喬佳君，張雨陽(yáng)，石京平，夏仲元

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029；2.中日友好醫(yī)院中醫(yī)外科，北京 100029）

橋本氏甲狀腺炎（hashimoto's thyroiditis，HT）以抗甲狀腺抗體陽(yáng)性為臨床主要診斷標(biāo)準(zhǔn)，中國(guó)成年人群甲狀腺抗體陽(yáng)性的患病率為14.19%，位居甲狀腺疾病第2 位［1］。本病易合并甲狀腺功能異常，尤其是引發(fā)甲減的主要原因，同時(shí)，自身抗體升高與不孕或女性不良妊娠結(jié)局相關(guān)。其發(fā)病機(jī)制尚不清楚，其中自身免疫因素占據(jù)主要因素之一，Th17-Treg 細(xì)胞平衡失調(diào)是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)，而IL-38 作為白介素1 家族成員，可以發(fā)揮抗炎特性，抑制Th17 成熟，調(diào)節(jié)Th17-Treg 平衡［2］?，F(xiàn)有研究表明硒元素的補(bǔ)充如服用硒酵母片能夠降低抗甲狀腺抗體，減輕甲狀腺損害，可作為HT 的輔助療法［3］。筆者認(rèn)為HT 發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，以扶正消癭為主要治療原則［4］，夏仲元教授自擬的扶正消癭湯是常用于HT 臨床治療的經(jīng)驗(yàn)方。本實(shí)驗(yàn)以扶正消癭湯作為實(shí)驗(yàn)組用藥，通過(guò)硒酵母片陽(yáng)性對(duì)照，觀察扶正消癭湯降低EAT 大鼠抗甲狀腺抗體、改善甲狀腺功能和組織病理?yè)p傷的作用，以及對(duì)IL-38 水平和Th17-Treg 平衡的影響，以期為扶正消癭湯臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

40 只SPF 級(jí)雌性6～8 周齡的Sprague-Dawley大鼠，體重160～180 g，購(gòu)于斯貝福（SCXK（京）2019-0010）；在中日醫(yī)院臨研所SPF 級(jí)小動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室（符合國(guó)標(biāo)GB14925-2010）中飼養(yǎng)。

1.2 倫理審查

本實(shí)驗(yàn)已經(jīng)通過(guò)中日醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理（編號(hào)：zryhyy21-21-03-06）。

1.3 中藥制備

扶正消癭湯組成為：生黃芪20 g、穿山龍15 g、炒白術(shù)15 g、法半夏10 g、夏枯草12 g、當(dāng)歸10 g、玄參15 g、土貝母15 g、炙甘草3 g 等，生藥材購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)北京華邈藥業(yè)有限公司及北京美康堂醫(yī)藥科技有限公司，將成人設(shè)為60 kg 后按照6.2 的大鼠與人體重劑量折算系數(shù)折算生藥量，上述中藥飲片，煎煮2 次，濾過(guò)后合并，濃縮為生藥量1.715 g/mL的藥液，高溫高壓滅菌后分裝，冷藏保存。

1.4 藥物與試劑

硒酵母片（商品名：西維爾，批號(hào)：210204）、豬甲狀腺球蛋白（PTg，天府新區(qū)華陽(yáng)正龍生化制品研究室，批號(hào)：202102）；完全弗氏佐劑（CFA，美國(guó)Sigma，批號(hào)：SLBW7430）、不完全弗氏佐劑（IFA，美國(guó)Sigma，批號(hào)：SLCB8702）；碘化鈉（NaI，北京酷來(lái)搏科技有限公司，批號(hào)：CS30143404）；甲狀腺球蛋白抗體（thyroglobulinantibody，TGAb）、游離三碘甲狀腺原氨酸（free triiodothyronine，F(xiàn)T3）、三碘甲狀腺原氨酸（triiodothyronine，T3）、游離甲狀腺素（free thyroxine，F(xiàn)T4）、甲狀腺素（thyroxine，T4）、促甲狀腺激素（thyroid-stimulating hormone，TSH）、甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體（thyroid peroxidaseantibody，TPOAb）、白細(xì)胞介素38（interleukin-38，IL-38）酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒（江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司，批號(hào)分別為：20210922-0582、20210922-70747、20210922-20356、20210922-0584、20210922-0573、20210922-20215、20210922-0519、220415-71280R1）；Pacific Blue anti-rat CD45 Antibody （Biolegend，USA，Cat# 202225）；FITC anti-rat CD3 Antibody（Biolegend，USA，Cat# 201403）；CD8 PerCP（Biolegend，USA，Cat# 201712）；PE-Cy7 Mouse Anti-Rat CD4（BD，USA，Cat#561578）；CD25 PE（Thermo Fisher，USA，Cat#12-0390-82）；FOXP3 APC（Thermo Fisher，USA，Cat#17-5773-82）；Rat IgG2a（Thermo Fisher，USA，Cat#12-4321-80/17-4321-81）；IL-17A PE（Thermo Fisher，USA，Cat#12-7177-81）。

1.5 儀器

正置光學(xué)顯微鏡BX-53（Olympus 公司）；酶標(biāo)分析儀RT-6100（Rayto 公司），；37 ℃、5%CO2孵箱（Thermo Fisher 公司）；流式細(xì)胞儀FACS（Becton Dickinson 公司）。

1.6 方法

1.6.1 EAT 大鼠模型的建立 隨機(jī)數(shù)字表法取10只SD 大鼠作為空白組，其余大鼠通過(guò)給予含0.05% NaI 的高碘飲水，以及弗氏佐劑與PTg 混合免疫注射，分為初次免疫1 周和加強(qiáng)免疫6 周，每次每只大鼠注射含PTg 100 μg，造EAT 模型，成模后隨機(jī)平均分為3 組：模型組、硒酵母片組、扶正消癭湯組。具體造模方法參照本課題組前期研究［5，6］?？瞻捉M同時(shí)間點(diǎn)則予普通動(dòng)物飲用水，每次給予PBS 緩沖液0.2 mL 皮下注射。造模后大鼠血清中TGAb、TPOAb 升高，則符合疾病臨床診斷。甲狀腺組織內(nèi)有淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞的浸潤(rùn)，膠質(zhì)減少，濾泡縮小，甚至破壞，以及后期出現(xiàn)纖維化改變等符合疾病病理診斷［7］。

1.6.2 分組及給藥 造模成功后，扶正消癭湯組大鼠給予10 mL·kg-1·d-1扶正消癭湯；硒酵母片組給予20.67 μg·kg-1·d-1硒 酵 母 片［按 成 人 劑 量3.33 μg·kg-1·d-1計(jì)算］；空白組與模型組大鼠給予10 mL·kg-1·d-1雙蒸水灌胃。測(cè)體重根據(jù)體重調(diào)整給藥劑量，療程為2個(gè)月，末次給藥后各組大鼠禁食12 h后取材。

1.6.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.6.3.1 抗甲狀腺抗體TPOAb、TGAb 檢測(cè) 取材當(dāng)天，各組大鼠禁食禁水，腹腔注射3%戊巴比妥鈉（0.1 mL/100 g）麻醉，每只大鼠通過(guò)腹主動(dòng)脈采血，收集5 mL 全血，離心（3 000 r/min）10 min 后獲得血清。遵從大鼠TPOAb、TGAb 的ELISA 試劑盒說(shuō)明書(shū)分別檢測(cè)TPOAb、TGAb 水平。

1.6.3.2 甲狀腺功能及IL-38 檢測(cè) 同上述方法獲得大鼠血清，遵從大鼠T3、FT3、T4、FT4、TSH 和IL-38 的ELISA 試劑盒說(shuō)明書(shū)分別 檢測(cè)T3、FT3、T4、FT4、TSH 和IL-38 濃度。

1.6.3.3 組織病理形態(tài)觀察 大鼠甲狀腺取材稱(chēng)重后用10%的中性福爾馬林溶液固定48 h 后進(jìn)行石蠟包埋，連續(xù)切片4 μm 厚，予蘇木精和伊紅進(jìn)行染色，脫水透明后用中性樹(shù)膠封片。于電子顯微鏡下觀察大鼠甲狀腺組織，包括上皮細(xì)胞和濾泡的大小形態(tài)、淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)程度、間質(zhì)的纖維化程度。光鏡下觀察病理變化分級(jí)指數(shù)：正常甲狀腺組織計(jì)為0 分；局灶性甲狀腺炎計(jì)為1 分；不超過(guò)40%的嚴(yán)重甲狀腺炎計(jì)為2 分；40%到80%的彌漫性甲狀腺炎計(jì)為3 分；超過(guò)80% 的彌漫性甲狀腺炎計(jì)為4 分［8］。

1.6.3.4 Th17 及Treg 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 每組取5只大鼠脾臟，制備脾細(xì)胞懸液，用篩子過(guò)濾，加入相應(yīng)染色抗體，孵育后上機(jī)檢測(cè)。其中CD4+IL-17A+用于確定Th17；CD4+CD25+FoxP3+用于確定Treg。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 扶正消癭湯對(duì)EAT 大鼠抗甲狀腺抗體的作用

模型組TPOAb 和TGAb 水平顯著高于空白組（P＜0.05），說(shuō)明模型成功。硒酵母片組與扶正消癭湯組的TPOAb 和TGAb 水平明顯低于模型組（P＜0.05）。但硒酵母片組與扶正消癭湯組之間的TPOAb 和TGAb 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 治療組對(duì)EAT 模型大鼠TPOAb 和TGAb 水平的影響（IU/mL,n=10，±s）Tab 1 Effect of the treatment group on TPOAb and TGAb levels of EAT model rats（IU/mL,n=10，±s）

表1 治療組對(duì)EAT 模型大鼠TPOAb 和TGAb 水平的影響（IU/mL,n=10，±s）Tab 1 Effect of the treatment group on TPOAb and TGAb levels of EAT model rats（IU/mL,n=10，±s）

注：對(duì)比空白組，*P＜0.05；對(duì)比模型組，△P＜0.05。

TGAb 130.13±26.69 204.32±34.12*162.34±29.84*△173.98±28.17*△9.966 0.000組別空白組模型組硒酵母片組扶正消癭湯組F P TPOAb 11.20±4.13 22.24±5.19*15.98±3.05*△15.67±4.39*△10.848 0.000

2.2 扶正消癭湯對(duì)EAT 大鼠甲狀腺組織病理的影響

空白組甲狀腺濾泡排列緊密且規(guī)則，腔內(nèi)均勻分布著淡紅色膠質(zhì)，上皮細(xì)胞呈低柱狀，未見(jiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。小葉間有薄壁纖維組織間隔，未見(jiàn)纖維化（圖1A）。模型組甲狀腺濾泡排列紊亂、其內(nèi)膠質(zhì)不均勻，部分濾泡破壞，可見(jiàn)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，上皮細(xì)胞有的脫落到濾泡腔內(nèi)，小葉間隔略有增寬（圖1B），提示造模成功。硒酵母組濾泡內(nèi)膠質(zhì)含量較正常組少，可見(jiàn)部分濾泡結(jié)構(gòu)破壞，上皮細(xì)胞有的脫落到濾泡腔內(nèi)，可見(jiàn)少量淋巴細(xì)胞分布，小葉間隔增寬，纖維組織增生，與模型組對(duì)比其淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)減少（圖1C）。扶正消癭湯組甲狀腺濾泡形態(tài)基本規(guī)則，腔內(nèi)膠質(zhì)分布較均勻，可見(jiàn)散在淋巴細(xì)胞，與模型組對(duì)比其濾泡破壞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)均有改善（圖1D）。觀察各組大鼠甲狀腺組織病理分級(jí)，發(fā)現(xiàn)與空白組比較，模型組病理分級(jí)更高（P＜0.05）。與模型組比較，扶正消癭湯組病理分級(jí)降低（P＜0.05）。同時(shí)扶正消癭湯組病理分級(jí)較硒酵母組更低（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

圖1 大鼠甲狀腺組織HE 染色（×200 倍）Fig 1 HE staining of rat thyroid tissue（200×）

表2 治療組對(duì)EAT 模型大鼠甲狀腺病理分級(jí)的影響（n=10，±s）Tab 2 Effect of the treatment group on thyroid pathological grade in EAT model rats（n=10，±s）

表2 治療組對(duì)EAT 模型大鼠甲狀腺病理分級(jí)的影響（n=10，±s）Tab 2 Effect of the treatment group on thyroid pathological grade in EAT model rats（n=10，±s）

注：對(duì)比空白組，*P＜0.05；對(duì)比模型組，△P＜0.05；對(duì)比硒酵母組，#P＜0.05。

甲狀腺病理分級(jí)0.50±0.55 2.33±0.82*2.33±0.52 1.17±0.98△#14.860 0.002組別空白組模型組硒酵母片組扶正消癭湯組FP

2.3 扶正消癭湯對(duì)EAT 大鼠甲狀腺功能的影響

模型組T3、FT3、T4、FT4 水平均高于空白組（P＜0.05）；而兩組TSH 水平比較差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。硒酵母片組與扶正消癭湯組的T4水平明顯低于模型組（P＜0.05）。但硒酵母片組、扶正消癭湯組分別與模型組之間的T3、FT3、FT4 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 治療組對(duì)EAT 模型大鼠甲狀腺功能的影響（n=10，±s）Tab 3 Effect of the treatment group on thyroid function of EAT model rats（n=10，±s）

表3 治療組對(duì)EAT 模型大鼠甲狀腺功能的影響（n=10，±s）Tab 3 Effect of the treatment group on thyroid function of EAT model rats（n=10，±s）

注：對(duì)比空白組，*P＜0.05；對(duì)比模型組，△P＜0.05。

組別空白組模型組硒酵母片組扶正消癭湯組TSH(mU/L)20.37±2.96 26.99±3.79 24.48±7.28 23.20±6.52 7.030 0.071 FP T3(ng/mL)5.78±1.46 10.18±1.91*8.99±2.75*8.06±1.98*7.432 0.001 T4(ng/mL)177.38±72.03 351.98±82.78*232.29±104.34△213.78±81.74△7.454 0.001 FT3(pmol/L)3.64±1.81 10.75±3.74*9.44±2.99*8.45±2.98*9.988 0.000 FT4(pmol/L)20.08±5.90 33.79±8.90*28.03±7.73*31.70±5.86*6.492 0.001

2.4 扶正消癭湯對(duì)EAT 模型大鼠IL-38 及Th17-Treg 的影響

與空白組比較，模型組IL-38 水平降低，Th17%升高，Th17/Treg 比值升高（P＜0.05）。硒酵母片組與扶正消癭湯組的IL-38 水平高于模型組（P＜0.05）。用藥干預(yù)的兩組Th17%和Th17/Treg 均低于模型組，但差異尚無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。各組間Treg%差異比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表4。

表4 治療組對(duì)EAT 模型大鼠IL-38 及Th17/Treg 的影響（n=5，±s）Tab 4 Effect of the treatment group on IL-38 and Th17/Treg in rats with EAT model（n=5，±s）

表4 治療組對(duì)EAT 模型大鼠IL-38 及Th17/Treg 的影響（n=5，±s）Tab 4 Effect of the treatment group on IL-38 and Th17/Treg in rats with EAT model（n=5，±s）

注：對(duì)比空白組，*P＜0.05；對(duì)比模型組，△P＜0.05。

Th17/Treg 0.32±0.09 0.63±0.08*0.56±0.20 0.56±0.30 2.453 0.101組別空白組模型組硒酵母片組扶正消癭湯組FP IL-38(pg/mL)143.24±13.07 73.11±15.94*115.49±25.10*△127.07±20.93△12.049 0.000 Th17(%)4.70±1.16 9.46±2.89*6.45±2.84 6.94±3.11 2.817 0.072 Treg(%)13.55±1.48 15.36±0.62 14.63±2.93 15.50±2.52 0.913 0.457

3 討論

Th17 淋巴細(xì)胞主要參與誘導(dǎo)趨化因子和炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，發(fā)揮促炎作用，故引起自身免疫病［9］；而Treg 細(xì)胞可以通過(guò)維持自身免疫耐受和控制自身活化的CD4+T 細(xì)胞增殖來(lái)抑制自身免疫病的發(fā)展［10］。Th17 細(xì)胞作用增強(qiáng)，Treg 細(xì)胞功能下降，可使B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生大量抗體，抗體依賴(lài)性介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用、補(bǔ)體系統(tǒng)的激活及自然殺傷細(xì)胞（NK 細(xì)胞）介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用共同導(dǎo)致淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)甲狀腺，使甲狀腺濾泡結(jié)構(gòu)受到破壞，導(dǎo)致HT 的發(fā)生［11］。甲狀腺自身抗體水平與HT 患者抑郁、生活質(zhì)量降低等癥狀相關(guān)，但西醫(yī)治療的主要目的是控制甲狀腺功能異常，恢復(fù)甲狀腺功能后患者仍有癥狀［12］。而中醫(yī)治療近年來(lái)大量臨床研究發(fā)現(xiàn)在降低HT 抗甲狀腺抗體、改善臨床癥狀、延緩病情發(fā)展等方面均有較好的臨床療效［13］，現(xiàn)代醫(yī)家多從肝、脾、腎論治，散結(jié)以化瘀、化痰、軟堅(jiān)為法，本實(shí)驗(yàn)首次以健脾扶正配合化痰消癭為基本大法干預(yù)EAT。已有部分研究證明中藥方劑可調(diào)節(jié)自身免疫性甲狀腺炎Th17-Treg 細(xì)胞平衡，如益氣化痰活血方可增強(qiáng)Th1、Th2、Treg 細(xì)胞對(duì)Th17 細(xì)胞的免疫抑制作用［14］，芪蠣消癭湯則可調(diào)控IL-23/IL-17 炎癥軸［15］。此外，陽(yáng)和湯［16］、消癭合劑［17］、軟堅(jiān)消癭顆粒［18］等均通過(guò)影響IL-6，IL-8，IL-10，IL-17 及TNFα 等相關(guān)細(xì)胞因子，調(diào)控影響Th17-Treg 細(xì)胞分化的Foxp3 和RORγt 基因表達(dá)。

HT 因其甲狀腺腫大為主要臨床癥狀，屬于中醫(yī)“癭病”范疇，《濟(jì)生方·癭瘤論治》和《外科正宗·癭瘤門(mén)》中均有言癭瘤者因氣凝瘀血痰滯而成。本課題組認(rèn)為痰-氣-血凝滯于頸前而成癭病，主要源于臟腑功能失調(diào)，而脾為氣血生化之源，“脾氣虛則四肢不用，五臟不安”，故從脾論治是關(guān)鍵，當(dāng)健脾益氣以扶正治其本?！鞍俨〗杂商底魉睢保±硪蛩貏t以痰為首，凝結(jié)于頸前兩側(cè)，故出現(xiàn)甲狀腺腫大、結(jié)節(jié)，凝滯于周身則出現(xiàn)乏力氣短、畏寒怕冷等癥，故化痰散結(jié)以消癭治其標(biāo)［4］。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)中益氣顆粒對(duì)改善HT 有良好的療效［5，19］，而扶正消癭湯以補(bǔ)中益氣湯合消瘰丸為底方加減，在健脾的基礎(chǔ)上增強(qiáng)了化痰消癭散結(jié)之功，對(duì)于臨床改善HT 患者甲狀腺腫大等臨床癥狀具有更突出的療效［20］。本方以生黃芪為君，黨參、炒白術(shù)為臣，增強(qiáng)黃芪的藥力，共奏補(bǔ)中益氣之功，佐以玄參、生牡蠣、土貝母化痰消癭散結(jié)，陳皮、法半夏理氣行滯，補(bǔ)氣防壅，兼化痰散結(jié)，香附、當(dāng)歸理氣解郁，養(yǎng)血和營(yíng)，夏枯草消痰散結(jié)消腫，穿山龍活血除濕通絡(luò)。炙甘草健脾益氣，調(diào)和諸藥為佐使。經(jīng)現(xiàn)代藥理學(xué)研究扶正消癭湯組成中黃芪、白術(shù)、黨參、陳皮、夏枯草、生牡蠣、當(dāng)歸、穿山龍、玄參、土貝母、炙甘草等藥物都具有調(diào)節(jié)免疫作用［21，22］。本研究通過(guò)高碘飲水聯(lián)合免疫注射法造模，并通過(guò)血清抗體和甲狀腺病理確定造模成功，結(jié)果顯示，扶正消癭湯可以降低EAT 模型大鼠抗甲狀腺抗體水平（包括TPOAb、TGAb），且治療作用與硒酵母片相似。同時(shí)該方可以改善病變大鼠甲狀腺組織的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和濾泡破壞程度，通過(guò)病理分級(jí)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)其療效優(yōu)于硒酵母片，表明扶正消癭湯對(duì)于HT 患者有積極作用。

此外，本研究通過(guò)對(duì)EAT 大鼠模型的甲狀腺功能檢測(cè)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)EAT 大鼠成模后T3、T4、FT3、FT4 水平明顯高于空白組，但TSH 水平組間比較并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，處于甲狀腺功能亢進(jìn)期，相當(dāng)于HT早期，其甲亢可能源于甲狀腺濾泡受淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)破壞后，甲狀腺激素釋放入血所致。唐偉等［23］研究亦發(fā)現(xiàn)EAT 模型組FT3，F(xiàn)T4 均較空白組顯著升高（P＜0.05），而TSH 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而姚婷［24］、俞靈鶯等［25］研究結(jié)果中EAT 模型組TSH 水平高于空白組（P＜0.05），侯麗萍等［26］研究結(jié)果中EAT 模型組FT3、FT4 和TSH 水平都高于空白組（P＜0.05），亦可能由于外源性甲狀腺球蛋白免疫的造模方式導(dǎo)致的FT3、FT4 水平與TSH水平同方向改變，但由于各文獻(xiàn)中EAT 大鼠的觀察時(shí)限均1～3 個(gè)月，未跟蹤長(zhǎng)期甲狀腺功能的改變，具體原因有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。本研究結(jié)果中扶正消癭湯能夠降低模型大鼠甲狀腺激素T4 水平，但對(duì)于FT3、FT4、T3 的降低作用尚無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。既往研究發(fā)現(xiàn)臨床上甲狀腺功能亢進(jìn)患者常表現(xiàn)為心肝火旺證［27］，心肝陰虛證［28］等。以健脾益氣，消癭散結(jié)為主要治法的扶正消癭湯既往主要以甲狀腺功能正常期、甲減期為主，是否能改善臨床HT合并甲亢患者的甲狀腺功能狀態(tài)仍需進(jìn)一步臨床研究。

研究發(fā)現(xiàn)IL-38 在慢性炎癥性疾病中常表達(dá)異常［29］，Xu 等［30］發(fā)現(xiàn)與健康對(duì)照組相比，HT 患者的IL-38 濃度降低，本研究亦發(fā)現(xiàn)模型組大鼠IL-38 水平低于空白組（P＜0.05），藥物治療后IL-38 水平升高（P＜0.05）。IL-38 可通過(guò)與IL-1 受體1、IL-36 受體和IL-1 受體10 等潛在受體結(jié)合發(fā)揮抗炎作用，其中IL-38 主要功能之一是抑制與Th17 細(xì)胞因子相關(guān)的反應(yīng)的誘導(dǎo)［31］。既往文獻(xiàn)顯示HT 患者甲狀腺組織和/或外周血中有異常高水平的Th17 細(xì)胞和與Th17 相關(guān)的促炎細(xì)胞因子［32］。本研究發(fā)現(xiàn)模型組Th17%和Th17/Treg 比值均較空白組升高，符合既往研究。硒酵母與扶正消癭湯治療組Th17%和Th17/Treg 比值較模型組降低，但差異尚無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。故扶正消癭湯可能通過(guò)增加IL-38 水平進(jìn)而抑制Th17 分化及相關(guān)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，改善HT 病情。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示扶正消癭湯可降低EAT 模型大鼠抗甲狀腺抗體水平，修復(fù)和減輕甲狀腺組織濾泡破壞與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，其可能的作用機(jī)制為調(diào)節(jié)IL-38 水平進(jìn)而抑制Th17 相關(guān)炎癥反應(yīng)，為臨床應(yīng)用本方治療HT 提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，未來(lái)可進(jìn)一步探究具體作用通路，為從脾論治HT 提供新的靶點(diǎn)和研究方向。

作者貢獻(xiàn)度說(shuō)明：

喬佳君：負(fù)責(zé)共同完成實(shí)驗(yàn)、論文書(shū)寫(xiě)、數(shù)據(jù)分析；張雨陽(yáng)、石京平：負(fù)責(zé)共同完成實(shí)驗(yàn)及文章核對(duì)等工作；夏仲元：負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)、論文指導(dǎo)。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。