張慧珍 ，靳雙玲(山西長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院附屬和平醫(yī)院婦科，山西 長(zhǎng)治 460000)

婦科再造膠囊為一種中藥制劑，其組成包括40 余味中草藥成分如當(dāng)歸、白芍等，有數(shù)10 年治療痛經(jīng)的歷史，但藥理研究報(bào)道不多。本實(shí)驗(yàn)致力于研究婦科再造膠囊對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜容受性的影響，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取8 w 齡30 只無(wú)特定病原(specific pathogen free，SPF)級(jí)健康性成熟SD 雌性未孕大鼠，體質(zhì)量為(96.12 ±8.06)g。在通風(fēng)、整潔、自動(dòng)控光12/12 h 光/暗循環(huán)、相對(duì)濕度(49 ±4)%，19～26 ℃實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下，大鼠充分給水。大約飼養(yǎng)1 w后(正常飼料喂養(yǎng)、自由攝食)用于實(shí)驗(yàn)。大鼠每籠5 只分籠喂養(yǎng)。促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑(gonadotropin-releasing hormone agonist，GnRHa)注射用丙氨瑞林，由貴陽(yáng)德昌祥制藥有限公司提供，批號(hào)2005035。將婦科再造膠囊研磨成粉后，用生理鹽水配制成混懸液(pH5.5)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

將30 只大鼠根據(jù)隨機(jī)表法均分為3 組，分別為婦科再造膠囊組(實(shí)驗(yàn)組，n=10)、正常組(n=10)與模型組(n=10)。實(shí)驗(yàn)組大鼠在動(dòng)情后每日上午10 時(shí)腹腔注射丙氨瑞林2.6 μg/200 g，連續(xù)9 d，于第9 天注射人絕經(jīng)期促性腺激素(human menopausal gonadotropin，HMG)4.2 IU/200 g，48 h 后注射人絨毛膜促性腺激素(human chorionic，gonadotropin，HCG)175 IU/200 g。把雌雄大鼠按照2∶1的比例合籠，將發(fā)現(xiàn)陰栓和精子的時(shí)間記錄為孕1 d。同時(shí)每日給予婦科再造膠囊混懸液3 ml 灌胃直到處死。正常組大鼠動(dòng)情后每日上午10 時(shí)腹腔注射與丙氨瑞林等量的生理鹽水，連續(xù)9 d，于第9 天注射與HMG 等量的生理鹽水，48 h 后注射與HCG 等量的生理鹽水。于大鼠排卵后合籠，將發(fā)現(xiàn)陰栓和精子的時(shí)間記錄為孕1 d。同時(shí)每日給予與婦科再造膠囊等量的生理鹽水灌胃直到處死。模型組大鼠動(dòng)情后每日上午10 時(shí)向大鼠腹腔注射丙氨瑞林2.6 μg/200 g，連續(xù)9 d，于第9 天注射與HMG 等量的生理鹽水，48 h 后注射與HCG 等量的生理鹽水。于大鼠排卵后合籠，將發(fā)現(xiàn)陰栓和精子的時(shí)間記錄為孕1 d。同時(shí)每日給予與婦科再造膠囊等量的生理鹽水灌胃直到處死。取妊娠第2 天和第5 天子宮制作標(biāo)本并稱量，通過(guò)觀察內(nèi)膜形態(tài)學(xué)指標(biāo)，對(duì)大鼠不同時(shí)段的子宮指數(shù)、內(nèi)膜成熟度等指標(biāo)進(jìn)行觀察、檢測(cè)，研究婦科再造膠囊對(duì)子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)因素的影響。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行，其中計(jì)量資料統(tǒng)計(jì)采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料統(tǒng)計(jì)采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況觀察

30 只大鼠喂養(yǎng)、排便正常，皮毛光澤，有良好的精神狀態(tài)，用藥周期中日常表現(xiàn)未見異常，且沒有任何不良反應(yīng)。

2.2 各組大鼠子宮指數(shù)的觀察

各組大鼠的子宮指數(shù)比較，見表1。實(shí)驗(yàn)組子宮指數(shù)明顯高于正常組、模型組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，實(shí)驗(yàn)組孕2 d、孕5 d 同組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

表1 各組大鼠的子宮指數(shù)比較(ˉx±s，n=10)Tab 1 Uterus index in each group (ˉx±s，n=10)

2.3 各組大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較

實(shí)驗(yàn)組、模型組孕2 d 及孕5 d 大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)組孕2 d 及孕5 d 間比較，子宮內(nèi)膜厚度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表2。

表2 各組大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較(ˉx±s，n=10)Tab 2 Endometrial thickness in each group (ˉx±s，n=10)

2.4 各組大鼠子宮內(nèi)膜成熟度比較

表3 是三組大鼠子宮內(nèi)膜成熟度比較。實(shí)驗(yàn)組孕2 d、5 d 發(fā)育情況與正常組、模型組比較明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。通過(guò)同組間比較，孕2 d 實(shí)驗(yàn)組與孕5 d 實(shí)驗(yàn)組子宮內(nèi)膜成熟度比較結(jié)果均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表3 各組大鼠子宮內(nèi)膜成熟度比較［n，(%)］Tab 3 Endometrial maturity in each group

2.5 各組雌激素和孕激素水平比較

表4 結(jié)果顯示，婦科再造丸膠囊能明顯提高大鼠血清中雌激素和孕酮水平，實(shí)驗(yàn)組與模型組、正常組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。三組雌激素水平、孕酮水平孕5 d 組大于孕2 d 組，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表4 各組雌激素和孕酮水平比較Tab 4 Estrogen and progesterone levels in each group

2.6 GnRHa 大鼠子宮內(nèi)膜組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)比較

正常組內(nèi)膜腺體數(shù)目多，腺體發(fā)育良好，腺上皮多為單層柱狀細(xì)胞，腺體之間空隙大，充盈著大量分泌物。間質(zhì)細(xì)胞呈圓形，血管明顯增生。實(shí)驗(yàn)組腺體數(shù)目較多，腺腔明顯增大，分泌物明顯增多，間質(zhì)中血管增生，內(nèi)膜表面有大量的膜狀突起。

3 討論

臨床及實(shí)驗(yàn)研究顯示，中藥可以減輕患者的痛苦、最大限度地減少不良反應(yīng)、改善卵細(xì)胞質(zhì)量和增強(qiáng)子宮內(nèi)膜的容受能力［1-2］。婦科再造膠囊作為中成藥的一種，性質(zhì)溫和，調(diào)節(jié)機(jī)體的異常變化過(guò)程副作用小，沒有后顧之憂，無(wú)依賴性。其由當(dāng)歸、白芍、阿膠、熟地、桑葚子、石斛、菟絲子等40 余味中藥材組成;氣微香，味甜、微苦，可補(bǔ)氣益血［3-4］，常用于養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、補(bǔ)益肝腎、暖宮止痛，治療月經(jīng)紊亂、帶經(jīng)日久、痛經(jīng)、帶下等婦科疾病。有研究表明，婦科再造膠囊還用于貧血、缺血性心臟病;手術(shù)前后及腫瘤放、化療的支持治療;老年體虛及其他氣血兩虛所致病癥。婦科再造膠囊藥性溫和，副作用小，因此對(duì)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定幾乎沒有影響，機(jī)體不會(huì)對(duì)婦科再造膠囊產(chǎn)生耐藥作用［5-7］。

研究表明，桑葚子、熟地可調(diào)節(jié)內(nèi)分泌水平;石斛具有抗衰老功能與抗氧化活性;菟絲子能對(duì)機(jī)體的生殖內(nèi)分泌活動(dòng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，能增大成年大鼠子宮、腺垂體，提高垂體反應(yīng)性，調(diào)節(jié)大鼠卵巢內(nèi)激素受體的水平。其補(bǔ)腎的重要意義是改善機(jī)體內(nèi)調(diào)節(jié)機(jī)制，恢復(fù)機(jī)體內(nèi)在功能，從而起到積極的治療作用［8-9］。

實(shí)驗(yàn)研究了婦科再造膠囊干預(yù)GnRHa 超促排卵大鼠和正常組大鼠(孕2 d 及孕5 d)子宮指數(shù)、子宮內(nèi)膜厚度及成熟度等參數(shù)的變化。實(shí)驗(yàn)組孕2 d、孕5 d 大鼠子宮指數(shù)比正常組、模型組高，通過(guò)進(jìn)行組間比較顯示實(shí)驗(yàn)組孕2 d 組子宮指數(shù)均低于孕5 d 組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);對(duì)兩組大鼠子宮內(nèi)膜成熟度進(jìn)行比較結(jié)果顯示，孕2 d 組與孕5 d組子宮內(nèi)膜成熟度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。由上可知，婦科再造膠囊能使子宮指數(shù)得到提高，子宮內(nèi)膜成熟度得到改善，促進(jìn)子宮內(nèi)膜和胞飲突正常發(fā)育，從而改善子宮內(nèi)膜容受性［10-13］，此為婦科再造膠囊的臨床應(yīng)用提供了參考。

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