林義成,傅慶林,郭 彬,劉 琛,丁能飛
(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 環(huán)境資源與土壤肥料研究所,浙江 杭州 310021)
鹽脅迫對(duì)紅葉石楠花青素含量及抗氧化系統(tǒng)的影響
林義成,傅慶林,郭 彬*,劉 琛,丁能飛
(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 環(huán)境資源與土壤肥料研究所,浙江 杭州 310021)
摘 要:采用盆栽實(shí)驗(yàn)研究不同NaCl添加量(質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0、0.1%、0.2%、0.3%和0.4%)對(duì)紅葉石楠地上部鮮重、株高、葉片Na含量、K+/Na+、細(xì)胞膜透性、葉片含水量、脯氨酸含量、抗氧化酶活性,以及花青素含量的影響。結(jié)果表明,在0.2%及更高濃度的NaCl處理下,紅葉石楠生長(zhǎng)受到抑制,葉片Na含量、細(xì)胞膜透性、脯氨酸含量顯著(P<0.05)增加,K+/Na+、葉片相對(duì)含水量顯著(P<0.05)下降。鹽脅迫造成紅葉石楠葉片的H2O2及丙二醛(MDA)含量顯著(P<0.05)增加,0.4%NaCl處理下,H2O2及MDA含量在新葉上的增幅分別為162%和128%,在老葉上的增幅分別為114%和33%。隨著鹽脅迫加劇,新葉氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性顯著(P<0.05)升高,過(guò)氧化物酶(POD)活性和花青素含量顯著(P<0.05)下降。與之相反,老葉的SOD和CAT酶活顯著(P<0.05)下降,而POD活性和花青素含量顯著(P<0.05)上升。由此可見,花青素在抵御鹽脅迫誘導(dǎo)的氧化傷害中具有重要作用,其在葉片中的含量與CAT酶活性呈現(xiàn)此消彼長(zhǎng)的關(guān)系。
關(guān)鍵詞:花青素;抗氧化酶;紅葉石楠;鹽脅迫
土壤鹽漬化及次生鹽漬化是制約農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的主要障礙因子之一,也是影響生態(tài)環(huán)境的重要因素。目前,世界上大約1/3的耕地都不同程度地受到自然或次生鹽漬化的影響[1]。鹽脅迫打破植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)離子的吸收平衡,干擾植物的正常代謝過(guò)程,引發(fā)生理生化紊亂,致使植物光合能力下降,最終導(dǎo)致植株死亡[2]。不同植物對(duì)鹽害的耐受性不同,大宗蔬菜,如番茄、蘿卜等屬鹽分敏感植物,0.1%的土壤含鹽量即可顯著影響其對(duì)土壤養(yǎng)分和水分的吸收[3]。而耐鹽植物,如鹽地堿蓬,可在含鹽量0.48%的土壤中存活,其耐鹽性與鹽分在液泡的區(qū)隔化過(guò)程有關(guān)[4]。此外,植物還可通過(guò)平衡K+/Na+、調(diào)控Ca2+吸收、加速脯氨酸等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)合成、提高植物抗氧化系統(tǒng)活性等多種途徑降低鹽脅迫造成的傷害[5]。
浙江濱海鹽土存在鹽分高、肥力低、土壤結(jié)構(gòu)不良等不利因素[6]。在浙江省濱海鹽土上篩選種植具有一定經(jīng)濟(jì)價(jià)值的耐鹽彩葉苗木品種,不僅可以快速降鹽、肥沃土壤,而且對(duì)充分利用濱海鹽漬土資源、改善生態(tài)環(huán)境等也具有十分積極的意義[7]。紅葉石楠是我國(guó)東南沿海地區(qū)廣泛種植的一種彩葉苗木,具有較強(qiáng)的抗旱和抗鹽堿能力,其新梢和嫩葉含有大量花青素,呈火紅色,色彩艷麗持久[8]?;ㄇ嗨厥且活悘V泛存在于植物的花、根、葉、果實(shí)、種皮等部位的水溶性色素,屬于類黃酮化合物,具有很強(qiáng)的抗氧化功能,能清除植物體內(nèi)的自由基[9]。目前,關(guān)于鹽脅迫對(duì)花青素合成的影響仍存在爭(zhēng)論。研究顯示,40mmol·L-1NaCl可促進(jìn)草莓花青素的合成[10],海水葉面噴施可促進(jìn)蘋果表皮花青素的累積[11],但孫紅等[12]研究表明,長(zhǎng)期低鹽處理抑制了葡萄果皮花青素的形成。在本研究檢索范圍內(nèi),關(guān)于鹽脅迫下花青素合成與植物抗氧化能力間響應(yīng)關(guān)系的報(bào)道并不多見。本研究通過(guò)盆栽實(shí)驗(yàn),研究鹽脅迫對(duì)紅葉石楠生理生化,特別是對(duì)花青素在抗氧化方面作用的影響,以期為調(diào)控彩葉苗木花青素的形成提供科學(xué)依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)用土系浙江省上虞涂區(qū)水稻土,土壤pH值6.7,有機(jī)質(zhì)11.7g·kg-1,速效磷20.4mg·kg-1,速效鉀118.3mg·kg-1,堿解氮96.5mg·kg-1,土壤樣品風(fēng)干后過(guò)2mm篩混勻。實(shí)驗(yàn)用扦插苗購(gòu)自德清陽(yáng)光園藝有限公司,規(guī)格統(tǒng)一為莖高30cm、胸徑0.5cm,栽植于裝有2 kg供試土壤的盆缽中(每盆1棵),置于浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院溫室培養(yǎng),光暗周期12h∶12h,晝夜溫度25℃/20℃。每天適時(shí)澆水,以保持土壤濕度在80%土壤飽和含水量。扦插苗生長(zhǎng)60d后,挑選一致的植株用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)共設(shè)5個(gè)處理:CK(對(duì)照),S1[0.1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同)NaCl],S2(0.2% NaCl),S3(0.3% NaCl),S4(0.4% NaCl)。每個(gè)處理重復(fù)5次。根據(jù)土壤質(zhì)量,按比例稱取NaCl溶解于100mL水中,將鹽水均勻地滴灌至盆缽?fù)寥乐?。鹽處理28d后,采集每個(gè)處理的新葉和老葉,其中新葉為新抽枝條頂端展開葉,老葉為植株中部枝干內(nèi)側(cè)葉片。葉片采集后,用自來(lái)水和蒸餾水反復(fù)沖洗干凈后,置于-80℃冰箱保存。
1.2.1 土壤電導(dǎo)率(EC)
土水質(zhì)量體積比1∶5浸提,采用DDS-11A型電導(dǎo)率儀測(cè)定。
1.2.2 葉片Na、K含量
將采集的葉片于70℃烘干72h,粉碎,過(guò)1mm篩,干灰化法制成待測(cè)液后,用原子光譜分析法測(cè)定Na、K含量。
1.2.3 葉片細(xì)胞膜透性
將5個(gè)新鮮葉圓片(每個(gè)0.78cm2)用蒸餾水沖洗3次,隨后浮于10mL蒸餾水中。24h后于室溫下用電導(dǎo)儀測(cè)定溶解電導(dǎo)率。將燒杯置于烘箱(95℃)2h后得到總電導(dǎo)率。結(jié)果用總電導(dǎo)率百分比表示[13]。
1.2.4 脯氨酸含量
稱取植物葉片 0.5g,用5mL 3%的磺基水楊酸溶液研磨勻漿,沸水浴中提取10min,冷卻后于3000r·min-1離心10min。吸取1mL上清液,加入2mL冰醋酸及2mL 2.5%酸性茚三酮試劑,在沸水浴中加熱30min,冷卻后加入4mL甲苯,振蕩后,取上層脯氨酸紅色甲苯溶液于比色杯中,以甲苯溶液為空白對(duì)照,在520mm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值,同時(shí)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算脯氨酸濃度[14]。
1.2.5 抗氧化酶活性及H2O2、丙二醛(MDA)含量
稱取新鮮植物樣品0.5 g于研缽中,4℃下用10mL pH值7.8的磷酸緩沖液研磨至勻漿,8000r·min-1離心15min。取上清液分析測(cè)量超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、過(guò)氧化物酶(POD)活性,以及可溶性蛋白含量。SOD活性采用四唑氮藍(lán)光氧化還原法測(cè)定,以每分鐘每克蛋白的反應(yīng)體系對(duì)四唑氮藍(lán)(NBT)光化還原抑制50%為1個(gè)活性單位(U)。CAT活性采用紫外吸收法測(cè)定,以1min內(nèi)D240減少0.1的酶量為1個(gè)酶活單位。POD活性采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定,將每分鐘1個(gè)單位的吸光度變化定義為1個(gè)POD活性單位??扇苄缘鞍缀康臏y(cè)定參照考馬斯亮藍(lán)法[15]。
植物葉片H2O2采用丙酮提取—TiSO4比色法測(cè)定,MDA采用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定[16]。
1.2.6 花青素含量
將待測(cè)葉片用液氮研磨成粉末,用1%鹽酸-甲醇溶液萃取。3000r·min-1離心5min,取上清液分別在530 nm和657 nm處測(cè)定吸光值,以1%鹽酸-甲醇溶液作為空白對(duì)照,同時(shí)繪制花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算花青素含量[17]。
所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2003計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差。用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS 17.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,用Duncan多重比較檢驗(yàn)各處理平均值之間的差異顯著性,顯著性水平為P<0.05。
土壤溶液電導(dǎo)率是評(píng)價(jià)土壤溶液鹽濃度的一個(gè)常用方法[18],也是判斷土壤鹽害的一個(gè)重要指標(biāo)。隨著NaCl加入量的增加,土壤電導(dǎo)率逐漸升高,平均增加幅度為0.45 mS·cm-1(圖1)。S3和S4處理顯著(P<0.05)提高了紅葉石楠葉片的Na含量,分別是對(duì)照的4.7倍和11.1倍,株高增量顯著(P<0.05)下降(分別為對(duì)照的48%和30%),地上部鮮重顯著(P<0.05)降低(分別為對(duì)照的50%和48%)。S1和S2處理對(duì)紅葉石楠葉片Na+含量和植株生長(zhǎng)無(wú)明顯影響。
K+/Na+、細(xì)胞膜透性、葉片相對(duì)含水量及脯氨酸含量是反映鹽脅迫對(duì)植物傷害的主要生理指標(biāo)。對(duì)于紅葉石楠新葉來(lái)講,S1處理的K+/Na+與對(duì)照相比未發(fā)生顯著變化,但隨著NaCl添加量增加,K+/Na+迅速減小,S2、S3、S4處理分別減少至對(duì)照的60%、22%和6%(圖2)。S1處理新葉的膜透性與對(duì)照相比無(wú)顯著差異,但S2、S3、S4處理的膜透性顯著(P<0.05)增加,約為對(duì)照的3倍。對(duì)照處理新葉相對(duì)含水量保持在91%,鹽脅迫降低了葉片相對(duì)含水量,S2~S4處理與對(duì)照相比差異顯著(P<0.05)。新葉S1處理的脯氨酸含量與對(duì)照相比無(wú)顯著變化,然而S2~S4處理的脯氨酸含量增加到對(duì)照(36mg·kg-1)的2倍左右。
對(duì)于老葉來(lái)講,對(duì)照處理的K+/Na+、葉片相對(duì)含水量、膜透性均略低于新葉,而脯氨酸含量卻高于新葉。S1和S2處理下,上述4個(gè)指標(biāo)與對(duì)照相比均未發(fā)生顯著變化。隨著NaCl濃度增加,K+/Na+、葉片相對(duì)含水量有所下降,但下降幅度均低于新葉。S4處理的細(xì)胞膜透性顯著(P<0.05)增加,而S3處理下與對(duì)照卻無(wú)顯著差異。S3和S4處理的脯氨酸含量均較對(duì)照顯著(P<0.05)增加。
柱上無(wú)相同字母的表示差異顯著(P<0.05)。Bars marked by no same letters indicated significant difference at P<0.05.圖1 各處理對(duì)土壤電導(dǎo)率、葉片Na含量、株高增量和地上部鮮重的影響Fig.1 Effects of salt stress on electrical conductivity of the soil solution,Na concentration in leaves,plant height increase and shoot biomass
柱上無(wú)相同小、大寫字母的分別表示新葉或老葉上處理間差異顯著(P<0.05)。下同。Bars marked by no same lowercase or uppercase letters indicated significant difference at P<0.05 within treatments in new leaves or old leaves,respectively.The same as below.圖2 各處理對(duì)葉片K+/Na+、膜透性、相對(duì)含水量和脯氨酸含量的影響Fig.2 Effects of salt stress on K+/Na+,cellular leakage,relative water content and proline content of leaves
在低濃度NaCl處理下(S1、S2處理),紅葉石楠新老葉片H2O2和MDA含量與對(duì)照相比無(wú)顯著差異(圖3)。但隨著NaCl濃度增加,紅葉石楠新老葉片H2O2和MDA含量均顯著(P<0.05)增加,且新葉的增幅遠(yuǎn)高于老葉。如在S4處理下,新葉H2O2和MDA含量與對(duì)照處理相比分別增加162%和128%,而老葉H2O2和MDA含量與對(duì)照處理相比分別增加114%和33%。
S1、S2處理對(duì)紅葉石楠新葉SOD酶活未產(chǎn)生顯著影響,而S3、S4處理則顯著(P<0.05)提升了新葉SOD酶活,S4處理與對(duì)照相比增幅達(dá)111%。對(duì)于紅葉石楠老葉來(lái)講,對(duì)照處理的SOD酶活略高于新葉,隨著NaCl濃度增加,SOD酶活略有下降,S4處理與對(duì)照相比顯著(P<0.05)下降,降幅12.8%。
對(duì)于紅葉石楠新葉來(lái)講,S1和S2處理對(duì)CAT酶活無(wú)顯著影響,而S3和S4處理下,CAT酶活顯著(P<0.05)提高,S4處理與對(duì)照相比增幅達(dá)456%。對(duì)于老葉來(lái)講,對(duì)照處理的CAT酶活略低于新葉,S2、S3處理下CAT酶活顯著(P<0.05)下降,分別為對(duì)照的71%和44%,S4處理下CAT酶活又顯著(P<0.05)上升,與對(duì)照相比增加37%。
紅葉石楠新葉S1和S2處理下POD酶活與對(duì)照相比未產(chǎn)生顯著變化,但隨著NaCl濃度增加,POD活性顯著(P<0.05)下降,S3和S4處理下分別為對(duì)照的35%和9%。各鹽分處理下,老葉的POD酶活下降趨勢(shì)與新葉相似,但是降幅遠(yuǎn)低于新葉,如老葉S3和S4處理的POD酶活分別為對(duì)照的81%和78%。
對(duì)照處理中,新葉花青素含量約是老葉的4倍。隨著NaCl濃度的增加,S1~S4處理的新葉花青素水平分別下降至對(duì)照的95%、63%、50%、21%。對(duì)于老葉來(lái)講,隨著NaCl濃度增加,花青素含量有上升趨勢(shì),S1~S4處理分別比對(duì)照提高19%、18%、20%和58%。
圖3 鹽脅迫對(duì)葉片H2O2和MDA含量,SOD、CAT、POD活性,以及花青素含量的影響Fig.3 Effects of salt stress on contents of H2O2 and MDA,activities of SOD,CAT,POD,and anthocyanin content of leaves
植物的耐鹽性是一個(gè)由多基因控制的復(fù)合遺傳性狀,主要取決于根系對(duì)離子的選擇性吸收和鹽分在器官組織和細(xì)胞水平上的區(qū)域化分布,以及在滿足細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)對(duì)離子需求的前提下,保持地上部分相對(duì)較低的鹽分濃度的能力[2,5]。在S1和S2處理(低鹽脅迫)下,紅葉石楠的株高增量與地上部鮮重并未受到顯著影響,表明紅葉石楠可耐受0.2%以下的鹽脅迫,其耐鹽主要機(jī)制與限制Na+向地上部轉(zhuǎn)移、維持了K+的胞內(nèi)平衡有關(guān)。這和Lacand等[19]的報(bào)道相一致。該研究認(rèn)為,植物根對(duì)Na的截留是限制Na向地上部運(yùn)輸?shù)闹饕?,并指出這種截留作用是在質(zhì)膜H+-ATPase驅(qū)動(dòng)下通過(guò)木質(zhì)部/共質(zhì)體的K/Na交換完成的。K是植物三大營(yíng)養(yǎng)元素之一,對(duì)氣孔行為、滲透調(diào)節(jié)、酶活、細(xì)胞膨脹和質(zhì)膜極化均有十分重要的作用[20]。在S1處理下,高K+/Na+維持了紅葉石楠新老葉片細(xì)胞膜透性和葉片相對(duì)含水量,穩(wěn)定了抗氧化系統(tǒng)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。鹽脅迫下紅葉石楠葉片脯氨酸含量顯著增加。脯氨酸作為植物體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),能夠增加胞質(zhì)濃度,改善細(xì)胞膜和其他高分子物質(zhì)的水環(huán)境,維持滲透壓和質(zhì)膜穩(wěn)定性,在植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的適應(yīng)中具有重要的作用[21]。
一旦土壤鹽分超出了紅葉石楠的耐受能力(S3和S4處理),植物鹽害隨即發(fā)生。紅葉石楠葉片中Na+大量累積,造成地上部鮮重和株高增量顯著下降。除了Na+的直接毒害外,鹽脅迫還造成植物生理干旱與作物生長(zhǎng)代謝所必需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素競(jìng)爭(zhēng)性吸收,新老葉片細(xì)胞膜透性顯著增加,新老葉片胞內(nèi)K+和Na+的動(dòng)態(tài)平衡被擾亂。受滲透脅迫的限制,葉片表面擴(kuò)張減小[22],葉片相對(duì)含水量顯著下降。此外,在高鹽脅迫下,紅葉石楠的新葉較老葉更為敏感,例如新葉的K+/Na+比例下降程度遠(yuǎn)高于老葉,細(xì)胞膜穩(wěn)性更易被打破,葉片對(duì)水分的把持能力,以及合成脯氨酸的能力也均低于老葉,這可能是植物主動(dòng)適應(yīng)鹽脅迫的結(jié)果。一方面,植物主動(dòng)弱化新葉對(duì)鹽分的應(yīng)對(duì)能力,進(jìn)而抑制新葉的生長(zhǎng)來(lái)減少對(duì)水分的需求和丟失;另一方面,老葉的葉片功能較新葉更為完整,是光合作用的主要貢獻(xiàn)者,植物加強(qiáng)對(duì)老葉的保護(hù),以更好地維持生存所必需的物質(zhì)和能量。
鹽脅迫干擾了植物體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的正常運(yùn)行,引起氧自由基的累積,導(dǎo)致氧化傷害。H2O2是活性氧的重要組分之一,也是氧化脅迫的重要指標(biāo)。MDA是膜脂過(guò)氧化作用的主要產(chǎn)物之一,其含量高低指征植物細(xì)胞受氧化傷害程度的大小[15]。隨著鹽分脅迫的加劇,植株葉片H2O2含量不斷累積,與之對(duì)應(yīng)的MDA含量也進(jìn)一步積累。盡管葉片脯氨酸含量有所增加,但在K+缺乏和滲透壓力不斷加劇的情況下,質(zhì)膜過(guò)氧化反應(yīng)的發(fā)生不可避免。
花青素的合成受多個(gè)基因協(xié)同調(diào)控,其同化過(guò)程與葉綠體和整個(gè)葉片發(fā)育進(jìn)程密切相關(guān)。在新葉發(fā)育初期,其抗氧化的調(diào)節(jié)能力較弱,需要合成大量的花青素輔助抗氧化酶系來(lái)清除光合過(guò)程電子傳遞形成的活性氧,以便在葉片發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期提供有效保護(hù)[24]。隨著葉片組織中葉綠體的不斷發(fā)育成熟,花青素含量逐漸下降,被葉綠素的綠色所掩蓋,這正是紅葉石楠新生幼葉呈現(xiàn)為紅色,并隨著葉片的發(fā)育成熟其葉色由紅變綠的原因[25]。鹽脅迫造成葉片抗氧化體系紊亂,新葉花青素的合成受阻,而老葉花青素含量有所上升。孫紅等[12]的研究也表明,長(zhǎng)期低鹽處理下,葡萄果實(shí)中的24個(gè)花青素代謝相關(guān)結(jié)構(gòu)基因中,有21個(gè)顯著下調(diào),造成花青素含量顯著下降。但對(duì)于不同植物,鹽脅迫對(duì)花青素的代謝影響并不相同。Galli等[10]的研究表明,長(zhǎng)期的低鹽脅迫(40mmol·L-1NaCl,85d)促進(jìn)了草莓的生長(zhǎng),以及抗生素合成基因的表達(dá),花青素含量與對(duì)照相比提高了60%。Yamada等[11]的研究也表明,50倍稀釋海水噴施蘋果顯著提高了果皮中花青素的含量。這可能與植物應(yīng)對(duì)環(huán)境脅迫的機(jī)制有關(guān)。適度的鹽脅迫加強(qiáng)了植物的抗氧化能力,促進(jìn)了花青素的合成,但長(zhǎng)期或過(guò)量的鹽脅迫則超出了植物耐受力,造成花青素合成代謝過(guò)程受阻。作為植物重要的抗氧化劑,花青素的合成與其他抗氧化酶系在抵御氧化傷害時(shí)各自所起的作用,以及它們之間這種此消彼長(zhǎng)的關(guān)系仍有待于進(jìn)一步研究。
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EffectsofsaltstressonanthocyanincontentandactivitiesofantioxidantenzymesinleavesofPhotiniafrasery
LIN Yicheng,F(xiàn)U Qinglin,GUO Bin*,LIU Chen,DING Nengfei
(InstituteofEnvironment,Resources,SoilandFertilizer,ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences,Hangzhou310021,China)
Abstract:In the present study,a pot experiment withPhotiniafraserywas conducted to examine NaCl addition(0,0.1%,0.2% 0.3%,0.4%) on fresh weight of aboveground parts,plant height increase,plant growth,Na and K concentration,electrolyte leakage,relative water content,contents of proline,H2O2,malondialdehyde(MDA),anthocyanin and activities of the enzymes related to antioxidant system of plant leaves.It was shown that the growth ofPhotiniafraserywas inhibited when NaCl addition amount was 0.2% or higher.Na and proline content,electrolyte leakage were significantly(P<0.05) increased,while K+/Na+and relative water content were significantly(P<0.05) decreased.Salt stress induced oxidative stress of leaves.The H2O2and MDA contents were significantly(P<0.05) increased by 162% and 128% in new leaves,and by 114% and 33% in old leaves,respectively.For new leaves,activities of SOD and CAT were significantly(P<0.05) enhanced,while POD activity and anthocyanin contents were significantly(P<0.05) decreased as the salt stress increased.However,activities of SOD and CAT were significantly(P<0.05) decreased,while POD activity and anthocyanin contents were significantly(P<0.05) increased as the salt stress increased in old leaves.Thus,it could be concluded that anthocyanin was an important antioxidant molecular ofPhotiniafrasery,which partially replaced the antioxidant roles of CAT under salt stress.
Key words:anthocyanin;antioxidant enzyme;Photiniafrasery;salt stress
中圖分類號(hào):Q945.78;S153
A
文章編號(hào):1004-1524(2018)06-0970-08
收稿日期:2018-02-26
基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金(41001184);浙江省科技廳重大科技專項(xiàng)(2015C03020);寧波市科技計(jì)劃(2014C10019)
作者簡(jiǎn)介:林義成(1962—),男,浙江建德人,副研究員,主要從事土壤改良研究。E-mail:lyc5918@sina.com.cn
,郭彬,E-mail:ndgb@163.com
10.3969/j.issn.1004-1524.2018.06.12
(責(zé)任編輯高 峻)