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基于植物代謝組學的新疆一枝蒿產(chǎn)地標志物多維度研究

2020-07-04 02:10謝冰周幟章宸陳路路霍美玲努爾波拉提·阿依達爾汗劉戈宇阿吉艾克拜爾·艾薩王中華再帕爾·阿不力孜
分析化學 2020年6期
關(guān)鍵詞:液相色譜

謝冰 周幟 章宸 陳路路 霍美玲 努爾波拉提·阿依達爾汗 劉戈宇 阿吉艾克拜爾·艾薩 王中華 再帕爾·阿不力孜

摘?要?采用基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)聯(lián)用技術(shù)的植物代謝組學分析方法,以采集自阿勒泰富蘊、哈密兩個地區(qū)的新疆一枝蒿植物為研究對象,開展多維度代謝組分析,從人工栽培和野生品種兩種角度,花、莖、枝葉3個層面,考察產(chǎn)地對于內(nèi)源性代謝物的影響。同時,靶向分析了25種已知代表性代謝物在不同組別中的水平;結(jié)合非靶向與靶向分析,闡明不同產(chǎn)地該植物的代謝特征。結(jié)果表明,無論是人工栽培品種還是野生品種,不同產(chǎn)地樣本的代謝組之間具有顯著差異,在野生品種中表現(xiàn)更為突出。最終,從人工栽培品種篩選出29種已知結(jié)構(gòu)類別的差異代謝物,包括10種黃酮類化合物、12種綠原酸類似物、7種一枝蒿酮酸衍生物;從野生品種篩選出45種已知結(jié)構(gòu)類別的差異代謝物,包括17種黃酮類化合物、14種綠原酸類似物、14種一枝蒿酮酸衍生物。25種已知代表性代謝物中,8種在人工栽培品種中、11種在野生品種中表現(xiàn)出了產(chǎn)地差異性。本研究為藥用植物新疆一枝蒿的產(chǎn)地鑒別、質(zhì)量評價體系建立提供了新的研究策略和研究基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞?新疆一枝蒿;植物代謝組學;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用;產(chǎn)地標志物

1?引 言

新疆一枝蒿為菊科蒿屬多年生草本植物巖蒿的全草,是常用的傳統(tǒng)維吾爾醫(yī)藥用植物,主要分布于我國新疆維吾爾族自治區(qū)的天山山脈和阿勒泰山脈附近,一般生長在海拔1600~3000 m 的亞高山草原、針葉林開闊地[1]。新疆一枝蒿具有抗炎、抗菌、抗過敏、抗病毒、保肝等藥理活性,藥用價值很高[2]。以一枝蒿為主要成分制成的“復方一枝蒿沖劑”、“一枝蒿口服液”等復方制劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床治療蕁麻疹、風熱感冒及感冒引起的相關(guān)癥狀[3]。由于新疆一枝蒿獨特的生態(tài)特性,其藥材資源大多依靠野生采挖,但該植物自然繁殖極為困難。 近年來,由于被大量開發(fā)利用,加上礦山開采、過度放牧等原因,藥材資源已經(jīng)匱乏,因而,人工栽培品種受到重視與關(guān)注,逐漸被臨床所采用。

前期研究表明,新疆一枝蒿全草中主要含有黃酮類[4]、倍半萜類[5,6]、生物堿類以及多糖和揮發(fā)油等[7,8]化合物。目前,已經(jīng)提取分離并鑒定出一百余種化合物的結(jié)構(gòu)。其中,一枝蒿酮酸的特征性成分是愈創(chuàng)木烷型倍半萜類化合物,對流感具有確切療效[9]。在此基礎(chǔ)上,針對一枝蒿酮酸單體進行結(jié)構(gòu)修飾,獲得其衍生物,有助于開發(fā)具有更高抗病毒活性與安全性的新藥[10]。總體而言,關(guān)于新疆一枝蒿的研究,包括采用傳統(tǒng)天然產(chǎn)物化學方法開展的針對某幾種或某一類化學成分分離與鑒定[6]、提取工藝[11,12]和藥效[13,14]等方面。然而,作為復雜的生物體,不同的生態(tài)因素或生長條件會對其包含初級代謝物和次級代謝物的整體成分產(chǎn)生擾動,進而影響其藥理活性。迄今為止,對新疆一枝蒿物質(zhì)基礎(chǔ)進行全面性、系統(tǒng)性分析的研究仍然較少。

代謝組學是研究生物體系受外部刺激或擾動后所產(chǎn)生的內(nèi)源性代謝物的整體及其變化規(guī)律的科學[15]。在植物學領(lǐng)域,代謝組學已經(jīng)應(yīng)用于探究高溫、干旱等條件脅迫下生物體內(nèi)代謝組的變化[16,17]。由于環(huán)境對于植物的生長發(fā)育具有十分重要的作用,因此,就藥用植物而言,闡明生態(tài)因素對代謝組產(chǎn)生的影響,對于其藥理活性和質(zhì)量評價具有重要意義。此外,與傳統(tǒng)天然產(chǎn)物化學分析方法相比,植物代謝組學不再以單一化合物或某類化合物的提取、分離、鑒定為研究目的,而是系統(tǒng)地研究植物中所有小分子化合物,具有高通量、高靈敏度等[18,19]優(yōu)勢。本研究組前期開展了新疆一枝蒿植物的代謝組學分析方法研究,建立了適用于該植物的前處理方法及其超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(Liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)分析方法,并且發(fā)現(xiàn)此植物不同組織器官的代謝組存在顯著差異[20]。

本研究針對不同產(chǎn)地新疆一枝蒿物質(zhì)基礎(chǔ)一致性的問題,采用基于LC-MS/MS技術(shù)的代謝組學研究策略,對采集自阿勒泰富蘊和哈密兩個地區(qū)的新疆一枝蒿植物,從人工栽培品種和野生品種兩個角度,花、莖、枝葉樣本3種層面,進行多維度代謝組分析,考察了特征活性成分在不同產(chǎn)地組中的含量水平,系統(tǒng)地探討產(chǎn)地因素對此植物內(nèi)源性代謝組產(chǎn)生的影響,篩選與產(chǎn)地相關(guān)的生物標志物,為新疆一枝蒿植物的產(chǎn)地鑒別、質(zhì)量評價體系的建立提供了參考。

2?實驗部分

2.1?儀器與試劑

Ultimate 3000 UHPLC型液相色譜儀、Q-OT-qIT雜合型質(zhì)譜儀(美國Thermo公司);GAMMA 2-16 LSC冷凍干燥機、RVC 2-25 CDplus真空離心濃縮儀(德國Christ公司);5430 R離心機、ThermoMiser C混勻儀(德國Eppendorf公司);KQ3200E超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);T10 standard高速分散機(德國IKA公司);0.22 μm濾膜(美國Agilent公司)。

化學對照品25種,分別為:蔓荊子黃素(Vitexicarpin,批號20150413)、蘆?。≧utinum,批號20151025)、一枝蒿酮酸(Rupestonic acid,批號20160329)、木犀草素(Luteolin,批號20151024)、異槲皮素(Isoquercitin,批號20160522)和洋艾素(Artemitin,批號20160813)均購于寶雞辰光生物公司;金腰乙素(Chrysosplenetin,批號150920)購于成都克洛瑪生物公司;蒙花苷(Linarin,批號111528-201509)、石吊蘭素(Lysionotin,批號111555-200602)、香草酸(Vanicllic acid,批號110776-201503)、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷(Luteolin-7-O-glucuronide,批號111968-201301)和綠原酸(Chlorogenic acid,批號110753-201415)均購于中國食品藥品檢定研究院;櫟草亭-7-O-葡萄糖苷(6-Hydroxyquercetin-7-O-β-D-glucopyranoside,批號17101215)、花旗松素(Taxifolin,批號17011204)、山奈酚(Kaempferol,批號17060213)、生松素(Pinocembrin,批號17120507)、芹黃素(Apigenin,批號17080101)、異鼠李素(Isohamnetin,批號17082910)、黃杞苷(Engeletin,批號17042803)、黃芩苷(Baicalin,批號17061323)、咖啡酸(Caffeic acid,批號17032701)、丁香酸(Syringic acid,批號17031705)、金絲桃苷(Hyperoside,批號16110215)、金合歡素(Acacetin,批號17040811)和山奈素(Kaempferide,批號17052403)均購于成都康邦生物公司。

乙腈和甲醇(HPLC級,德國Merck公司);甲酸(HPLC級,美國ROE公司);實驗用水為純凈水(杭州娃哈哈有限公司)。

2.2?實驗方法

2.2.1?樣品采集與制備?采用同年采集的新疆維吾爾族自治區(qū)阿勒泰富蘊縣盛花期的人工栽培品種(以下簡稱F地區(qū)的人工品種,或FA)和野生品種(以下簡稱F地區(qū)的野生品種,或FW)新疆一枝蒿,哈密市盛花期的人工栽培品種(以下簡稱H地區(qū)人工品種,或HA)和野生品種(以下簡稱H地區(qū)野生品種,或HW)新疆一枝蒿。采集后立即置于干冰中暫存,并盡快轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱保存。取FA組、FW組、HA組和HW組的花、莖、枝葉樣本各14份,在液氮中使用研缽研磨成粉末,并置于冷凍干燥機脫水48 h。稱取50 mg 凍干粉末于勻漿管中,冰浴條件下,使用1 mL甲醇-水(80∶20,V/V)在高速分散器中提取3 min(25000 r/min,1 min;3000 r/min,1 min;25000 r/min,1 min)。超聲10 min后,在4℃,以13500 r/min離心10 min,上清液置于真空離心濃縮儀中濃縮3 h。將濃縮物復溶于1 mL乙腈-水(50∶50,V/V),超聲混勻后離心10 min,上清液過0.22 μm濾膜液,待測[21]。

質(zhì)量控制(Quality control,QC)樣品為各部位實際樣品的等量混合樣品,即來源于花、莖、枝葉的樣品分別混合制成花-QC、莖-QC、枝葉-QC,用于監(jiān)測分析系統(tǒng)的穩(wěn)定性。

2.2.2?液相色譜和質(zhì)譜條件?Acquity UPLC HSS T3色譜柱(100 mm × 2.1 mm,1.8 μm,Waters公司);水(含0.1%甲酸,A)和乙腈(含0.1%甲酸,B)為流動相;流速為0.3 mL/min,進樣量為5 μL,柱溫為40℃;洗脫梯度: 0~20 min,5%~50% B;20~27 min,50%~98% B;27~30 min,98% B。每次進樣前,色譜柱用初始流動相平衡8 min。

離子源為電噴霧(Electrospray ionization,ESI)源;采用負離子檢測模式;掃描模式為全掃描;掃描范圍: m/z 100~1000;分辨率: 60000;噴霧電壓:3 kV;鞘氣: 35 psi(1 psi = 6.895 kPa);輔助氣: 15 psi;離子源溫度: 380℃。

2.2.3?分析順序和數(shù)據(jù)處理?分析樣品前測試空白溶劑樣品,保證色譜柱及系統(tǒng)中無殘留污染物干擾。連續(xù)進樣10 次QC 樣品,待儀器檢測穩(wěn)定后,開始實際樣品檢測。實際樣品隨機排列,并且每進樣12種實際樣品插入1種QC樣品。

獲得原始數(shù)據(jù)后,采用MM File conversion軟件將數(shù)據(jù)格式由.RAW轉(zhuǎn)換為.XML,并載入R語言xcms程序包進行峰識別、峰對齊、峰填充及峰過濾,獲得包括質(zhì)荷比(m/z)、保留時間及峰面積的二維數(shù)據(jù)陣。然后,將二維數(shù)據(jù)陣導入SIMCA-P(Version 14.0,Umetrics AB,Ume,Sweden)進行多變量統(tǒng)計分析,利用主成分分析(Principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判別分析(Orthogonal partial least square discriminant analysis,OPLS-DA)構(gòu)建模型。進一步選擇VIP(Variable importance in projection)值大于1,即對分組貢獻較大的變量;去除組內(nèi)變異較大、組間交差嚴重的變量;再對兩組獨立樣本進行t檢驗,選擇p<0.05的變量;運用Pearson相關(guān)性分析進一步篩除加合離子、同位素離子及碎片離子,最終獲得差異變量。根據(jù)差異代謝物的高分辨MS及MS/MS譜,結(jié)合已知特征成分的質(zhì)譜裂解規(guī)律和代謝物數(shù)據(jù)庫Metlin(http://metlin.scripps.edu)檢索,確定差異代謝物的結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)類別。

3?結(jié)果與討論

3.1?數(shù)據(jù)質(zhì)量控制

為了獲得真實可靠的數(shù)據(jù),本研究從以下兩方面進行數(shù)據(jù)質(zhì)量控制: (1)在ESI負離子模式下的UHPLC-MS(UHPLC-(-) ESI-MS)分析時,采用不同組間穿插進樣、組內(nèi)隨機進樣的方式進行檢測;(2)通過繪制QC樣品的PCA得分圖和所有實際樣品的保留時間變異圖,考察檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性。以圖1中花-QC樣本構(gòu)建的PCA得分圖和花部位實際樣品的保留時間變異圖為例,所有花-QC樣品的峰面積偏差在-2SD~2SD之間,并且實際樣品的保留時間變異均在20~20 s內(nèi)。莖、枝葉部位樣品也滿足同樣的數(shù)據(jù)質(zhì)量標準。結(jié)果表明,色譜系統(tǒng)的分離性能和穩(wěn)定性良好,分析方法穩(wěn)定、可靠,保證了后續(xù)數(shù)據(jù)處理得到的組間差異來自于不同產(chǎn)地新疆一枝蒿代謝組差異,而非人為失誤或儀器系統(tǒng)的誤差。

3.2?不同產(chǎn)地新疆一枝蒿代謝輪廓分析

圖2為不同來源的新疆一枝蒿花、莖和枝葉樣本的代表性總離子流色譜圖。從整體輪廓上看,F(xiàn)W組和HW組樣本的莖和枝葉部位體現(xiàn)出了顯著差異。例如,從圖2的FW和HW組的莖和葉局部放大圖可見,保留時間8.0~16.0 min,F(xiàn)地區(qū)樣本有色譜峰檢出,而H地區(qū)幾乎沒有;相反地,保留時間24.0~28.0 min,H地區(qū)樣本色譜峰強度顯著高于F地區(qū)樣本。莖的主要作用是將根吸收的水分和無機鹽運輸至其它器官,或?qū)⑷~合成的有機養(yǎng)料自上而下運輸至植株其它部位,而FW組和HW組樣本植株生長的海拔不同,因此莖和枝葉代謝輪廓出現(xiàn)顯著差異是合理的。在其它組別的樣本中,以花為例,無論是人工品種,還是野生品種,不同產(chǎn)地樣品的整體輪廓基本一致,但仍然存在明顯的局部差異,如保留時間10.0~14.0 min區(qū)域??傊煌a(chǎn)地新疆一枝蒿代謝輪廓存在差異,尤其體現(xiàn)在野生品種的莖和枝葉樣本。

采用二維數(shù)據(jù)陣構(gòu)建多變量統(tǒng)計模型,進一步對樣本的產(chǎn)地差異進行分析。首先,構(gòu)建無監(jiān)督的PCA模型(見電子版文后支持信息圖S1),在未知組別的情況下,不同產(chǎn)地的樣本已經(jīng)呈現(xiàn)出明顯的分組分布,充分說明產(chǎn)地或生態(tài)條件對于新疆一枝蒿的代謝組具有影響。從組間區(qū)分的程度可知,F(xiàn)W組和HW組的花、莖、枝葉樣本的組間距離比于FA組和HA組更大,與上述代謝輪廓表現(xiàn)出一致特征。推測可能是由于兩種地區(qū)的野生品種生長地生態(tài)條件相差較遠,而人工栽培時,因為人為因素的參與,植物的生長條件較為接近。為了獲取引起組間分離的差異變量,構(gòu)建了有監(jiān)督的OPLS-DA模型。以FA和HA組的花部位樣本為例,OPLS-DA模型經(jīng)1種預測主成分和1種正交成分擬合后,49.4%(R2X)的變量可用于解釋HA和H野生品種之間99.3%(R2Y)的差異,并經(jīng)過交叉有效驗證后的平均預測能力為93.8%(Q2Y)。進一步進行了相同主成分數(shù)的PLS-DA置換驗證分析,經(jīng)200次置換驗證后,R2Y截距小于0.4,Q2Y截距小于0.05,表明所構(gòu)建的OPLS-DA模型具有顯著的統(tǒng)計學差異。其它各組樣本之間構(gòu)建的OPLS-DA模型均經(jīng)過了交叉有效性驗證和置換驗證,保證了模型有效、可靠。

3.3?產(chǎn)地差異代謝物的篩選

根據(jù)已構(gòu)建的OPLS-DA模型和課題組前期建立的差異變量篩選流程,最終獲得的差異變量數(shù)以及差異倍數(shù)(Fold of change,F(xiàn)C)大于5的差異變量種數(shù)如表1所示。與上述結(jié)果基本一致,F(xiàn)W組和HW組樣本之間的產(chǎn)地差異變量數(shù)整體上大于FA組和HA組之間的差異變量數(shù)。然后,對差異變量進行MS/MS分析及結(jié)構(gòu)鑒定。以黃酮類化合物為例,從結(jié)構(gòu)上看,此類化合物包含黃酮、異黃酮、黃酮醇、異黃酮醇、黃烷酮等多種苷元及其糖苷類化合物,具有明顯的質(zhì)譜裂解規(guī)律。在負離子模式下,如果黃酮的A環(huán)是5,7-OH取代,且B環(huán)上也有OH取代,A環(huán)可能發(fā)生斷裂,生成[M-H-C3O2];C環(huán)發(fā)生開裂,會丟失C2H2O碎片(67.9893),產(chǎn)生[M-H-C2H2O];此外,當A環(huán)上含有5,7-OH取代時,C環(huán)可能發(fā)生RDA裂解,產(chǎn)生m/z 151.0013的特征子離子。異黃酮類化合物和黃酮類類似,A環(huán)可能發(fā)生斷裂生成[M-H-C3O2],同時,A環(huán)若為5,7-OH取代或7-OH取代,容易失去CHO·(29.0022);若有OCH3取代,容易失去·CH3(15.0229)[21]。黃酮苷類化合物在其MS/MS譜中會出現(xiàn)苷元離子Y0-和自由基苷元離子[Y0-H],并可根據(jù)兩者的相對強度判斷糖基的取代位置[22]。此外,新疆一枝蒿中倍半萜化合物結(jié)構(gòu)類型主要為愈創(chuàng)木烷型,以一枝蒿酮酸為代表,其結(jié)構(gòu)上多有羧基取代[8],故在負離子模式下能夠較好地電離并被檢識,一枝蒿酮酸在TIC中的響應(yīng)強度可達到109。MS/MS分析中,一枝蒿酮酸主要發(fā)生脫羧反應(yīng),產(chǎn)生m/z 203.1437([M-H-CO2])的特征子離子[7]。其二聚體主要發(fā)生RDA裂解,產(chǎn)生2個倍半萜單元碎片離子[23,24]??偨Y(jié)與歸納黃酮類化合物、一枝蒿酮酸、綠原酸的質(zhì)譜裂解規(guī)律,對組間FC>5的代謝物進行結(jié)構(gòu)類別的判斷。

如圖3A所示,在FA組和HA組比較分析中,花的產(chǎn)地差異代謝物共判別出13種化合物(4種黃酮類化合物、4種綠原酸類似物、5種一枝蒿酮酸衍生物),莖的產(chǎn)地差異代謝物共判別出8種化合物(2種黃酮類化合物、5種綠原酸類似物、1種一枝蒿酮酸衍生物),枝葉的產(chǎn)地差異代謝物共判別出8種化合物(4種黃酮類化合物、3種綠原酸類似物、1種一枝蒿酮酸衍生物)。如圖3B所示,F(xiàn)W組和HW組比較分析中,花的產(chǎn)地差異代謝物共判別出23種(6種黃酮類化合物、12種綠原酸類似物、5種一枝蒿酮酸衍生物),莖的產(chǎn)地差異代謝物共判別出6種(3種黃酮類化合物2種綠原酸類似物1種一枝蒿酮酸衍生物),枝葉的產(chǎn)地差異代謝物共判別出16種化合物(8種黃酮類化合物、8種一枝蒿酮酸衍生物)。從上述已知結(jié)構(gòu)類別的產(chǎn)地差異代謝物的聚類熱圖(圖3)可知,人工品種中,差異代謝物多在H地區(qū)樣本中具有更高含量,并且一枝蒿酮酸衍生物也較F地區(qū)更為豐富。類似地,大部分野生品種的產(chǎn)地差異代謝物也在H地區(qū)樣本中表現(xiàn)出更高的豐度。

3.4?新疆一枝蒿已知代表性代謝物的靶向分析

非靶向分析中,差異變量的篩選需要經(jīng)過多種步驟,例如,選擇VIP>1的變量時,由于代謝物含量的尺度差異,高豐度代謝物對于模型的作用更大,加之背景噪音的影響,較低豐度的差異離子信息會被掩蓋,從而丟失一些重要信息。因此,本研究另外選取了新疆一枝蒿中25種已知代表性代謝物,對其進行了靶向分析,以此更系統(tǒng)地考察不同產(chǎn)地的代謝物差異。代表性已知代謝物包含20種黃酮類、3種有機酸類、1種倍半萜類化合物和1種綠原酸。在負離子模式下,花、莖、枝葉樣品中分別檢測到18、16和11種。結(jié)合原始輪廓圖和單變量統(tǒng)計分析,篩選出產(chǎn)地相關(guān)的已知代謝物,如表2所示。人工品種中,咖啡酸、蒙花苷、蘆丁、金絲桃苷、花旗松素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、一枝蒿酮酸、生松素共8種已知代謝物具有顯著的統(tǒng)計學差異。整體而言,上述代謝物在H地區(qū)樣本中具有更高的含量,相比于F地區(qū)樣本,大多高出2~3倍。野生品種中,蒙花苷、芹黃素、黃杞苷、山奈酚、花旗松素、生松素、異鼠李素、蘆丁、金絲桃苷、一枝蒿酮酸、綠原酸共11種已知代謝物具有顯著的統(tǒng)計學差異。與人工品種的情況相反,在野生品種中,大部分代謝物在F地區(qū)樣本中具有更高含量,其中,蒙花苷的含量是H地區(qū)樣本的20倍以上。

蒙花苷、蘆丁在人工品種和野生品種中均被識別為產(chǎn)地差異代謝物,而且差異倍數(shù)較大,整合分析兩個品種共4組數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),這兩種代謝物在FW組中含量最高。蒙花苷有抗衰老、抗疲勞、抑制血糖升高作用[25]。蘆丁具有抗炎、維持血管抵抗力、降低其通透性、減少脆性等作用,可用于防治腦溢血、高血壓、視網(wǎng)膜出血、紫癜和急性出血性腎炎等疾病[26]。此外,特征有效成分一枝蒿酮酸在各組中含量差別不大,但是FW組中含量最高。

對比非靶向與靶向分析篩選出的產(chǎn)地差異代謝物發(fā)現(xiàn),已知代謝物并未包含在結(jié)構(gòu)未知的差異代謝物中,表明靶向分析為非靶向分析提供了補充作用,將兩者結(jié)合,能夠更加全面地評價代謝組差異。

綜合上述分析結(jié)果,在人工品種中,通過非靶向分析篩選出29種產(chǎn)地差異代謝物,包括10種黃酮類代謝物、12種綠原酸類似物、7種一枝蒿酮酸衍生物;通過靶向分析篩選出8種已知產(chǎn)地差異代謝物。同理,在野生品種中,通過非靶向分析篩選出45種產(chǎn)地差異代謝物,包括17種黃酮類代謝物、14種綠原酸類似物、14種一枝蒿酮酸衍生物;通過靶向分析篩選出11種已知產(chǎn)地差異代謝物。由此,建立了人工品種新疆一枝蒿植物的產(chǎn)地標志物組,包括37種代謝物;野生品種新疆一枝蒿植物的產(chǎn)地標志物組,包括56種代謝物。

4?結(jié) 論

針對阿勒泰富蘊地區(qū)和哈密地區(qū)的新疆一枝蒿植物物質(zhì)基礎(chǔ)是否一致的問題,采用基于UHPLC-MS/MS技術(shù)的代謝組學分析方法,從人工栽培品種和野生品種兩種角度,花、莖、枝葉3個層面,開展系統(tǒng)研究;同時針對新疆一枝蒿中25種已知代表性代謝物進行了靶向分析。結(jié)果表明,產(chǎn)地因素對于其代謝組具有影響,并且對于野生品種的影響大于人工品種。結(jié)合非靶向與靶向分析,建立了兩種品種新疆一枝蒿植物的產(chǎn)地標志物組,可用于產(chǎn)地鑒別或質(zhì)量評估。本研究結(jié)果為后期新疆一枝蒿的質(zhì)量評價體系的建立提供了新的研究思路和分子學研究基礎(chǔ)。

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