楊 柳，程繽雁，付 博，姜 華，李洪玉，張 云

原子高科股份有限公司，北京 102413

放射性藥品(radiopharmaceuticals)是指含有一種或幾種放射性核素供醫(yī)學(xué)診斷和治療的藥品[1]。放射化學(xué)純度(radiochemistry purity，簡(jiǎn)稱放化純度)是指某一特定化學(xué)形式的放射性核素的放射性量占該核素總放射性量的比例(Y)。放化純度作為放射性藥品的關(guān)鍵質(zhì)量控制項(xiàng)目，在工藝研究階段的配方優(yōu)化和注冊(cè)上市后的質(zhì)量控制中均起著非常重要的作用。

治療用碘[131I]化鈉膠囊是可用于甲狀腺疾病治療的膠囊劑型放射性藥品，其放化純度測(cè)定方法主要有紙色譜(paper chromatography, PC)法和放射性-高效液相色譜(radio-high performance liquid chromatography, Radio-HPLC)法。PC法是以紙為載體，以紙上所含水分或其他物質(zhì)為固定相，用適宜的展開(kāi)劑對(duì)放射性樣品溶液進(jìn)行展開(kāi)的分配色譜法，用合適的放射性檢測(cè)器測(cè)量展開(kāi)后的色層紙以確定各組分的放射性分布[2]?！睹绹?guó)藥典》40版(USP40版)收錄的碘[131I]化鈉膠囊放化純度測(cè)定采用了PC法[3]，明確以尺寸為25 mm×300 mm的色層紙作為固定相、75%(體積比)甲醇作為流動(dòng)相的展開(kāi)條件對(duì)放射性主峰與雜質(zhì)峰進(jìn)行分離，但色層紙展開(kāi)長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)影響了檢測(cè)效率。Radio-HPLC法是在高效液相色譜系統(tǒng)中檢測(cè)器模塊處，將放射性檢測(cè)器串聯(lián)于常規(guī)檢測(cè)器(如紫外分光光度計(jì)、二極管陣列檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器等)之后，色譜系統(tǒng)前端色譜柱與流動(dòng)相相互作用實(shí)現(xiàn)各種組分的分離，并流經(jīng)放射性檢測(cè)器進(jìn)行放射性活度的測(cè)定以確定各組分的放射性分布[4-5]。Radio-HPLC法中常規(guī)檢測(cè)器可以實(shí)現(xiàn)“冷化合物”色譜峰的檢測(cè)并與各放射性化學(xué)成分進(jìn)行比對(duì)從而達(dá)到鑒別的目的?！稓W洲藥典》9.0版(EP9.0版)中治療用碘[131I]化鈉膠囊的放化純度測(cè)定便采用了Radio-HPLC法[6]，一方面，該方法具有靈敏度好、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)，有利于治療用碘[131I]化鈉膠囊放化純度分析過(guò)程中放射化學(xué)雜質(zhì)的準(zhǔn)確測(cè)定；另一方面，該方法將紫外分光光度計(jì)與放射性檢測(cè)器有機(jī)結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)了治療用碘[131I]化鈉膠囊放化純度分析過(guò)程中放射化學(xué)雜質(zhì)的定性鑒別。

2021年4月，原子高科股份有限公司研制的治療用碘[131I]化鈉膠囊獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)上市。該膠囊制劑的內(nèi)容物包含一定放射性活度的碘[131I]、抗氧劑A和填充劑B，抗氧劑和填充劑的種類與EP9.0版收錄的治療用碘[131I]化鈉膠囊不同；另外，與口服溶液劑型和注射劑型相比，膠囊劑型的放射性藥品放化純度方法學(xué)研究需考慮的影響因素較多。因此，本工作擬從膠囊的前處理方法、輔料對(duì)分析方法的影響以及放射化學(xué)雜質(zhì)的研究等方面入手，建立測(cè)定治療用碘[131I]化鈉膠囊放化純度的Radio-HPLC分析方法，為建立合理的放射性藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供技術(shù)參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑和儀器

氯化鈉(分析純)、碳酸氫鈉(分析純)、甲醇(分析純)、磷酸(優(yōu)級(jí)純)、乙腈(色譜純)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；正辛胺(分析純)、碘化鉀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，阿拉丁試劑有限公司；滅菌注射用水，石家莊四藥有限公司；碘[131I]化鈉口服溶液，原子高科股份有限公司；十八烷基硅烷鍵合硅膠填充的色譜柱(4.6 mm×250 mm×5 μm)，美國(guó)Agilent公司；0.45 μm濾膜，北京化大膜材料廠；砂芯抽濾裝置，頗爾公司。

1260高效液相色譜儀(包括四元泵、紫外檢測(cè)器、柱溫箱和自動(dòng)進(jìn)樣器)，美國(guó)Agilent公司；LB514放射性流量檢測(cè)儀，德國(guó)伯托公司；AB135十萬(wàn)分之一電子分析天平，梅特勒-托利多公司；超聲波清洗儀，上海魯碩實(shí)業(yè)有限公司；YP502N千分之一電子天平，上海菁海儀器有限公司；CRC-55tR活度計(jì)，美國(guó)CAPINTEC公司。

1.2 色譜條件

采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱(4.6 mm×250 mm×5 μm，pH適用范圍為2～9)；以5.85 g/L氯化鈉溶液(加入0.65 mL正辛胺并用稀磷酸調(diào)pH至7.0)-乙腈(V∶V=20∶1)為流動(dòng)相，經(jīng)0.45 μm濾膜濾過(guò)后超聲去除氣泡后使用；放射性流量檢測(cè)儀(BGO檢測(cè)池，15 μL)與紫外檢測(cè)器(檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm)串聯(lián)，柱溫為25 ℃，進(jìn)樣量為20 μL，運(yùn)行時(shí)間為40 min，以1.5 mL/min流速進(jìn)行等度洗脫。以下若無(wú)特別說(shuō)明，均按照此色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3 溶液的制備

1.3.1對(duì)照溶液 分別取碘化鉀26.22 mg和碘酸鉀24.50 mg，分別置于1 L量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得到碘化鉀和碘酸鉀的儲(chǔ)備液；再精密量取碘化鉀和碘酸鉀的儲(chǔ)備液各1 mL，分別置于10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，即得含碘化物2.0 mg/L的對(duì)照溶液1和含碘酸根2.0 mg/L的碘酸鉀溶液，二者等體積混合得到對(duì)照溶液2。

1.3.2載體溶液 取碘化鉀1 g、碘酸鉀2 g與碳酸氫鈉10 g，加1 000 mL水溶解制成。

1.3.3樣品溶液 取1粒治療用碘[131I]化鈉膠囊，將內(nèi)容物溶解于10 mL水中，超聲助溶，靜置后，取上層清液，用載體溶液稀釋一倍，作為樣品溶液。

1.3.4陰性對(duì)照溶液 按照治療用碘[131I]化鈉膠囊的處方工藝組成，取抗氧劑A、填充劑B等制劑輔料按處方比例制備不含碘[131I]化鈉溶液的膠囊，按1.3.3節(jié)方法制備陰性對(duì)照溶液。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

在樣品溶液的放射性色譜圖中，應(yīng)滿足以下兩點(diǎn)：(1) 碘[131I]化鈉的放化純度按放射性峰面積歸一化法計(jì)算應(yīng)不得低于95%；(2) 放射性主峰的保留時(shí)間與對(duì)照溶液1中碘化物峰的保留時(shí)間相差不超過(guò)10%。

2 結(jié)果和討論

2.1 輔料對(duì)分析方法運(yùn)行時(shí)間的影響

以流動(dòng)相作為空白參考，進(jìn)樣色譜系統(tǒng)進(jìn)行分析，考察對(duì)照溶液1、抗氧劑A溶液和填充劑B溶液的主峰保留時(shí)間，以確定適宜的方法運(yùn)行時(shí)間。碘化物的色譜峰近似于對(duì)稱形正態(tài)分布，填充劑B在該條件下無(wú)紫外吸收，而抗氧劑A的色譜峰拖尾嚴(yán)重，運(yùn)行時(shí)間為40 min才能保證出峰完全以至于不會(huì)影響下一針的樣品分析；對(duì)比主峰保留時(shí)間，抗氧劑A和填充劑B在碘化物色譜峰位置處無(wú)干擾，即不會(huì)影響放射性主峰碘[131I]化物的鑒別。

2.2 樣品溶液制備方法的優(yōu)化

在治療用碘[131I]化鈉膠囊的制備工藝過(guò)程中，碘[131I]藥液滴加步驟使膠囊中的填充劑結(jié)塊，塊狀物的形成導(dǎo)致內(nèi)容物溶解效率較低，嚴(yán)重影響了方法的回收率。通過(guò)模擬實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在進(jìn)行樣品放化純度測(cè)定前處理過(guò)程中，若對(duì)膠囊內(nèi)容物只是簡(jiǎn)單的加水溶解，不進(jìn)行任何輔助操作，回收率僅能達(dá)到25%左右；而采用超聲助溶后回收率可提高至70%以上。

2.3 樣品氧化降解實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化

在研究分析方法的專屬性時(shí)，需要考察分析方法是否能夠有效地將主峰與潛在的雜質(zhì)峰進(jìn)行分離。如果治療用碘[131I]化鈉膠囊中抗氧劑量不足，可能會(huì)發(fā)生因外部氧化作用而引起碘[131I]的降解。該實(shí)驗(yàn)采用常見(jiàn)的強(qiáng)氧化劑包括濃硝酸、濃硫酸、雙氧水、次氯酸鈉、高氯酸、氯酸鉀等對(duì)治療用碘[131I]化鈉膠囊進(jìn)行了強(qiáng)降解實(shí)驗(yàn)。以碘離子和碘[131I]離子為反應(yīng)物，分別與一定濃度的濃硝酸、次氯酸鈉、高氯酸和雙氧水進(jìn)行反應(yīng)，待反應(yīng)完畢經(jīng)稀釋制成測(cè)試溶液進(jìn)樣分析，放射性流量檢測(cè)儀未檢測(cè)到信號(hào)，推測(cè)可能是碘離子和碘[131I]離子只被氧化到單質(zhì)碘(單質(zhì)碘[131I])，而單質(zhì)碘(單質(zhì)碘[131I])在反應(yīng)過(guò)程中已揮發(fā)，所以無(wú)法檢測(cè)到。當(dāng)使用氯酸鉀-濃硫酸作為氧化劑體系時(shí)：反應(yīng)之初，溶液體系變?yōu)榧t棕色，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，出現(xiàn)大量的黑色固體，反應(yīng)至一定時(shí)間后，紅棕色以及黑色固體消失，反應(yīng)溶液變得澄清，經(jīng)稀釋制成測(cè)試溶液進(jìn)樣分析，可觀察到原碘[131I]化物處放射性峰消失，同時(shí)產(chǎn)生與碘酸根保留時(shí)間一致的放射性峰。通過(guò)該降解實(shí)驗(yàn)得到的放射性峰為碘[131I]酸根。

2.4 方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

2.4.1系統(tǒng)適用性 吸取流動(dòng)相、水、對(duì)照溶液1、對(duì)照溶液2和陰性對(duì)照溶液各20 μL，進(jìn)行色譜分析。圖譜中5.2 min左右的紫外色譜峰為流動(dòng)相和水色譜圖中固有峰位，通過(guò)對(duì)照溶液1和溶液2的紫外色譜峰情況確定了碘化物和碘酸根的紫外色譜峰位置，陰性對(duì)照溶液在碘化物、碘酸根紫外色譜峰處均無(wú)干擾，因此對(duì)碘[131I]化物、碘[131I]酸根放射性峰的鑒別無(wú)影響，對(duì)照溶液2中碘化物和碘酸根紫外色譜峰的分離度大于1.5。

2.4.2專屬性 對(duì)碘[131I]化物溶液進(jìn)行氧化降解制備得到碘[131I]酸根溶液，對(duì)比碘[131I]化物主峰與潛在的降解雜質(zhì)碘[131I]酸根峰的保留時(shí)間，并計(jì)算二者的分離度，考察分析方法對(duì)治療用碘[131I]化鈉膠囊的放化純度準(zhǔn)確、可靠測(cè)定的能力。測(cè)試溶液的制備方法如下：

(1) 未破壞樣品分析：取1粒治療用碘[131I]化鈉膠囊內(nèi)容物于10 mL西林瓶中，超聲助溶，靜置后，取上層清液，作為碘[131I]化物溶液；用載體溶液稀釋一倍，作為測(cè)試溶液1；

(2) 氧化降解實(shí)驗(yàn)樣品分析：取一定濃度碘化鉀溶液于10 mL反應(yīng)瓶中，滴入適量碘[131I]化物溶液，再依次加入與碘化鉀溶液等體積的9 mol/L濃硫酸以及氯酸鉀溶液，密封，溫水浴反應(yīng)一定時(shí)間，待反應(yīng)體系變澄清，即表示碘[131I]化物的氧化降解反應(yīng)完成。隨即取0.2 mL反應(yīng)液，測(cè)得其活度濃度為47.36 GBq/L，加入0.8 mL滅菌注射用水稀釋淬滅反應(yīng)，得到活度濃度為9.62 GBq/L的溶液，取適量再與等體積載體溶液混合均勻，作為測(cè)試溶液2；并將測(cè)試溶液1與2按一定比例混合，得到同時(shí)含碘[131I]化物和氧化降解產(chǎn)物的測(cè)試溶液3。

對(duì)測(cè)試溶液1、2、3進(jìn)行色譜分析，結(jié)果示于圖1。從測(cè)試溶液1和2的放射性圖譜可知，碘[131I]化物和氧化降解產(chǎn)物的放射性峰保留時(shí)間分別為7.779 min和2.815 min。從測(cè)試溶液3的放射性圖譜可知，降解產(chǎn)物放射性峰與主峰碘[131I]化物能夠?qū)崿F(xiàn)完全分離，分離度為31.58，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足分離度不小于1.5的要求[7]。根據(jù)反應(yīng)可能的原理推測(cè)降解產(chǎn)物為碘[131I]酸根離子[8-9]，與對(duì)照溶液1和2對(duì)比，碘化物和碘酸根紫外峰分別與碘[131I]化物和碘[131I]酸根放射性峰一一對(duì)應(yīng)。以上實(shí)驗(yàn)表明，在氧化條件下產(chǎn)生的降解產(chǎn)物碘[131I]酸根對(duì)放射性主成分碘[131I]化物測(cè)定無(wú)干擾，說(shuō)明所建立的HPLC法測(cè)定治療用碘[131I]化鈉膠囊的放化純度專屬性良好。

上圖是放射性圖譜，下圖是紫外圖譜

2.4.3線性及濃度測(cè)量范圍 以一定濃度的碘[131I]化物溶液和碘[131I]酸根溶液作為線性儲(chǔ)備液進(jìn)行稀釋，分別得到一系列不同放射性濃度水平的溶液，考察主峰峰面積與放射性濃度成比例關(guān)系的能力，并確定分析方法的測(cè)量范圍。

(1) 碘[131I]化物

線性母液：取一批次碘[131I]化鈉口服溶液配制得到活度濃度為1 502.20 GBq/L的線性母液200.0 μL。線性儲(chǔ)備液：量取線性母液150.0 μL于色譜用進(jìn)樣瓶?jī)?nèi)，加滅菌注射用水稀釋至0.6 mL，得碘[131I]化物活度濃度約為384.80 GBq/L的線性儲(chǔ)備液。線性溶液：分別量取線性儲(chǔ)備液5.0、8.0、40.0、100.0、100.0、100.0 μL于色譜用進(jìn)樣瓶中，經(jīng)稀釋后得到一系列碘[131I]化物溶液，其活度濃度為0.37、1.85、9.25、46.25、92.50、185.00 GBq/L，該系列溶液分別與等體積載體溶液混合，即得到碘[131I]化物活度濃度為0.19、0.92、4.62、23.12、46.25、92.50 GBq/L的線性溶液。對(duì)這些樣品進(jìn)行色譜分析，每個(gè)溶液重復(fù)測(cè)定2次，記錄每個(gè)線性點(diǎn)的峰面積，計(jì)算其平均值，以碘[131I]化物活度濃度對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸，線性曲線示于圖2。由圖2可知：碘[131I]化物活度濃度在0.19～92.50 GBq/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為y=161.90x+466.32，線性相關(guān)系數(shù)r2=0.985。

圖2 碘[131I]化物的線性曲線

(2) 碘[131I]酸根

線性母液：氧化降解實(shí)驗(yàn)制備得到47.36 GBq/L碘[131I]酸根溶液。線性儲(chǔ)備液：量取線性母液200.0 μL于色譜用進(jìn)樣瓶?jī)?nèi)，加滅菌注射用水稀釋至1.0 mL，得碘[131I]酸根活度濃度為9.62 GBq/L的線性儲(chǔ)備液。線性溶液：由線性儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋1倍分別得到一系列溶液，溶液活度濃度分別為9.62、4.81、2.40、1.20、0.60、0.30 GBq/L，該系列溶液分別與等體積載體溶液混合，即得到碘[131I]酸根化合物活度濃度為4.81、2.40、1.20、0.60、0.30、0.15 GBq/L的線性溶液。對(duì)溶液進(jìn)行色譜分析，每種溶液重復(fù)測(cè)定2次，記錄每個(gè)線性點(diǎn)的峰面積，計(jì)算其平均值，以碘[131I]酸根活度濃度對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸，線性曲線示于圖3。由圖3可知：碘[131I]酸根活度濃度在0.15～4.81 GBq/L具有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為y=188.70x-39.97，線性相關(guān)系數(shù)r2=0.994。

圖3 碘[131I]酸根的線性曲線

2.4.4檢測(cè)限(LOD)與定量限(LOQ) 根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典四部：9101分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則》[10]，HPLC可以直接采用信噪比(S/N)法確定檢測(cè)限與定量限，檢測(cè)限的S/N應(yīng)≥3，定量限的S/N應(yīng)≥10。根據(jù)已知低濃度溶液測(cè)出的信噪比，計(jì)算出能被可靠檢測(cè)或者被可靠定量的碘[131I]化物溶液或者碘[131I]酸根溶液的活度濃度，即為二者的檢測(cè)限或定量限。

(1) 碘[131I]化物

根據(jù)0.19 GBq/L線性溶液放射性主峰的S/N為34.35，推算出定量限與檢測(cè)限適宜的活度濃度，分別為9.63×10-2GBq/L和3.21×10-2GBq/L。對(duì)其進(jìn)行色譜分析，重復(fù)測(cè)定3次，記錄S/N，結(jié)果列入表1和2。

表1 碘[131I]化物的檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 碘[131I]化物的定量限實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(2) 碘[131I]酸根

根據(jù)0.15 GBq/L線性溶液放射性主峰的S/N為28.51，推算出定量限與檢測(cè)限適宜的活度濃度，分別為7.91×10-2GBq/L和4.74×10-2GBq/L，對(duì)其進(jìn)行色譜分析，重復(fù)測(cè)定3次，記錄S/N，結(jié)果列入表3和4。

表3 碘[131I]酸根的檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表4 碘[131I]酸根的定量限實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4.5準(zhǔn)確度 根據(jù)碘[131I]化鈉膠囊的處方組成，取不含碘[131I]的空白輔料(抗氧劑A+填充劑B)于10 mL西林瓶中，將50 μL 活度為129.50 MBq碘[131I]溶液均勻滴在空白輔料上，即制備得到模擬膠囊內(nèi)容物，放置10 min，使碘[131I]化物充分吸附，之后參照1.3.3節(jié)的方法制備成碘[131I]化物活度濃度為6.48 GBq/L(C理論)的樣品溶液，按照上述過(guò)程平行制備6份樣品溶液，對(duì)其進(jìn)行色譜分析，記錄碘[131I]化物放射性主峰峰面積，代入線性回歸方程y=161.90x+466.32，計(jì)算得到碘[131I]化物活度濃度測(cè)定值(Cdet)，結(jié)果列入表5。由表5可知：回收率在70.06%～75.31%，平均值為71.96%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(sr)為3.38%。通過(guò)式(1)可計(jì)算出模擬膠囊內(nèi)容物中碘化學(xué)含量(w)為40 μg/kg，滿足待測(cè)成分含量對(duì)應(yīng)的回收率(70%～125%)和重復(fù)性(sr=15%，n=6)的要求[10]。

表5 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(1)

式中：A理論，碘[131I]的理論加入活度，MBq；a，碘[131I]的比活度，MBq/kg；m，模擬膠囊內(nèi)容物質(zhì)量，g。

2.4.6耐用性 主要考察了HPLC法色譜條件如色譜柱溫度、流速、流動(dòng)相pH值對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。本實(shí)驗(yàn)所用對(duì)照溶液1和對(duì)照溶液2按照1.3.1節(jié)的方法進(jìn)行制備，待分析樣品溶液參照2.4.2 節(jié)中測(cè)試溶液3的制備方法。對(duì)這兩種溶液進(jìn)行色譜分析，結(jié)果列入表6。由表6可知：對(duì)照溶液2中碘化物與碘酸根分離度(d)在7.37～12.88；待分析樣品碘[131I]化鈉放射性主峰的保留時(shí)間(tR2)與對(duì)照溶液1中碘化物峰的保留時(shí)間(tR1)的相對(duì)誤差為0.44%～2.00%；待分析樣品溶液中碘[131I]化鈉的放化純度按放射性峰面積歸一化法計(jì)算均在97.0%左右，sr=0.10%(n=12)。以上結(jié)果均滿足文獻(xiàn)[10]中d≥1.5、tR2和tR1相對(duì)誤差小于10%、放化純度≥95%和sr≤2%(n=6)的要求。

表6 耐用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4.7重復(fù)性 一名實(shí)驗(yàn)人員參照2.4.2 節(jié)測(cè)試溶液3的方法，制備某一活度濃度水平的6份樣品溶液，活度濃度應(yīng)在碘[131I]化物溶液的線性范圍內(nèi)(0.19～92.50 GBq/L)。對(duì)6份樣品溶液進(jìn)行色譜分析，并對(duì)溶液中碘[131I]化鈉的放化純度按放射性峰面積歸一化法計(jì)算得到其平均值為97.12%，sr=0.31%(n=6)，滿足sr≤1%(n=6)的要求[10]，表明該法重復(fù)性良好。

2.4.8中間精密度 兩名實(shí)驗(yàn)人員按照測(cè)試溶液3的方法各制備同一活度濃度水平的6份樣品溶液，活度濃度應(yīng)在碘[131I]化物溶液的線性范圍內(nèi)。對(duì)12份樣品溶液進(jìn)行色譜分析，并計(jì)算樣品溶液中碘[131I]化鈉的放化純度，得到放化純度平均值為97.13%，sr=0.32%(n=12)，滿足sr≤2%(n=6)的要求[10]，表明該法中間精密度良好。

2.5 最小進(jìn)樣量的確定

放射性流量檢測(cè)儀對(duì)同一核素的檢測(cè)效率不會(huì)隨其化學(xué)形態(tài)不同而改變，在對(duì)碘[131I]離子和碘[131I]酸根均進(jìn)行檢測(cè)限與定量限的實(shí)驗(yàn)時(shí)，檢測(cè)限分別為3.21×10-2GBq/L和4.74×10-2GBq/L，對(duì)應(yīng)的S/N分別為5.39和8.27，二者活度濃度與S/N的比例關(guān)系分別為0.16和0.16，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與理論一致。放射性化學(xué)雜質(zhì)碘[131I]酸根的檢測(cè)限(LOD)為4.74×10-2GBq/L和百分比(Y′)應(yīng)小于5%(治療用碘[131I]化鈉膠囊放化純度應(yīng)不小于95%)，最小進(jìn)樣量活度(Amin)由式(2)計(jì)算為1.90×10-2MBq，可確保放射性化學(xué)雜質(zhì)百分比不小于5%時(shí)能被檢測(cè)到。

Amin=LOD×0.02/0.05

(2)

式中：0.02為進(jìn)樣體積，mL；0.05為雜質(zhì)碘[131I]酸根放射性量不應(yīng)超過(guò)總放射性量的百分比。

2.6 不同活度濃度進(jìn)樣量下放化純度的測(cè)定

取1粒膠囊內(nèi)容物溶解于10 mL水中，超聲助溶，然后靜置，取上層清液，備用。加入一定量碘[131I]酸根溶液，混勻，得到活度濃度為103.60 GBq/L的溶液，取適量與載體溶液混合后活度濃度為51.80 GBq/L，依次稀釋獲得10.36、5.18、3.45、1.15 GBq/L的溶液，以上溶液均按測(cè)試方法進(jìn)行分析，進(jìn)樣量為20.0 μL，按放射性活度計(jì)算進(jìn)樣量分別為1.04、0.21、0.10、6.90×10-2、2.30×10-2MBq。測(cè)得樣品放化純度均約在95.0%～95.5%，平均值為95.31%，sr=0.20%(n=5)。結(jié)果表明：在滿足最小進(jìn)樣量和活度濃度線性范圍的前提下，不同進(jìn)樣量對(duì)樣品放化純度檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有影響。

3 結(jié) 論

建立了治療用碘[131I]化鈉膠囊放化純度的Radio-HPLC測(cè)定方法，該法具有較強(qiáng)的專屬性、較高的準(zhǔn)確度和良好的重復(fù)性與中間精密度，可用于治療用碘[131I]化鈉膠囊放化純度的質(zhì)量控制，并為其它種類的放射性藥品放化純度Radio-HPLC測(cè)定方法的建立以及方法學(xué)驗(yàn)證提供參考。