王斯捷 李曉蓬 郝辰業(yè) 劉桂霞 李衛(wèi)華 唐赟

摘 要 計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)是一門較新興的學(xué)科，是藥物科學(xué)領(lǐng)域的前沿學(xué)科。我們大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)小組的研究主要圍繞計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)，通過藥物分子對接、藥效團(tuán)模型、3D-QSAR以及高通量虛擬篩選等技術(shù)來研究大創(chuàng)課題——靶向ERR 的計(jì)算機(jī)輔助抗II型糖尿病藥物設(shè)計(jì)研究。全文主要講述實(shí)驗(yàn)研究內(nèi)容、研究過程和實(shí)驗(yàn)中的收獲與心得。

關(guān)鍵詞 計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì) 大學(xué)生 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn) 探索

中圖分類號：G424 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

Exploration and Experience on Computer-aided Drug Design Experiment

WANG Sijie， LI Xiaopeng， HAO Chenye， LIU Guixia， LI Weihua， TANG Yun

（School of Pharmacy， East China University of Science and Technology， Shanghai 200237， China）

Abstract Computer-aided drug design is a relatively new discipline， as well as a frontier subject in the field of medical science. The research group mainly focuses on the computer-aided drug design. Through the molecular docking， pharmacophore model， 3D-QSAR and high-throughput virtual screening technology， we tried to do some study on the drug design targeting ERR alpha for the treatment of type 2 diabetes. In the present paper， the research contents and the process， as well as the gain and thoughts from the experiment were described in detail.

Key words computer-aided drug design； undergraduate； innovative experiment； exploration

0 引言

藥物化學(xué)家們一直使用著藥物設(shè)計(jì)思想，他們在對先導(dǎo)化合物進(jìn)行優(yōu)化時(shí)所使用的生物電子等排原理、前藥原理以及拼合原理等，就是傳統(tǒng)的、定性的、經(jīng)驗(yàn)型的設(shè)計(jì)思想。這些方法不需要對靶標(biāo)結(jié)構(gòu)有深入的了解，具有較強(qiáng)的實(shí)用性，但較難突破原來化合物的框架，因此主要用于先導(dǎo)化合物優(yōu)化。隨著計(jì)算機(jī)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，計(jì)算機(jī)在藥物發(fā)現(xiàn)中的應(yīng)用越來越廣，逐漸出現(xiàn)了計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)思想，即以計(jì)算機(jī)為工具，根據(jù)已掌握的靶標(biāo)結(jié)構(gòu)知識和/或已知活性化合物的知識，對藥物-靶標(biāo)相互作用機(jī)理進(jìn)行歸納、分析和預(yù)測，從而指導(dǎo)下一步藥物分子的合成。通過計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)和篩選，一方面可以加速先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化，從而縮短藥物研究與開發(fā)的周期；另一方面還可以降低開發(fā)的成本，減少人力、物力和財(cái)力的浪費(fèi)。短短四十幾年來，計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)在藥物從概念到上市的過程中起著越來越關(guān)鍵的作用，已形成一門新興交叉學(xué)科。因此，在藥學(xué)本科專業(yè)介紹計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)知識，讓學(xué)生了解相關(guān)學(xué)科的內(nèi)容，已是學(xué)科發(fā)展的必然要求。

1 實(shí)驗(yàn)基地

藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)是一種特殊的實(shí)驗(yàn)，需要在計(jì)算機(jī)房、并有一定的軟硬件設(shè)施才能進(jìn)行。學(xué)院2005年8月開始籌建實(shí)驗(yàn)室，通過教育部修購基金、校新專業(yè)建設(shè)費(fèi)用及課題組的科研經(jīng)費(fèi)，購置了聯(lián)想萬全T280服務(wù)器一臺(tái)及聯(lián)想PC機(jī)10臺(tái)（現(xiàn)已擴(kuò)充到18臺(tái)），構(gòu)成服務(wù)器-終端集群系統(tǒng)，同時(shí)購買了Schr dinger分子模擬與設(shè)計(jì)軟件一套，到2006年6月初步建成了本科藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室。

2 實(shí)驗(yàn)平臺(tái)成果與榮譽(yù)

目前藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室已正常運(yùn)轉(zhuǎn)八年，取得了較好的教學(xué)效果。2008年，“本科藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課程建設(shè)” 獲得華東理工大學(xué)教學(xué)成果三等獎(jiǎng)。

“藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)”課程從2006開始先后在藥學(xué)04-11級進(jìn)行教學(xué)。每年的教學(xué)方式和技巧都會(huì)基于前一年教學(xué)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)的基礎(chǔ)上加以改進(jìn)。學(xué)生們學(xué)習(xí)興致很高，實(shí)驗(yàn)課上仔細(xì)操作，并認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。很多學(xué)生反饋上了實(shí)驗(yàn)課以后對藥物設(shè)計(jì)的理論知識才有了深入的理解，明白了一些課堂上沒弄明白的問題；還有一些學(xué)生通過做藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，對這個(gè)領(lǐng)域產(chǎn)生了非常濃厚的興趣，希望我們能再多增加幾個(gè)藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，并希望以后有機(jī)會(huì)能從事藥物設(shè)計(jì)方面的課題研究。

學(xué)生們對藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課程表現(xiàn)出來的濃厚興趣，激發(fā)我們進(jìn)一步改進(jìn)教學(xué)方式和技巧，這將促使藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課程進(jìn)入一個(gè)良性循環(huán)。

同時(shí)，建立的本科藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室，除了服務(wù)于本科藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課程之外，還是學(xué)院創(chuàng)新實(shí)踐教學(xué)基地。實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行八年來，已承擔(dān)（含正在進(jìn)行的）50余名本科二年級和三年級學(xué)生參加大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)以及USRP活動(dòng)，80余名本科畢業(yè)班學(xué)生進(jìn)行畢業(yè)論文工作，以及新加坡理工學(xué)院來訪學(xué)生6名。由唐赟老師指導(dǎo)的本科生先后獲得第三屆“全國大學(xué)生藥苑論壇”的優(yōu)秀論文獎(jiǎng)，第四屆的創(chuàng)新成果三等獎(jiǎng)，以及第三屆“上海市大學(xué)生創(chuàng)新論壇”的優(yōu)秀報(bào)告獎(jiǎng)。

3 大創(chuàng)課題實(shí)踐

3.1 大創(chuàng)人員組成

組長：李曉蓬

組員：王斯捷、郝辰業(yè)

指導(dǎo)老師：劉桂霞

3.2 研究背景

眾所周知，糖尿病是威脅人類健康的重要疾病之一，而根據(jù)體內(nèi)能否分泌胰島素，糖尿病可分為I型糖尿病和II型糖尿病，而II型糖尿病患者占糖尿病患者總數(shù)的九成以上。II型糖尿病除了會(huì)導(dǎo)致我們熟知的視力模糊，身體消瘦，代謝紊亂，還可以導(dǎo)致腎臟損傷，心臟病等并發(fā)癥，以致造成死亡。這都給患者帶來極大的痛苦，給社會(huì)和家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

國際上，對于II型糖尿病的治療一直是一個(gè)研究熱點(diǎn)。目前已有不少上市銷售的口服降糖藥，因?yàn)樘悄虿≈委熕幬锎嬖谳^大的毒副作用，長期服用容易產(chǎn)生低血糖癥，所以不斷探索新的糖尿病藥物成為目前研究的熱點(diǎn)。

我們小組要研究的新型糖尿病治療靶標(biāo)——雌激素關(guān)聯(lián)受體所屬的核受體是一類有明確DNA結(jié)合、激活和配體結(jié)合域的調(diào)控蛋白，其配體結(jié)合域的三級結(jié)構(gòu)表明它們可以允許全部結(jié)合或部分結(jié)合激動(dòng)劑、拮抗劑和反式激動(dòng)劑。把小分子靶向?qū)拥紼RR上，可以通過ERR與其它相關(guān)分子相互作用而增強(qiáng)線粒體氧化磷酸化，研究表明增強(qiáng)線粒體氧化磷酸化能力可以有效改善糖尿病，而這一治療糖尿病的途徑是之前治療糖尿病藥物所沒有涉及的。

ERR不單能通過氧化磷酸化治療糖尿病，ERR的激動(dòng)劑和反向激動(dòng)劑也可以通過抑制糖異生、提高葡萄糖利用水平來調(diào)控糖尿病。

3.3 研究內(nèi)容和方法

該大創(chuàng)課題的研究內(nèi)容是綜合運(yùn)用分子對接、藥效團(tuán)模型、高通量虛擬篩選等計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)方法，闡明激動(dòng)劑與ERR的相互作用機(jī)理，設(shè)計(jì)和發(fā)現(xiàn)若干個(gè)可能的高活性ERR激動(dòng)劑候選化合物。

在接到課題后，我們?nèi)司蛯⒄n題任務(wù)進(jìn)行了詳細(xì)的分工：郝辰業(yè)負(fù)責(zé)用分子對接等模擬方法研究配體與ERR的相互作用機(jī)理；李曉蓬負(fù)責(zé)構(gòu)建ERR的配體藥效團(tuán)模型；王斯捷負(fù)責(zé)對小分子數(shù)據(jù)庫進(jìn)行虛擬高通量篩選。三個(gè)人的研究內(nèi)容又是相互關(guān)聯(lián)的，所以，在實(shí)驗(yàn)過程中，我們互相之間要經(jīng)常溝通研究進(jìn)展，討論研究結(jié)果。

4 實(shí)驗(yàn)過程的阻礙與收獲

在大創(chuàng)的第二個(gè)暑假我們研究小組的成員決定留在校內(nèi)共同研究課題。在那個(gè)暑假里，雖然酷暑難耐，但我們的研究熱情并沒退減。研究過程可謂一波三折。一開始，我們要做一個(gè)3D-QSAR模型，但是相關(guān)的軟件并不完整，我們的實(shí)驗(yàn)一開始就遇到了困難。我們首先請教了出差的老師，之后又詢問了實(shí)驗(yàn)室的師兄師姐，于是，我們決定放棄使用之前的SYBYL軟件，開始學(xué)習(xí)Maestro軟件的使用，Maestro軟件也能構(gòu)建三維構(gòu)效關(guān)系模型。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行至7月底，天氣越來越炎熱，溫度已經(jīng)高達(dá)近40攝氏度，動(dòng)一動(dòng)就滿身大汗。所以，我們決定在實(shí)驗(yàn)室打地鋪睡覺，這樣既節(jié)省時(shí)間，又能避暑。

上大學(xué)第一次感受到幾個(gè)人為了研究一個(gè)課題這么努力。功夫不負(fù)有心人，我們?nèi)撕芸煺莆樟苏n題所需的計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)軟件的使用方法，例如：SYBYL、DS、Catalyst、Maestro、Glide等。在實(shí)驗(yàn)過程中，我們還根據(jù)實(shí)際調(diào)研的文獻(xiàn)以及收集的數(shù)據(jù)對項(xiàng)目的研究方案進(jìn)行了些許調(diào)整。經(jīng)常討論是解決實(shí)驗(yàn)中遇到的問題、加速實(shí)驗(yàn)進(jìn)程的法寶。實(shí)驗(yàn)過程中，我們?nèi)麆?chuàng)新團(tuán)隊(duì)成員經(jīng)常一起討論各自的實(shí)驗(yàn)進(jìn)展、實(shí)驗(yàn)中的新發(fā)現(xiàn)、和實(shí)驗(yàn)過程中遇到的問題；一旦遇到我們自己無法解決的問題，我們就會(huì)及時(shí)請教指導(dǎo)老師和實(shí)驗(yàn)室的師兄師姐。討論經(jīng)常會(huì)給我們帶來一些靈感和啟發(fā)，實(shí)驗(yàn)中遇到的困難也一一攻克。目前，我們已順利完成了既定的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，基本實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)。

5 結(jié)語

這次實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷給我們最深遠(yuǎn)的影響絕不僅僅是學(xué)會(huì)一些知識，而是我們在科研實(shí)踐過程中學(xué)會(huì)了如何發(fā)現(xiàn)并解決問題，從而培養(yǎng)了自己求學(xué)好問和持之以恒的精神。這給我們以后的學(xué)習(xí)和工作帶來的影響，我想會(huì)是決定性的。因?yàn)槲覀儗W(xué)會(huì)了不向困難低頭，在學(xué)習(xí)中獲得解決問題的能力和滿足好奇心的快樂。

與此同時(shí)，相信不遠(yuǎn)的將來，以計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)為主要內(nèi)容的“藥物設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)”課程將在中國高校會(huì)越來越普及，會(huì)有越來越多的人能進(jìn)入CADD的世界。此時(shí)，我想起實(shí)驗(yàn)室里常說的一句話，CADD is like searching for a needle in a haystack. 這句話也是人生的信條，與大家共勉！

基金項(xiàng)目： 2012年國家大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目（S12040）

參考文獻(xiàn)

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