馮敏超，羅 芳，謝 勝，陳祖民，譚瑾軒，李 凱，陳國忠，王道剛

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530001）

腸易激綜合征（irritable bowel syndrome，IBS）是一種常見的功能性胃腸道疾病，以腹瀉、便秘、疼痛為特征，影響全球9%～23%的人口，其中腹瀉型腸易激綜合征（diarrhoeal irritable bowel syndrome，IBS?D）是IBS 最常見的亞型，約占40%［1，2］。目前IBS?D 發(fā)病機(jī)制尚未能被完全揭示。槲皮素作為黃酮類化合物，有抗炎、抗氧化、抑制細(xì)胞增殖等作用。前期已經(jīng)證實(shí)，槲皮素能減輕IBS 大鼠的炎癥反應(yīng)，可作為腸易激綜合征治療的輔助藥物［3，4］。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一種用于從宏觀角度分析和預(yù)測藥物干預(yù)疾病的潛在機(jī)制的方法，因此，本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對槲皮素干預(yù)IBS?D 的作用機(jī)制進(jìn)行初步探究，并結(jié)合動物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行初步驗(yàn)證，以提供證據(jù)支持含有槲皮素成分的中藥對IBS?D 的治療。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

SPF 級雄性SD 大鼠50 只，體重160～200 g，購自湖南屠宰場景達(dá)實(shí)驗(yàn)動物（中國長沙；證書號SCXK（湘）2019?0004）。所有大鼠在廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心飼養(yǎng)［SYXK（湘）2019?0001］，光源每12 h 明暗交替循環(huán)，常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由采食，飲水。該研究按照《實(shí)驗(yàn)動物護(hù)理原則》進(jìn)行，獲得廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物倫理委員會的批準(zhǔn)（審批號：2021?066）。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑

槲皮素、戊巴比妥鈉購自Sigma 公司（批號：Q4951?10G；AM00469）；蘇木精和伊紅（H&E）染色試劑盒（Solarbio 公司，G1120）；大鼠IL?1β、IL?6、TNF?α、VEGFA ELISA 試劑盒（Proteintech 公司，批號：KE10003；KE10007；KE10002；KE20014）；大鼠TP53 ELISA 試劑盒（CUSABIO 公司，CSB?E08336r）；大鼠AKT1 ELISA 試劑盒（上?？瓢┥锕?，CB13377?Ra）。

1.3 儀器設(shè)備

組織切片機(jī)（德國Leica 公司，型號：RM2016）；酶標(biāo)儀（Rayto 公司，型號：RT?6100）；光學(xué)顯微鏡（Olympus 公司，型號：BX43）。

1.4 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

1.4.1 槲皮素靶點(diǎn)的篩選和中藥?槲皮素?靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 使用搜索詞“槲皮素”在TCMSP （Tra?ditional Chinese Medicine Systems Pharmacology，https：//tcmspw.com/tcmsp.php）、SwissTar?getPre?diction （http：//www.swisstargetprediction.ch/） 和BATMAN?TCM 數(shù)據(jù)庫 （http：//bionet.ncpsb.org/batman?tcm/） 獲得槲皮素的潛在靶點(diǎn)和相對應(yīng)中藥。通過TCMIP v2.0 數(shù)據(jù)庫（http：//www.tcmip.cn/TCMIP/index.php）、中國藥典2020 版本、相關(guān)書籍文獻(xiàn)獲得中藥的性味歸經(jīng)。UniProt 數(shù)據(jù)庫（http：//www.uniprot.org/） 用于標(biāo)準(zhǔn)化基因和蛋白質(zhì)的名稱。使用Cytoscape 3.7.1 構(gòu)建中藥?槲皮素?靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。

1.4.2 IBS?D 相關(guān)靶點(diǎn)的收集 通過使用搜索詞“diarrhea irritable bowel syndrome”在GeneCards 數(shù)據(jù)庫中獲得IBS?D 的相關(guān)靶點(diǎn) （https：//auth.lifemapsc.com/）。

1.4.3 交叉目標(biāo)基因的Venn 圖映射 Venny 工具（http：//bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/） 用于繪制槲皮素靶基因與IBS?D 靶基因的維恩圖并進(jìn)行比較，以獲得靶基因的交集。

1.4.4 蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)（PPI）的構(gòu)建 基于交叉目標(biāo)結(jié)果，在string 數(shù)據(jù)庫 （http：//string?db.org/） 中構(gòu)建了PPI 網(wǎng)絡(luò)，物種限制為“智人”，所需的最低交互分?jǐn)?shù)為0.4。然后將PPI 網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.1 軟件，使用CytoHubba 和MCODE 算法插件獲得該網(wǎng)絡(luò)的一組核心靶點(diǎn)。

1.4.5 GO 功能分析和KEGG 途徑富集分析 為了確定槲皮素調(diào)節(jié)IBS?D 的潛在通路途徑，使用DA?VID 數(shù)據(jù)庫對交叉靶標(biāo)進(jìn)行GO 富集分析（https：//david.ncifcrf.gov/）。進(jìn)行KEGG 分析，根據(jù)P≤0.01 繪制了信號通路直方圖，并選擇了前20條信號通路繪制KEGG 氣泡圖。然后通過Omic?Share 網(wǎng)站將數(shù)據(jù)可視化（https：//www.omicshare.com/）。

1.5 分子對接模擬

在PPI 網(wǎng)絡(luò)分析中確定的前五個核心基因被選擇用于與槲皮素進(jìn)行分子對接模擬。其中槲皮素的2D 結(jié)構(gòu)從PubChem 數(shù)據(jù)庫下載（https：//pub?chem.ncbi.nlm.nih.gov/）并使用ChemBio3D 優(yōu)化機(jī)械結(jié)構(gòu)。靶蛋白的晶體結(jié)構(gòu)從RCSB 數(shù)據(jù)庫中獲得（https：//www.rcsb.org/）。 使用AutoDockTools 1.5.6 將配體和受體文件轉(zhuǎn)換為pdbqt 格式，并通過用氫原子替換水分子來改進(jìn)其結(jié)構(gòu)。最后，在Dis?covery Studio 軟件中進(jìn)行分子對接模擬。Discov?ery Studio 計算的LibDock 評分表明配體與受體的結(jié)合程度。

1.6 動物實(shí)驗(yàn)

1.6.1 IBS?D 模型制備和實(shí)驗(yàn)分組 大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組、模型組、槲皮素低、中、高劑量組，每組10 只。大鼠IBS?D 模型建立的參考文獻(xiàn)［5］，每日束縛大鼠1 h 并使用1 mL 4%乙酸灌腸，持續(xù)7 d。造模成功后開始灌胃給藥，槲皮素組大鼠分別給予槲皮素5、10、20 mg/kg 灌胃［3］，空白組與模型組大鼠給予等量生理鹽水灌胃，每日1 次，持續(xù)2 周。

1.6.2 IBS?D 大鼠結(jié)腸組織病理學(xué)觀察 在制備切片（5 μm 厚）之前，用4%多聚甲醛固定大鼠的結(jié)腸組織并將其包埋在石蠟中。切片，烤片30 min，用二甲苯和無水乙醇脫蠟和水合，進(jìn)行HE 染色。通過在光學(xué)顯微鏡來評估IBS?D 大鼠結(jié)腸組織的病理變化。

1.6.3 ELISA 法檢測大鼠血清IL?1β、IL?6、TNF?α、TP53、AKT1、VEGFA 的水平 無菌條件下，大鼠腹主動脈取血，血液樣本在室溫下靜置2 h，然后在高速離心機(jī)中以3 000 r/min 在4 ℃下離心15 min。去除血清上層，并根據(jù)制造商的說明，使用酶標(biāo)儀在450 nm 處測量IL?1β、IL?6、TNF?α、TP53、AKT1、VEGFA 的OD 值，繪制樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線并換算濃度。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理

所有資料分析均使用SPSS 25.0 軟件與Graph?Pad Prism 9.0 軟件進(jìn)行。數(shù)據(jù)以（±s）表示，使用單因素方差分析分析各組間差異的顯著性。P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 槲皮素潛在靶點(diǎn)的篩選

在 TCMSP、SwissTargetPrediction 和 BAT?MAN?TCM 數(shù)據(jù)庫中搜索槲皮素的潛在靶點(diǎn)和對應(yīng)的中藥，共獲得311 個潛在靶點(diǎn)和188 味中藥。隨后，我們構(gòu)建一個中藥?槲皮素?靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，如圖1所示，該網(wǎng)絡(luò)包括500 個節(jié)點(diǎn)和499 個邊緣，例如包括IL?2、IL?6、IL?10、CXCL2、MYC 等靶點(diǎn)和谷精草、牡丹皮、香附、丁香、三七等草藥。

2.2 含有槲皮素的中藥的性味歸經(jīng)分析

在TCMSP 數(shù)據(jù)庫搜索含有槲皮素的中藥，利用TCMIP 等數(shù)據(jù)庫歸納中藥的性味歸經(jīng)，含有槲皮素的中藥的“四氣”多歸屬為寒；“五味”多為苦、甘；歸經(jīng)多入肝經(jīng)、肺經(jīng)，見圖2。

圖2 中藥性味歸經(jīng)分析Fig 2 Analysis chart of Chinese herbal medicine's sexual flavor and meridian

2.3 PPI 網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

搜索TCMSP、BATMAN?TCM 和Swiss 靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫預(yù)測槲皮素在治療IBS?D 中所涉及的潛在靶點(diǎn)，確定了311 個潛在靶點(diǎn)。通過搜索GeneCards數(shù)據(jù)庫（相關(guān)性評分≥16.261 283 87），獲得650 個IBS?D 相關(guān)基因。將槲皮素的靶點(diǎn)和IBS?D 的相關(guān)基因?qū)隣micShare 云平臺后，識別出77 個重疊的靶基因，見圖3A。進(jìn)一步探索槲皮素治療IBS?D 的核心目標(biāo)，將這些重疊的目標(biāo)基因?qū)隨TRING 網(wǎng)站構(gòu)建PPI 網(wǎng)絡(luò)，該網(wǎng)絡(luò)包括77 個節(jié)點(diǎn)和1135 個邊緣，包括TP53、VEGFA、SRC、EGFR 和IL1B 等靶點(diǎn)，見圖3B 和表1。

圖3 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)靶標(biāo)分析Fig 3 Network pharmacological target analysis

表1 PPI 網(wǎng)絡(luò)中77 個主要組件的拓?fù)浞治鯰ab 1 Topological analysis of 77 main components in PPI network

2.4 槲皮素核心靶點(diǎn)的搜索

使用MCODE 對PPI 網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行模塊劃分與聚類分析，共獲得4 個模塊，其中得分最高的模塊（得分=33.632）包括39 個節(jié)點(diǎn)和639 條邊，見圖4A 和表2；模塊二（得分=3.750）包括9 個節(jié)點(diǎn)和15 條邊，見圖4B；模塊三、四（得分=3.000）包括3 個節(jié)點(diǎn)和3條邊，見圖4C、D；此外，使用CytoHubba 插件提取PPI 網(wǎng)絡(luò)中按degree 排名前10 的節(jié)點(diǎn)，包括TP53、TNF?α、AKT1、VEGFA 和IL6 等核心節(jié)點(diǎn)，見圖4e和表3。結(jié)合兩種算法結(jié)果，上述靶點(diǎn)被確定為槲皮素治療IBS?D 的核心靶點(diǎn)。

圖4 PPI 網(wǎng)絡(luò)核心靶點(diǎn)分析Fig 4 PPI network core target analysis

表2 基于Mocde 的網(wǎng)絡(luò)核心目標(biāo)拓?fù)浞治鯰ab 2 Topological analysis of network core targets based on Mocde

表3 基于Cytohubba 的網(wǎng)絡(luò)核心目標(biāo)拓?fù)浞治鯰ab 3 Topological analysis of network core targets based on Cytohubba

2.5 GO 功能富集和KEGG 途徑富集分析

77 個重疊的靶基因被提交到DAVID 數(shù)據(jù)庫和Om?icShare 云平臺，用于GO 和KEGG 途徑富集分析，共鑒定了2 793 個相關(guān)GO 富集條目和132 條KEGG 途徑（P≤0.01）。涉及IBS?D 治療的GO 富集條目包括2 494 個生物過程條目（BP）、178 個分子功能條目（MF）和121 個細(xì)胞成分條目（CC）。GO富集分析的BP、MF、CC 的前20 個條目，見圖5。這些分析表明，生物質(zhì)量調(diào)節(jié)、程序性細(xì)胞死亡的調(diào)節(jié)、分子功能的正調(diào)節(jié)、分子功能的正調(diào)節(jié)和細(xì)胞增殖等生物過程在槲皮素的抗IBS?D 作用中起著重要作用。分子功能包括生長因子受體結(jié)合、蛋白磷酸酶結(jié)合、受體結(jié)合、細(xì)胞因子活性和激酶活性。細(xì)胞成分主要涉及質(zhì)膜蛋白復(fù)合物、細(xì)胞質(zhì)核周區(qū)、質(zhì)膜部分和細(xì)胞基膜。

圖5 槲皮素用于IBS?D 治療的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)靶標(biāo)的GO 富集分析Fig 5 GO enrichment analysis of network pharmacological targets of quercetin for IBS?D treatment

132 條KEGG 途徑涉及人類疾?。ㄈ绨┌Y、傳染病、心血管疾病和免疫性疾?。?、細(xì)胞過程（細(xì)胞生長和死亡及運(yùn)輸和分解代謝）、生物系統(tǒng)（如免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)）、環(huán)境信息處理（如信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和信號分子及相互作用）和代謝（如脂質(zhì)代謝）等。此外，Pathways in cancer、MAPK、PI3K?Akt 和TNF 信號通路被鑒定為在IBS?D 發(fā)展中起主要作用的4 種途徑，見圖6。

圖6 槲皮素治療IBS?D 的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)靶標(biāo)的KEGG 富集分析Fig 6 KEGG enrichment analysis of network pharmacological targets for quercetin treatment of IBS?D

2.6 分子對接分析

用五個核心靶標(biāo)（TP53、TNF?α、AKT1、VEG?FA 和IL6）和槲皮素進(jìn)行分子對接，見圖7?；贒iscovery Studio 軟件的計算結(jié)果顯示，TP53?槲皮素、TNF?α?槲皮素、AKT1?槲皮素、VEGFA?槲皮素、IL6?槲皮素具有良好的結(jié)合能力，LibDock 得分分別為85.698 4、111.196、72.431 7、79.826 3 和107.199。

2.7 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果

2.7.1 大鼠一般情況 空白組大鼠精神較佳、糞便正常、飲食規(guī)律、活動自如；模型組大鼠精神狀態(tài)不佳、糞質(zhì)稀溏、飲食及活動減少、體質(zhì)量降低；經(jīng)過治療后，槲皮素各劑量組大鼠精神狀態(tài)較好，糞質(zhì)逐漸好轉(zhuǎn)，飲食及活動增加，體質(zhì)量增加。

2.7.2 槲皮素對結(jié)腸組織的影響 空白組大鼠結(jié)腸組織上皮細(xì)胞連接緊密，腸粘膜結(jié)構(gòu)完整，腺體結(jié)構(gòu)排列整齊，未見明顯器質(zhì)性病變。模型組大鼠可見杯狀細(xì)胞漿內(nèi)富含液顆粒，少量中性粒細(xì)胞及炎性細(xì)胞散量存在，腸粘膜結(jié)構(gòu)相對完整。與模型組對比，槲皮素各劑量組大鼠結(jié)腸組織未見明顯器質(zhì)性病變，炎性反應(yīng)減少，見圖8。

圖8 槲皮素對IBS?D 大鼠結(jié)腸組織病理學(xué)的影響（HE，×400）Fig 8 Effect of quercetin on colonic histopathology in IBS?D rats （HE， ×400）

2.7.3 槲皮素對IBS?D 大鼠TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?1β、IL?6 的影響 ELISA 結(jié)果顯示，與空白組相比，模型組大鼠TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?1β、IL?6 均升高（P＜0.05）；與模型組相比，槲皮素各治療組大鼠逆轉(zhuǎn)了TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?1β、IL?6 的升高（P＜0.05），其中槲皮素高劑量組抑制效果最顯著，見表4。

表4 槲皮素對IBS?D 大鼠TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?1β 和IL?6 的影響 （n=10， ±s）Tab 4 Effect of quercetin on TP53， TNF?α， AKT1， VEGF?A， IL?1β and IL?6 in IBS?D rats （n=10， ±s）

表4 槲皮素對IBS?D 大鼠TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?1β 和IL?6 的影響 （n=10， ±s）Tab 4 Effect of quercetin on TP53， TNF?α， AKT1， VEGF?A， IL?1β and IL?6 in IBS?D rats （n=10， ±s）

注：與空白組比較，*P＜0.05; 與模型組比較，#P＜0.05。

組別空白組模型組低劑量組中劑量組高劑量組FP TP53 21.40±20 114.41±15.38*69.48±4.91#51.41±4.57#34.57±3.64#131.6 TNF?α 32.82±11.82 317.62±28.43*220.41±17.79#157.31±10.39#106.17±11.02#237.6 AKT1 4.48±1.39 65.13±8.54*42.08±3.98#25.04±3.90#13.53±2.29#156.9 IL?1β 14.49±4.51 120.45±15.36*74.13±7.65#47.31±7.10#31.20±3.37#137.2 IL?6 34.30±6.13 141.91±15.75*104.76±9.77#76.58±5.27#55.99±5.41#121.3＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05 VEGF?A 270.81±35.77 452.65±27.27*400.12±13.83#358.76±7.43#319.41±5.44#64.57＜0.05＜0.05

3 討論

目前認(rèn)為IBS?D 與腸道微生物群、內(nèi)臟超敏反應(yīng)、腸道通透性、腸腦相互作用、低度炎癥等多種機(jī)制相關(guān)［6］。其中，炎癥反應(yīng)是免疫系統(tǒng)誘導(dǎo)的基本反應(yīng)，以保護(hù)身體免受病原體、組織損傷和壓力的侵害。本研究網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果顯示，槲皮素治療IBS?D 的核心關(guān)鍵靶點(diǎn)為TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A 和IL?6，這些靶點(diǎn)與炎癥反應(yīng)，細(xì)胞程序性死亡，氧化應(yīng)激有關(guān)。研究表明TP53 作為轉(zhuǎn)錄因子，能使得線粒體外膜通透性增高，誘發(fā)細(xì)胞凋亡，也可以通過PI3K/Akt、MAPK 等信號通路調(diào)控細(xì)胞周期、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡［7?9］。AKT1 是一種細(xì)胞內(nèi)激酶，幾乎在所有組織中都有表達(dá)，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞新陳代謝、穩(wěn)態(tài)、存活和增殖等［10］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸炎相關(guān)癌癥中，AKT1 磷酸化能誘導(dǎo)NLRP3 炎癥小體活化介導(dǎo)炎癥反應(yīng)［11］。氧化應(yīng)激可以激活生長、趨化、炎性細(xì)胞、抗炎等多種轉(zhuǎn)錄因子維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)［12］。據(jù)報道，VEGF?A 是一種高度保守的分泌信號蛋白，受缺氧或生長因子等效應(yīng)物調(diào)節(jié)，同時VEGF 是氧化應(yīng)激過程中的重要節(jié)點(diǎn)，能增加細(xì)胞內(nèi)ROS 的表達(dá)，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖，調(diào)節(jié)缺氧/復(fù)氧系統(tǒng)之間的平衡［13］。另外，VEGF 的缺失能增加細(xì)胞凋亡，影響內(nèi)皮細(xì)胞存活和代謝［14］。作為炎癥反應(yīng)的促進(jìn)者，TNF?α 可增加更多趨化因子和細(xì)胞因子的產(chǎn)生，導(dǎo)致炎癥級聯(lián)的放大，加劇器官的炎癥損傷［15］。IL?6 是誘導(dǎo)和維持炎癥的關(guān)鍵細(xì)胞因子，可以由巨噬細(xì)胞在組織損傷時釋放，IL?6 高表達(dá)可以促進(jìn)全身性的炎癥反應(yīng)［16］。本研究，槲皮素明顯降低TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?1β 和IL?6 的表達(dá)水平，表明槲皮素可能是通過抑制細(xì)胞凋亡、細(xì)胞自噬、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)干預(yù)IBS?D。

KEGG 途徑富集分析顯示MAPK、PI3K?Akt 和TNF 信號通路可能是槲皮素作用IBS?D 發(fā)展中起主要作用的途徑。MAPK 通路已被證實(shí)是IBS?D發(fā)展中的重要途徑，可以發(fā)揮調(diào)節(jié)IBS 大鼠模型中免疫相關(guān)分子的分泌和鎮(zhèn)痛作用［17］。此外MAPK的抑制劑可以有效緩解動物模型中的炎癥和神經(jīng)性疼痛［18］。研究表明，PI3K/Akt 信號在細(xì)胞的凋亡和自噬過程中有重要作用［19］。據(jù)報道，PI3K?Akt 通路激活自噬破壞腸黏膜屏障，導(dǎo)致IBS 癥候群的發(fā)生，抑制PI3K?Akt 通路能夠保護(hù)腸上皮細(xì)胞，改善腸黏膜屏障［20］。先前的研究也表明，抑制PI3K/AKT 信號通路可降低IBS?D 小鼠的內(nèi)臟敏感性，改善IBS?D 癥候群［21］。TNF 信號通路控制免疫系統(tǒng)的發(fā)育，細(xì)胞存活信號通路，增殖并調(diào)節(jié)代謝過程［22］。HOU 等人發(fā)現(xiàn)，抑制TNF 通路誘導(dǎo)的炎癥信號可以保護(hù)腸上皮緊密連接并修復(fù)IBS?D 對腸上皮屏障造成的損害［23］。遺憾的是，本研究沒有對MAPK、PI3K?Akt 和TNF 信號通路進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，希望后續(xù)可以展開研究。

綜上所述，本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法揭示了槲皮素治療IBS?D 的關(guān)鍵靶點(diǎn)及作用通路，實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了槲皮素作用于TP53、TNF?α、AKT1、VEGF?A、IL?6 等關(guān)鍵靶點(diǎn)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞自噬等途徑，發(fā)揮治療IBS?D 的作用。

作者貢獻(xiàn)度說明：

馮敏超、謝勝：構(gòu)思并設(shè)計了該研究和實(shí)驗(yàn)；羅芳、譚瑾軒：負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)收集處理及文章撰寫；王道剛、陳祖民、李凱、陳國忠：負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)思路及最終文章的修改。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。