膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；細(xì)胞系，腫瘤；連接蛋白43［中圖分類號(hào)］R338.2［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A［文章編號(hào)］2096-5532（2023）03-0361-03doi：10.11712/jms.2096-5532.2023.59.091［開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）］［網(wǎng)絡(luò)出版］https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.R.20230802.0901.001;2023-08-0213：07：34EFFECTS OF p53 GENE

源[1]。魚類細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)材料，比活魚實(shí)驗(yàn)具有便捷、經(jīng)濟(jì)、易操作和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。對(duì)比人和哺乳動(dòng)物離體培養(yǎng)的細(xì)胞株，魚類細(xì)胞株平均傳代100 代仍可繼續(xù)分裂，且來源于成魚的細(xì)胞系仍具有分裂能力。本文歸納整理了近年新建魚類細(xì)胞系的數(shù)據(jù)，綜述了魚類細(xì)胞系組織來源、培養(yǎng)方法及應(yīng)用現(xiàn)狀，以期為魚類細(xì)胞系研究提供最新的參考數(shù)據(jù)。1 國(guó)內(nèi)外魚類細(xì)胞系構(gòu)建情況自1962 年Wolf 和Quimby 建立了第一個(gè)魚類細(xì)胞系—虹鱒（Oncorhynchus mykiss）

據(jù)［1］、癌癥細(xì)胞系百科全書（CCLE）［2］和癌癥藥物敏感性基因組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（GDSC）［3］等相繼發(fā)布，這些數(shù)據(jù)庫(kù)中整合收錄了大量細(xì)胞系與藥物之間的敏感性關(guān)系數(shù)據(jù)?；诖?，近些年國(guó)內(nèi)外學(xué)者提出了許多藥物-細(xì)胞系響應(yīng)的預(yù)測(cè)方法。這些方法大致可分為基于回歸模型［4］、基于網(wǎng)絡(luò)推斷［5］、基于矩陣分解［6］和基于深度學(xué)習(xí)［7］的預(yù)測(cè)方法等等。如：Iorio 等人［4］通過彈性網(wǎng)絡(luò)和LASSO 構(gòu)建基因表達(dá)值與響應(yīng)值之間的回歸預(yù)測(cè)模型，但其缺點(diǎn)是忽略了藥物的相關(guān)

養(yǎng)應(yīng)用最重要的細(xì)胞系，廣泛用于科研與疫苗生產(chǎn)，但該細(xì)胞PKR基因與PRRSV相互作用機(jī)制尚不明確。本研究將在本實(shí)驗(yàn)室前期克隆獲得Marc-145細(xì)胞PKR基因序列、構(gòu)建融合EGFP標(biāo)簽真核表達(dá)載體基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)shRNA[6]，并篩選能夠下調(diào)表達(dá)PKR的shRNA，進(jìn)而構(gòu)建該shRNA穩(wěn)定表達(dá)的Marc-145細(xì)胞系，研究PKR在下調(diào)狀態(tài)下對(duì)PRRSV增殖的影響，為闡明PRRSV與PKR相互作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1 細(xì)胞與病毒Marc-145、H

徐公平人骨肉瘤細(xì)胞系在骨肉瘤 ( osteosarcoma，OS ) 的基礎(chǔ)研究中扮演著重要的角色，現(xiàn)已知的人骨肉瘤細(xì)胞系種類眾多，每種 OS 細(xì)胞系都有自己不同的生物學(xué)行為特性以及基因表達(dá)，因此同一種實(shí)驗(yàn)采用不同的人骨肉瘤細(xì)胞系可能產(chǎn)生迥然不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。將橫向比較 6 種常用的人骨肉瘤細(xì)胞系 MG-63，Saos-2，U-2 OS，人成骨細(xì)胞 ( HOB )，KRIB 和 143B 的特點(diǎn)，并討論在實(shí)際研究中的應(yīng)用。一、MG-63MG-63 是目前 O

胞培養(yǎng)，研究，細(xì)胞系，組織培養(yǎng)技術(shù)，現(xiàn)狀分析.一、引言十八世紀(jì)末成立了一個(gè)由中國(guó)共產(chǎn)黨員所領(lǐng)導(dǎo)的組織來培訓(xùn)技術(shù)隊(duì)伍。之后，1907年，美國(guó)著名的生物學(xué)家哈里森以青蛙胚作為主要的培養(yǎng)基地，用淋巴結(jié)來培養(yǎng)青蛙胚的神經(jīng)組織。之后，逐漸從體內(nèi)組織中采集細(xì)胞，在無菌，適當(dāng)?shù)臏囟龋?ph ，特定營(yíng)養(yǎng)條件下模擬各種微生物環(huán)境，開發(fā)了一系列可以維持細(xì)胞生長(zhǎng)，再生，結(jié)構(gòu)和機(jī)械性功能的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。該項(xiàng)技術(shù)在人類對(duì)于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、病毒學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域的研究與應(yīng)用都有著巨大的貢獻(xiàn)

法檢測(cè)多種肝癌細(xì)胞系中SOAT1的表達(dá)，在SOAT1表達(dá)較低的肝癌細(xì)胞系HCCLM3中加入蛋白酶體抑制劑MG132后檢測(cè)SOAT1蛋白水平的變化，篩選人源卵巢腫瘤相關(guān)蛋白酶（OTU）家族中與SOAT1相互作用的DUB分子，通過泛素化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)SOAT1的去泛素化效應(yīng)。結(jié)果SOAT1蛋白穩(wěn)定性受到泛素-蛋白酶體系統(tǒng)的調(diào)控，對(duì)人源OTU家族進(jìn)行無偏性篩選，顯示OTUD3可以與SOAT1特異性結(jié)合，通過去除SOAT1的多聚泛素化，維持SOAT1的蛋白穩(wěn)定性。結(jié)

織： 人膀胱癌細(xì)胞系EJ(美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心)。納入30例行膀胱癌根治術(shù)前接受過以5-FU為基礎(chǔ)的全身化療方案的復(fù)發(fā)性膀胱癌患者，收集切除的膀胱癌組織，其中9例化療敏感組織，21例化療耐藥組織。本研究經(jīng)湖南省人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(倫理審批文號(hào)：hnkyll-lx-20180716)，并取得所有涉及此項(xiàng)研究患者的知情同意。1.2 方法1.2.1 EJ/5-FU耐藥細(xì)胞系的構(gòu)建： 根據(jù)文獻(xiàn)[9]方法稍作修改，以細(xì)胞系EJ為母本細(xì)胞，通過5-FU濃度遞增反

基、生物支架和細(xì)胞系，以及消費(fèi)者接受度和新食品法規(guī)方面的重大挑戰(zhàn)。一般來說，原代細(xì)胞可用于研究短期內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞肉生產(chǎn)的機(jī)制，但原代細(xì)胞在進(jìn)入衰老或細(xì)胞周期停滯之前只能進(jìn)行有限的細(xì)胞分裂，這使得長(zhǎng)期研究和商業(yè)規(guī)模生產(chǎn)變得困難。與原代細(xì)胞培養(yǎng)不同，永生細(xì)胞系不會(huì)衰老，它們可以無限分裂。因此，永生細(xì)胞系更容易研究和更安全。有消費(fèi)者研究表明，口味、營(yíng)養(yǎng)和安全是影響食用人造肉消費(fèi)意愿的重要問題。因此，用于培養(yǎng)肉的永生細(xì)胞系應(yīng)該從消費(fèi)者熟悉的細(xì)胞類型和物種中開發(fā)出來，并

細(xì)胞)系這兩種細(xì)胞系對(duì)PV進(jìn)行細(xì)胞分離。因此，保證RD和L20B細(xì)胞系對(duì)PV的高度敏感性，對(duì)所用細(xì)胞系進(jìn)行有效的質(zhì)量控制，才能及時(shí)分離出標(biāo)本中低水平的PV，以確保不漏檢脊灰野病毒及VDPV[4]。本研究對(duì)重慶市疾病預(yù)防控制中心脊灰實(shí)驗(yàn)室2013-2019年P(guān)V分離所用細(xì)胞系的質(zhì)量控制情況進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1 材料與方法1.1材料1.1.1細(xì)胞系 本研究使用的RD細(xì)胞系和L20B細(xì)胞系均來自中國(guó)疾病預(yù)防控制中心脊灰實(shí)驗(yàn)室，將所獲得的RD細(xì)胞系和L2

部鱗癌順鉑耐藥細(xì)胞系是研究耐藥機(jī)制的主要對(duì)象，但目前尚缺乏成熟的順鉑耐藥細(xì)胞系。本研究以頭頸部鱗癌細(xì)胞系FaDu、UD-SCC-4及UM-SCC-22B為基礎(chǔ)對(duì)象，采用順鉑濃度遞增、間歇誘導(dǎo)的方法獲取頭頸部鱗癌順鉑耐藥細(xì)胞系，鑒定順鉑耐藥特性，同時(shí)探討順鉑耐藥與細(xì)胞表面受體編碼基因Notch1表達(dá)的關(guān)系，以初步明確Notch1信號(hào)通路在頭頸部鱗癌順鉑耐藥過程中的作用及其機(jī)制。1 材料和方法1.1 細(xì)胞系 人頭頸部鱗癌細(xì)胞系FaDu購(gòu)自美國(guó)ATCC公司，UD

多藥敏感卵巢癌細(xì)胞系及多藥耐藥卵巢癌細(xì)胞系。qRT-PCR檢測(cè)miR-193a-3p 在上述兩種卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)，探討miR-193a-3p 與卵巢癌細(xì)胞多藥耐藥的關(guān)系及其作用。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 細(xì)胞系 人卵巢癌細(xì)胞系HO8910，ES-2 和SKOV-3 來源于中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞研究所；A2780細(xì)胞系來自北京協(xié)和醫(yī)院腫瘤細(xì)胞庫(kù)。1.1.2 主要試劑 胎牛血清(FBS，美國(guó)Invitrogen公司生產(chǎn))，McCoy's 5A，RP

產(chǎn)生影響。肝癌細(xì)胞系體外遷移實(shí)驗(yàn)表明，降低BTN3A3表達(dá)后促進(jìn)肝癌細(xì)胞系的遷移，侵襲實(shí)驗(yàn)表明，降低BTN3A3表達(dá)后促進(jìn)肝癌細(xì)胞系的侵襲，說明BTN3A3調(diào)控肝癌細(xì)胞系的擴(kuò)散轉(zhuǎn)移能力。降低BTN3A3表達(dá)后肝癌細(xì)胞系克隆形成能力增強(qiáng)，說明BTN3A3調(diào)控單個(gè)肝癌細(xì)胞在新的位點(diǎn)增殖的能力。本研究初步明確了減少BTN3A3的表達(dá)能夠促進(jìn)肝細(xì)胞癌的惡性進(jìn)展，有助于增加對(duì)BTN3A亞家族蛋白質(zhì)功能的了解，為發(fā)展新的高級(jí)別肝細(xì)胞癌的分子治療靶點(diǎn)提供線索。材料與方法

種人NSCLC細(xì)胞系（PC9、HCC827、NCI-H1975、QG56、1-87、 H1299、H2122、H322、H460、LK2、LK87、H23、A549、H157）進(jìn)行流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)存在EGFR突變的細(xì)胞系PD-L1表達(dá)明顯高于EGFR野生型細(xì)胞系（P=0.023），且EGFR突變型細(xì)胞系HCC827、PC-9、H1975可以檢測(cè)到EGFR高水平的磷酸化作用（表1）。為了探索EGFR通路對(duì)PD-L1表達(dá)的影響，研究者進(jìn)一步對(duì)EGFR突

兔;脾臟組織;細(xì)胞系;生物學(xué)特性;中圖分類號(hào)：$829.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1000-4440（2019）01-0130-06家兔是具有重要毛用和肉用價(jià)值的傳統(tǒng)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，在中國(guó)畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有重要地位。兔也是傳統(tǒng)的試驗(yàn)?zāi)Ｊ絼?dòng)物，與小鼠、猴、豬等試驗(yàn)動(dòng)物相比，體型適中，易操作，且生理結(jié)構(gòu)和調(diào)控機(jī)制與人類接近，尤其適用于人類心腦血管疾病等研究。RHDv（兔出血癥病毒）從爆發(fā)以來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者相繼對(duì)該病毒開展了深入研究，在病原學(xué)、診斷技術(shù)、免疫防控等多方

儀器 食管鱗癌細(xì)胞系(KYSE150細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞，中科院上海細(xì)胞庫(kù))，RPMI1640 培養(yǎng)基(Thermo scientific公司)，胎牛血清(天杭生物科技公司)，胰蛋白酶(Solarbio)，二甲基亞砜(Sigma)及75%乙醇；實(shí)驗(yàn)儀器包括超凈工作臺(tái)、CO2恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、電泳儀、流式細(xì)胞儀、超低溫冰箱、熒光定量PCR儀、平底型 96 孔培養(yǎng)板及PyroMark Q96 ID焦磷酸測(cè)序儀等。1.2細(xì)胞輻照實(shí)驗(yàn) 將存放有食管鱗

了肝細(xì)胞永生化細(xì)胞系及HCC細(xì)胞系中HBx的表達(dá)水平與RASSF1A基因表達(dá)水平之間的相關(guān)性，進(jìn)而分析HBx對(duì)RASSF1A表達(dá)抑制的可能機(jī)制以及RASSF1A基因的低表達(dá)是否受其啟動(dòng)子區(qū)甲基化的影響。1 材料與方法1.1 細(xì)胞系正常肝細(xì)胞永生化細(xì)胞系L02、Chang liver，HCC癌旁細(xì)胞系QSG-7701，HCC細(xì)胞系SMMC-7721、BEL-7405、MHCC-97H、MHCC-97L、HepG2，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HBV病毒的HCC細(xì)胞系HepG2.

界上第一個(gè)魚類細(xì)胞系——虹鱒(Oncorhynchusmykiss)性腺細(xì)胞系RTG-2,目前已報(bào)道的魚類細(xì)胞系超過280株。這些細(xì)胞系被應(yīng)用于病毒學(xué)、毒理學(xué)、生理學(xué)、腫瘤及基因工程等多個(gè)研究領(lǐng)域，近幾年魚類細(xì)胞系作為環(huán)境污染物的監(jiān)測(cè)生物得到廣泛的重視。環(huán)境污染物是指進(jìn)入環(huán)境后改變環(huán)境的正常組成和性質(zhì)，進(jìn)而直接或間接有害于人類與其他生物的物質(zhì)。近些年，隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)快速發(fā)展，大量的污染物隨廢水及地表徑流排放到水體中，使水資源環(huán)境遭受了一定的破壞[2]。進(jìn)入

胞資源中心人源細(xì)胞系中6種主要病毒的檢測(cè)楊振麗 卞曉翠 馮海涼 劉玉琴100005 北京，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院 細(xì)胞資源中心目的檢測(cè)人源細(xì)胞系中EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)、乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)、丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)、人乳頭瘤病毒(Human pappilomavirus, HPV)、人免疫缺陷病毒(Human im

楤木激素自養(yǎng)型細(xì)胞系生物學(xué)特性1)殷晴晴 宋濤 張磊 代金玲 李玉花 由香玲(東北林業(yè)大學(xué),哈爾濱,150040) (內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)) (東北林業(yè)大學(xué))以前期研究獲得的楤木激素自養(yǎng)型細(xì)胞系為研究材料，利用分光光度和高壓液相色譜(HPLC)法分析了該細(xì)胞系，即生長(zhǎng)量，3種抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD 、過氧化物酶POD、過氧化氫酶CAT)活性，細(xì)胞壁(醇不容提取物)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，細(xì)胞壁中纖維素、半纖維和總果膠的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，以及3種植物內(nèi)源激素(植物生長(zhǎng)素IAA、

法：C3和C5細(xì)胞系是來自于同一淋巴瘤細(xì)胞系的兩個(gè)亞克隆，采用CCK-8檢測(cè)2個(gè)淋巴瘤細(xì)胞系C3和C5的增殖能力；應(yīng)用常規(guī)染色體分析法檢測(cè)這些細(xì)胞系的核型；采用軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)這些細(xì)胞系的體外致瘤能力；采用Transwell小室檢測(cè)這些細(xì)胞系的侵襲轉(zhuǎn)移能力；通過小鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)這些細(xì)胞系的體內(nèi)致瘤能力。結(jié)果：兩個(gè)細(xì)胞系中C3增殖能力強(qiáng)于C5，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。核型分析結(jié)果表明，這兩個(gè)細(xì)胞系都是非整倍體核型，細(xì)胞系C3的眾數(shù)范圍是38～78，C5的

論與講座胰島β細(xì)胞系研究概況趙冬冬，楊沛霖，段佳慧，林樹梅*(沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110866)胰島具有控制能量代謝的重要作用。全球糖尿病發(fā)病率快速增加，引起了科學(xué)家對(duì)胰島細(xì)胞生物學(xué)研究的重視。然而，胰島分離困難,且費(fèi)用昂貴，胰島功能在生物及分子水平上很難獲得更加全面的認(rèn)識(shí)。過去胰島來源的細(xì)胞系由于其分化不穩(wěn)定，僅作為原代胰島細(xì)胞的替代品。如今，人們通過紫外線照射、病毒轉(zhuǎn)染等方法建立了多種胰島β細(xì)胞系，保持了很多正常胰島的關(guān)鍵功能特性，而成

療對(duì)骨肉瘤原代細(xì)胞系耐藥細(xì)胞系的影響。〔方法〕 MTT法檢測(cè)不同溫度下熱療對(duì)原代細(xì)胞系和耐藥細(xì)胞系生存率的影響；并測(cè)定43 ℃溫度作用下濃度為1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL的甲氨蝶呤(MTX)和濃度為1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL的阿霉素(ADM)對(duì)原代細(xì)胞系與耐藥細(xì)胞系生存率的影響；免疫組化檢測(cè)43 ℃熱療作用下，原代細(xì)胞系與耐藥細(xì)胞系HSP70的表達(dá)?！步Y(jié)果〕 原代細(xì)胞系與耐藥細(xì)胞系熱療后細(xì)胞生存率下降；隨著化療藥物

花奶牛耳緣組織細(xì)胞系的建立徐水林1，2，馬偉1，馬桂蘭2，馬花1，馬衛(wèi)國(guó)1，喬自林1* （1.西北民族大學(xué)甘肅省動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)研究中心，甘肅蘭州730030； 2.蘭州民海生物工程有限公司，甘肅蘭州730010）摘要：目的：通過耳緣組織細(xì)胞的分離培養(yǎng)和保存，在細(xì)胞水平上保存蘭州黑白花奶牛的種質(zhì)資源。方法：采用植塊法培養(yǎng)蘭州黑白花奶牛的耳緣組織原代細(xì)胞，經(jīng)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)后在液氮中冷凍保存，并對(duì)保存的耳緣組織細(xì)胞系進(jìn)行了復(fù)蘇活力、形態(tài)、生長(zhǎng)特性、微生物和內(nèi)、外

對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞系上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響>*賈莉婷△，張玉超，李靜，張琳琳，田遠(yuǎn)，于海洋，榮守華，邢金芳，李君芳，馬嘯天鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 鄭州 450052△女，1958年11月生，本科，教授，研究方向：臨床免疫學(xué)，E-mail：jialt@163.com關(guān)鍵詞三陰性乳腺癌；miR-200c；Slug；E-cadherin；上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化摘要目的：探討miR-200c對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞系上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響。方法：選取三陰性人乳腺癌細(xì)胞系BT549、M

dherin；細(xì)胞系，腫瘤Fund program：Natural Science Foundation of China(30700360)磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate，S1P)是細(xì)胞膜鞘磷脂的代謝產(chǎn)物，通過與S1P異三聚體G蛋白耦聯(lián)受體(S1PR)結(jié)合介導(dǎo)機(jī)體炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖遷移、血管生成等多種生理活動(dòng)，同時(shí)在多種惡性腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中具有重要作用。研究表明，當(dāng)S1P與S1PR1/S1PR3結(jié)合時(shí)，腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力提

200在人肺癌細(xì)胞系中表達(dá)的情況，以便為臨床上治療肺癌提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 材料與方法1.1 材料 肺癌細(xì)胞株 H1792、HCC2279、PC9、H1299、CALU-1、H2052、PC7、H2122、H322、SQ-5、A549、EBC-1、H157、 H1650均購(gòu)自ATCC公司。RPMI 1640培養(yǎng)基、胎牛血清均購(gòu)自Gibco公司。胰蛋白酶購(gòu)自Santa Cruz 公司。1.2 方法 對(duì)H1792等肺癌細(xì)胞株進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)的方法是：將H1

3的AR42J細(xì)胞系的建立吳敏李潔劉曉李欽芳郭曉榕湛先?！菊磕康慕⒎€(wěn)定表達(dá)增強(qiáng)型GFP(EGFP)-LC3的AR42J細(xì)胞。方法利用慢病毒過表達(dá)載體Lentiviral-EGFP-LC3包裝成慢病毒，感染大鼠胰腺腺泡細(xì)胞AR42J。以Lentiviral-EGFP感染作為陰性對(duì)照。通過倒置熒光顯微鏡觀察及流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)病毒感染效率，蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)穩(wěn)定傳代細(xì)胞株的LC3蛋白表達(dá)。用毒胡蘿卜素處理細(xì)胞建立內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)應(yīng)激的A

霉素增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞系對(duì)順鉑敏感性的機(jī)制研究△張永清1徐春玉1李銳銳1盧靜2焦坤2黃杰3周童亮4苗勁蔚1#1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院婦瘤科，北京1000262首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，北京1000693美國(guó)俄亥俄州立大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室，哥倫布2000604中日友好醫(yī)院基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室，北京100029目的研究雷帕霉素對(duì)卵巢癌細(xì)胞系順鉑敏感性的影響，以及PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路（簡(jiǎn)稱m TOR信號(hào)通路）與卵巢癌細(xì)胞系順鉑耐藥的相關(guān)性；初探雷

阿霉素對(duì)乳腺癌細(xì)胞系的作用效應(yīng)王?，|1， 馬方婧2， 劉 銘1， 桑 偉1， 張 巍1(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院1病理科，2乳腺科， 烏魯木齊 830054)目的 探討表阿霉素對(duì)不同乳腺癌細(xì)胞系的作用效應(yīng)。方法 應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)并分析表阿霉素作用于乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、SKBR3、 MDA-MB-231及MDA-MB-468后免疫原性標(biāo)志物的表達(dá)以及不同乳腺癌細(xì)胞系死亡過程中免疫原性死亡的能力；采用CCK-8方法觀察表阿霉素對(duì)不同乳腺癌細(xì)胞系增殖的抑制

VCAR-3 細(xì)胞系腫瘤球形成，并探討其作用的潛在機(jī)制是否涉及下調(diào)干細(xì)胞標(biāo)志物CD44 蛋白表達(dá)。1 材料與方法1.1 藥品和試劑CAS 由湖南師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院曹建國(guó)教授惠贈(zèng)，經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定純度為0. 958。鼠抗人CD44 單克隆抗體為美國(guó)Cell signaling 公司產(chǎn)品;鼠抗人β-actin 單克隆抗體系美國(guó)Sigma 公司生產(chǎn)。1.2 細(xì)胞系與成球培養(yǎng)人卵巢癌OVCAR-3 細(xì)胞系細(xì)胞購(gòu)自上海中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)(中國(guó)上海市)。參照文獻(xiàn)［6］的

，獲得相應(yīng)的T細(xì)胞系。在科研過程及臨床的免疫治療過程中，經(jīng)常需要將分離的T細(xì)胞或獲得的T細(xì)胞系進(jìn)行凍存。為了研究細(xì)胞凍存后HPV特異性的T細(xì)胞系細(xì)胞存活率及功能，應(yīng)用包含10%二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)、90%小牛血清的凍存液凍存6個(gè)T細(xì)胞系細(xì)胞，液氮中凍存不同時(shí)間后復(fù)蘇，臺(tái)盼藍(lán)(trypan blue)染色法檢測(cè)復(fù)蘇后T細(xì)胞系細(xì)胞的存活率，ELISPOT檢測(cè)復(fù)蘇后T細(xì)胞系細(xì)胞的功能，以利于更好地鑒定建系的細(xì)胞系及其推廣應(yīng)

[1]。胰腺癌細(xì)胞系是用于了解胰腺癌生物學(xué)特征，闡明其發(fā)生、發(fā)展規(guī)律并尋找有效診治方法的重要實(shí)驗(yàn)材料。自Dobrynin等[2]1963年建立了第一個(gè)胰腺癌細(xì)胞系CAPA以來，美國(guó)、日本、中國(guó)、德國(guó)及以色列等國(guó)的科學(xué)家已相繼建立了近百個(gè)人胰腺癌細(xì)胞系供科研使用，其中大多數(shù)為PDAC細(xì)胞系。本文就PDAC細(xì)胞系的建立及其在胰腺癌研究方面取得的一些進(jìn)展做一綜述。一、PDAC細(xì)胞系的建立1．PDAC細(xì)胞系建立方法：PDAC細(xì)胞系的建立方法主要包括：(1)常規(guī)原代

S1在人乳腺癌細(xì)胞系MDA MB-231和MCF-7中的表達(dá)研究甚少．本文通過分子生物學(xué)方法研究BRMS1在人乳腺癌細(xì)胞系MDA MB-231和MCF-7中的表達(dá)，旨在發(fā)現(xiàn)BRMS1在人乳腺癌細(xì)胞系的受體基因序列，為研究者進(jìn)一步研究BRMS1在人乳腺癌細(xì)胞系MDA MB-231和MCF-7中的生物學(xué)功能提供依據(jù)，為臨床醫(yī)師從基因?qū)W角度對(duì)人乳腺癌進(jìn)行治療及預(yù)防其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移提供參考．1 材料和方法1．1 材料細(xì)胞系:人乳腺癌細(xì)胞系:MDA MB-231和MCF-

內(nèi)皮細(xì)胞特點(diǎn)的細(xì)胞系。然而，要求理想的永生細(xì)胞系顯示原代細(xì)胞的所有特性對(duì)細(xì)胞本身就是矛盾的。獲得永生性的細(xì)胞即使不是發(fā)生了惡性轉(zhuǎn)變，也是一種非生理性變化的跡象。尋找內(nèi)皮細(xì)胞系的目的就是要找到表現(xiàn)盡可能多的原代內(nèi)皮細(xì)胞特點(diǎn)而盡可能少的腫瘤細(xì)胞特性。尋找內(nèi)皮細(xì)胞系時(shí)要避免出現(xiàn)退行性變和腫瘤特點(diǎn)如非整倍和不穩(wěn)定染色體組、軟瓊脂培養(yǎng)基生長(zhǎng)和對(duì)裸鼠的致瘤性。將內(nèi)皮細(xì)胞用于系列實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們必須確定哪些特性對(duì)證明實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的有效性很重要，哪些特性有利于簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟。比如說

綜 述·人喉癌細(xì)胞系的建系研究進(jìn)展△湯瑋晶 陶磊細(xì)胞系的建立可以詳細(xì)分析腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)、形態(tài)學(xué)、抗原性和細(xì)胞原性的特征。喉癌是頭頸部最常見的惡性腫瘤之一，病理分型以鱗狀細(xì)胞癌為主。本文就細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞系和細(xì)胞株的建立和保存，腫瘤細(xì)胞的體外培養(yǎng)、人喉癌細(xì)胞系的建系情況、建系方法、細(xì)胞系的主要特性和細(xì)胞系培養(yǎng)過程中存在的問題進(jìn)行綜述。1 細(xì)胞系建立的研究背景美國(guó)動(dòng)物學(xué)家Ross Granville Harrison于1907年首次成功地在體外培養(yǎng)基(凝結(jié)的淋

組特征)以及癌細(xì)胞系百科全書(包含用于研究工作的大約1000個(gè)癌細(xì)胞系的相似數(shù)據(jù))，對(duì)這些數(shù)據(jù)彼此之間進(jìn)行了匹配，并根據(jù)大約50個(gè)卵巢癌細(xì)胞系與來自“高級(jí)別漿液性卵巢癌(High grade serous ovarian carcinoma，HGSOC)”患者的臨床樣本的基因組相似性對(duì)它們進(jìn)行了排序。該團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)最流行的卵巢癌細(xì)胞系（占所有已發(fā)表的關(guān)于HGSOC的研究論文的60%）并不是非常像HGSOC，而12個(gè)最適合的卵巢癌細(xì)胞系僅用在1%的已發(fā)表研

基因在卵巢癌細(xì)胞系中CPG 位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)及該基因的表達(dá)情況，為尋找卵巢癌基因治療的靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。1 材料與方法1.1 主要試劑:DNA 提取試劑盒、PCR 試劑盒和RT-PCR 試劑盒(Promega 公司);McCOY's 5A 培養(yǎng)基(Sigma 公司);Trizol 試劑(Invitrogen 公司);DMEM/HamF12 培養(yǎng)基(Thermo公司);胎牛血清(Hyclone 公司);兔抗人TSLC1 單克隆杭體(Abcam 公司);引物

腺癌、膀胱癌等細(xì)胞系中明顯激活p21的表達(dá)，并抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)凋亡［2，4］。本研究旨在篩選更多對(duì)dsP21－322起效應(yīng)的新細(xì)胞系，同時(shí)在p21 被激活時(shí)檢測(cè)其上游p53 的表達(dá)，對(duì)dsP21－322介導(dǎo)p21 的上調(diào)是否依賴p53 進(jìn)行初步研究。1 材料與方法1.1 材料與試劑化學(xué)合成的dsP21－322及dsControl（廣州RiboBio公司），人肺腺癌細(xì)胞系NCI－H1299、人宮頸癌細(xì)胞系HeLa、人骨肉瘤細(xì)胞系U2－OS、人腎上皮細(xì)胞

10）MDCK細(xì)胞系（Madin-Darby canine kidney cells）是從犬腎組織中分離培養(yǎng)獲得的上皮樣貼壁細(xì)胞，該細(xì)胞系可連續(xù)傳代[1]。MDCK細(xì)胞系可以用于多種病毒的繁殖和純化，如禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）、呼腸孤病毒（Reovius）、腺病毒（Adenovirus）、犬細(xì)小病毒（Canine parvovirus，CPV）、貓粒細(xì)胞缺乏癥病毒（Feline panleukopenia virus

腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞系中表達(dá)下調(diào)。1 材料與方法1.1 材料 乳腺癌細(xì)胞系T47D、MCF7、MDA-MB-453、MDA-MB-231均購(gòu)自武漢大學(xué)典型培養(yǎng)物典藏中心。質(zhì)粒pcDNA3.1-NRDG2為本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建并測(cè)序正確。anti-NDRG2單克隆抗體購(gòu)自cell signaling公司，anti-beta actin及HRPIgG抗體購(gòu)自博士德公司。1.2 方法 Western blot：將胰蛋白酶消化的5×106個(gè)細(xì)胞用PBS洗2遍，裂解0.5 h

性肽對(duì)人膽囊癌細(xì)胞系GBC-SD細(xì)胞作用前后的基因表達(dá)譜，篩選與抗癌活性肽作用相關(guān)的基因表達(dá)改變。方法 將1152條人類全長(zhǎng)基因的PCR產(chǎn)物按微矩陣排列點(diǎn)樣于特殊處理的玻片上制備成表達(dá)譜芯片；按一步法抽提抗癌活性肽作用前后體外培養(yǎng)的膽囊癌細(xì)胞的RNA并純化mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄用兩種熒光Cy3-dUTP和Cy5-dUTP標(biāo)記對(duì)照和實(shí)驗(yàn)組膽囊癌細(xì)胞cDNA，制成cDNA探針并與表達(dá)譜芯片雜交，用ScanArray4000掃描儀掃描芯片上兩種熒光信號(hào)，計(jì)算機(jī)分析