趙留存等??

【摘要】目的：比較兩種檢測(cè)方法優(yōu)劣，為豐富山銀花藥材質(zhì)量控制方法提供參考。方法：采用ACQUITY UPLC BEH C18（21×100mm，17μm）色譜柱，流動(dòng)相乙腈（A）-04%醋酸（B），梯度洗脫（0～2 min，7%A；2～23 min，7%A～ 28%A；23～10 min，28%A；10～ 105 min，28%A～ 7%A），梯度流速（0～2～23～ 26～28～4～43～45～105min，035～035～025～015～01～02～03～035～035ml/min），PDA（二極管陣列檢測(cè)器）λ=330 nm；ELSD檢測(cè)器，漂移管溫度60℃，噴霧器48℃，增益值100，氣體流速20psi，柱溫50℃。結(jié)果：PDA檢測(cè)綠原酸在03045～15225μg（R2=09994）質(zhì)量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，ELSD檢測(cè)綠原酸在03045～15225μg（R2=09993）質(zhì)量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。結(jié)論：PDA檢測(cè)器檢測(cè)時(shí)受噪音影響較小，基線較平穩(wěn)，測(cè)得的數(shù)據(jù)比ELSD檢測(cè)器更準(zhǔn)確。

【關(guān)鍵詞】超高效液相色譜法；綠原酸；蒸發(fā)光檢測(cè)器；二極管陣列檢測(cè)器

【中圖分類號(hào)】R2841【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2015）01-0021-03

山銀花為忍冬科植物灰氈毛忍冬Lonicera macranthoides Hand-Mazz.、紅腺忍冬Lonicera confusa DC或黃褐毛忍冬Lonicera fulvoto-mentosa Hsu et SCCheng的干燥花蕾或帶初開的花[1]?；覛置潭鳟a(chǎn)湖南、重慶和貴州，紅腺忍冬主產(chǎn)浙江、江西、福建、廣西等地，黃褐毛忍冬主產(chǎn)貴州等地[2]。其化學(xué)成分主要含有揮發(fā)油、黃酮、有機(jī)酸和三萜類[3]，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱的功效[4]。谷筱玉[5]用HPLC-UV-ELSD法、李紅霞[6]用HPLC法測(cè)定山銀花中綠原酸的含量，二者對(duì)山銀花中綠原酸的含量測(cè)定用紫外檢測(cè)器；盧鳳來(lái)[7]用HPLC-ELSD法、張璐[8]用HPLC-ELSD法測(cè)定山銀花中綠原酸的含量，二者用ELSD檢測(cè)器對(duì)山銀花中的綠原酸含量進(jìn)行測(cè)定。而國(guó)內(nèi)尚未見有山銀花含量測(cè)定的UPLC法報(bào)道。本文用UPLC法將紫外檢測(cè)器（PDA）與蒸發(fā)光檢測(cè)器（ELSD）串聯(lián)同時(shí)測(cè)定山銀花中綠原酸的含量，并對(duì)兩種檢測(cè)方法進(jìn)行對(duì)比，優(yōu)選出了最佳測(cè)定方法，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1儀器和試劑

11儀器Waters UPLC H-Class 超高效液相色譜儀，配有四元超高壓溶劑系統(tǒng)、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣恒溫樣本管理器、ELSD檢測(cè)器、PDA檢測(cè)器和Empower 3色譜工作站；電子分析天平（XS20S）；超聲波清洗器（HS1026OD，天津奧康）。

12材料綠原酸（批號(hào)：110753-201314，中國(guó)食品藥品檢定研究院）。山銀花分別采自貴州綏陽(yáng)縣小關(guān)鄉(xiāng)、丹寨興仁鎮(zhèn)、金沙龍壩鄉(xiāng)、施秉縣白垛鄉(xiāng)和安順西秀區(qū)，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院魏升華副教授鑒定，各地山銀花均為灰氈毛忍冬。乙腈為色譜純（德國(guó)Merck）；水為哇哈哈純凈水；其余試劑均為分析純。

13溶液的制備

131對(duì)照品溶液的制備精密量取對(duì)照品綠原酸609mg，用50%甲醇定容至10 ml即得。

3討論

31檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇取綠原酸對(duì)照品溶液，采用二極管陳列檢測(cè)器進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，吸收光譜顯示綠原酸在2190、2452、3240 nm處有最大吸收，參考《中國(guó)藥典》2010年版一部山銀花的含量測(cè)定方法綠原酸的檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm，因此本實(shí)驗(yàn)選取330nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)[1]。

32PDA檢測(cè)器PDA檢測(cè)器是通過(guò)化合物結(jié)構(gòu)中特定基團(tuán)對(duì)紫外光的吸收而對(duì)化合物進(jìn)行檢測(cè)的檢測(cè)器，具有靈敏度高、線性范圍寬、使用方便、對(duì)流速和溫度不敏感等優(yōu)點(diǎn)，在液相色譜中應(yīng)用非常廣泛。但缺點(diǎn)是對(duì)無(wú)紫外吸收的化合物無(wú)法檢測(cè)[9]。ELSD作為一種通用型檢測(cè)器，既適用于有紫外吸收的化合物的測(cè)定，又適合于無(wú)紫外吸收的化合物的測(cè)定，其檢測(cè)范圍更廣泛一些[10]。本文通過(guò)兩種檢測(cè)方式對(duì)比，兩種檢測(cè)器都能測(cè)出山銀花中綠原酸的含量，通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的圖譜分析PDA檢測(cè)器檢測(cè)時(shí)受噪聲影響較小，基線較平穩(wěn)，積分測(cè)得的數(shù)據(jù)比ELSD檢測(cè)器準(zhǔn)確，因此UPLC法測(cè)定山銀花中綠原酸的含量應(yīng)當(dāng)用PDA檢測(cè)器檢測(cè)更準(zhǔn)確一些。

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（收稿日期：20140929）