邱雪婷，胡羽杰，2，張紫晨，王 敏，孫 敏*

1南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，江蘇 南京 210029；2無錫市梁溪區(qū)南禪寺街道社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心全科，江蘇 無錫 214000

半乳糖凝集素?3（galectin?3，Gal?3）廣泛存在于人體各組織中，參與細(xì)胞生長、凋亡、炎癥反應(yīng)等多種生物學(xué)過程［1］。從已有研究來看，Gal?3介導(dǎo)了巨噬細(xì)胞分化、泡沫細(xì)胞形成、血管內(nèi)皮功能障礙、血管平滑肌增殖遷徙從而促進(jìn)動脈粥樣硬化的發(fā)生［2］。頸動脈粥樣硬化（carotid atherosclerosis，CAS）作為動脈粥樣硬化在局部血管的表現(xiàn)，其持續(xù)發(fā)展是缺血性腦卒中的重要原因，如何及早預(yù)測CAS的發(fā)展對預(yù)防缺血性腦卒中具有重要價值?，F(xiàn)有的超聲成像技術(shù)可以理想地量化頸動脈內(nèi)膜中層厚度（ca?rotid intima?media thickness，cIMT）從而達(dá)到檢測CAS的目的［3］。本研究分析了中老年社區(qū)人群血清Gal?3水平，并通過頸動脈超聲檢測了受試者2年后的CAS 情況，初步探究Gal?3 對CAS 發(fā)展的預(yù)測價值，為篩選CAS 發(fā)生發(fā)展的預(yù)測因子，及時預(yù)防腦血管疾病提供參考數(shù)據(jù)。

1 對象和方法

1.1 對象

收集2017年9月—2018年3月在無錫市南禪寺衛(wèi)生服務(wù)中心體檢人群共95例受試者的一般資料及臨床生化指標(biāo)，并于2020年對受試者進(jìn)行頸動脈超聲檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①使用利尿劑或糖皮質(zhì)激素的患者；②患有甲亢、慢性胰腺炎等影響血糖的疾病；③患有嚴(yán)重心功能不全和既往有心肌梗死病史；④合并有肝腎功能不全、腫瘤或重癥感染者；⑤顯著影響cIMT的相關(guān)疾病。診斷標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病診斷采用WHO1999年診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究納入的2型糖尿?。╰ype 2 diabe?tes，T2DM）患者均為首次確診糖尿病患者。

本研究通過南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院的倫理委員會批準(zhǔn)（倫審號：2014?SR?095），并獲得了所有受試者的知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 生物學(xué)指標(biāo)檢測

采集受試者的空腹靜脈血，3 000 r/min 離心15 min 后分裝保存于-70°冰箱。使用人血清Gal?3酶聯(lián)免疫試劑盒檢測樣本Gal?3 水平（DGAL30，R&D公司，美國），使用葡萄糖氧化酶法試劑盒檢測樣本血糖水平（GL8526，上海執(zhí)誠生物科技有限公司），使用高效液相色譜法糖化血紅蛋白試劑盒檢測樣本糖化血紅蛋白（21070，上海華臣生物試劑有限公司），使用電化學(xué)發(fā)光法C肽檢測試劑盒檢測C肽（03184897190），使用胰島素檢測電化學(xué)發(fā)光法試劑盒檢測空腹胰島素（12017547122）（Roche Diag?nostics GmbH，瑞士），其余生化指標(biāo)使用羅氏全自動化學(xué)發(fā)光分析儀e602完成檢測。

1.2.2 頸動脈超聲檢測

超聲檢查使用彩色多普勒超聲系統(tǒng)（DC?70Exp，深圳邁瑞生物電子有限公司），受試者取仰臥位，探頭頻率5 MHz，測量雙側(cè)cIMT，而后依據(jù)其頸動脈超聲結(jié)果判斷是否患CAS。根據(jù)2009 年血管超聲檢查指南［4］，CAS 定義為cIMT≥1.0 mm 和（或）存在1個及以上斑塊。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

統(tǒng)計學(xué)分析軟件使用SPSS 26.0，計量正態(tài)分布資料用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，計量非正態(tài)分布資料使用中位數(shù)和四分位數(shù)［M（P25，P75）］表示，計數(shù)資料用百分比表示。兩組間正態(tài)分布資料的比較使用t檢驗，兩組間非正態(tài)分布資料的比較使用Mann?Whitney 檢驗，多組間正態(tài)分布資料的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD 法，多組間非正態(tài)分布資料的比較采用Kruskal?WallisH檢驗，計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗。采用Pearson 相關(guān)分析正態(tài)分布資料間的相關(guān)性，采用Spearman相關(guān)分析非正態(tài)分布資料間的相關(guān)性，采用多元線性回歸分析T2DM 合并CAS 的影響因素。P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料的比較

依據(jù)所有受試者的血清Gal?3 水平以四分位數(shù)法劃分為4組，分別為Q1、Q2、Q3、Q4。一般生物學(xué)資料見表1，組間空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）、糖化血紅蛋白（glycated hemoglobin，HbA1c）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein choles?terol，LDL?C）存在組間差異，雖然未發(fā)現(xiàn)CAS 發(fā)生率的差異，但是兩側(cè)cIMT 存在顯著組間差異，其他指標(biāo)如收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、體重指數(shù)（BMI）、空腹胰島素（FINS）、空腹C 肽、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、胰島素抵指數(shù)（HOMA?IR）等沒有明顯組間差異。進(jìn)一步各組間比較，發(fā)現(xiàn)，Q3 和Q4 組的FBG 及HbA1c 水平較Q2 組更高（P=0.034，P=0.001），HbA1c 水平小較Q2 組高（P=0.048，P=0.003）；Q1 組的LDL?C 水平較另外3 組更高（P=0.039、0.006、0.025），左側(cè)cIMT 水平較另外3 組更低（P=0.007，0.031，0.004），右側(cè)cIMT 水平也較另外3組更低（P=0.037，0.027，0.001）。

表1 Gal?3四分位數(shù)分組的一般資料及血生化指標(biāo)比較Table 1 Comparison of general data and blood biochemical indexes of gal?3 quartile grouping

2.2 全部受試者cIMT相關(guān)因素分析

將全部受試者的上述臨床資料、頸動脈超聲時期的糖代謝和血脂情況分別與cIMT行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)雙側(cè)cIMT 與Gal?3、年齡分別正相關(guān)，此外右側(cè)cIMT還與患者行頸動脈超聲檢查時的LDL?C負(fù)相關(guān)（表2）。以cIMT為因變量，Gal?3、年齡和LDL?C為自變量進(jìn)行多元線性回歸分析，發(fā)現(xiàn)除年齡外，Gal?3及頸動脈超聲檢查時LDL?C水平對cIMT無明顯影響。

表2 頸動脈內(nèi)膜中層厚度相關(guān)因素分析Table 2 Correlation analysis of carotid intima media thickness in all subjects

2.3 T2DM患者cIMT相關(guān)因素分析

從上述受試者中篩選出T2DM 患者，分析其CAS的影響因素。左側(cè)cIMT與Gal?3、年齡正相關(guān)，而右側(cè)cIMT與Gal?3明顯正相關(guān)（表3）。以cIMT為因變量，Gal?3和年齡為自變量進(jìn)行多元線性回歸分析，發(fā)現(xiàn)年齡和Gal?3 為T2DM 患者左側(cè)cIMT 進(jìn)展的影響因素（表4）。

表3 T2DM患者cIMT相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis of carotid intima media thickness in T2DM patients

表4 T2DM患者cIMT的回歸分析Table 4 Regression analysis of carotid intima media thickness in T2DM patients

3 討論

Gal?3 作為廣譜生物學(xué)應(yīng)答因子介導(dǎo)多種應(yīng)答機(jī)制，參與多種病理生理過程，許多作用機(jī)制目前仍不完全明確［5］。本次研究中以Gal?3 水平劃分四分位區(qū)間觀察其與中老年人群CAS 相關(guān)指標(biāo)之間的關(guān)系。

腦卒中在中國目前死亡和致殘的主要原因中占據(jù)首位［6］，我國卒中一級預(yù)防研究分析結(jié)果顯示，高血壓患者cIMT與首次腦卒中風(fēng)險顯著相關(guān)［7］，如何早期預(yù)防和監(jiān)測動脈粥樣硬化的進(jìn)展很有必要性。但是cIMT 檢測需要合適型號的超聲儀器和專業(yè)的超聲醫(yī)生，操作相對耗時，在廣大人群腦卒中一級預(yù)防中的應(yīng)用受限。因此，利用簡單易行的指標(biāo)，先將cIMT 增高的人群篩選出來，再進(jìn)行必要的超聲檢查，可提高一級預(yù)防的效率。

Gal?3 在動脈粥樣硬化斑塊中沉積并隨著動脈粥樣硬化斑塊范圍和炎癥程度增加而升高［8-9］，此前就有橫斷面的臨床研究顯示Gal?3水平與冠狀動脈粥樣硬化密切相關(guān)［10-12］。在Gal?3與CAS方面，既往的一項橫斷面研究中，研究者以Gal?3的5分位數(shù)為分組依據(jù)描述受試者基線特征，在校正年齡、血脂等相關(guān)影響因素后發(fā)現(xiàn)cIMT 仍然與Gal?3 相關(guān)，且隨著Gal?3 水平的升高而升高［13］，該研究表明Gal?3可能是預(yù)防或管理動脈粥樣硬化疾病的一個靶點。另有橫斷面研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，CAS患者的血Gal?3升高，即使校正相關(guān)風(fēng)險因素，Gal?3水平升高與動脈粥樣硬化之間的顯著關(guān)聯(lián)持續(xù)存在［14］。此外，一項前瞻性隊列研究［15］納入了558 例接受頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)的患者，術(shù)前1 d 采集血漿檢測其Gal?3 水平，并以登記形式確定術(shù)后神經(jīng)缺血事件。在平均隨訪42.6個月后發(fā)現(xiàn)，即使調(diào)整了已知的動脈粥樣硬化危險因素，高血漿Gal?3 水平仍可預(yù)測缺血性腦血管事件，尤其是在女性患者中。因此作者認(rèn)為這種新的標(biāo)志物可用來篩選發(fā)生動脈粥樣硬化血栓性腦血管事件的高風(fēng)險患者，從而更好地指導(dǎo)臨床工作。本次研究首次在中國社區(qū)中老年人群中探索了Gal?3 和CAS 的關(guān)系，分析發(fā)現(xiàn)Gal?3水平高的受試者具有較高的cIMT，然而校正相關(guān)因素后發(fā)現(xiàn)Gal?3 和雙側(cè)cIMT 不再具有相關(guān)性，結(jié)果不一致的原因可能主要是樣本量的差異。事實上，由于本研究的例數(shù)相對較少，不能否認(rèn)結(jié)果的可靠性可能相對弱于上述研究。此外，種族的差異不能忽視，因此后期需要國內(nèi)更大規(guī)模隨訪研究來進(jìn)一步探索Gal?3和CAS的關(guān)系。

糖尿病患者腦血管疾病發(fā)生率遠(yuǎn)高于非糖尿病人群，長期的高血糖水平引起的血管內(nèi)皮氧化應(yīng)激和炎癥會加速動脈粥樣硬化發(fā)生［16］。此前的研究提示Gal?3與糖尿病患病率及糖代謝指標(biāo)密切相關(guān)［17-19］，本研究也顯示Gal?3 水平較高的受試者，其相應(yīng)的FBG、HbA1c 也較高。此外，我們發(fā)現(xiàn)T2DM患者Gal?3 和雙側(cè)cIMT 顯著正相關(guān)，在校正相關(guān)影響因素后，Gal?3 仍然是T2DM 患者左側(cè)cIMT 的影響因素，這與之前的研究發(fā)現(xiàn)Gal?3是新診斷T2DM患者的cIMT 的影響因素一致［20］，說明Gal?3 對CAS的影響在T2DM患者中更明顯，對T2DM患者的CAS的預(yù)測作用更加準(zhǔn)確，有助于快速方便的篩查T2DM患者的CAS。

本研究顯示，雙側(cè)cIMT 與年齡和LDL?C 相關(guān)，與既往研究相符［21-22］。有研究提示冠心病患者的Gal?3與LDL?C正相關(guān)［23］，這可能與Gal?3與糖基化終末產(chǎn)物修飾的脂質(zhì)結(jié)合，影響LDL?C的清除有關(guān)［24］。本研究發(fā)現(xiàn)Q1組的LDL?C水平較另外3組更高，然而并未發(fā)現(xiàn)Gal?3與LDL?C之間的相關(guān)性，本研究和徐旺等［23］的研究均發(fā)現(xiàn)Gal?3 與年齡明顯正相關(guān)，而兩個研究受試對象的年齡差異較大，且徐旺等［23］的研究對象特定為冠心病患者，這都可能導(dǎo)致結(jié)果不一致。因而需要更大量的樣本來進(jìn)一步探索兩者之間的關(guān)系。

眾所周知，CAS 患者發(fā)生腦血管事件的風(fēng)險更高，然而并不是所有CAS 患者都會出現(xiàn)腦血管意外，因此需要新的標(biāo)志物來識別那些將受益于強(qiáng)烈藥物治療的患者。本研究在社區(qū)中老年人群中發(fā)現(xiàn)Gal?3 是T2DM 患者左側(cè)cIMT 的獨立影響因素，對CAS 有一定預(yù)測價值，有助于T2DM 患者警惕腦血管意外的發(fā)生。

本研究的優(yōu)勢為首次在中國社區(qū)中老年人群中探索了Gal?3和CAS的關(guān)系，并且發(fā)現(xiàn)T2DM患者中Gal?3與cIMT呈正相關(guān)，提示了血Gal?3作為CAS生物學(xué)標(biāo)志物的價值，為臨床CAS的預(yù)測提供了重要信息。然而，本次研究總體樣本量較少，可能產(chǎn)生抽樣誤差，且缺少基線頸動脈超聲的資料。

T2DM 患者中Gal?3 與cIMT 相關(guān)，可能成為臨床預(yù)測和評估T2DM 患者CAS 的發(fā)生風(fēng)險的指標(biāo)，Gal?3與cIMT相結(jié)合，可更早、更全面地評估CAS的發(fā)生發(fā)展。后期特別需要更大規(guī)模隨訪研究以更準(zhǔn)確的判斷Gal?3對CAS發(fā)生風(fēng)險的影響。