徐月啟，張 強(qiáng)

(河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 藥學(xué)部，河南 鄭州 450000)

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中藥冬蟲(chóng)夏草的性狀及顯微鑒定研究

徐月啟，張 強(qiáng)

(河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 藥學(xué)部，河南 鄭州 450000)

目的：研究分析冬蟲(chóng)夏草的性狀及顯微鑒定情況。方法：選用由四川、青海等地收集或自采的19份蟲(chóng)草樣品及來(lái)源準(zhǔn)確的館存標(biāo)本8份作為研究對(duì)象。結(jié)果：經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，冬蟲(chóng)夏草由蟲(chóng)體與自頭部長(zhǎng)出的真菌子座連接而成。蟲(chóng)體與蠶相似，類圓柱形，稍有彎曲，長(zhǎng)約3～5cm，粗約3～8mm，呈深黃色至黃棕色，可分成頭部(簡(jiǎn)稱H)、胸節(jié)(簡(jiǎn)稱Th)以及腹節(jié)(簡(jiǎn)稱Ab)。顯微鑒別特征主要包括腹節(jié)體壁特征與腹足趾部特征。結(jié)論：根據(jù)冬蟲(chóng)夏草的性狀及顯微特征鑒別其真?zhèn)?，可為相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的增修訂與市場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)提供科學(xué)依據(jù)，還能為其它混淆品的鑒別研究、制劑與粉末的檢驗(yàn)提供一定參考。

冬蟲(chóng)夏草；性狀； 顯微鑒定

《中國(guó)藥典》中記載冬蟲(chóng)夏草是一種麥角菌科真菌冬蟲(chóng)夏草菌于蝙蝠蛾科昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)上的子座或幼蟲(chóng)尸體上寄生的復(fù)合體。其具有化痰、止血以及補(bǔ)肺益腎等功效，常用于腰膝酸軟、陽(yáng)痿遺精、癆嗽咳血以及久咳虛喘等病癥的治療。隨著冬蟲(chóng)夏草資源的減少，市場(chǎng)中混淆品逐漸增多,所以完善蟲(chóng)草品種的鑒定方法，準(zhǔn)確判斷其來(lái)源，對(duì)藥品的檢驗(yàn)及監(jiān)督具有非常重要的意義。將《中國(guó)藥典》或相關(guān)文獻(xiàn)資料中對(duì)冬蟲(chóng)夏草的鑒定、性狀特征作為主要依據(jù)，但是由于混淆品逐漸增多，現(xiàn)有性狀描述變得過(guò)于簡(jiǎn)單，一些混淆品也具有以上特征，缺乏更為科學(xué)、準(zhǔn)確的鑒別點(diǎn)，所以本研究將進(jìn)一步圍繞其性狀及顯微特征進(jìn)行探究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選用由四川、青海等地收集或自采的19份蟲(chóng)草樣品及來(lái)源準(zhǔn)確的8份館存標(biāo)本作為研究對(duì)象。

1.2 方法

觀察并記錄樣品外觀的性狀特征，應(yīng)用游標(biāo)卡尺對(duì)樣品的基本數(shù)據(jù)進(jìn)行測(cè)量，同時(shí)利用數(shù)碼照相機(jī)逐一拍照。將樣品表面放入水中浸潤(rùn)，應(yīng)用解剖針將其殘留的菌膜及雜質(zhì)去除，使用OLYMPUS SZX-12實(shí)體纖維鏡、數(shù)碼成像系統(tǒng)觀察樣品的微觀性狀特征，并做好詳細(xì)記錄。將材料置入水中浸潤(rùn)，并將其表面殘留的菌膜、雜質(zhì)去除，再利用刀片刮取相應(yīng)的觀察部位，放在載玻片上，然后利用濾紙將水分吸干。先滴加適量的水合氯醛試液再加熱透化，待顏色變淺或者半透明后進(jìn)行沖洗，將水分吸干。然后滴加少量稀甘油，蓋上蓋玻片，冷卻以后在OLYMPUS BX51-DP71透射光顯微鏡、CCD數(shù)碼成像系統(tǒng)下觀察，通過(guò)目鏡測(cè)微尺測(cè)量，并記錄好其特征數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 性狀鑒別特征

冬蟲(chóng)夏草是由蟲(chóng)體與自頭部長(zhǎng)出的真菌子座連接而成的。子座單生，稀2～3個(gè)，由頭頂靠近中央部生出。其表現(xiàn)為細(xì)長(zhǎng)圓柱形，基部稍粗，略有扭曲，長(zhǎng)約4～7cm，粗約2～4mm，表面呈棕褐色或深褐色，略有縱紋。子座頂端存在圓錐樣的不孕部位，長(zhǎng)約3～6cm。一些子座上端略有膨大，表現(xiàn)為短柱狀，表面較粗糙，在放大鏡下可觀察到密布的顆粒狀子囊殼。制柔韌，很容易折斷，橫斷面邊緣呈棕褐色，中心近似白色。膨大部位橫斷面邊緣可觀察到單層卵圓形的子囊殼部分包埋在子座內(nèi)，縱切面可觀察到子囊殼表現(xiàn)為卵圓形，且垂直埋生。蟲(chóng)體與蠶相似，類圓柱形，稍有彎曲，長(zhǎng)約3～5cm，粗約3～8mm，呈深黃色或黃棕色，可分成頭部、胸節(jié)以及腹節(jié)。頭部比較小，寬約2.8～4.5mm，一般被子座基部菌膜所包囊，將菌膜去除后表面呈黃棕色或紅棕色，大部分緊密、皺密，頂端中央存在子座由縫間隙擠出。胸節(jié)長(zhǎng)約3.5～7.3mm，表現(xiàn)為淡黃色或黃色，背側(cè)環(huán)紋較細(xì)密，靠近頭端稍有骨化。胸節(jié)腹側(cè)存在殘存胸足，共3對(duì)，均為棕黃色節(jié)鉤狀。腹節(jié)長(zhǎng)約2～4cm，呈深黃色或黃棕色，分為10節(jié)，1～7腹節(jié)背側(cè)有明顯的環(huán)紋，并依次呈弧形排列。將每腹節(jié)分成4個(gè)小節(jié)，第1小節(jié)較寬闊；第2小節(jié)較狹短；第3、4小節(jié)較狹長(zhǎng)，靠近尾部的小節(jié)逐漸變少，或是分節(jié)不顯著。各腹節(jié)前兩小節(jié)可觀察剛毛脫落后的殘留毛片，特別是背側(cè)的兩對(duì)比較顯著，毛片稍有突出，表現(xiàn)為圓形點(diǎn)狀，呈淡黃色，較光澤。

2.2 顯微鏡鑒別特征

2.2.1 腹節(jié)體壁特征 體壁表面存在濃密的小刺毛，且散布黃棕色或紅棕色團(tuán)塊狀物質(zhì)。小刺毛呈不規(guī)則排布，長(zhǎng)約25～35μm，呈淡黃色，脫落部位可觀察到圓形殘痕。團(tuán)塊狀物質(zhì)呈黃棕色或紅棕色，直徑約為25～60μm，表面比較粗糙，其上也存在小刺毛。體壁上毛片近似類圓形，最大直徑約為300～500μm，呈淡黃色，表面平滑或稍有皺紋，靠近中央處有1個(gè)環(huán)形毛窩，直徑約為75～105μm，邊緣表現(xiàn)黃棕色，且中心下陷，顏色較淺，可觀察到剛毛脫落痕。

2.2.2 腹足趾部特征 趾部頂面觀多平截，表現(xiàn)為類圓形，內(nèi)側(cè)端與外側(cè)端相比稍窄，其上存在密集的趾鉤。趾鉤呈棕黃色，表現(xiàn)類圓形多環(huán)狀，排布較均勻。最內(nèi)環(huán)趾鉤有22～37個(gè)，頂面觀略表現(xiàn)短條形，一端呈鈍圓，一端呈略尖，長(zhǎng)約35～65μm；側(cè)面觀表現(xiàn)鉤狀。趾鉤向外環(huán)越來(lái)越短，排列交錯(cuò)不規(guī)則，邊緣有刺狀小棘，頂面可見(jiàn)類圓形點(diǎn)狀，側(cè)面可見(jiàn)刺突狀。

3 討論

通過(guò)對(duì)收集的冬蟲(chóng)夏草樣品研究發(fā)現(xiàn)，冬蟲(chóng)夏草蟲(chóng)體部位在外觀性狀上存在一系列規(guī)律性鑒別特征，例如足形態(tài)及毛片、環(huán)紋及分節(jié)、子座長(zhǎng)出方式以及不同部位色澤差異等。冬蟲(chóng)夏草子座從頭部開(kāi)進(jìn)中央部位的生出，蟲(chóng)體的腹節(jié)、胸節(jié)以及頭部的色澤差異，1～7腹節(jié)每節(jié)一寬三狹的性狀特征是鑒別冬蟲(chóng)夏草真?zhèn)蔚年P(guān)鍵。根據(jù)實(shí)驗(yàn)觀察可知蟲(chóng)體背側(cè)、體側(cè)、腹側(cè)體壁表面的特征基本一致，為了實(shí)驗(yàn)條件的一致性，每個(gè)樣品均選擇第3腹節(jié)、第1小節(jié)背側(cè)的體壁作為研究腹節(jié)體壁的部位。結(jié)果顯示冬蟲(chóng)夏草體部分的體壁存在特異性的團(tuán)塊樣物質(zhì)及小刺毛。本組實(shí)驗(yàn)中以第3腹節(jié)腹側(cè)的腹足為主，若此部位缺失個(gè)體，應(yīng)選擇其它腹足予以實(shí)驗(yàn)。冬蟲(chóng)夏草的蟲(chóng)體腹足趾鉤排列存在特異性，表現(xiàn)為類圓形多環(huán)分布，最內(nèi)環(huán)趾鉤有22～37個(gè)，趾鉤從內(nèi)環(huán)向外環(huán)越來(lái)越短。根據(jù)對(duì)冬蟲(chóng)夏草藥材蟲(chóng)體性狀及顯微特征的鑒定研究發(fā)現(xiàn)，與冬蟲(chóng)夏草產(chǎn)生有關(guān)的此類昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)需具備穩(wěn)定性及一致性的鑒別特征，以上特征與其它種類蟲(chóng)草相對(duì)應(yīng)的昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)存在明顯差異性。所以，根據(jù)冬蟲(chóng)夏草的性狀及顯微特征鑒別其真?zhèn)?，可為相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的增修訂與市場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)提供科學(xué)依據(jù)，還能為其它混淆品的鑒別研究、制劑與粉末的檢驗(yàn)提供參考。

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(責(zé)任編輯：宋勇剛)

2014-02-25

徐月啟(1975-),河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥師，研究方向?yàn)獒t(yī)院藥學(xué)。

R282.5

A

1673-2197(2014)11-0010-02