磁珠
- 單增李斯特菌單克隆抗體制備及免疫磁珠分離方法的建立
磁響應(yīng)性能的納米磁珠結(jié)合,實現(xiàn)目標菌株的分離和濃縮,具有特異性好和易于操作等優(yōu)點[7]。文湘郡等[8]建立了大腸桿菌O157:H7的免疫磁珠分離方法,對牛奶中的大腸桿菌O157:H7的捕獲率達到90%。王亞磊[9]建立了金黃色葡萄球菌的免疫磁珠分離方法,從牛奶中分離金黃色葡萄球菌的捕獲率在80%以上。本研究使用甲醛滅活的單增李斯特菌全菌為免疫原,通過雜交瘤技術(shù)制備了鼠源單克隆抗體,并對抗體特性進行分析,使用制備的單克隆抗體與羧基磁珠相結(jié)合,通過最佳條件的優(yōu)
畜牧與獸醫(yī) 2023年9期2023-10-17
- 免疫磁珠結(jié)合顯色平板快速檢測嬰兒配方奶粉中阪崎克羅諾桿菌
域中的應(yīng)用。免疫磁珠分離技術(shù)基于抗原抗體反應(yīng)及磁力學(xué)原理,可以將目標微生物從成分復(fù)雜的樣品基質(zhì)中分離出來并保持其生物活性,具有縮短檢測時間、提高檢出率等優(yōu)勢。該項技術(shù)現(xiàn)已被應(yīng)用于金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌等多種細菌的檢測中,與實時熒光聚合酶鏈反應(yīng)、酶聯(lián)免疫吸附、量子點熒光標記等其它分析手段的聯(lián)合研究也取得了良好的進展[4-7]。目前用于檢測致病性大腸埃希氏菌、沙門氏菌、單增李斯特氏菌等致病菌的免疫磁珠已經(jīng)實現(xiàn)商品化,但大多數(shù)為國外進口產(chǎn)品[8]
食品研究與開發(fā) 2023年14期2023-08-08
- 磁珠快速核酸提取法在南美白對蝦病原檢測中的應(yīng)用及其性能評價
王建平, 柳 海磁珠快速核酸提取法在南美白對蝦病原檢測中的應(yīng)用及其性能評價徐勝威1, 葛明峰1*, 盧先東2, 劉艷紅2, 黃一哲2, 王雯瓊1, 王雪磊1, 王建平1, 柳 海1(1.寧波市海洋與漁業(yè)研究院, 浙江 寧波 315012; 2.寧波愛基因科技有限公司, 浙江 寧波 315105)為實現(xiàn)南美白對蝦相關(guān)病原核酸快速、便捷提取, 并實現(xiàn)原材料國產(chǎn)化, 降低成本, 建立了一種基于國產(chǎn)磁珠的核酸快速提取方法(以下簡稱磁珠法). 以攜帶蝦肝腸胞蟲的南美
寧波大學(xué)學(xué)報(理工版) 2023年3期2023-05-26
- 粉煤灰磁珠的制備及性能表征
存一定含量的富鐵磁珠,約占粉煤灰的0.5%~18%。磁珠主要由磁鐵礦、磁赤鐵礦、赤鐵礦、鐵鎂氧體等結(jié)晶相以及玻璃基體組成,磁鐵礦(Fe3O4)為主要結(jié)晶相[6],對磁珠的回收和資源化利用在近年來逐漸受到人們的關(guān)注[7]。磁珠的組成復(fù)雜,不同的燃煤和燃燒條件會導(dǎo)致不同電廠采集的粉煤灰中磁珠的組分含量不同。磁珠中存在的大量磁性含鐵尖晶石理論上也應(yīng)具有與Fe3O4相似的磁損耗吸波性能[810]。同時,在含鐵尖晶石中,Fe2+與Fe3+相距很近,在外場作用下很容易
采礦技術(shù) 2023年1期2023-01-29
- 新型高效納米磁珠試劑盒在DNA檢測中的應(yīng)用
珠法[3-5]、磁珠法[6-7]、直接擴增法[8]、Microcon 100(Millipore)超濾濃縮法[9]等,其中磁珠法還有半定量作用。Chelex法提取是最簡便的方法,實驗成本低,因而被普遍使用,但其容易受生物檢材的影響,特別是遇到微量的、含雜質(zhì)多的接觸性檢材,檢測成功率不高。硅珠法提取原理是依托硅珠的吸附作用,對于微量的、含雜質(zhì)的檢材效果較好。在實驗中,雖然得到的DNA比較純,但是需要反復(fù)洗脫,易造成DNA損耗,如果檢材DNA含量極少,最終會得
中國刑警學(xué)院學(xué)報 2022年6期2022-12-30
- 磁珠提取技術(shù)在副溶血弧菌檢測中的應(yīng)用
括硅膠柱提取法和磁珠法。硅膠柱法提取核酸需要多次高速離心,不利于實現(xiàn)操作的自動化、高通量。磁珠法利用磁性納米材料的超順磁性,通過外加磁場控制磁珠分散和聚集以實現(xiàn)核酸與雜質(zhì)的分離。該方法方便快速,無需離心機等裝置,便于自動化操作,有利于副溶血弧菌的快速檢測和高通量檢測。隨著磁性納米技術(shù)的發(fā)展,磁珠提取技術(shù)被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)[7-8]、核酸[9]、細菌[10]、病毒[11]的分離檢測。本研究通過Fe3O4@SiO2磁珠對牡蠣、對蝦和貽貝的DNA進行提取純化,并
食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報 2021年6期2021-12-31
- 基于磁珠捕獲和連接的免核酸提取的恒溫擴增技術(shù)
究擬建立一種基于磁珠捕獲的免提核酸環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增技術(shù)CLIP-LAMP (capture and ligation probe-LAMP),能夠快速、簡便地進行大體積病原體檢測。1 材料與方法1.1 材料主要試劑:1 μmol/L鏈霉親和素磁珠(Invitrogen公司); T4 多聚核苷酸激酶、BstDNA 聚合酶大片段和1× ThermoPol 反應(yīng)緩沖液(New England Biolabs, NEB 公司);裂解液、洗液(Diacutate 公司
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床 2021年11期2021-11-12
- 化學(xué)發(fā)光技術(shù)中磁珠濃度對光信號水平的影響
范圍,尤其是隨著磁珠的應(yīng)用,使得其反應(yīng)過程從非均相變?yōu)榫?,從而更容易實現(xiàn)全自動化,反應(yīng)速度更快,各種誤差更小,檢測結(jié)果重復(fù)性更高,因此被廣泛用于各種化學(xué)物質(zhì)的檢測中,是21世紀最具有發(fā)展前景的檢測技術(shù)之一。在化學(xué)發(fā)光分析中,通常采用磁珠作為固相吸附材料。應(yīng)用最為廣泛的是將鏈霉親和素結(jié)合在磁珠上[1],通過生物素和鏈霉親和素之間的強結(jié)合力來捕獲含有生物素的發(fā)光物質(zhì),再通過磁珠的磁性以達到分離,并通過對發(fā)光信號的檢測以實現(xiàn)對待測物質(zhì)的定量測定。磁珠本身雖然與
檢驗醫(yī)學(xué)與臨床 2021年8期2021-04-28
- CUT&Tag產(chǎn)物回收和建庫方法的優(yōu)化
座體-鏈霉親和素磁珠體系(streptavidin beads recovery CUT&Tag, srCUT&Tag),可以快速便捷地完成CUT&Tag的產(chǎn)物回收。本文在K562細胞中展開H3K4me3、RNA聚合酶II (RNA polymerase II, RNAPII)、轉(zhuǎn)錄因子CTCF和HMGA1的CUT&Tag實驗,并利用現(xiàn)有的乙醇沉淀、片段分選(solid-phase reversible immobilization, SPRI)磁珠回收和
遺傳 2021年4期2021-04-22
- 基于血糖儀設(shè)計檢測甲基對硫磷的便攜式傳感器
代芳摘 要:利用磁珠的分離與富集作用,以血糖儀為檢測器,建立一種檢測甲基對硫磷的便攜式傳感器。結(jié)果顯示:在1~316 nmol/L范圍內(nèi)血糖儀信號減弱值與目標濃度的對數(shù)值呈良好的線性關(guān)系,檢測限為1 nmol/L。該傳感器便攜可行,靈敏度高,重復(fù)性好,為有機磷農(nóng)藥甲基對硫磷的篩查提供了一種新方法。關(guān)鍵詞:磁珠;血糖儀;有機磷農(nóng)藥甲基對硫磷中圖分類號:X832;TP212 文獻標識碼:A 文章編號:1003-5168(2021)19-00
河南科技 2021年19期2021-03-10
- 粉煤灰磁珠精細化分級試驗研究
中磁性微珠(簡稱磁珠(MSs))的含量在4%~18%之間[2]。磁珠的性質(zhì)取決于煤炭的性質(zhì)、煤炭破碎方式、燃燒后的回收方法[3]。不同磁珠間的性質(zhì)差異較大, Fe含量在20%~88 %之間,F(xiàn)e以鐵氧化物和含鐵硅酸鹽玻璃等多種形式存在[4]。依據(jù)組成和結(jié)構(gòu)方面的差異對磁珠進行有效分離,對磁珠資源綜合利用具有重要的指導(dǎo)意義。目前,磁選是磁珠分級的主要方法,磁選可以直接從粉煤灰中獲得不同磁性的磁珠產(chǎn)物。但磁選分級產(chǎn)物中,磁珠的粒徑與鐵含量等物化性質(zhì)差異依然很大
選煤技術(shù) 2021年5期2021-02-23
- 一種基于磁珠的血清miRNA提取體系的研究
片法、旋轉(zhuǎn)柱法和磁珠法等[11-13]。磁珠法是近年來新興的一種核酸提取方法,具有高效性、特異性等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于miRNA提取的研究。目前,市面上有很多不同類型用于核酸提取的納米磁珠,這些磁珠的大小、修飾官能團和生產(chǎn)工藝都有所不同,導(dǎo)致它們核酸提取性能也有很大的差異[14]。除磁珠本身因素的影響外,miRNA提取過程中磁珠用量、裂解液pH等對提取效果也有很大的影響,具體的影響情況又會因磁珠的不同而不同[15]。因此,本研究主要以人標準血清為樣本,以Pr
中國計量大學(xué)學(xué)報 2020年4期2021-01-28
- 不同粒徑的免疫磁珠對食源性致病菌捕獲效率的影響
00089)免疫磁珠(Immunomagnetic beads,IMBs)是 一類表面固定了特異性抗體的磁性顆粒,所以能夠特異性地捕獲目標物并在一定磁場強度下分離目標物[1],由此形成的免疫磁分離技術(shù)已應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測[2],體外診斷[3-4]和食品安全檢測[5-6]等諸多領(lǐng)域。在微生物檢測領(lǐng)域,由于傳統(tǒng)微生物病原體檢測前處理方法煩瑣耗時,世界上許多國家都采用免疫磁珠特異性捕獲作為一種有效的前處理方法,在大腸埃希氏菌O157:H7、賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲等微生
食品與生物技術(shù)學(xué)報 2020年9期2020-11-11
- 一種簡單經(jīng)濟提取小鼠大量腎小球的實驗方法
微分篩選[5]、磁珠灌注腎臟技術(shù)等[6-7],其中磁珠獲得大量腎小球的方法受到大家的普遍歡迎。但是磁珠價格不菲,有些實驗動物本身價格就比較昂貴,一些要求獲取較多腎小球的實驗預(yù)算就會增多,導(dǎo)致其中部分有創(chuàng)意和有意義的實驗設(shè)計難以實現(xiàn),使其使用受到一定的限制。本實驗對該技術(shù)略微進行改變,使磁珠的使用量大大減少,同時仍可獲得大量的腎小球,希望該簡單經(jīng)濟實用的實驗方法為廣大的科研工作者提供方便。1 材料與方法1.1 實驗動物無特定病原體(SPF)級雌性12 周齡C
中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志 2020年7期2020-09-27
- 氨基納米磁珠粒徑大小影響因素研究
101)復(fù)合納米磁珠是一種高通量的材料,可以快速提取生物中的核酸樣本。隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,核酸提取需要解決的關(guān)鍵問題也變成了用簡單、快速、適合大眾的方法從多種生物組織中來獲得高產(chǎn)量和高品質(zhì)的基因組DNA[1]。納米磁珠就是指具有納米的超順磁微球,是一種新型的納米材料。使用這種材料提取DNA與傳統(tǒng)的分離方法相比,能將DNA從復(fù)雜的生物樣品中快速分離出來,能夠?qū)崿F(xiàn)分離和富集的同時進行,有效地提高了分離速度和富集效率[2],同時也使分析檢測的靈敏度大大提升
黑龍江科學(xué) 2020年18期2020-09-18
- 六種蛋白質(zhì)與生物納米磁珠的吸附性能研究
164)生物納米磁珠是由復(fù)合鐵氧體強磁核、磁核外層的高分子殼層材料構(gòu)成的磁性微球,又稱磁珠。磁珠表面能夠包裹功能基層,如各種離子、抗體、抗原、核酸和酶等,被應(yīng)用于靶向藥物載體、細胞分離、核酸和蛋白生物大分子的分離、免疫檢測、微生物檢測、固定化酶等多個生物領(lǐng)域[1-4]。近年來,磁珠以其分散性良好、對生物分子的結(jié)合快速有效、絮凝可逆可控等優(yōu)點,在生物技術(shù)和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域受到了廣泛關(guān)注[5-6]。利用磁珠表面的功能基層與蛋白質(zhì)的特異性吸附,可以進行蛋白質(zhì)的富集純
生物技術(shù)通報 2020年6期2020-07-10
- 基于磁珠的電子設(shè)備輻射抑制機理與應(yīng)用
電路模塊,鐵氧體磁珠是用于干擾抑制的常用保護器件。如圖1所示,與電感器相比,鐵氧體磁珠具有較寬頻帶的濾波特性。另外,鐵氧體磁珠在高頻下呈電阻性,因此,它們可以將高頻干擾作為熱量消散。由于鐵氧體磁珠的上述特性,其在輻射抑制中常常扮演較為重要的角色。本文從輻射發(fā)射生成機理入手分析磁珠的輻射抑制機理,并通過具體案例驗證該措施的有效性。1 鐵氧體磁珠的基本特性鐵氧體磁珠的一般結(jié)構(gòu)如圖2所示,它是由鍍層、端電極、內(nèi)導(dǎo)線線圈和鐵氧體材料組成。磁珠兩端的電極是由銀、鎳和
電子技術(shù)與軟件工程 2020年16期2020-02-02
- 基于磁珠的核酸快速提取和純化
發(fā)展起來的第3代磁珠法[7-11],其提取技術(shù)和效率不斷地改進優(yōu)化。本研究通過納米磁珠法提取純化細菌基因組DNA、總RNA和質(zhì)粒DNA,并與試劑盒法和Trizol法提取效果進行比對分析,以期獲得最佳的提取方法,為核酸提取技術(shù)提供理論數(shù)據(jù)。1 材料與方法1.1 材料SanPrep柱式質(zhì)粒DNA小量抽提試劑盒、SanPrep柱式DNA膠回收試劑盒、SanPrep柱式PCR產(chǎn)物純化試劑盒購自上海生工,Universal Genomic DNA Extractio
生物學(xué)雜志 2019年4期2019-08-21
- 兩種核酸提取方法檢測丙肝HCV-RNA定量的比較
2.1儀器 兩種磁珠法使用SMART32半自動核酸提取儀進行丙型肝炎病毒核酸提取。提取后的核酸均使用IMPLEN分光光度計進行純度檢測。使用ABI Prism7500實時熒光PCR進行擴增及分析。1.2.2試劑 中元磁珠法所用試劑由重慶中元生物技術(shù)有限公司提供,達安磁珠法和達安手工法所用試劑由中山大學(xué)達安基因股份有限公司提供,所用試劑均在有限期內(nèi)。1.3 實驗方法1.3.1HCV-RNA提取 嚴格按照各自試劑說明書要求進行核酸提取。1.3.2HCV-RNA
廣州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2019年5期2019-05-27
- SA-hIL-21修飾磁珠的合成及其生物學(xué)功能的研究
定到已生物素化的磁珠上,得到SA-IL-21修飾磁珠,從而探索一種實現(xiàn)在細胞表面較小空間范圍內(nèi)富集IL-21的方法.外周血淋巴細胞(peripheral blood lymphocyte)是血液循環(huán)中的淋巴細胞,主要由T細胞、B細胞和NK等免疫細胞組成.研究表明,外周血單核細胞(PBMC)、T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK來源的細胞系均表達IL-21受體.人外周血淋巴細胞可由人外周血分離獲得.由于人外周血淋巴細胞主要由表達IL-21受體的免疫細胞組成,并易于獲
復(fù)旦學(xué)報(自然科學(xué)版) 2019年2期2019-05-10
- 磁珠綁定DNA分子在納米孔中易位研究
點。本文通過綁定磁珠來降低DNA的易位速度,DNA分子是通過非共價鏈霉親和素-生物素鍵連接在磁珠上,并證明在800mV電壓下,被捕獲的DNA與磁珠會斷裂從而從納米孔中釋放出來。測量綁定磁珠的DNA通過納米孔的阻塞離子電流軌跡,統(tǒng)計DNA易位事件的持續(xù)時間。DNA與磁珠綁定后,DNA易位的速度降低。關(guān)鍵詞:納米孔;DNA;磁珠;過孔時間引言得益于低成本高通量的特性,納米孔檢測技術(shù)廣泛的應(yīng)用于快速分析生物分子(DNA,RNA,蛋白質(zhì)等),以及生物分子之間的相互
科學(xué)與技術(shù) 2019年5期2019-04-23
- 磁珠固定化結(jié)核分枝桿菌二氫葉酸還原酶及其表征
大量活性表達、在磁珠表面固定化并保留其活性,就成為應(yīng)用此策略的關(guān)鍵。此前發(fā)現(xiàn),對帶6×His標簽融合蛋白可用Ni2+-NTA磁珠位點選擇性固定化以期保留活性[22],但固定化體系必需Ni2+等重金屬離子,而這些重金屬離子可能影響固定化酶的活性。羧基磁珠也是固定化蛋白的常用載體,此固定化體系基本不會有重金屬離子殘留干擾酶活性。本研究經(jīng)重組表達獲得MtDHFR,比較Ni2+-NTA磁珠和活化羧基磁珠固定化對MtDHFR活性、穩(wěn)定性及抑制劑響應(yīng)的影響,以探索適合
生物工程學(xué)報 2019年3期2019-03-27
- 高效捕獲阪崎腸桿菌免疫磁珠的制備研究
近年來,利用免疫磁珠和定量PCR相結(jié)合檢測食品中致病菌的方法相繼被報道[8-10],本研究在傳統(tǒng)免疫磁珠制備的基礎(chǔ)上,引入親和力更高的鏈霉親和素——生物素系統(tǒng),提升磁珠與抗體偶聯(lián)量,并優(yōu)化捕獲體系,建立起一種高效、靈敏、特異性強的阪崎腸桿菌分離方法,為該菌的精確檢測奠定基礎(chǔ)。1 實驗部分1.1 菌株阪崎腸桿菌(ATCC 29544)、阪崎腸桿菌(ATCC51329)、大腸桿菌(ATCC 25922)、腸炎沙門氏菌(CMCC(B)50041)、金黃色葡萄球菌
安徽化工 2019年1期2019-03-04
- 磁性吸附劑脫汞機理及技術(shù)研究進展
和潛在脫汞能力的磁珠[11]。本研究利用飛灰中磁珠改性制備可回收的磁性脫汞吸附劑,對復(fù)雜煙氣組分適應(yīng)性良好,并實現(xiàn)了多次循環(huán)再生高效脫汞,實現(xiàn)了大氣汞排放控制與飛灰的資源化利用[16-18]。1 Co3O4改性磁珠脫汞過渡金屬氧化物可通過其具有的晶格氧與吸附氧實現(xiàn)對Hg0的氧化,繼而將汞脫除,同時,煙氣中含有的O2可補充被消耗的氧,從而實現(xiàn)脫汞能力的再生。本研究使用Co(NO3)2浸漬磁珠后熱解,制備Co3O4改性磁珠用于固定床脫汞試驗。1.1 Co3O4
綜合智慧能源 2019年12期2019-02-13
- 可控雙親性硅羥基磁珠Fe3O4@SiO2的制備
528300)磁珠是一種新型的功能材料,具備磁導(dǎo)向性、高比表面積、生物兼容性等一系列獨特且優(yōu)越的理化性質(zhì),可以有效縮短實驗時間,是一種新型的高效率的試劑.磁珠內(nèi)部包含一個磁核,常用的磁核是Fe3O4和γ-Fe2O3,在磁場的存在下能迅速聚集,離開磁場能夠均勻分散[1-3].李亞棟等人采用溶劑熱法制備Fe3O4磁性內(nèi)核,采用三氯化鐵、乙二醇、醋酸鈉和聚乙二醇為原料,在200 ℃高溫高壓反應(yīng)8 h以上得到200~800 nm磁性內(nèi)核[4].但磁珠之間存在的范
周口師范學(xué)院學(xué)報 2018年5期2018-09-28
- 表面電性可控磁珠微流控芯片在DNA提取中的應(yīng)用
,獲得pH可控的磁珠,并成功用于病毒和質(zhì)粒DNA的提取。由于磁珠的可操控性強,在微流控芯片中有良好的應(yīng)用優(yōu)勢[15],Choi等[16]通過磁場將表面固定有生物素標記抗體的磁珠固定在芯片通道中,通過磁場控制,可以簡單方便地引入或排出磁珠; Zhang等[17]構(gòu)建了夾層式的磁珠固相萃取芯片,實現(xiàn)了λ-DNA的微量提取; Li等[18]構(gòu)建了磁珠芯片,提取人類淋巴細胞中的DNA,提取效率雖比市售試劑盒略低,但有助于實現(xiàn)自動化分析。本研究采用自制的表面電性可控
分析化學(xué) 2018年9期2018-09-11
- 基于巨磁電阻傳感器的磁珠檢測方法
2.8 μm粒徑磁珠的檢測[6]。2014年,Cheng C Y等人利用簡單的永磁體裝置實現(xiàn)了對納米磁珠的檢測。GMR生物傳感器利用對磁珠的檢測間接實現(xiàn)對生物樣品的分析,傳感器對磁珠的檢測能力決定著對生物樣品的檢測限及靈敏度[7]。除了GMR傳感器自身性能外,磁場激勵模式及信號檢測方法也是影響磁珠檢測效果的重要因素。由于激勵磁場均勻性對磁珠檢測影響很大,目前研究中大多采用亥姆霍茲線圈產(chǎn)生激勵磁場[7,8],導(dǎo)致整個檢測裝置體積較大。此外,目前廣泛使用的微米
傳感器與微系統(tǒng) 2018年5期2018-04-27
- CAR-T細胞制備過程中磁珠法激活T細胞條件的優(yōu)化
3/CD28 的磁珠共同孵育。Tumaini 等[13]同時比較了2 種T 細胞激活方法,發(fā)現(xiàn)磁珠法可避免中間分離步驟,且產(chǎn)生的總擴增倍數(shù)也高于OKT3(抗CD3 的抗體)激活。之前的研究也顯示,抗CD3 和CD28 的抗體刺激可以產(chǎn)生適度的T 細胞激活[14],而磁珠可提供類似天然抗原呈遞細胞(antigen-presenting cells,APCs)的作用,激活能力可極大地增強[15-16]。然而,不同的磁珠激活條件可能會影響T 細胞的激活效果,但目
生物技術(shù)通訊 2018年6期2018-04-10
- 不同磁珠對過敏原蛋白純化效果的比較研究
種新型納米材料,磁珠能用于檢測毒素[7]、病毒[8]、細菌[9]等,也可用于分離特定生物分子[10]。磁性分離技術(shù)是以磁性微粒為載體,在外加磁場的定向控制下,利用磁性微粒表面的配體和受體間的特異性親和作用,可從復(fù)雜的原始生物體系中直接分離出目標生物分子,具有簡單方便和高選擇性的雙重優(yōu)勢,為生物分子的快速分離和富集提供一種強有力的手段[11]。本文以南美白對蝦的過敏原Tm及其特意性單克隆抗體為模式體系,選用2種不同的商業(yè)磁珠構(gòu)建免疫磁珠,利用親和純化法快速分
- 基于磁分選技術(shù)和間接免疫熒光技術(shù)的肺癌A549細胞的分離檢測
鐵(Fe3O4)磁珠表面構(gòu)建免疫磁珠(MNPs-Anti-EGFR),通過EGFR抗體和肺癌A549細胞的表面抗原的特異性結(jié)合,將免疫磁珠與肺癌細胞結(jié)合.通過磁場作用,使肺癌細胞在磁場的作用下從混合細胞中分離富集.分離出的細胞利用間接熒光技術(shù)在其細胞表面連接結(jié)合PE熒光團的特異性抗體,并用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)對細胞核染色以定位細胞位置.通過倒置熒光顯微鏡的觀察,從而實現(xiàn)對腫瘤細胞的定量計數(shù)檢測.實驗結(jié)果顯示該方法對肺癌A549細胞具有
上海師范大學(xué)學(xué)報·自然科學(xué)版 2017年4期2017-09-18
- 免疫磁珠對紫外線引起CD4細胞γ?H2AX相對熒光強度變化的影響
16026)免疫磁珠對紫外線引起CD4細胞γ?H2AX相對熒光強度變化的影響徐 丹,齊 菲,吳 超,孫野青?(大連海事大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院環(huán)境系統(tǒng)生物學(xué)研究所,大連116026)針對免疫磁珠技術(shù)中磁珠大小對免疫檢測結(jié)果的影響問題,以三種免疫磁珠為研究對象,分析了單個細胞結(jié)合不同大小磁珠的數(shù)量情況,利用流式細胞術(shù)分析了γ?H2AX相對熒光強度變化與輻射劑量的變化關(guān)系,探討了免疫磁珠與細胞結(jié)合對紫外線UVC誘發(fā)CD4細胞γ?H2AX相對熒光強度變化的影響。發(fā)
載人航天 2017年1期2017-07-18
- 硅羥基磁珠的制備及全基因組DNA提取優(yōu)化
0642)硅羥基磁珠的制備及全基因組DNA提取優(yōu)化李海洋1王飛1雷紅濤3張璇2,3陳珂1(1. 西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,綿陽 621000;2. 廣東順德創(chuàng)新設(shè)計研究院,佛山 528000;3. 廣東省食品質(zhì)量安全重點實驗室 農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風險評價實驗室 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,廣州 510642)旨在制備硅羥基功能化納米磁珠與核酸提取試劑,并對提取過程進行優(yōu)化。采用溶劑熱法制備硅羥基功能化納米磁珠,并用表面化學(xué)修飾法在磁珠表面包裹Si
生物技術(shù)通報 2017年6期2017-06-21
- 應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA
啟鳴?應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA程 沖 陳啟鳴泉州市公安局刑偵支隊:應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA,并評價其應(yīng)用價值。:對實驗室日常受理的6例牙齒,分別采用有關(guān)文獻提出的QIAquick?PCR純化試劑盒方法和M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA。:6例牙齒采用兩種方法檢出結(jié)果一致,但是M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA過程較簡單、時間短。結(jié)論:M48磁珠試劑盒可以應(yīng)用于牙齒DNA提取,并能大大減少實驗人員工作量。法醫(yī)物證 牙齒 DNA提取牙齒DNA含量
海峽科學(xué) 2017年11期2017-02-03
- 三種磁珠法提取脫落細胞DNA的比較
63000)三種磁珠法提取脫落細胞DNA的比較王華榮1,廖勤2,吳世青1(1.滄州市公安局刑警支隊,河北滄州 061000;2.唐山市公安局刑警支隊,河北唐山 063000)法醫(yī)遺傳學(xué);DNA;提取法;磁珠法;脫落細胞法醫(yī)DNA鑒定中的脫落細胞檢材是指含有人體皮膚黏膜脫落上皮細胞的檢材,是當前刑事案件現(xiàn)場最有可能提取到的生物物證。目前關(guān)于脫落細胞提取純化方法對比的報道[1-3]較多,但相同提取方法效果橫向比較的研究較少。本研究對IQ磁珠、M48磁珠、Pre
法醫(yī)學(xué)雜志 2016年6期2017-01-12
- 免疫磁珠富集與熒光定量PCR技術(shù)聯(lián)合檢測丙型肝炎病毒
.重慶大學(xué))免疫磁珠富集與熒光定量PCR技術(shù)聯(lián)合檢測丙型肝炎病毒曹姍姍1張文玲1王瑾1周魯林1劉留2吳燕2肖利力1*(1.北京國際旅行衛(wèi)生保健中心北京100088;2.重慶大學(xué))建立一種免疫磁珠與熒光定量PCR技術(shù)聯(lián)合檢測丙型肝炎病毒的方法。將丙型肝炎病毒抗體與羧基修飾磁珠偶聯(lián),制備出特異性丙型肝炎病毒免疫磁珠,并檢測活化磁珠富集病毒的效率。結(jié)果表明1 mg免疫磁珠與75 μg丙型肝炎病毒單克隆抗體偶聯(lián)時,具有最高抗體偶聯(lián)量,該偶聯(lián)后的磁珠富集丙型肝炎病毒
質(zhì)量安全與檢驗檢測 2016年5期2016-12-02
- EDC/NHS法制備免疫磁珠及其效果驗證
NHS法制備免疫磁珠及其效果驗證張爾力(湖南警察學(xué)院,湖南長沙410138)免疫磁珠又叫免疫磁性微球,是免疫學(xué)和磁性微球結(jié)合而發(fā)展的一類新型材料,一般用于物質(zhì)的提取和分離,由于其高效、低毒等特性,目前在生物化學(xué)領(lǐng)域、醫(yī)藥領(lǐng)域、食品檢測領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。本文主要應(yīng)用EDC/NHS法活化羧基磁珠,再將人類精子特異性抗體與之偶聯(lián),最后制備成免疫磁珠,進行細胞捕獲實驗,分別捕獲人類的上皮細胞和精子,提取DNA,進行PCR(聚合酶鏈式反應(yīng)),進行電泳,根據(jù)STR(短串聯(lián)
化工管理 2016年30期2016-11-14
- 基于NMR納米探針的生物傳感器用于快速檢測沙門氏菌
門氏菌單抗與羧基磁珠偶聯(lián)制備免疫磁珠,并以此為NMR分子探針,以免疫磁珠為生物傳感器,特異性地捕獲并檢測出樣品中的致病菌,從而建立一種更快的檢測沙門氏菌的方法。實驗將得到的不同樣品溶液放入核磁共振儀中檢測自旋-自旋弛豫時間(T2)值,考察不同條件對T2值的影響。通過實驗發(fā)現(xiàn),免疫磁珠的使用量,緩沖溶液的選擇,捕獲時間的長短都會對樣品T2值產(chǎn)生影響。通過優(yōu)化實驗,分別繪制出不同條件下T2值的曲線變化,并得出最佳捕獲條件。在捕獲緩沖溶液為磷酸鹽緩沖溶液PBS(
食品工業(yè)科技 2016年5期2016-09-10
- 免疫磁珠磁振觀測系統(tǒng)及其實驗研究
46000)免疫磁珠磁振觀測系統(tǒng)及其實驗研究李平(長治醫(yī)學(xué)院,長治 046000)本文設(shè)計了一款觀測免疫磁珠在振動磁場作用下磁振特性的系統(tǒng),解決了處于微米級別的磁珠運動在肉眼下不可見的問題。 實驗研究表明,系統(tǒng)設(shè)計滿足觀測要求,且磁珠振動的頻率和振幅受振動磁場的頻率和振幅的影響。免疫磁珠 磁振 觀測 實驗研究引言免疫分析是體外診斷的重要手段,包括病毒、腫瘤標志物等多類檢測項目[1],有均相免疫分析、非均相免疫分析。二者的主要差別在于免疫復(fù)合物是否需分離,其
現(xiàn)代制造技術(shù)與裝備 2016年3期2016-09-05
- 一種捕獲磁珠及光纖檢測裝置的研究
【摘 要】對以磁珠為載體的生化樣品進行光學(xué)檢測是重要的生化檢測方法之一。在檢測過程中,核心環(huán)節(jié)是通過磁場將磁珠精確地吸引到檢測位置。本文基于電流磁效應(yīng)原理,構(gòu)想了一種捕獲磁珠的電磁鐵模型。再通過COMSOL5.1仿真軟件進行驗證。最后將電磁鐵模型和光纖組裝成檢測裝置。裝置尺寸在毫米范圍,而且該裝置消耗試液量在微升級別,節(jié)省檢測成本?!娟P(guān)鍵詞】電流磁效應(yīng) 磁珠 光纖 光學(xué)檢測【Abstract】Optical detection of biochemical
中國科技縱橫 2016年5期2016-05-14
- 免疫磁珠捕獲—通用引物PCR快速檢測食品中致病菌
磁性微珠制作免疫磁珠,對食品中的致病菌進行檢測,希望可以提高食品中致病菌的檢出率。材料選擇菌株。上海漢尼公司生產(chǎn),菌種號為ATCC13706,腸炎沙門氏菌;上海漢尼公司生產(chǎn),菌種號為ATCC7644,單增李斯特氏菌;上海漢尼公司生產(chǎn),菌種為ATCC25931,宋氏志賀氏菌;深圳出口入境檢驗局生產(chǎn),菌種號為03C0077708VB01稻葉型霍亂弧菌;本實驗室分離保存,菌種是CC008,E.coliO157:H7。試劑選擇。上海生工生物工程技術(shù)公司生產(chǎn)的透析袋
食品界 2016年6期2016-05-14
- M48磁珠法提取脫落細胞DNA的改良方法
地區(qū)均采用M48磁珠法提取DNA[1-2],常規(guī)M48磁珠法提取DNA步驟較為繁瑣,耗時較長,而本文采用改良M48磁珠法進行DNA提取,可以縮短提取時間,并能保證提取質(zhì)量。1 材料與方法1.1 材料實驗選用的50例煙蒂、50例作案工具(螺絲刀柄、匕首柄、老虎鉗柄)、50例紡織品(手套、衣服等)均為案件物證,煙蒂用直接剪取后備檢,紡織品用脫落細胞粘取器粘取后備檢,作案工具用干濕兩步擦拭法擦拭后備檢。50例煙蒂、50例作案工具、50例紡織品的每個樣品各選取 2
海峽科學(xué) 2015年10期2015-11-19
- 微流控芯片中磁珠表面免疫反應(yīng)動力學(xué)研究
[2 - 4]。磁珠具有易于操控、比表面積大、偶聯(lián)效率高的特點[5]。在微流控非均相免疫分析中,磁珠作為固相載體已引起了廣大研究者的興趣。因此,了解微流控芯片中磁珠表面免疫反應(yīng)動力學(xué)行為對于免疫分析技術(shù)的改進與提高具有非常重要的意義,并可為設(shè)計和優(yōu)化芯片結(jié)構(gòu)提供參考。本文建立了一種實時監(jiān)測微流控芯片中磁珠表面免疫反應(yīng)的方法。采用該方法探究了流速、分析物濃度等對磁珠表面偶聯(lián)的小鼠IgG與溶液中Cy3標記的羊抗小鼠IgG的反應(yīng)動力學(xué)的影響,并求出了磁球表面免疫
分析科學(xué)學(xué)報 2015年2期2015-10-16
- 基于納米免疫磁珠快速富集4種海洋致病性弧菌的研究*
高效、簡便的免疫磁珠法對樣品進行分離富集,該法作為一種前處理手段,與其它檢測方法結(jié)合使用,可大大縮短檢測時間,提高檢測限(蘇晨曦等,2012)。Wang等(2013)用免疫磁分離技術(shù)結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測蘋果汁中的脂環(huán)酸芽孢桿菌屬(Alicyclobacillus spp.),檢測限為 103CFU/mL,與傳統(tǒng)培養(yǎng)法相比,檢測時間縮短了24—40倍。Zeng等(2014)用免疫磁分離與環(huán)介導(dǎo)等溫擴增(LAMP)技術(shù)聯(lián)合檢測生蠔中的副溶血弧菌
海洋與湖沼 2015年6期2015-04-10
- 免疫磁珠捕獲PCR快速檢測單核細胞增生李斯特氏菌
30020)免疫磁珠捕獲PCR快速檢測單核細胞增生李斯特氏菌李婧姮1,郭慧琴2,高曉強3,劉 芳3,邱 實1,李建武1,曾海娟1,劉 蘭2,宋春美1,劉 箐1,*(1.上海理工大學(xué)醫(yī)療器械與食品學(xué)院,上海 200093;2.上海慧耘生物科技有限公司,上海 200433;3.甘肅出入境檢驗檢疫局,甘肅 蘭州 730020)利用免疫磁珠富集單核細胞增生李斯特氏菌,采用聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴增進行快速檢測。
食品科學(xué) 2015年12期2015-01-05
- 新型磁珠分選純化儀的研制
201403新型磁珠分選純化儀的研制【作 者】許穎原,陳 毅上海銘源數(shù)康生物芯電有限公司,上海市,201403該文介紹了一種新型磁珠分選純化儀的研制。該儀器的研制目的是從痰液中捕獲結(jié)核菌,是用于臨床標本前處理的自動化儀器,為臨床輔助診斷結(jié)核病提供新一代的技術(shù)平臺。該儀器功能齊全,不僅可以用于結(jié)核菌的分選,還能夠用于基因、蛋白、細胞等物質(zhì)的分選純化,應(yīng)用范圍極廣。該儀器采用了16位單片機作為控制核心,在確保各項功能和儀器可靠性的前提下,使儀器硬件成本大大下降
中國醫(yī)療器械雜志 2014年3期2014-02-28
- IMS-FMO捕獲及富集派琴蟲方法的建立
的貝類派琴蟲免疫磁珠分離純化檢測方法。方法本研究方法包括四部分:(i)捕獲;(ii)熒光顯微鏡觀察;(iii)富集;(iv)方法敏感性評價。結(jié)果本研究建立的派琴蟲免疫磁珠分離純化方法,檢測派琴蟲限度可達103個/mL,整個檢測過程僅需1個小時,特異性良好。結(jié)論派琴蟲免疫磁珠分離純化方法將為水產(chǎn)品中派琴蟲的檢測提供一種快速簡便的技術(shù)支持。奧爾森派琴蟲;免疫磁珠分離;熒光顯微觀察;分析;檢測派琴蟲病是世界動物衛(wèi)生組織(OIE)規(guī)定的法定報告水生動物疾病之一。目
中國動物檢疫 2014年6期2014-02-24
- 免疫磁珠的原理與特性及其在動物源性食品檢測中的應(yīng)用研究
命科學(xué)學(xué)院)免疫磁珠(IMB)簡稱磁珠。免疫磁珠是通過磁場作用特異性分離目的產(chǎn)物的新興技術(shù),具有操作簡便、靈敏度高、耗時少、生物活性強等特點,是近30年發(fā)展起來的新型免疫學(xué)分離技術(shù),在食品微生物及其毒素、細菌分離、生化及分子遺傳學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。常用免疫磁珠是超順磁性四氧化三鐵納米磁珠,可通過特殊官能團偶聯(lián)抗原或標記物,結(jié)合于靶物質(zhì),并在外加磁場作用下達到分離、純化的目的。動物源性食品是指可食用動物的肉、乳、蛋及其制品和副產(chǎn)品。動物源性食品污染通常存在
浙江畜牧獸醫(yī) 2014年5期2014-01-23
- 免疫磁珠富集技術(shù)進展①
10632)免疫磁珠富集技術(shù),是以磁性微球作為固相表面,結(jié)合免疫學(xué)方法建立起的一門具有重要應(yīng)用前景的樣品富集手段。具有磁性的微顆粒通過結(jié)合特定抗體,在液相中能特異性地與相應(yīng)抗原結(jié)合,依靠磁場的作用力快速地使所需樣品量得到大大的濃縮。由于免疫磁珠富集法具有快速及特異性強的特點,在三十余年的發(fā)展中,已廣泛應(yīng)用于分離及濃縮特定細胞、微生物、蛋白質(zhì)和核酸片段等肉眼難以觀察或樣品中含量不高的物質(zhì)。其應(yīng)用也隨著各個科學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展而日趨全面和深入[1]。隨著抗體技術(shù)的發(fā)
中國免疫學(xué)雜志 2013年1期2013-11-27
- 羧基磁珠吸附乙型肝炎病毒表面抗原的性能研究*
510260)磁珠被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的分離提純、細胞分離、酶的固定、免疫分析等多個領(lǐng)域[1-4]。以磁珠為固相介質(zhì)對蛋白質(zhì)進行提純是一項新興的蛋白質(zhì)分離技術(shù),與傳統(tǒng)分離方法比較,蛋白質(zhì)的磁分離技術(shù)具有快速、高純、高收率等優(yōu)點[5]。羧基磁珠是表面帶有羧基功能團的磁珠,其吸附蛋白是基于磁珠表面的陰離子交換基團-COOH與表面帶正電的蛋白之間的作用[6]。乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)分子量大,其結(jié)構(gòu)變化對活性影響較大,結(jié)構(gòu)和活性表征相對容易研究且手段多
檢驗醫(yī)學(xué)與臨床 2013年22期2013-10-11
- 免疫磁珠法富集沙門氏菌的優(yōu)化及應(yīng)用
度,人們采用免疫磁珠的方法對樣品進行富集。王海明等利用英國Matrix公司的Pathetrix免疫磁分離系統(tǒng)進行動態(tài)富集,目標菌捕獲效率的平均值達到60%,三種濃度的沙門氏菌添加到8種食品基質(zhì)中,目標菌捕獲效率的平均值是23%[6]。張東方等[7]將免疫磁捕獲和實時熒光PCR技術(shù)結(jié)合起來,16h內(nèi)檢測雞肉中的沙門氏菌,檢測限為104CFU/mL。王曉聞等[8]免疫磁珠捕獲和PCR技術(shù)結(jié)合起來,在7h內(nèi)檢測了牛乳中的沙門氏菌,檢測靈敏度為9CFU/mL。然而
食品工業(yè)科技 2013年13期2013-10-10
- 基于免疫磁珠快速分離金黃色葡萄球菌的研究
的檢測需求。免疫磁珠(Immunomagnetic Beads,IMBs)具有選擇性好,特異性強,能將目標菌從復(fù)雜的食品基質(zhì)中快速分離出來,起到快速分離、富集細菌的作用[8]。目前,國內(nèi)外已有學(xué)者利用免疫磁珠與其他檢測方法結(jié)合,如酶聯(lián)免疫法,PCR,量子點熒光檢測等對沙門氏菌[9-12],大腸桿菌[13-14],李斯特菌[15-17],阪崎桿菌[18]等多種食源性微生物進行檢測研究,利用免疫磁珠對金黃色葡萄球菌的檢測尚處于探索階段[19]。本研究擬利用生物
食品工業(yè)科技 2013年9期2013-08-07
- 磁珠法提取糞便檢材DNA
不高。本研究采用磁珠分離試劑盒(sbeadex?forensic kit)提取糞便檢材,有效去除抑制因子,并高效回收高純度DNA,提高此類檢材的檢驗成功率,現(xiàn)報道如下。1 材料與方法5份糞便檢材和3份糞便擦拭物(載體為衛(wèi)生紙)分別來自本公安局實驗室2010年以來受理的案件。剪取黃豆粒大小糞便檢材、約1cm×2cm大小糞便擦拭物分別放入1.5 mL離心管中。分別采用磁珠分離試劑盒(sbeadex?forensic kit,煙臺澳斯邦公司)和Chelex法,提
法醫(yī)學(xué)雜志 2013年1期2013-05-19
- 免疫磁珠富集結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附法檢測醬油中黃曲霉毒素B1
,價格昂貴。免疫磁珠分離技術(shù)可將分離與富集結(jié)為一體,因此具有高效、快速和操作簡便等優(yōu)點。免疫磁珠的富集凈化包括吸附和洗脫兩個過程,吸附是免疫磁珠和樣品中的待測物之間的特異性結(jié)合,而洗脫是用有機溶劑將吸附在免疫磁珠上的待測物洗下來,與磁珠分離[15-16]。免疫磁珠富集凈化作為一種前處理手段可避免傳統(tǒng)方法的缺點,它不僅可以減少有毒有害試劑的使用,提高試樣的凈化效果,而且所需設(shè)備簡單,操作簡便。目前國內(nèi)外尚未見以免疫磁珠富集凈化結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附法檢測醬油基質(zhì)中
食品科學(xué) 2013年18期2013-01-30
- 單增李斯特菌免疫磁珠的制備研究
單增李斯特菌免疫磁珠的制備研究徐金亭,李志清,向軍儉*,唐 勇,楊紅宇(暨南大學(xué)分子免疫學(xué)與抗體工程研究中心,廣東廣州510632)目的:制備可高效、特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠。探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力。方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設(shè)置了6個主要偶聯(lián)時間和6組偶聯(lián)溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的
食品工業(yè)科技 2012年5期2012-11-15
- 副溶血性弧菌免疫磁珠的制備及其應(yīng)用
副溶血性弧菌免疫磁珠的制備及其應(yīng)用蘇晨曦1,孫曉紅1,*,盧 瑛1,趙 勇1,Vivian C H Wu2,潘迎捷1(1.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院,上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心,上海 201306;2.美國緬因大學(xué)食品科學(xué)與人類營養(yǎng)系,美國緬因 04469)研究比較了不同的免疫磁珠(Immunomagnetic Beads,IMBs)富集捕獲副溶血性弧菌的能力。采用兩種副溶血性弧菌多克隆抗體,分別包被經(jīng)羧基和甲苯磺酰胺基基團修飾的磁珠,制備完成5個免疫
食品工業(yè)科技 2012年17期2012-10-25
- 羧基化磁性納米微球的表面生物修飾方法
A和B兩種羧基化磁珠,以山羊抗小鼠IgG為模式蛋白,優(yōu)化了EDC/sulfo-NHS法的羧基磁珠表面抗體的修飾條件,對比分析了抗體修飾前后磁珠粒徑和多分散系數(shù)(PDI)的變化,并利用競爭性免疫層析法評價了磁珠表面修飾抗體的生物學(xué)活性。優(yōu)化結(jié)果顯示,不同粒徑和廠家的羧基磁珠,其表面的最佳抗體修飾條件是不同的。磁珠A抗體修飾前后的平均水力學(xué)粒徑變化率為6.55%,PDI分別為0.011和0.046,變化微小,而磁珠B在抗體修飾前后的平均水力學(xué)粒徑變化率為135
食品與生物技術(shù)學(xué)報 2012年1期2012-01-11