姚素花，麥李明，石俊婷

百令膠囊對尿毒癥腹膜透析患者腹透液中轉化生長因子-β1、纖維連接蛋白表達的影響

姚素花，麥李明，石俊婷

目的研究百令膠囊對尿毒癥腹膜透析患者腹透液中轉化生長因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)、纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)水平的影響。方法 將腹膜透析患者60例隨機分為對照組和試驗組(各30例)，均應用1.5%腹膜透析液、6 000 mL/d，試驗組加用百令膠囊5粒、3/d、口服，觀察1、3、6個月后2組腹透液中TGF-β1、FN水平的變化。結果 對照組TGF-β1、FN水平隨透析時間延長逐漸升高；試驗組TGF-β1、FN水平無明顯變化，與對照組比較明顯降低(P＜0.05)。結論 百令膠囊可以降低腹透液中TGF-β1、FN水平，能起到抑制腹膜纖維化的作用。

百令膠囊；腹膜透析；轉化生長因子-β1；纖維連接蛋白；腹膜纖維化

腹膜透析是目前終末期腎臟病患者較為有效、經(jīng)濟的替代療法之一，而腹膜纖維化是導致腹膜透析患者技術存活率偏低的主要原因[1]。其中轉化生長因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)過度表達、纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)的表達增多都是導致腹膜纖維化的可能機制。研究表明，冬蟲夏草可通過抑制纖維細胞的增殖，減少細胞基質合成作用，延緩纖維化的發(fā)生，具有良好的抗纖維化作用[2]。百令膠囊為人工冬蟲夏草，是由蝙蝠蛾多毛孢真菌經(jīng)深層液體培養(yǎng)而成的發(fā)酵蟲草菌絲體制劑，含蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖及多種維生素、微量元素、19種氨基酸多種化合物，作用效果與天然蟲草類似[3]。作者以規(guī)律腹膜透析患者中TGF-β1及FN作為腹膜纖維化的標志，探討百令膠囊在腹膜纖維化中的防治作用及可能機制。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2014年1月—2015年6月在中國石油天然氣集團公司中心醫(yī)院新行腹膜透析患者60例，年齡29～78歲。入選標準:①符合尿毒癥診斷標準[內生肌酐清除率(endogenous creatinine clearancerate，Ccr)＜15 mL/min]，并行規(guī)律腹膜透析(1.5%腹膜透析液2 000 mL、3/d)；②之前未服用過血管緊張素轉化酶抑制劑和(或)血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑類降壓藥物。入選者隨機分成試驗組和對照組(各30例)，均是應用1.5%腹膜透析液，6 000 mL/d[廣州百特醫(yī)療用品有限公司、規(guī)格1.5%葡萄糖(含乳酸鹽)每袋2 000 mL、批號G1038055]，其中試驗組加用蟲草制劑(百令膠囊)5粒、3/d、餐后口服(杭州中美華東制藥有限公司、規(guī)格每粒0.5 g、批號140111)，對照組未服用任何蟲草制劑。退出標準:①并發(fā)腹膜透析腹膜炎；②加用血管緊張素轉化酶抑制劑和(或)血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑類降壓藥物。觀察過程中共退出研究8例，其中試驗組5例、對照組3例。對照組共納入27例，男性11例、女性 16例，年齡(60.19±11.77)歲，血肌酐(786.42±146.54)μmol/L。 試驗組納入25例，男性11例、女性 14例，年齡(61.96±9.44)歲，血肌酐(777.26±161.25)μmol/L。2組一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，透析1個月后檢測透析充分性均提示透析充分(表1)，具有可比性。

表1 透析1個月時2組透析充分性

1.2 方法 研究對象均在腹膜透析1個月時取24 h腹透液、24 h尿量測定透析充分性。于入選時及腹膜透析1、3、6個月后取腹透液樣本置－20℃冰箱內凍存待測，統(tǒng)一用酶聯(lián)免疫吸附測定方法檢測腹透液中 TGF-β1、FN 水平。

1.3 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 17.0軟件，計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率來表示，組間比較采用χ2檢驗；TGF-β1與FN之間的關系采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 TGF-β1、FN 水平 透析 1、3、6 個月后，對照組腹透液中TGF-β1、FN水平均逐漸升高，而試驗組TGF-β1、FN水平無明顯變化，2組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05，表 2)。

2.2 FN與TGF-β1相關性 患者FN與TGF-β1呈正相關(r＝0.499，P＜0.05)。

表 2 TGF-β1、FN 水平(ng/mL)

3 討論

腹膜透析因其操作簡單、對血流動力學影響小、有效保護殘余腎功能等優(yōu)點，是目前終末期患者長期腎臟替代治療的主要方法之一[4]；而腹膜纖維化是導致腹膜功能喪失的主要原因之一[5]。目前，國內的腹膜透析液因其生物不相容性，長期應用可導致腹膜間皮細胞受損后分泌大量的致纖維化因子，是腹膜纖維化的誘因[6]。因此，如何減少致纖維化因子表達，延緩腹膜纖維化極為重要。本研究主要通過觀察百令膠囊對長期規(guī)律腹膜透析患者腹透液中TGF-β1、FN的表達變化，從而了解其對腹膜纖維化的防治作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，長期應用非生理性腹膜透析液可使腹透液的TGF-β1、FN表達水平升高，且FN與TGF-β1呈正相關。長期應用非生理性腹膜透析液可增加腹膜細胞外基質(extracellular matrixc，ECM)中的TGF-β1表達水平，刺激ECM成分FN合成增加，減少降解，并產(chǎn)生大量纖維溶解抑制因子，使得纖維素在腹膜大量沉積，最終導致腹膜纖維化[7-11]。

冬蟲夏草是我國名貴的中藥，含有蟲草素及其衍生物、蟲草酸、多糖、核苷等多種化合物，其中蟲草多糖約占菌絲體總量的3%～5%，是含量最高的藥理活性物質，具有廣泛的生理生化性質，其主要藥理作用表現(xiàn)為抑制成纖維細胞的增殖生長及合成ECM，具有多種藥效，其中對肝、肺、腎等器官的抗纖維化作用尤為明顯，近年來被廣泛研究[12-14]。然而，目前國內僅有動物實驗研究其對腹膜透析中抗腹膜纖維化的作用[15]。本研究發(fā)現(xiàn)對長期腹膜透析患者應用百令膠囊干預1、3、6個月時，其腹透液中TGF-β1、FN表達水平均無明顯升高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示百令膠囊具有抑制腹膜纖維化形成的作用。

冬蟲夏草抗纖維化的作用機制尚不明確。有研究報道，冬蟲夏草抗肝纖維化可能與抑制脂質過氧化反應、減少細胞因子及生長因子表達有關[12]。通過抑制TGF-β1表達，調整Ⅰ型/Ⅱ型細胞因子平衡起到抗肺纖維化作用[13]。抑制TGF-β1表達，減少細胞增殖及ECM聚集，減輕炎癥反應可能是其發(fā)揮抗腎間質纖維化的重要機制[14]。而其抗腹膜纖維化研究鮮見報道。本研究發(fā)現(xiàn)，抗腹膜纖維化可能與百令膠囊下調腹膜透析患者中TGF-β1表達、抑制FN合成、減少ECM的沉積有關。

本研究通過應用百令膠囊對長期腹膜透析患者的干預降低腹透液中TGF-β1的表達水平、抑制FN合成、減少ECM的沉積，改善腹膜組織中毛細血管的形成和腹膜滲透性，從而起到抑制腹膜纖維化的作用。目前，臨床上對尿毒癥已無殘余腎功能的患者，應用蟲草制劑保腎意義不大；但通過本研究發(fā)現(xiàn)，對于規(guī)律腹膜透析患者繼續(xù)應用蟲草制劑可延緩腹膜纖維化進展，為臨床治療提供一定的參考。但本研究樣本量較少，觀察時間相對較短，后續(xù)研究需增加樣本量，延長觀察時間，有待更為廣泛、全面的研究予以證實。

[1]黃琳，龐捷，李錦山，等.百令膠囊聯(lián)合尿毒康合劑對腹膜透析患者殘余腎功能及微炎癥狀態(tài)的影響[J].陜西中醫(yī)，2016，37(11):1477-1479.

[2]鄭宏香，何勁松.常用中藥在防治腹膜透析相關性腹膜纖維化中的重要作用[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2010，11(4):372-373.

[3]鄭瑜倩，程巧鴛，祝明，等.HPLC同時測定百令膠囊中5種核苷類成分的含量[J].中國實驗方劑學雜志，2015，21(5):61-64.

[4]郭春艷，劉虹.腹膜透析腹膜結構和功能保護的新策略[J].中國血液凈化，2014，13(2):113-118.

[5]陳續(xù)紅，劉虹.腹膜透析腹膜失功的防治[J].中華血液凈化，2015，14(9):512-514.

[6]McIntyre NJ，Chesterton LJ，John SG，et al.Tissue advanced glycation end product concentration in dialysis patiens[J].J Am Soc Nephrol，2010，5(1):51-55.

[7]Margetts PJ，Oh KH，Kolb M.Transforming growth factorbeta:importance in long-term peritoneal membrane changes[J].Perit Dial Int，2005，25(Suppl 3):S15-S17.

[8]熊重祥，劉娜，嚴海東.腹膜纖維化治療的最新進展[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2014，15(3):276-279.

[9]張德魚，趙建榮.腹膜透析相關性腹膜纖維化及防治[J].內蒙古醫(yī)學雜志，2010，42(12):1474-1476.

[10]姚曉彤，高延霞.腹膜透析相關性腹膜纖維化的機制及干預[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2015，16(8):741-743.

[11]鄒庚藝，曹雪瑩，周建輝，等.腹膜透析相關腹膜纖維化的防治進展[J].中華腎病研究電子雜志，2016，5(1):42-44.

[12]傅纓，熊耀斌，資曉飛，等.發(fā)酵蟲草菌粉抗大鼠肝纖維化作用及機理研究[J].江西醫(yī)藥，2014，49(5):383-385.

[13]張穎茁，楊曉彤，楊慶堯，等.蟲草對肺部疾病治療的研究進展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2014，14(34):6786-6788，6793.

[14]江慧星，孔薇.蟲草制劑抗腎纖維化作用研究進展[J].上海中醫(yī)藥大學學報，2014，28(3):108-111.

[15]王立瑞，黃海東，蔣更如，等.蟲草菌液對高糖作用下大鼠腹膜間皮細胞轉化生長因子β1和纖維連接蛋白表達的影響[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志，2011，12(6):493-496.

The influence of Bailing capsule on the expression of transforming growth factor-β1 and fibronectin in the peritoneal dialysissolution in uremia peritoneal dialysis patients

YAO Suhua， MAI Liming， SHI Junting
(Department of Nephrology， China National Petroleum Corporation Central Hospital，Langfang Hebei 065000，China)

ObjectiveTo investigate the influence of Bailing capsule on the expression of transforming growth factor-β1(TGF-β1)and fibronectin(FN)in peritoneal dialysis solution in uremia peritoneal dialysis patients.Methods Sixty patients treated with peritoneal dialysis were divided into two groups randomly(30 cases in control group and 30 cases in experimental group)，all patients were treated with peritoneal dialysis by 1.5%peritoneal dialysis solution(6 000 mL everyday)， and patients in experimental group taken five Bailing capsules each time， three times a day.We observed the changes of the expression of TGF-β1 and FN in the peritoneal dialysis solution in 1， 3 and 6 months.Results The expression of TGF-β1， FN in peritoneal dialysis solution in control group increased gradually as dialysis time went on.In experimental group，the expression of TGF-β1， FN in peritoneal dialysis solution was no obvious changes， but lower than control group(P＜0.05).Conclusion Bailing capsule can decrease the expression of TGF-β1， FN in the peritoneal dialysis solution，and may inhibit peritoneal fibrosis.

Bailing capsule； Peritoneal dialysis； Transforming growth factor-β1(TGF-β1)；Fibronectin(FN)；Peritoneal fibrosis

R692.5

B

2095-3097(2017)05-0266-03

10.3969/j.issn.2095-3097.2017.05.003

河北省廊坊市科技支撐項目(2014013005)

065000河北廊坊，中國石油天然氣集團公司中心醫(yī)院腎內科(姚素花，麥李明，石俊婷)

2017-03-21 本文編輯:張在文)