李麗紅
福建省龍巖市第二醫(yī)院輸血科 (福建龍巖 364000)
輸血是臨床常見的一種救治手段,可以快速補(bǔ)充患者的血容量,保證機(jī)體獲得足夠的氧氣,防止患者出現(xiàn)休克癥狀[1]。輸血前必須做好血型鑒定及配對(duì)工作,以免患者出現(xiàn)過敏、充血性心力衰竭、肺水腫、枸櫞酸鈉中毒、溶血等輸血反應(yīng)[2]。臨床常見的血型鑒定方法有鹽水試管法、卡式微柱凝膠法等,臨床效果各不一致。本研究重點(diǎn)探討微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)在臨床血型鑒定與輸血中的應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。
選取我院2016年7月至2018年10月收治的1 200例輸血患者作為研究對(duì)象,其中男684例,女516例;年齡20~78歲,平均(38.52±9.78)歲;211例有輸血史,989例無輸血史。供血者1 200名,均為無償獻(xiàn)血者,其中男672名,女528名;年齡21~76歲,平均(38.49±9.77)歲。
抽取所有研究對(duì)象4 ml清晨空腹靜脈血液制作成血液標(biāo)本,將所有血液標(biāo)本分為等同的兩份,一份通過鹽水試管法進(jìn)行血型鑒定,聚凝胺法進(jìn)行交叉配血;一份通過微柱凝膠法進(jìn)行血型鑒定和交叉配血。
1.2.1 儀器與試劑選擇
本研究所用儀器包括Baso離心機(jī),聚凝胺試劑由合肥天一生物技術(shù)研究所提供,微柱凝膠卡由美國(guó)基立福公司公司提供。
1.2.2 血型鑒定
(1)鹽水試管法:按照鑒定常規(guī)將所有血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理,分離血清,根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第4版)中對(duì)于鹽水試管法的操作標(biāo)準(zhǔn)對(duì)血型進(jìn)行鑒定,離心后觀察其反定結(jié)果,同時(shí)做陰性對(duì)照管以排除冷凝集。(2)微柱凝膠法:將所有血液標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)離心處理后,分離血清,然后在Diana微柱凝膠卡上A、B、D、C、E、Clt孔分別加入1%紅細(xì)胞懸液50μl,N/A1、N/B兩支凝膠微管則分別滴入血清50μl和標(biāo)準(zhǔn)A型、B型的1%紅細(xì)胞懸液50μl,滴注完成后將其再用離心機(jī)離心9 min,離心完成后用肉眼對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定。
1.2.3 交叉配血
(1)聚凝胺法:將所有供血者與輸血患者的血液標(biāo)本按照常規(guī)進(jìn)行離心處理,分離血清,配制好3%~5%紅細(xì)胞懸液,然后分別在兩支一次性試管上標(biāo)上主側(cè)和次側(cè)兩個(gè)記號(hào),標(biāo)有主側(cè)的試管內(nèi)滴入1滴供血標(biāo)本紅細(xì)胞懸液和2滴輸血患者的血漿標(biāo)本,標(biāo)有次側(cè)的試管內(nèi)滴入2滴供血者的血漿標(biāo)本和1滴輸血患者的紅細(xì)胞懸液,滴加完畢后再加入0.6 ml低離子介質(zhì)溶液使其混勻,靜置1 min后加入2滴聚凝胺溶液,搖勻進(jìn)行15 s的離心處理,觀察上清液有無溶血,倒掉上清液,收取管底0.1 ml的凝集液,觀察是否有凝集,然后往里加入2滴重懸液進(jìn)行肉眼結(jié)果判定。(2)微柱凝膠法:按照常規(guī)將所有供血者和輸血患者的血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理,分離血清,配制好1%的紅細(xì)胞懸液,在兩支凝膠微管上分別標(biāo)上主側(cè)和次側(cè)兩個(gè)記號(hào),標(biāo)有主側(cè)的凝膠微管內(nèi)加入50μl供血標(biāo)本紅細(xì)胞懸液和30μl輸血患者的血漿標(biāo)本,標(biāo)有次側(cè)的凝膠微管內(nèi)加入30μl供血者的血漿標(biāo)本和50μl輸血患者的紅細(xì)胞懸液,完畢后將其置于37℃下進(jìn)行孵育,孵育時(shí)間為15 min,孵育完畢后用離心機(jī)進(jìn)行9 min的離心處理,最后用肉眼對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定。
(1)比較兩種檢測(cè)方法的血型鑒定結(jié)果;(2)比較兩種檢測(cè)方法的交叉配血結(jié)果。聚凝胺法的判定標(biāo)準(zhǔn):匹配,1 min內(nèi)散開,屬于聚凝胺引起的非免疫性凝集;不匹配,不散開,屬于異體抗體引起的免疫性凝集[3]。微柱凝膠的判定標(biāo)準(zhǔn):匹配,凝膠管底有紅細(xì)胞沉積;不匹配,凝膠管底無紅細(xì)胞沉積,紅細(xì)胞聚集在凝膠微管上、中部位[4]。
應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
兩種檢測(cè)方法的正反定型不符率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 兩種檢測(cè)方法的血型鑒定結(jié)果比較[份(%)]
聚凝胺法的交叉配血不合率高于微柱凝膠法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。
表2 兩種檢測(cè)方法的交叉配血結(jié)果比較[份(%)]
在臨床急診急救中,輸血是常見的一種救治手段,可快速補(bǔ)充患者的血容量,使其不會(huì)出現(xiàn)因血液流失過多而導(dǎo)致的缺氧、休克,但輸血前必須先做血型鑒定,以免血型不符產(chǎn)生排斥[5]。為了提高患者的輸血效率,需要提高血型鑒定與交叉配血的檢測(cè)效率。以往臨床常使用鹽水試管法進(jìn)行血型鑒定,但其操作較為復(fù)雜,對(duì)血量的需求也較高,加之交叉配血時(shí)使用的聚凝胺法容易受到肝素、藥物等因素的影響,因此,雖然鹽水試管法的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,但其檢測(cè)效率難以滿足臨床需求[6]。
隨著醫(yī)療技術(shù)水平的提高,微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)在臨床上被廣泛運(yùn)用在血型鑒定與交叉配血中,其操作手法的簡(jiǎn)易度與檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度受到多數(shù)學(xué)者的認(rèn)可[7]。本研究結(jié)果顯示,兩種檢測(cè)方法的正反定型不符率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。聚凝胺法的交叉配血不合率高于微柱凝膠法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說明微柱凝膠法更具有檢測(cè)優(yōu)勢(shì),對(duì)于血液中的不規(guī)則抗體的檢測(cè)度更高。微柱凝膠法主要利用生物凝膠過濾的原理,凝膠間隙只允許單個(gè)紅細(xì)胞通過,當(dāng)紅細(xì)胞與不規(guī)則抗體結(jié)合導(dǎo)致體積增大時(shí),無法通過凝膠間隙,因而出現(xiàn)正常紅細(xì)胞在凝膠管下部近底處,而凝塊聚集在中上部,從而得以鑒定血型[8-9]。聚凝胺法檢測(cè)交叉配血的標(biāo)準(zhǔn)是觀察紅細(xì)胞是否產(chǎn)生凝集,如果可以散開則為配對(duì),但藥物、肝素等因素也有可能引發(fā)凝集的紅細(xì)胞散開,因此,存在一定的誤差[10]。微柱凝膠法內(nèi)凝集的紅細(xì)胞即使分開,但由于原有體積增大,仍無法通過只允許單個(gè)紅細(xì)胞通過的凝膠間隙,因此,該法可有效減少交叉配血中的假陽性現(xiàn)象,提高輸血安全性。
總之,微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確,可提高醫(yī)師輸血的效率與安全性。