨床調(diào)控AS、延緩血管衰老。

3 總結(jié)

衰老是一個(gè)復(fù)雜的生物過程，除了外在的衰老表現(xiàn)，其主要特征是組織和器官的功能下降、結(jié)構(gòu)退化、適應(yīng)性和順應(yīng)性減低，增加多種慢性疾病的發(fā)病率和死亡［36］。探索衰老的發(fā)生機(jī)制、延緩衰老相關(guān)疾病的發(fā)生具有重要意義。構(gòu)建血管衰老相關(guān)細(xì)胞模型、模擬人類衰老表型是完善衰老機(jī)制和藥物研發(fā)等研究的重要工具之一。根據(jù)血管衰老及血管衰老相關(guān)疾病形成的病因進(jìn)行干預(yù)，進(jìn)而構(gòu)建符合研究需要的病理模型，可以用于研發(fā)新藥或驗(yàn)證科學(xué)假說。

復(fù)制性衰老更貼近衰老的真實(shí)狀態(tài)，但其實(shí)驗(yàn)周期較長(zhǎng)、耗費(fèi)較多的人力物力財(cái)力，而誘導(dǎo)型衰老造模時(shí)間較短，模型容易成功，但是其亦存在一定的缺點(diǎn)。模型建立過程中，不同誘導(dǎo)劑的使用對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生一定的損傷，而誘導(dǎo)劑造成的損傷在細(xì)胞的自然衰老過程可能較少出現(xiàn)，因此誘導(dǎo)劑建立的血管細(xì)胞衰老模型與自然衰老模型可能存在一定的差異［37］。通過對(duì)不同物質(zhì)誘導(dǎo)血管衰老相關(guān)細(xì)胞模型的方法進(jìn)行比較可知，誘導(dǎo)劑的使用濃度存在較大差異，這可能與實(shí)驗(yàn)選用的細(xì)胞種類不同、造模時(shí)間長(zhǎng)短不同有關(guān)。成功構(gòu)建血管衰老細(xì)胞模型是研究開始的重要前提，而血管衰老細(xì)胞模型多種多樣，各具特色，應(yīng)根據(jù)擬開展的具體研究?jī)?nèi)容、研究目的的不同選擇更為合適的模型，以期與臨床病理表現(xiàn)相符，使研究更具科學(xué)性。不同方法誘導(dǎo)建立不同的血管衰老細(xì)胞模型有其不同的適用研究?jī)?nèi)容，如氧化損傷是細(xì)胞衰老模型常用的方法，H2O2可用于氧化損傷致血管細(xì)胞衰老模型的建立［38］；高糖、高脂的使用可模擬糖脂代謝紊亂對(duì)血管細(xì)胞衰老的影響；Ang II是衰老相關(guān)性血管疾?。ㄈ绺哐獕?、冠心病等）發(fā)生發(fā)展的重要病理因素，其與血管細(xì)胞的異常增殖和遷移、氧化應(yīng)激、血管炎癥等有關(guān)［28］。

血管衰老細(xì)胞模型建立成功與否需要有相關(guān)指標(biāo)的驗(yàn)證，但目前對(duì)于不同方法誘導(dǎo)模型評(píng)價(jià)時(shí)選用的衰老相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，不同的研究選用的指標(biāo)不盡相同，多數(shù)文獻(xiàn)選用SA-β-Gal染色、細(xì)胞形態(tài)改變、衰老相關(guān)蛋白累積、細(xì)胞周期改變等指標(biāo)進(jìn)行細(xì)胞衰老模型的驗(yàn)證。模型建立過程中誘導(dǎo)劑的使用濃度及造模時(shí)間存在較大差異。因此，后續(xù)開展血管衰老和血管衰老疾病相關(guān)體外實(shí)驗(yàn)研究時(shí)應(yīng)注重血管衰老細(xì)胞模型的建立及評(píng)價(jià)，為血管衰老疾病的防治提供更多科學(xué)依據(jù)。

［1］ Ding YN， Tang X， Chen HZ， et al. Epigenetic regulation of vascular aging and age-related vascular diseases［J］. Adv Exp Med Biol， 2018， 1086：55-75.

［2］ Childs BG， Gluscevic M， Baker DJ， et al. Senescent cells： an emerging target for diseases of ageing［J］. Nat Rev Drug Discov， 2017， 16（10）：718-735.

［3］ Tian XL， Li Y. Endothelial cell senescence and age-related vascular diseases［J］. J Genet Genomics， 2014， 41（9）：485-495.

［4］ Jia G， Aroor AR， Jia C， et al. Endothelial cell senescence in aging-related vascular dysfunction［J］. Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis， 2019， 1865（7）：1802-1809.

［5］ Feng CH， Zhang HY， Yang M， et al. Oxygen-sensing nox4 generates genotoxic ROS to induce premature senescence of nucleus pulposus cells through MAPK and NF-κB pathways［J］. Oxid Med Cell Longev， 2017， 2017：7426458.

［6］ Wei W， Ji S. Cellular senescence： molecular mechanisms and pathogenicity［J］. J Cell Physiol， 2018， 233（12）：9121-9135.

［7］ Baar MP， Brandt RMC， Putavet DA， et al. Targeted apoptosis of senescent cells restores tissue homeostasis in response to chemotoxicity and aging［J］. Cell， 2017， 169（1）：132-147.

［8］ Khemais-Benkhiat S， Belcastro E， Idris-Khodja N， et al. Angiotensin II-induced redox-sensitive SGLT1 andexpression promotes high glucose-induced endothelial cell senescence［J］. J Cell Mol Med， 2020， 24（3）：2109-2122.

［9］ Rogers SC， Zhang X， Azhar G， et al. Exposure to high or low glucose levels accelerates the appearance of markers of endothelial cell senescence and induces dysregulation of nitric oxide synthase ［J］. J Gerontol A Biol Sci Med Sci， 2013， 68（12）：1469-1481.

［10］ Maeda M， Tsuboi T， Hayashi T. An inhibitor of activated blood coagulation factor X shows anti-endothelial senescence and anti-atherosclerotic effects［J］. J Vasc Res， 2019， 56（4）：181-190.

［11］ Chen TS， Ma C， Fan G， et al. SIRT3 protects endothelial cells from high glucose-induced senescence and dysfunction via the p53 pathway［J］. Life Sci， 2021， 264：118724.

［12］ 劉思妤， 盧新華， 譚斌， 等. 瓜蔞皮提取物抑制高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老的機(jī)制研究［J］. 中成藥， 2015， 37（9）：2057-2060.

Liu SY， Lu XH， Tan B， et al. Mechanism of extract ofpeel inhibiting human umbilical vein endothelial cell senescence induced by high glucose［J］. Chin Tradit Patent Med， 2015， 37（9）：2057-2060.

［13］ Song J， Lee B， Kang S， et al. Agmatine ameliorates high glucose-induced neuronal cell senescence by regulating the p21 and p53 signaling ［J］. Exp Neurobiol， 2016， 25（1）：24-32.

［14］ Carta G， Murru E， Banni S， et al. Palmitic acid： physiological role， metabolism and nutritional implications［J］. Front Physiol， 2017， 8：902.

［15］ 熊海容， 段麗， 李聰， 等. 原花青素B2通過Akt/FoxO4通路拮抗內(nèi)皮細(xì)胞衰老的實(shí)驗(yàn)研究［J］. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)， 2018， 30（11）：1884-1889， 1903.

Xiong HR， Duan L， Li C， et al. Experimental study of proanthocyanidin B2 antagonizing endothelial cell senescence through Akt/FoxO4 pathway［J］. Nat Prod Res Dev， 2018， 30（11）：1884-1889， 1903.

［16］ Lee J， Yoo JH， Kim HS， et al. C1q/TNF-related protein-9 attenuates palmitic acid-induced endothelial cell senescence via increasing autophagy［J］. Mol Cell Endocrinol， 2021， 521：111114.

［17］ Wang X， Zhang JQ， Xiu CK， et al. Ginseng-sanqi-chuanxiong （GSC） extracts ameliorate diabetes-dnduced endothelial cell senescence through regulating mitophagy via the AMPK pathway［J］. Oxid Med Cell Longev， 2020， 2020：7151946.

［18］ 王雪， 修成奎， 楊靜， 等. 人參-三七-川芎提取物對(duì)高糖高脂誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老的影響［J］. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志， 2019， 25（1）：124-129.

Wang X， Xiu CK， Yang J， et al. Interventional effect and mechanism of extract of ginseng radix et rhizoma，notoginseng radix et rhizoma and chuanxiong rhizoma on vascular endothelial cellular senescence induced by high glucose and high fat［J］. Chin J Exp Tradit Med Formulae， 2019， 25（1）：124-129.

［19］ Jang YC， Kwon I， Cosio-Lima L， et al. Endurance exercise prevents metabolic distress-induced senescence in the hippocampus［J］. Med Sci Sports Exerc， 2019， 51（10）：2012-2024.

［20］ 鄢夢(mèng)竹， 李書國. 人參皂甙Rg3對(duì)血管平滑肌細(xì)胞衰老的影響及機(jī)制［J］. 中華老年心腦血管病雜志， 2015， 17（10）：1079-1082.

Yan MZ， Li SG. Effect of ginsenoside Rg3 on senescence of vascular smooth muscle cells and its mechanism［J］. Chin J Geriatr Heart Brain Veaael Dis， 2015， 17（10）：1079-1082.

［21］ Wang LF， Cao Q， Wen K， et al. CD38 deficiency alleviates D-galactose-induced myocardial cell senescence through NAD/Sirt1 signaling pathway［J］. Front physiol， 2019， 10：1125.

［22］ 林捷琪， 阮云軍， 楊儒于， 等. 不同濃度雌二醇對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老模型的影響［J］. 中國臨床解剖學(xué)雜志， 2019， 37（5）：528-533， 541.

Lin JQ， Ruan YJ， Yang RY， et al. Investigating the effects of different concentrations of estradiol on senescence model of human umbilicalvein endothelial cells induced by hydrogen peroxide［J］. Chin J Clin Anat， 2019， 37（5）：528-533， 541.

［23］ 宋仕聰， 阮云軍， 吳賽珠， 等. 雷帕霉素對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老的干預(yù)研究［J］. 中國病理生理雜志， 2019， 35（7）：1226-1231.

Song SC， Ruan YJ， Wu SZ， et al. Study on the intervention of rapamycin on the senescence of vascular endothelial cells induced by hydrogen peroxide［J］. Chin J Pathophysiol， 2019， 35（7）：1226-1231.

［24］ 肖新懷， 徐米清， 方燕齡. 丹參酮ⅡA通過激活SIRT1/eNOS通路減輕過氧化氫誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老［J］. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志， 2019， 35（9）：806-811.

Xiao XH， Xu MQ， Fang YL. TanshinoneⅡA attenuates hydrogen peroxi-induced senescence of human umbilical vein endothelial cells by activating SIRT1/eNOS pathway［J］. Chin J Cell Mol Immunol， 2019， 35（9）：806-811.

［25］ Kim SG， Sung JY， Kim JR， et al. Quercetin-induced apoptosis ameliorates vascular smooth muscle cell senescence through AMP-activated protein kinase signaling pathway［J］. Korean J Physiol Pharmacol， 2020， 24（1）：69-79.

［26］ 曹瓊瓊. 白藜蘆醇在血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老-炎癥中的機(jī)制研究［D］. 合肥： 安徽醫(yī)科大學(xué)， 2021.

Cao QQ. Study on the mechanism of resveratrol in senescence and inflammation of vascular endothelial cells［D］. Hefei： Anhui Medical University， 2021.

［27］ Herbert KE， Mistry Y， Hastings R， et al. Angiotensin II-mediated oxidative DNA damage accelerates cellular senescence in cultured human vascular smooth muscle cells via telomere-dependent and independent pathways［J］. Circ Res， 2008， 102（2）：201-208.

［28］ 郭春玲， 逯朝陽， 楊濱， 等. 血管緊張素（1-7）通過p53/Drp1軸對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老的影響［J］. 中國動(dòng)脈硬化雜志， 2020， 28（11）：960-965.

Guo CL， Lu CY， Yang B， et al. Effect of angiotensin （1-7） on angiotensin II-induced vascular endothelial cell senescence via p53/Drp1 axis［J］. Chin J Arterioscler， 2020， 28（11）：960-965.

［29］ Miyao M， Cicalese S， Kawai T， et al. Involvement of senescence and mitochondrial fission in endothelial cell pro-inflammatory phenotype induced by angiotensin II［J］. Int J Mol Sci， 2020， 21（9）：3112.

［30］ Miao SB， Xie XL， Yin YJ， et al. Accumulation of smooth muscle 22α protein accelerates senescence of vascular smooth muscle cells via stabilization of p53and［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2017， 37（10）：1849-1859.

［31］ Li D， Huang F， Ni M， et al. α7 nicotinic acetylcholine receptor relieves angiotensin II induced senescence in vascular smooth muscle cells by raising nicotinamide adenine dinucleotide-dependent SIRT1 activity［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2016， 36（8）：1566-1576.

［32］ Abbas M， Jesel L， Auger C， et al. Endothelial microparticles from acute coronary syndrome patients induce premature coronary artery endothelial cell aging and thrombogenicity： role of the Ang II/AT1 receptor/NADPH oxidase-mediated activation of MAPKs and PI3-kinase pathways［J］. Circulation， 2017， 135（3）：280-296.

［33］ Patel RV， Mistry BM， Shined S， et al. Therapeutic potential of quercetin as a cardiovascular agent［J］. Eur J Med Chem， 2018， 155：889-904.

［34］ 毛琦， 鄧夢(mèng)楊， 李祿豐，等. Klotho激活自噬對(duì)氧化低密度脂蛋白介導(dǎo)的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老的影響［J］. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志， 2020， 45（6）：587-595.

Mao Q， Deng MY， Li LF， et al. Effect of Klotho on oxidized low-density lipoprotein-induced endothelial cell senescence via activation of autophagy［J］. Med J Chin PLA， 2020， 45（6）：587-595.

［35］ Jiang YH， Jiang LY， Wang YC， et al. Quercetin attenuates atherosclerosis via modulating oxidized LDL-induced endothelial cellular senescence［J］. Front Pharmacol， 2020， 11：512.

［36］ Fulop T， Larbi A. Biology of aging： paving the way for healthy aging［J］. Exp Gerontol， 2018， 107：1-3.

［37］ Salmon EE， Breithaupt JJ， Truskey GA. Application of oxidative stress to a tissue engineered vascular aging model induces endothelial cell senescence and activation［J］. Cells， 2020， 9（5）：1292.

［38］ Martin J， López A， Martínez J， et al. Phase II study of gemcitabine plus sirolimus in previously treated patients with advanced soft-tissue sarcoma： a spanish group for research on sarcomas （GEIS） study［J］. Target Oncol， 2018， 13（1）：81-87.

Research advances on vascular aging-related cellular models

LIU Yan-fei1， GAO Rui2， XU Feng-qin1， LIU Yue3△

（1，，100091，；2，，100091，；3，，100091，）

Vascular aging is the initial stage of aging. The establishment of vascular aging model is critical to the investigation and drug selection of aging. Different inducers such as glucose， palmitic acid （PA）， glucose combined with PA， D-galactose， hydrogen peroxide， angiotensin II， oxidized low-density lipoprotein have been reported to contribute to vascular aging. Here we review different vascular aging-related cellular models used in recent years.

Vascular aging； Celluar model； Senescence-related secretory phenotype

R363； R329.2+5

A

10.3969/j.issn.1000-4718.2022.03.024

1000-4718（2022）03-0572-05

2021-10-09

2022-01-14

［基金項(xiàng)目］國家自然科學(xué)基金優(yōu)秀青年基金資助項(xiàng)目（No. 82022076）；中國中醫(yī)科學(xué)院優(yōu)秀青年科技人才培養(yǎng)專項(xiàng)（No. ZZ15-YQ-017）

Tel： 010-62835303； E-mail： liuyueheart@hotmail.com

（責(zé)任編輯：林白霜，羅森）