蘭子堯 林野 趙松華 周貽兵 李磊 劉利亞

(貴州省疾病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550004)

氣相色譜法測定蔬菜中9種有機磷農(nóng)藥的殘留量

蘭子堯 林野 趙松華 周貽兵 李磊 劉利亞

(貴州省疾病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550004)

有機磷； 氣相色譜； 蔬菜； 殘留量

據(jù)統(tǒng)計，中國農(nóng)藥每年用量達50～60萬噸，其中70%為有機磷農(nóng)藥[1]。有機磷農(nóng)藥的廣泛應(yīng)用顯著提高了農(nóng)作物的產(chǎn)量，但同時也增加了水源、食物中農(nóng)藥的殘留量，人群暴露于多種有機磷農(nóng)藥，可使健康受損[2]。歐盟、美國、日本、韓國均已立法制定了嚴格的有機磷農(nóng)藥殘留量標準[3]。在我國敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化樂果、水胺硫磷、樂果、毒死蜱和三唑磷9種農(nóng)藥是蔬菜生長過程中病蟲害防治的常用有機磷農(nóng)藥，其殘留檢測問題已經(jīng)日益引起社會各界的共同關(guān)注。目前，國內(nèi)蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量的檢測方法無法同時檢測上述9種有機磷農(nóng)藥殘留量，因此，需建立一種科學、快速、省時、準確，一次分析多種有機磷農(nóng)藥的測定方法。現(xiàn)報告如下。

1 臨床資料

1.1 主要儀器與試劑 Varian450-GC型氣相色譜儀(配PFPD檢測器，美國瓦里安公司)；LD-OV-1701石英毛細管色譜柱(30 μm×320 μm×0.32 μm，貴州萊德色譜技術(shù)開發(fā)有限公司)；IKA-T25均質(zhì)器(德國IKA公司)；Sigma3-18K高速冷凍離心機(德國Sigma公司)；乙腈(色譜純，Merck Sharp&Dohme,MSD)；Siemens實驗室純水器(西門子有限公司)。氯化鈉及其它試劑均為分析純(國藥集團化學試劑有限公司)。敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化樂果、水胺硫磷、樂果、毒死蜱和三唑磷標準樣品均為100 μg/mL(農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所)。

1.2 色譜條件 載氣為高純氮氣，載氣流量1.0 mL/min；氫氣流量13 mL/min；空氣1流量17 mL/min；空氣2流量10 mL/min；進樣口溫度250 ℃，分流比10∶1；PFPD檢測器溫度280 ℃；程序升溫初始柱溫150 ℃，保持2 min，以10 ℃/min速率升至250 ℃，保持8 min；進樣量1.0 μL。分離結(jié)果見圖1。

圖1 9種有機磷標準溶液色譜圖

1.3 樣品測定 稱取切碎混勻的蔬菜樣品10 g于50 mL具塞離心管中，加入乙腈30.00 mL，使用均質(zhì)器均質(zhì)3 min，加入氯化鈉5 g，置于冷凍高速離心機上以10 000r/min，-5 ℃離心10 min，取乙腈層20.00 mL過無水硫酸鈉后，濃縮定容至1.0 mL，待測定。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取溶劑的選擇 選取同一份加標蔬菜樣品，通過試驗比較丙酮、二氯甲烷、乙腈等溶劑對蔬菜中有機磷的提取效率，確定最佳提取溶劑。試驗結(jié)果表明：丙酮提取效果最好，但色素等大分子也亦被提取到有機相中，并且丙酮與水互溶，增加后處理負擔；二氯甲烷密度大于水，提取液位于樣品溶液下層，不利于操作，且二氯甲烷對極性較大的有機磷提取效果不佳；乙腈提取效果較好，并且分層速度較快，便于后續(xù)測定。因而確定乙腈為最佳提取溶劑。

2.2 提取方法及凈化方案的確定 蔬菜中有機磷農(nóng)藥提取方法主要有振蕩提取、超聲提取和均質(zhì)提取等。選用不同的提取方式，測定同一份加標樣品，比較不同方法的提取率及實驗過程。結(jié)果表明，振蕩提取和超聲提取耗時較長，至少需要30 min，并且振蕩提取效率較低。高速組織勻漿機均質(zhì)提取速度較快，且提取效率與超聲提取相當。因此確定使用均質(zhì)提取3 min為最佳提取方法。

提取液的凈化方法常規(guī)使用加入活性炭吸附色素、過固相萃取柱(SPE)去除雜質(zhì)，但本項目采用冷凍高速離心的方法進行凈化。設(shè)置轉(zhuǎn)速在10 000r/min以上，溫度在-5 ℃以下，提取液中的固體殘渣和水分被離心到離心管的底層，上層提取液較為清澈透明。雖然高速冷凍離心不能去除色素等大分子物質(zhì)，但由于PFPD檢測器的高選擇性并不影響測定。凈化時間較為快速，不消耗試劑耗材，節(jié)約分析成本。

2.3 標準曲線和方法檢測限 將混合標準溶液在0.05～1.0 μg/mL范圍內(nèi)配制成5個不同濃度的標準溶液系列。按照“1.2”項色譜條件進行色譜分析，以峰面積對質(zhì)量濃度做線性回歸分析。以儀器3倍信噪比(S/N=3)對應(yīng)的濃度作為儀器檢出限，以取蔬菜樣品10 g計算本方法的最低檢測濃度，結(jié)果見表1。

表1 9種有機磷農(nóng)藥線性測定結(jié)果

2.4 加標回收率和精密度試驗 在空白蔬菜樣品中添加兩種濃度的有機磷農(nóng)藥混合標準溶液，考察方法檢測樣品的準確度和精密度。按上述實驗步驟操作，平行測定3次。測定樣品不同加標濃度的回收率，計算平均回收率和相對標準偏差，試驗結(jié)果見表2。

表2 回收率和精密度試驗結(jié)果/(mg/kg)

2.5 樣品測定 應(yīng)用本方法測定本省新鮮蔬菜樣品300份，其中47份樣品檢出禁用農(nóng)藥甲胺磷，檢出率為15.67%；17份樣品中限用有機磷農(nóng)藥超標，超標率為5.67%，超標的限用有機磷農(nóng)藥主要為毒死蜱、敵敵畏和氧化樂果；其它有機磷項目未檢出。

3 小 結(jié)

在查閱相關(guān)文獻[4-6]的基礎(chǔ)上，本文建立了乙腈均質(zhì)萃取，GC-PFPD同時測定上述9種有機磷農(nóng)藥殘留量的檢測方法，同時測定蔬菜樣品中敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化樂果、水胺硫磷、樂果、毒死蜱和三唑磷9種農(nóng)藥的殘留量。方法操作簡便，各農(nóng)藥組分能較好地分離，各種實驗參數(shù)均達到氣相色譜分析技術(shù)要求，并且節(jié)省耗材、溶劑，降低了分析成本，適合于大批量樣品的快速測定。

[1] 趙敏嫻，王燦楠，李亭亭，等.江蘇居民有機磷農(nóng)藥膳食累積暴露急性風險評估[J].衛(wèi)生研究，2013,5(42):844-848.

[2] 潘家榮.有機磷農(nóng)藥的聯(lián)合毒性研究進展[J].環(huán)境與健康雜志，2007,2(7):553-556.

[3] 李光浩.水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的氣相色譜法研究[J].分析化學,2009,37(10):146.

[4] 中華人民共和國衛(wèi)生部.食品中有機磷農(nóng)藥殘留量的測定(GB/T 5009.20-2003)[S].北京:中國標準出版社,2003.

[5] 中華人民共和國衛(wèi)生部.植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定(GB/T 5009.103-2003) [S].北京:中國標準出版社,2003.

[6] 中華人民共和國衛(wèi)生部.柑桔中水胺硫磷殘留量的測定(GB/T 5009.109-2003) [S].北京:中國標準出版社,2003.

R282.71

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1000-744X(2016)04-0378-02

2015-04-02)