王藝紅，鄭紹忠，吳藝燕

解放軍第一七五醫(yī)院（廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院），福建漳州 363000

氯霉素氫化可的松滴耳液（氯可滴耳液）是《中國醫(yī)藥制劑規(guī)范》中收載的品種[1]，其有效成分為氯霉素和氫化可的松，是一種常用的醫(yī)院制劑。規(guī)范中“含量測定”項下未對氫化可的松進(jìn)行含量控制。為保證制劑質(zhì)量，筆者參考有關(guān)文獻(xiàn)[2-4]設(shè)計了雙波長分光光度法測定氯可滴耳液中氫化可的松的含量。該法不需要分別處理供試品，在氯可滴耳液稀釋1000倍后，便可直接測定氯霉素和氫化可的松的含量。

1 儀器與試劑

紫外可見分光光度計 （島津UV-2250）；分析天平（BT214S，德國賽多利斯）。氫化可的松對照品（山東新華制藥股份有限公司，批號：090913）；氯霉素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：130555-200602）；氯霉素氫化可的松滴耳液（本院制劑室配制，規(guī)格8 ml，批號為100128、100315、100517）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品貯備液的制備

準(zhǔn)確稱取105℃下干燥至恒重的氯霉素對照品100.0 mg和氫化可的松對照品20.0 mg，分別用無水乙醇溶解并定容至 200 ml，制成貯備液 A（500 μg/ml的氯霉素對照品）和貯備液B（100 μg/ml的氫化可的松對照品）。再精密量取貯備液A、B各100 ml，于250 ml容量瓶中，加水稀釋定容，即得氯霉素濃度為200 μg/ml，氫化可的松的濃度為40 μg/ml的混合溶液。

2.2 等吸收波長的選擇

取編號為A、B、C的100 ml容量瓶3個。分別加貯備液A 2 ml；貯備液 B 5 ml；貯備液 A、B 各 2 ml；加水定容，搖勻備用。將以上3種溶液以水為空白，分別于200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，建立紫外光吸收圖譜，見圖1。根據(jù)圖1，可見氫化可的松在248 nm處有最大吸收，即λ1＝248 nm，而氯霉素在該點與308.7 nm處有等吸收，即參比波長λ2＝308.7 nm。

2.3 線性關(guān)系考察

分別精密量取貯備液 C 0.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 ml分別置于100 ml容量瓶中，用水定容，搖勻。以水為空白，于248、308.7 nm 處測定吸收度（A），求出吸收度之差△A氫化可的松＝A248-A308.7。以濃度（C）為橫坐標(biāo)，△A為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸分析，得回歸方程：A=0.04456C+0.00220，r=0.9999，結(jié)果表明，氫化可的松在0～10 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4 精密度試驗

取貯備液C 25 ml，用水稀釋并定容至200 ml，搖勻。分別取樣測定 6 次，測得濃度為 5.076、5.083、5.089、5.090、5.083、5.087 μg/ml，平均 5.0847μg/ml，RSD 為 0.10%。

圖1 貯備液紫外光吸收圖譜

2.5 穩(wěn)定性試驗

取“2.4”項下供試液，分別于 0、1、2、3、6、8 h 測定，測得濃度分別為 5.059、5.124、5.071、5.140、5.080、5.137 μg/ml，平均為 5.1018 μg/ml，RSD 為 0.70%。

2.6 測定范圍試驗

精密量取氯霉素氫化可的松滴耳液1 ml，置于100 ml容量瓶中，加水定容，搖勻。再精密量取稀釋液4.0、5.0、6.0 ml各5份，分別置50 ml容量瓶中，加水定容并搖勻，即得處方濃度為80%、100%、120%的樣品供試液，測定吸光度，得濃度值，見表1。

表1 不同濃度的供試液的濃度測定情況

2.7 加樣回收率試驗

精密量取貯備液C 4、6、8 ml各3份，分別置于50 ml容量瓶中，再分別各加貯備液B 1.0 ml，加入經(jīng)稀釋了1000倍的空白供試品溶液至刻度，搖勻。測定吸光度，得濃度值，計算加入氫化的松的回收率。見表2。

2.8 樣品含量測定

精密量取樣品5 ml，稀釋1000倍，使之成為每毫升含氯霉素 25 μg，氫化可的松 5 μg 的溶液。 照“2.6”項下方法測定氫化可的松含量；在278 nm處測定氯霉素含量。三批樣品的測定結(jié)果，見表3。

3 討論

氫化可的松是氯可滴耳液的主要成分之一，且為激素類成分，不良反應(yīng)多且嚴(yán)重，為了保障制劑質(zhì)量，提供臨床安全有效的用藥，有必要建立氫化可的松的含量測定方法。

表2 加樣回收率測定結(jié)果

表3 樣品測定結(jié)果

3.1 供試品溶液的稀釋劑選擇

氯霉素微溶于水，而氫化可的松不溶于水，因此制備貯備液A、B時使用無水乙醇溶解。此外，其他稀釋過程一律選用環(huán)保、廉價、易得的純化水為溶劑，經(jīng)試驗證明，測定的精密度高，穩(wěn)定性好，結(jié)果可靠。

3.2 空白無干擾

不含氯霉素和氫化可的松的空白供試品溶液稀釋1000倍后，以水為空白，在200～400 nm波長范圍內(nèi)無吸收，故測定時不需對樣品進(jìn)行特殊處理。

3.3 方法學(xué)要求

樣品稀釋1000倍后，各主要成分在測定波長處的吸收值均在適宜范圍內(nèi)，符合方法學(xué)要求。測定氫化可的松的供試液同時也可用于氯霉素的含量測定，無需另行制備，說明本法供試液的制備簡便，含量測定快速。

綜上所述，使用雙波長分光光度法測定氫化可的松的含量操作快速簡便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于氯可滴耳液的質(zhì)量控制。建議將氫化可的松的含量控制寫入法規(guī)，進(jìn)一步完善氯可滴耳液的質(zhì)量控制。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.中國醫(yī)院制劑規(guī)范:西藥制劑[M].2版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1995:158.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].二部.中國醫(yī)藥科技出版社,2010:1031.

[3]彭芳玲,李國強(qiáng),龍榮.氯霉素氫化可的松滴耳液的制備和質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生學(xué)雜志,2006,22(11):1639-1640.

[4]李小軍,王永桂.分光光度法測定氯霉素氫化可的松滴耳液中氫化可的松的含量[J].中國藥事,2004,18(3):179-180.