郭立斌 施宛辰 劉英

作者單位：136000 四平市中心人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科1，吉林省組織工程實(shí)驗(yàn)室3；132013 吉林醫(yī)藥學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系2

腦梗死是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，具有高致殘率、高致死率和高復(fù)發(fā)率等特點(diǎn)，是危害人類生命和健康的主要致殘性疾病[1-2]。在世界范圍內(nèi)，腦卒中已經(jīng)成為人類死亡的第二位死因，2008年公布的我國(guó)第三次死因調(diào)查資料顯示腦卒中已經(jīng)成為中國(guó)的第一位死因，其中，腦梗死平均占卒中類型的62.4﹪[3]，有資料顯示，預(yù)計(jì)未來二十年，腦梗死將成為疾病負(fù)擔(dān)的第一位[4-5]，對(duì)于其防治具有積極的意義。本研究對(duì)于四平市中心人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2016年1月至2017年12月收治的50例急性腦梗死患者的嗜酸性粒細(xì)胞、血小板CD62p水平進(jìn)行檢查，同時(shí)進(jìn)行頸部血管超聲檢查，探討急性缺血性腦梗死再發(fā)與頸動(dòng)脈斑塊、以及嗜酸性粒細(xì)胞水平、血小板CD62p水平之間的相關(guān)性。

資料與方法

一、一般資料

選擇2016年1月至2017年12月四平市中心人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科腦梗死患者50例。納入標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)病48 h內(nèi)，診斷均符合第四屆全國(guó)腦血管病會(huì)議修訂的標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)CT/MRI檢查證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）嚴(yán)重心臟、肝臟、腎臟、肺功能不全；（2）合并感染、腫瘤、免疫性疾??；（3）合并血液系統(tǒng)疾病。按有、無(wú)頸內(nèi)動(dòng)脈斑塊分為2組，每組25例。隨訪1年，探討急性缺血性腦梗死再發(fā)率。

二、方法

1.頸動(dòng)脈超聲檢查：入組患者均在入院3 d內(nèi)進(jìn)行頸部血管超聲檢查，受檢者取仰臥位，頭略向后伸，轉(zhuǎn)向檢查者的對(duì)側(cè)，充分暴露頸部。先從鎖骨內(nèi)側(cè)段橫向檢查頸總動(dòng)脈，然后沿胸鎖乳突肌外緣縱切檢查，依次顯示頸總動(dòng)脈（CCA）、頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA）、頸外動(dòng)脈（ECA）和椎動(dòng)脈（VA）。檢測(cè)采用 Sequoia512 型全數(shù)字化彩色多普勒超聲診斷儀（美國(guó)ACUSON公司）進(jìn)行，探頭頻率為7.5 ～10.0 MHz。

2.嗜酸粒細(xì)胞檢測(cè)：入組患者于入院后第2天清晨空腹抽取靜脈血，置于EDTAK-2抗凝管中。外周血細(xì)胞檢測(cè)采用全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀SysmexXT-1800i（日本希森美康公司）。

3.活化血小板檢測(cè)：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD62p,方法如下：患者空腹采EDTA抗凝全血2 ml，流式試管中分別加入PE-CY5標(biāo)記抗CD62p（美國(guó)BD公司）：PE-CY5標(biāo)記同行對(duì)照IgG1（美國(guó)BD公司）抗體 2 μl，EDTA 抗凝全血 5 μl及 0.01﹪ PBS 20 μl， 室溫孵育 20 min 后加入 1 ml 0.01 ﹪ PBS，混勻后上機(jī)檢測(cè)。所用儀器為EPICS XL流氏細(xì)胞儀（美國(guó)Beckman Coulter 公司）。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法

所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)用SAS 9.2軟件，血脂檢測(cè)指標(biāo)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、絕對(duì)值與CD62p的變化數(shù)據(jù)用± s表示，兩組間比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn)。兩組患者性別、三種疾病斑塊發(fā)生數(shù)間的比較采用四格表χ2檢驗(yàn)，以P＜ 0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1.分組：比較入組患者年齡、性別、既往病史等指標(biāo)差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，患者一般資料見表1。

2.兩組患者血脂比較：比較入組患者血脂檢測(cè)指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，患者血脂比較見表2。

3.檢測(cè)指標(biāo)比較：各組患者的嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、絕對(duì)值與CD62p的變化見表3。有頸動(dòng)脈斑塊形成的患者嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)及絕對(duì)值均較無(wú)頸動(dòng)脈斑塊形成的患者低；而CD62p的陽(yáng)性率卻高于對(duì)照組患者（P＜ 0.05）。

4.隨訪結(jié)果：隨訪資料顯示，有頸動(dòng)脈斑塊形成的患者發(fā)生再梗死的幾率高于無(wú)頸動(dòng)脈斑塊形成的患者（P＜ 0.05，表 4）。

表1 兩組患者一般資料比較

表2 兩組患者血脂水平比較（± s，mmol/L）

表2 兩組患者血脂水平比較（± s，mmol/L）

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表3 兩組患者嗜酸性粒細(xì)胞與CD62p的變化（± s）

表3 兩組患者嗜酸性粒細(xì)胞與CD62p的變化（± s）

分組 例數(shù) 嗜酸性粒細(xì)胞百分比 嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值 CD62p（﹪）無(wú)頸動(dòng)脈斑塊 25 2.92±0.81 0.32±0.11 13.04±1.08有頸動(dòng)脈斑塊 25 1.13±0.34 0.11±0.09 23.51±1.24 t 值 10.188 7.388 31.836 P值 0.000 0.000 0.000

表4 兩組患者隨訪再發(fā)比較（n = 25）

討 論

腦梗死是神經(jīng)系統(tǒng)常見的疾病，每年約有1 億人患有急性缺血性中風(fēng)。它是最可能導(dǎo)致人類死亡的疾病之一[1-2]。進(jìn)行性缺血性腦梗死（progressive ischemia stroke，PIS）是一種類型的缺血性卒中，其主要神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體征呈緩慢進(jìn)行性進(jìn)展[6]，疾病進(jìn)展通常在發(fā)病后6 h到1周內(nèi)發(fā)生。 PIS預(yù)后差，死亡率高，造成患者、家庭和社會(huì)的沉重負(fù)擔(dān)，因此越來越受到醫(yī)學(xué)工作者的關(guān)注，并開展了深入研究。目前缺血性卒中的進(jìn)展、誘導(dǎo)進(jìn)展的機(jī)制和相關(guān)危險(xiǎn)因素尚未確定。因此，研究PIS的早期預(yù)測(cè)，從而及時(shí)有效進(jìn)行預(yù)防和臨床干預(yù)，已非常必要和緊迫。

關(guān)于腦梗死的病因、病理、發(fā)病機(jī)制和疾病發(fā)展的潛在啟動(dòng)因素，既往已經(jīng)有很多研究，但尚無(wú)一致的結(jié)論。目前，腦梗死發(fā)展被認(rèn)為是各種病因和相關(guān)因素共同作用的結(jié)果。血小板活化在腦梗死的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。血小板是血栓構(gòu)成的主要成分，cD62p作為血小板活化的特異標(biāo)志物，能夠直接反映體內(nèi)血小板的活化程度[7-8]。本研究檢測(cè)了急性缺血性卒中患者發(fā)病48 h內(nèi)的血漿CD62p水平，結(jié)果顯示腦梗死伴有頸動(dòng)脈斑塊者，其血漿CD62p水平增高，即具有更高的血小板活性。此結(jié)果提示血小板被激活后可能會(huì)促進(jìn)血栓進(jìn)一步發(fā)展，從而加重腦梗死患者的臨床癥狀。

近年來少數(shù)研究曾報(bào)告嗜酸性粒細(xì)胞參與心、腦梗死的形成[9-11]。臨床亟需評(píng)定腦梗死初發(fā)及再發(fā)的臨床實(shí)用性預(yù)測(cè)指標(biāo)。因此通過初步研究，結(jié)果提示嗜酸性粒細(xì)胞有可能用于腦梗死復(fù)發(fā)和預(yù)后的預(yù)測(cè)指標(biāo)[12]。本研究針對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞、血小板活性、頸動(dòng)脈斑塊和腦梗死再發(fā)的相關(guān)性進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示有頸動(dòng)脈斑塊形成的腦梗塞患者，其嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)低于無(wú)頸動(dòng)脈斑塊形成的患者，這可能是由于發(fā)病過程中嗜酸性粒細(xì)胞遷移到組織中。Sun等[13]報(bào)道，嗜酸性粒細(xì)胞出現(xiàn)在缺血后皮質(zhì)中，即使在沒有梗塞的情況下也與神經(jīng)元死亡相關(guān)，進(jìn)而導(dǎo)致皮質(zhì)萎縮。另外，嗜酸性粒細(xì)胞可以釋放細(xì)胞因子和趨化因子如IL-4[14-15]，IL-6[16]和IL- 10[17]，進(jìn)一步在腦梗死的病理過程中起破壞作用。腦梗死患者嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)變化的機(jī)制需要進(jìn)一步研究。

André等[18]報(bào)道血小板中表達(dá)的CD62p能夠通過單核細(xì)胞在血栓部位聚集，是血栓斑塊成分中組織因子的重要來源。在本研究中未發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞計(jì)數(shù)及絕對(duì)值的改變，提示單核細(xì)胞對(duì)于預(yù)測(cè)腦梗死再發(fā)的意義有待于繼續(xù)研究和證實(shí)。與之相反，本研究發(fā)現(xiàn)了嗜酸性粒細(xì)胞與血小板活性的反向同步變化，即有頸動(dòng)脈斑塊形成的腦梗塞患者，在嗜酸性粒細(xì)胞減低的同時(shí)，其血小板CD62p水平高于無(wú)頸動(dòng)脈斑塊形成的患者。這一變化趨勢(shì)也出現(xiàn)于心肌梗塞的形成中[19-20]。CD62p介導(dǎo)白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附[11]。當(dāng)CD62p與白細(xì)胞表面的相應(yīng)配體結(jié)合時(shí)，會(huì)引起白細(xì)胞的緩慢滾動(dòng)，最終導(dǎo)致炎癥部位的白細(xì)胞濃度增加[21-22]，有助于缺血后再灌注損傷并促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成。

綜上所述，本研究在急性缺血性腦梗死有或無(wú)頸動(dòng)脈斑塊形成的患者中，對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與百分比、血小板CD62p水平和血脂的臨床檢測(cè)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果顯示PIS發(fā)生與嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)及比例呈明顯負(fù)相關(guān)，與頸動(dòng)脈斑塊存在和血小板CD62p水平呈明顯正相關(guān)，與血脂水平無(wú)直接關(guān)系，而且有頸動(dòng)脈斑塊形成的患者PIS復(fù)發(fā)率較高。因此，可以初步認(rèn)為嗜酸性粒細(xì)胞參與了有頸動(dòng)脈斑塊形成的腦梗死患者的腦梗死初發(fā)與再發(fā)。嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與CD62p協(xié)同應(yīng)用，結(jié)合頸動(dòng)脈斑塊情況，有可能成為簡(jiǎn)便易行的PIS臨床預(yù)測(cè)指標(biāo)，便于對(duì)腦梗死高危人群進(jìn)行早期篩查、干預(yù)并進(jìn)行有效的二級(jí)預(yù)防。

由于本研究例數(shù)較少，今后將繼續(xù)積累病例，期待大樣本的進(jìn)一步觀察結(jié)果。