宋惠英

復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院輸血管理科，上海201700

微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)價(jià)值對(duì)比

宋惠英

復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院輸血管理科，上海201700

目的探討微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)價(jià)值差異。方法選取含有紅細(xì)胞同種抗體血液樣本163例，分別采用微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法檢測(cè)；比較兩種方法紅細(xì)胞同種抗體總檢出準(zhǔn)確率，-D，-E，-C，-c，-e，-C+e，-E+c，-M，-N，-S，-s，-Dia，-Fya，-Fyb，-Jka，-Jkb，-K，-k，-Lua，-Lub，-Lea，-Leb，-P1及未知抗體特異性檢出準(zhǔn)確率等。結(jié)果常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為82.21%（134/163），98.77%（161/163）；微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其中常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為28.00%（7/25），100.00%（25/25）；而常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于未知抗體特異性抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為52.17%（12/23），100.00%（23/23）；微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體、未知抗體特異性抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率均顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)總體價(jià)值優(yōu)于試管抗球蛋白；但在臨床配血時(shí)如微柱凝膠抗球蛋白法檢測(cè)出現(xiàn)不匹配現(xiàn)象，應(yīng)與常規(guī)試管抗球蛋白法聯(lián)合應(yīng)用以提高輸血指導(dǎo)效果。

微柱凝膠抗球蛋白法；抗球蛋白法；紅細(xì)胞；同種抗體；檢測(cè)

作為輸血安全檢驗(yàn)重要組成部分之一，紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查對(duì)于預(yù)防輸血反應(yīng)和避免新生兒溶血癥發(fā)生作用關(guān)鍵[1-2]；臨床常規(guī)采用試管抗球蛋白法進(jìn)行紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)，但操作較為繁瑣[3]，而近年來微柱凝膠抗蛋白法以其操作簡(jiǎn)便，肉眼可行結(jié)果判定等優(yōu)勢(shì)開始在臨床得到推廣使用[4]，但兩種方法紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率優(yōu)劣仍存在爭(zhēng)議。本次研究選取含有紅細(xì)胞同種抗體血液樣本163例，分別采用微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法檢測(cè)；比較兩種方法紅細(xì)胞同種抗體總檢出準(zhǔn)確率和各分型檢出準(zhǔn)確率，探討兩種方法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)價(jià)值差異。

1 資料與方法

1.1 血液標(biāo)本來源

選取我院檢驗(yàn)科2012年1月—2013年10月收集因輸血前相容性不符或發(fā)生輸血不良反應(yīng)血液標(biāo)本163例，每份標(biāo)本均包含抗凝和不抗凝血各10 mL。

1.2 檢測(cè)儀器與試劑

檢測(cè)儀器選擇TXK4型血型血清學(xué)用離心機(jī)（長(zhǎng)沙英泰離心機(jī)儀器有限公司生產(chǎn)），Diana免疫微柱孵育器(長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn))；檢測(cè)試劑包括低離子/抗人球蛋白卡，抗球蛋白，譜試劑紅細(xì)胞系及抗體篩查標(biāo)準(zhǔn)品，均由Diamed AG公司生產(chǎn)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 抗球蛋白法以混合待檢測(cè)液體（血清50 uL+3%～5%譜試劑紅細(xì)胞系懸液25 uL）于37℃溫箱內(nèi)孵育40 min，足量鹽水反復(fù)沖洗4～5次，傾倒上清后加入抗球蛋白50 uL，100r/min離心1 min后觀察。

1.3.2 微柱凝膠抗球蛋白法以0.8%譜試劑紅細(xì)胞系懸液50 uL注入低離子/抗人球蛋白卡中，再取待檢測(cè)血清或血漿標(biāo)本加入同一卡中，于37℃溫箱內(nèi)孵育20 min，依次以80r/min離心2 min，200r/min離心4 min后觀察，參照試劑說明書進(jìn)行結(jié)果判定[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次研究數(shù)據(jù)錄入分析分別選擇Epidata3.08和SPSS 18.0軟件；統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05判定為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為82.21%（134/163），98.77%（161/163）；微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其中常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為28.00%（7/25），100.00%（25/25）；而常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于未知抗體特異性抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為52.17%（12/23），100.00%（23/23）；微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體、未知抗體特異性抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率均顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；見表1。

表1 微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗

3 討論

常規(guī)試管抗球蛋白法和微柱凝膠蛋白凝膠法均以抗球蛋白為檢測(cè)基礎(chǔ)[6]；其中常規(guī)試管抗球蛋白試驗(yàn)是公認(rèn)檢測(cè)IgG抗體金標(biāo)準(zhǔn)，其通過將IgG抗體致敏紅細(xì)胞與抗球蛋白混合后觀察是否有凝集反應(yīng)出現(xiàn)[7-8]；而微柱凝膠抗球蛋白法檢測(cè)機(jī)制為綜合生化、免疫學(xué)及物理等多種方法方法，利用游離紅細(xì)胞和聚集紅細(xì)胞直徑不同，以一定孔徑凝膠介質(zhì)分離不同狀態(tài)紅細(xì)胞[9-10]。本次研究結(jié)果顯示，常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為82.21%（134/163），98.77%（161/ 163）；微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其中微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率與之前報(bào)道基本一致，但常規(guī)抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率低于以往報(bào)道[11-12]，可能與研究血液樣本，檢測(cè)儀器及試劑差異有關(guān)。而微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體、未知抗體特異性抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率均顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這與常規(guī)食管抗球蛋白法37℃孵育時(shí)間長(zhǎng)于微柱凝膠抗球蛋白法有關(guān)，因延長(zhǎng)孵育時(shí)間可降低對(duì)冷性抗體檢測(cè)準(zhǔn)確率[13-14]。

綜上所述，微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細(xì)胞同種抗體檢測(cè)總體價(jià)值優(yōu)于試管抗球蛋白；但在臨床配血時(shí)如微柱凝膠抗球蛋白法檢測(cè)出現(xiàn)不匹配現(xiàn)象，應(yīng)與常規(guī)試管抗球蛋白法聯(lián)合應(yīng)用以提高輸血指導(dǎo)效果。

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R446.6

A

1672-5654（2014）10（a）-0180-02

2014-08-05）

宋惠英（1970-），女，上海松江，大專，主管檢驗(yàn)師，主要從事臨床輸血前后的實(shí)驗(yàn)。