賈小飛，閆俊強(qiáng)，舒伯輝，賽 蕊，黃麗娜

白介素-32與帕金森病患者非運(yùn)動癥狀的相關(guān)性研究

賈小飛，閆俊強(qiáng)，舒伯輝，賽 蕊，黃麗娜

目的探討帕金森病(Parkinson’s disease，PD)患者血清白介素-32(interleukin-32，IL-32)水平與非運(yùn)動癥狀之間的相關(guān)性。方法 采用橫斷面調(diào)查研究，選取2014年10月—2016年10月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院74例門診、住院PD患者及60名健康體檢者，檢測外周血清中IL-32的水平，采用PD非運(yùn)動癥狀評價量表(non-motor symptom score，NMSS)對患者的非運(yùn)動癥狀進(jìn)行評分統(tǒng)計；分析血清IL-32水平與患者非運(yùn)動癥狀及NMSS各項的相關(guān)性。結(jié)果 PD患者血清IL-32水平高于健康體檢者(P＝0.014)；PD患者血清IL-32水平與NMSS評分之間存在顯著正相關(guān)(r＝0.668，P＝0.000)；NMSS各項分析結(jié)果顯示，PD患者血清IL-32水平與患者的情緒與認(rèn)知障礙(r＝0.766、P＝0.000)、注意力與記憶力障礙(r＝0.687、P＝0.000)均存在正相關(guān)。結(jié)論 PD患者血清IL-32高于正常水平，可能是影響PD患者的情緒與認(rèn)知、注意力與記憶力的因素，降低血清IL-32水平也許是治療PD患者非運(yùn)動癥狀新的靶點。

帕金森??；白介素-32；非運(yùn)動癥狀

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一種中老年常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，其發(fā)病率僅次于阿爾茨海默病位居第2，我國65歲以上老年人群中PD發(fā)病率為1.7%[1]。PD特有的運(yùn)動遲緩、肌強(qiáng)直、姿勢步態(tài)異常及面部表情減少等運(yùn)動癥狀被神經(jīng)科臨床醫(yī)生所熟知，而非運(yùn)動癥狀往往被臨床醫(yī)生所忽視。與運(yùn)動癥狀相比，神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)生對PD非運(yùn)動癥狀的識別率和確診率均低于50%[2]。因此，尋找PD非運(yùn)動癥狀的影響因素，并對其進(jìn)行干預(yù)至關(guān)重要。白介素(interleukin，IL)-6與PD的相關(guān)性尚存在爭議[3-4]，作為IL-6的上游因子IL-32與PD非運(yùn)動癥狀的相關(guān)性鮮見報道。作者通過檢測PD患者血清IL-32水平并與患者的非運(yùn)動癥狀評價量表(non-motor symptoms scale，NMSS)評分進(jìn)行對比分析，進(jìn)一步探討PD患者血清IL-32水平與患者非運(yùn)動癥狀之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2014年10月—2016年10月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院門診及住院PD患者資料，所有入組患者均符合英國PD協(xié)會腦庫臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。

排除標(biāo)準(zhǔn):①精神異常、近期有過急性感染病史、慢性感染病史、自身免疫性疾病史；②有惡性腫瘤、肝腎功能不全、心力衰竭、嚴(yán)重貧血、急性或慢性消耗性疾病或病?；颊?；③急性或慢性的認(rèn)知功能減退，無法配合NMSS評分的患者；④拒絕參與研究的患者。同時選取醫(yī)院健康體檢中心健康體檢者，均符合入組標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)且所有入組患者及健康體檢者均簽署知情同意書。

本研究納入的PD患者和健康體檢者性別、年齡及體重指數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05，表1)。

表1 2組性別、年齡、體重指數(shù)

1.2 方法

1.2.1 血清學(xué)檢測 采集PD患者及健康體檢者清晨空腹肘靜脈全血5 mL，3 000 r/min離心20 min，采集血清200 μL至EP管中置于－80℃低溫冰箱凍存統(tǒng)一檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(武漢伊萊瑞特生物科技有限公司)統(tǒng)一檢測血清IL-32水平，酶標(biāo)儀(型號 Perkin Elmer)在450 nm波長處檢測光密度值。實驗器材及場所由河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)疾病研究所提供。

1.2.2 評價 NMSS是評價PD患者非運(yùn)動癥狀最全面可靠的量表，評價內(nèi)容包括心血管系統(tǒng)、睡眠與疲勞、情緒與認(rèn)知、知覺與幻覺、注意力與記憶力、胃腸道癥狀、泌尿系統(tǒng)癥狀及其他項共8項，而其他包括不能解釋的疼痛、味覺或嗅覺功能減退、性功能障礙、體重變化及出汗增多等。NMSS根據(jù)最近1個月自身的情況，按癥狀出現(xiàn)的嚴(yán)重程度及頻率進(jìn)行評分；嚴(yán)重程度共劃分為0～3級4種，頻率劃分為1～4個等級。程度與頻率的乘積為總得分，得分越高患者的非運(yùn)動癥狀越嚴(yán)重。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 21.0軟件，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料用百分比表示，組間比較采用χ2檢驗；IL-32與NMSS評分之間相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)系數(shù)檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IL-32水平 PD患者血清IL-32為(34.98±13.77)pg/mL，健康體檢者血清IL-32為(20.08±5.35)pg/mL，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t＝7.978、P＝0.014)。

2.2 IL－32與NMSS評分相關(guān)性 PD患者血清IL-32為(34.98±13.77)pg/mL，與 NMSS評分(93.52±20.00)分存在正相關(guān)性 (r＝0.668，P＝0.000)。

IL-32水平與患者的情緒與認(rèn)知障礙(r＝0.766、P＝0.000)、注意力與記憶力障礙(r＝0.687、P＝0.000)存在正相關(guān)(表2)。

表2 IL-32與NMSS各項相關(guān)性

3 討論

炎癥因子激活小膠質(zhì)細(xì)胞是PD病理生理機(jī)制的中心環(huán)節(jié)。早在1988年McGeer等[6]就已經(jīng)在尸檢中證實了小膠質(zhì)細(xì)胞參與PD的病理生理過程。隨著現(xiàn)代影像技術(shù)的發(fā)展，PET研究證實小膠質(zhì)細(xì)胞活躍存在于PD患者的多處大腦區(qū)域中[7]。

生理條件下中樞神經(jīng)系統(tǒng)正常生理功能的維持有賴于血腦屏障功能的完整性。某些因素(炎癥、卒中、創(chuàng)傷等)損傷血腦屏障后，致使T淋巴細(xì)胞滲透入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，釋放腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)依次激活小膠質(zhì)細(xì)胞，并分泌CD206、精氨酸酶-1等，從而激活星形膠質(zhì)細(xì)胞，最終導(dǎo)致黑質(zhì)區(qū)多巴胺神經(jīng)元變性、凋亡。

IL-32是Kim等[8]首先發(fā)現(xiàn)并命名的一種新型白介素?，F(xiàn)已證實IL-32是一種前炎癥因子[9]，通過p38絲裂原活化蛋白激酶信號通路，誘導(dǎo)多種IL、TNF-α、巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2和趨化因子等的分泌，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，與多種炎癥性疾病及自身免疫疾病(潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及艾滋病等)密切相關(guān)[10-11]。

IL-32與PD的相關(guān)性研究較少，其參與神經(jīng)炎癥反應(yīng)的具體機(jī)制可能是IL-32通過p38絲裂原活化蛋白激酶、核因子-κB信號通路[7]，誘導(dǎo)包括TNF-α在內(nèi)的多種炎性因子及趨化因子等分泌[12]。TNF-α在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)是一種神經(jīng)毒性介質(zhì)，可誘導(dǎo)神經(jīng)元主要組織相容性復(fù)合體-Ⅰ上調(diào)，上調(diào)后的神經(jīng)元更易受到主要組織相容性復(fù)合體-Ⅰ限制性細(xì)胞毒性T細(xì)胞攻擊。小膠質(zhì)細(xì)胞受損后產(chǎn)生一些氧自由基，例如氮氧化物和超氧化物等，依次誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，致使多巴胺神經(jīng)元功能喪失直至進(jìn)入凋亡程序，最終出現(xiàn)PD的臨床表現(xiàn)[13-14]。

Braak等[15]在2003年發(fā)表了一項重要假說，該假說將PD分為6期，在典型運(yùn)動癥狀出現(xiàn)之前，患者腦組織α-突觸核蛋白酶已主要累及嗅球、迷走神經(jīng)背側(cè)運(yùn)動核、延髓及腦橋被蓋等，從而出現(xiàn)嗅覺減退、吞咽困難、抑郁、睡眠障礙及疼痛等非運(yùn)動癥狀；當(dāng)累及到中腦黑質(zhì)時，患者即出現(xiàn)臨床上典型的運(yùn)動癥狀；進(jìn)一步發(fā)展則累及邊緣系統(tǒng)和新皮質(zhì)區(qū)域。這為PD患者在疾病不同階段出現(xiàn)的情緒、精神和認(rèn)知障礙乃至癡呆等非運(yùn)動癥狀提供了一種新的理論。

本研究結(jié)果顯示，PD患者血清IL-32水平顯著高于健康體檢者，Spearman等級相關(guān)系數(shù)分析顯示PD患者血清IL-32水平與PD患者非運(yùn)動癥狀之間存在正相關(guān)關(guān)系，NMSS各項分析顯示IL-32水平與患者的情緒與認(rèn)知障礙、注意力及記憶力障礙方面存在正相關(guān)。PD患者普遍存在不同程度的非運(yùn)動癥狀，所有非運(yùn)動癥狀中，情緒與認(rèn)知障礙發(fā)生比例最高，其次為注意力與記憶力障礙、睡眠障礙與疲勞及其他方面等。PD患者的非運(yùn)動癥狀個體臨床表現(xiàn)差異較大且種類繁多，醫(yī)生對PD患者的非運(yùn)動癥狀關(guān)注較少，疾病發(fā)生、發(fā)展過程中非運(yùn)動癥狀給患者帶來較為嚴(yán)重的影響；特別是到疾病中晚期，非運(yùn)動癥狀可加重運(yùn)動障礙、縮短壽命，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量[16-17]。臨床醫(yī)生應(yīng)重視并早期識別患者的非運(yùn)動癥狀給予及時干預(yù)，從而緩解患者痛苦、提高患者生活質(zhì)量。

綜上所述，PD患者的非運(yùn)動癥狀發(fā)生率高且與IL-32之間存在明確相關(guān)性，IL-32可能是治療PD患者非運(yùn)動癥狀又一新靶點。鑒于本研究納入的患者較少，且以門診患者居多，無法對患者進(jìn)行干預(yù)后隨訪其血清IL-32水平及非運(yùn)動癥狀，無法得知降低血清IL-32水平是否可以作為PD的修飾治療方案，還需要大樣本前瞻性隊列研究加以論證。

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Study of correlation between plasma interleukin-32 level and the non-motor symptom of Parkinson’s disease

JIA Xiaofei， YAN Junqiang， SHU Bohui， SAI Rui， HUANG Lina
(Department of Neurology，the First Affiliated Hospital of Henan University of Science and Technology， Luoyang Henan 471003， China)

ObjectiveTo determine the correlation of interleukin(IL)-32 and the non-motor symptom of Parkinson’s disease(PD).Methods A cross-sectional study was performed.Seventy four PD patients and 60 control patients in the First Affiliated Hospital of Henan University of Science and Technology were enrolled.Plasma IL-32 levels of the case and control group were detected.PD patients were assessed with the non-motor symptoms scale(NMSS).Results The plasma IL-32 levels in PD were significant higher than those in the control group(P＝0.014).Plasma IL-32 levels in PD were significantly correlated with NMSS scales(r＝0.668，P＝0.000).Subgroup analysis showed that plasma IL-32 levels in PD were correlated with emotion and cognition(r＝0.766， P＝0.000)， attention and remembrance(r＝0.687， P＝0.000).Conclusion Plasma IL-32 levels were higher in PD patients.IL-32 may be affected by PD patients with emotional awareness，attention and memory factors.To reduce serum IL-32 level may be a new target for the treatment of non-motor symptoms in patients with PD.

Parkinson’s disease(PD)； Interleukin-32(IL-32)； Non-motor symptom

R742.5；R392.114

B

2095-3097(2017)05-0269-03

10.3969/j.issn.2095-3097.2017.05.004

國家自然科學(xué)基金聯(lián)合基金項目(U1304809)

471003河南洛陽，河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(賈小飛，閆俊強(qiáng)，舒伯輝，賽 蕊，黃麗娜)

黃麗娜，E-mail:hln388＠163.com

2017-03-13 本文編輯:徐海琴)