摘要：為探究魚油和豆油作為飼料脂肪源對(duì)彭澤鯽親本卵巢發(fā)育的影響，將健康的初始體質(zhì)量為253.78±5.34 g的彭澤鯽分別以魚油（FO）和豆油（SO）兩種脂肪源的試驗(yàn)飼料飼喂 60 d。采用Illumina NovaSeq 6000高通量測(cè)序平臺(tái)對(duì)彭澤鯽親本卵巢組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。然后將所測(cè)序列經(jīng)質(zhì)控，組裝后對(duì)比到GO KEGG等數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行注釋，并對(duì)其進(jìn)行差異基因等的聚類分析。試驗(yàn)結(jié)果顯示，F(xiàn)O組平均得到4.33×10⁷條Raw Reads，原始數(shù)據(jù)過濾掉測(cè)序接頭序列、未知堿基序列、低質(zhì)量序列后平均得到4.19×10⁷條Clean Reads，堿基數(shù)6.50Gb；SO組平均得到4.30×10⁷條Raw Reads，原始數(shù)據(jù)過濾掉測(cè)序接頭序列、未知堿基序列、低質(zhì)量序列后平均得到4.15×10⁷條Clean Reads，堿基數(shù)6.45Gb。經(jīng)過純化后，Q20比例在97.25%以上，Q30比例在91.55%以上。在SO組相對(duì)FO組比較中，按照qlt;0.05和|log2FC（SO/FO）|gt;1的篩選條件，得到425個(gè)差異表達(dá)基因（DEGs），顯著上調(diào)基因有290個(gè)，顯著下調(diào)基因有135個(gè)，共篩選出7個(gè)性腺發(fā)育相關(guān)基因，其中6個(gè)基因顯著上調(diào)，1個(gè)基因顯著下調(diào)。對(duì)DEGs進(jìn)行GO功能分析表明，差異表達(dá)的基因?qū)Ρ鹊紾O數(shù)據(jù)庫共898個(gè)GO term，這些term分別對(duì)應(yīng)細(xì)胞組分，分子功能以及生物過程等三大類，差異基因主要涉及到生物調(diào)控、細(xì)胞過程、代謝過程和刺激反應(yīng)等。通過KEGG富集分析結(jié)果表明，兩組樣本之間的差異表達(dá)基因富集194條通路，主要涉及細(xì)胞進(jìn)程、環(huán)境信息處理、遺傳信息處理、新陳代謝、有機(jī)系統(tǒng)等五大類代謝通路。其中細(xì)胞生長和死亡、信號(hào)分子和相互作用、氨基酸代謝和脂類代謝等富集顯著。

關(guān)鍵詞：彭澤鯽親本；脂肪源；轉(zhuǎn)錄組測(cè)序；差異表達(dá)基因；KEGG富集

中圖分類號(hào)：S917.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

基金項(xiàng)目：江西省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（20203BBF63045）；江西省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（JXARS-03）；江西省農(nóng)牧漁業(yè)科研指導(dǎo)性課題（2023-35）

作者簡介：肖俊（1991—），男，水產(chǎn)師，碩士，研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖。E-mail：874370756@qq.com

*通訊作者：丁立云（1981—），男，研究員，博士，研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖與飼料營養(yǎng)。E-mail：dingliyun2008@163.com

彭澤鯽（Carassius auratus var.Pengze）是我國首個(gè)直接從野生鯽魚中人工選育出的養(yǎng)殖新品種，具有生長快、抗病能力強(qiáng)、耐低氧、肉質(zhì)鮮嫩等特點(diǎn)^［1］。自選育以來，彭澤鯽的養(yǎng)殖發(fā)展迅速，取得巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益^［2］。2023年，彭澤鯽被推選為江西農(nóng)產(chǎn)品“二十大區(qū)域公用品牌”，彭澤鯽科技小院獲批全國科技小院^［3］。苗種質(zhì)量是商業(yè)化水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展的關(guān)鍵指標(biāo)之一，近年來，人們對(duì)彭澤鯽的需求量急劇增加，彭澤鯽產(chǎn)量不能夠滿足市場需求，勢(shì)必就要擴(kuò)大彭澤鯽的養(yǎng)殖規(guī)模，但彭澤鯽魚苗生產(chǎn)養(yǎng)殖基地很少，苗種的質(zhì)量和來源就得不到保障，長此以往，會(huì)導(dǎo)致優(yōu)質(zhì)苗種退化^［4］。

脂肪是魚類機(jī)體不可或缺的營養(yǎng)物質(zhì)，其提供的必需脂肪酸對(duì)魚類生長和繁殖發(fā)育有著重要作用^［5］，魚油作為傳統(tǒng)水產(chǎn)飼料的常用脂肪源，因其富含長鏈多不飽脂肪酸（Long chain polyunsaturated fatty acids，LC-PUFA），成為水產(chǎn)飼料中最理想的脂肪源^［6］。LC-PUFAs，特別是C22：6n-3（DHA）、C20：5n-3（EPA）和C20：4n-6（ARA），是卵黃蛋白原和胚胎細(xì)胞生物膜的關(guān)鍵成分之一^［7］。脂肪源的營養(yǎng)價(jià)值在很大程度上取決于脂肪酸的不飽和程度及各種脂肪酸的比例。如添加富含n-6和n-3多不飽和脂肪酸的飼料對(duì)雌鯉（Cyprinus carpio）的性腺成熟和繁殖性能至關(guān)重要^［6］。羅非魚（Oreochromis niloticus）攝食富含LNA的飼料可以在性腺中檢測(cè)到濃度遠(yuǎn)高于攝食魚油組的n-3 PUFAs^［7］。豆油對(duì)提高中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）產(chǎn)卵力的效果優(yōu)于魚油^［8］。

卵巢是魚類繁殖不可缺少的生殖器官，選用魚油和豆油作為彭澤鯽親本飼料的脂肪源，研究其對(duì)彭澤鯽親本卵巢發(fā)育關(guān)鍵基因及相關(guān)信號(hào)通路具有一定的意義。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的普及，利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序全面快速的獲得卵巢組織幾乎全部轉(zhuǎn)錄本序列信息，挖掘與性腺發(fā)育相關(guān)的候選基因是一種解析性腺發(fā)育機(jī)制的有效途徑^［9］。高通量測(cè)序技術(shù)在動(dòng)物組織中挖掘差異表達(dá)基因和富集代謝通路等方面的研究較為豐富。然而，從營養(yǎng)角度出發(fā)的研究卻幾乎沒有。特別是針對(duì)彭澤鯽親本的研究尚未有過報(bào)道。因此，本研究通過使用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)探究飼料中添加魚油和豆油對(duì)彭澤鯽親本的卵巢組織差異表達(dá)基因（Differentially expressed genes，DEGs）轉(zhuǎn)錄表達(dá)情況，并從中篩選出性腺發(fā)育關(guān)鍵基因及相關(guān)信號(hào)通路。旨在為彭澤鯽親本生殖發(fā)育及相關(guān)機(jī)制的闡明奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚及飼養(yǎng)管理

彭澤鯽親本購買于九江良盛生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，正式試驗(yàn)開始前在循環(huán)水系統(tǒng)中用基礎(chǔ)飼料暫養(yǎng)4周，以適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境和飼料規(guī)格。本研究選取了健康且有活力的彭澤鯽親本90尾，初始體質(zhì)量為（253.78±5.34）g。將其平均分成2組，每組3個(gè)平行，每個(gè)平行15尾魚，養(yǎng)殖周期為60 d。投喂時(shí)間設(shè)定為每天的9∶00和17∶00，對(duì)試驗(yàn)魚進(jìn)行飽食投喂。養(yǎng)殖試驗(yàn)水質(zhì)進(jìn)行嚴(yán)格把控：水溫（20±5） ℃，溶解氧≥7 mg/L，pH 7.53±0.12，氨氮和亞硝酸濃度均≤0.1 mg/L。光周期遵循自然周期。

1.2 試驗(yàn)飼料

飼料的蛋白質(zhì)源選擇進(jìn)口魚粉、豆粕和谷朊粉，脂肪源選擇魚油（FO）和豆油（SO），將FO∶SO按5∶0和0∶5的比例配置成2種等氮等能試驗(yàn)飼料。經(jīng)過逐級(jí)混勻的方式混合均勻后，將顆粒飼料制粒成直徑為2 mm的大小，并在晾干后放置于-20 ℃冰箱保存。表1是基礎(chǔ)飼料配方和營養(yǎng)成分，表2是各個(gè)試驗(yàn)組飼料的脂肪酸組成。

1.3 樣品采集

飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，饑餓24 h，隨即將魚置冰盤內(nèi)解剖，取出卵巢組織，用凍存管分裝，并迅速置于液氮中，然后于-70 ℃冰箱保存，以備總RNA提取。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1" RNA提取與檢測(cè)，文庫構(gòu)建與高通量測(cè)序

使用Trizol試劑盒（Invitrogen，Carlsbad，CA，USA）按照制造商的方案從卵巢組織中提取總RNA。使用安捷倫2100生物分析儀（Agilent Technologies，Palo Alto，CA，USA）和RNase-free瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)總RNA的質(zhì)量和完整性。文庫構(gòu)建和高通量測(cè)序（采用Illumina NovaSeq 6000）由華大基因（華大基因科技股份有限公司，深圳）完成。

1.4.2" 數(shù)據(jù)過濾

測(cè)序得到的raw data使用SOA Pnuke（v1.5.6）進(jìn)行過濾，過濾掉包含接頭的reads（接頭污染）、未知堿基N含量大于5%的reads、低質(zhì)量的reads（質(zhì)量值低于15的堿基占該reads總堿基數(shù)的比例大于20%的reads為低質(zhì)量的reads），得到clean data。后續(xù)使用Dr.Tom多組學(xué)數(shù)據(jù)挖掘系進(jìn)行數(shù)據(jù)分析、繪圖及挖掘。

1.4.3" 差異表達(dá)基因分析

使用HISAT2（v2.1.0）軟件將clean data比對(duì)到參考基因組上。使用Bowtie2（v2.3.4.3）將clean data比對(duì)到參考基因集上。使用RSEM（v1.3.1）軟件進(jìn)行基因表達(dá)定量，并使用pheatmap（v1.0.8）繪制基因在不同樣本中的表達(dá)量聚類熱圖。使用DESeq2（v1.4.5）進(jìn)行差異基因檢測(cè)，首先對(duì)讀取次數(shù)進(jìn)行歸一化處理，然后根據(jù)模型計(jì)算假設(shè)檢驗(yàn)概率（p-value），最后進(jìn)行多個(gè)假設(shè)檢驗(yàn)校正，得到FDR值（1 discovery rate）。根據(jù)差異分析結(jié)果，篩選qlt;0.05和|log2FC（SO/FO）|gt;1基因?yàn)椴町惐磉_(dá)基因（DEGs），q是多重假設(shè)檢驗(yàn)校正后的P值，F(xiàn)C為差異倍數(shù)（Fold change）。進(jìn)一步深入探索與表型變化相關(guān)的基因功能，使用Phyper對(duì)差異基因進(jìn)行GO及KEGG富集分析，以 Qvalue≤0.05為閾值，滿足此條件的定義為在候選基因中顯著富集。根據(jù)DEGs進(jìn)行火山圖分析、KEGG通路富集分析、GO功能富集分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果

根據(jù)飼料中脂肪源不同，將其分為FO和SO兩組，每組三個(gè)重復(fù)，取樣卵巢組織（ovarian，O）后測(cè)序共得到6組轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，F(xiàn)O組三個(gè)重復(fù)平均得到4.33×10⁷條Raw Reads，原始數(shù)據(jù)過濾掉測(cè)序接頭序列、未知堿基序列、低質(zhì)量序列后平均得到4.19×10⁷條Clean Reads，堿基數(shù)6.50Gb；SO組三個(gè)重復(fù)平均得到4.30×10⁷條Raw Reads，原始數(shù)據(jù)過濾掉測(cè)序接頭序列、未知堿基序列、低質(zhì)量序列后平均得到4.15×10⁷條Clean Reads，堿基數(shù)6.45Gb。經(jīng)過純化后，6個(gè)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)Q20比例均在97.25%以上，Q30比例均在91.55%以上，過濾后Reads比例均在 94.93%以上。這些結(jié)果表明，測(cè)序數(shù)據(jù)具有足夠的數(shù)量和高質(zhì)量，可以確保準(zhǔn)確的序列裝配和足夠的轉(zhuǎn)錄組覆蓋率，可進(jìn)一步進(jìn)行后續(xù)分析。各實(shí)驗(yàn)組測(cè)序數(shù)據(jù)見表2。

2.2" 差異表達(dá)基因分析

在SO組相對(duì)FO組比較中，按照qlt;0.05和|log2FC（SO/FO）|gt;1的篩選條件，在兩組中檢測(cè)出425個(gè)DEGs，其中上調(diào)DEG 290個(gè)，下調(diào)DEG 135個(gè)（圖1）。在這些DEG中，篩選出了一些性腺發(fā)育相關(guān)基因（表3），如11β羥基類固醇脫氫酶（11β-hydroxysteroid dehydrogenase，11βhsd）、17β羥基類固醇脫氫酶（11β-hydroxysteroid dehydrogenase，17βhsd）、雌激素受體（Estrogen Receptor，ER）、叉頭框蛋白2（Forkhead transcriptional factor 2，foxl2），威廉姆斯瘤基因（Wilms 1，wt1）、雄激素受體（Androgen Receptor，AR）和透明帶精子結(jié)合蛋白（Zona pellucida，ZP）等。

2.3" GO功能富集分析

在SO組相對(duì)FO組的比較中用GO術(shù)語注釋到的425個(gè)DEGs進(jìn)行GO（Gene Ontology）功能富集分析。如圖2所示，DEGs分別富集在生物過程（Biological process）、細(xì)胞組分（Cellular component）及分子功能（Molecular function） 3個(gè)類別中，GO term分別為335、237和326個(gè)。其中在生物過程功能類型中主要富集在生物調(diào)控（Biological regulation）、細(xì)胞過程（Cellular process）、代謝過程（Metabolic process）和刺激反應(yīng)（Response to stimulus）；在細(xì)胞組分功能類型中主要富集在細(xì)胞構(gòu)造（Cellular anatomical entity）和蛋白復(fù)合物（Protein-containing complex）；在分子功能類型中主要富集在結(jié)合（Binding）、催化活性（Catalytic activity）、分子功能調(diào)節(jié)（Molecular function regulator）和轉(zhuǎn)運(yùn)活性（Transporter activity）。根據(jù)DEGs富集氣泡圖可知（圖3），胞外區(qū)（Extracellular region）和酶調(diào)節(jié)因子活性（Enzyme regulator activity）是包含DEGs最多的類別，其次還有肽酶抑制劑活性（Peptidase inhibitor activity）、肽酶調(diào)節(jié)活性（Peptidase regulator activity）、酶抑制劑活性（Enzyme inhibitor activity）和內(nèi)肽酶抑制劑活性（Endopeptidase inhibitor activity）等。

2.4" KEGG富集通路分析

在SO組相對(duì)于FO組的比較中所有的DEGs映射到KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）通路數(shù)據(jù)庫，進(jìn)行通路富集分析。如圖4所示，SO組相對(duì)FO組的比較中涉及到的通路有194條，這些DEGs分別富集在細(xì)胞進(jìn)程（Cellular Processes）、環(huán)境信息處理（Environmental Information Processing）、基因信息處理（Genetic Information Processing）、新陳代謝（Metabolism）和有機(jī)體系統(tǒng)（Organismal Systems）5個(gè)類別中。其中細(xì)胞進(jìn)程DEGs較多的通路有細(xì)胞生長和死亡（Cell growth and death）和細(xì)胞群落-真核生物（Cellular community-eukaryotes）；環(huán)境信息處理DEGs較多的通路有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)（Signal transduction）和信號(hào)分子和相互作用（Signaling molecules and interaction）；基因信息處理DEGs較多的通路有折疊分類和退化（Folding，sorting and degradation）和翻譯（Translation）；新陳代謝DEGs較多的通路有全局和總覽圖（Global and overview maps）、脂代謝（Lipid metabolism）和氨基酸代謝（Amino acid metabolism）；有機(jī)體系統(tǒng)DEGs較多的通路有內(nèi)分泌系統(tǒng)（Endocrine system）、免疫系統(tǒng)（Immune system）、消化系統(tǒng)（Digestive system）和循環(huán)系統(tǒng)（Circulatory system）。從KEGG富集分析中選取富集最顯著的20個(gè)通路（Pathway），做KEGG富集氣泡圖。由圖5可知，DEGs KEGG Pathway主要富集在黏著斑（Focal adhesion）、PI3K-Akt信號(hào)通路（PI3K-Akt signaling pathway）、ECM-受體互作（ECM-receptor interaction）、蛋白質(zhì)的消化和吸收（Protein digestion and absorption）和松弛素信號(hào)通路（Relaxin signaling pathway）中。

3 討論

高通量的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序已經(jīng)成為人們挖掘新基因的有效手段，采用該技術(shù)對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物卵巢發(fā)育過程的研究，能幫助更好地了解卵巢發(fā)育這一生理過程中機(jī)體內(nèi)在的轉(zhuǎn)錄調(diào)控變化，以便更積極主動(dòng)地去解決生產(chǎn)上因卵巢發(fā)育而產(chǎn)生的各類問題。吳丹等^［10］通過比較綠鰭馬面鲀精巢和卵巢的轉(zhuǎn)錄組表達(dá)差異，初步闡明了精巢和卵巢的基因表達(dá)特征。Zhou等^［11］利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)研究不同大豆磷脂含量對(duì)三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）卵巢組織的影響，并發(fā)掘出其調(diào)控卵巢發(fā)育的功能性基因和相關(guān)通路。李青等^［12］對(duì)鯽魚血液、肝臟、卵巢組織轉(zhuǎn)錄組比較分析為進(jìn)一步克隆和挖掘鯽魚功能基因、多態(tài)性檢測(cè)及群體遺傳多樣性分析等方面研究奠定基礎(chǔ)。

高通量測(cè)序的準(zhǔn)確性在于堿基質(zhì)量值和Reads的數(shù)量和質(zhì)量。在本研究中，F(xiàn)O組和SO組的平均Reads總數(shù)分別為4.33×10⁷個(gè)和4.30×10⁷個(gè)，堿基質(zhì)量值Q30的比例均達(dá)到了91.55%。比對(duì)測(cè)序Reads和參考基因組序列是后續(xù)分析的關(guān)鍵一步，只有比對(duì)成功的序列才能被用于后續(xù)分析。本研究中，F(xiàn)O組的比對(duì)效率為83.29%，SO組的比對(duì)效率為81.12%，與之前的研究結(jié)果一致^［13-15］，表明選用的參考基因組具備了進(jìn)行后續(xù)分析的必要條件。隨后，使用BLAST軟件將測(cè)序基因與Nr、GO、KEGG數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對(duì)，為基因提供全面的注釋信息。

本研究從彭澤鯽親本卵巢組織的DEGs中篩選出7個(gè)與性腺發(fā)育相關(guān)的基因。foxl2參與了卵巢分化過程以及其他發(fā)育過程。先前的研究已經(jīng)在南方鲇（Clarias gariepinus）^［16］、稀有鮈鯽（Gobiocypris rarus）^［17］、刀魚（Coilia nasus）^［18］和黃鱔（Monopterus albus）^［19］等魚類中進(jìn)行過基因克隆和鑒定工作，結(jié)果顯示foxl2在各自性腺中的表達(dá)量要高于其他組織，而在卵巢中的表達(dá)量也要高于精巢。因此，foxl2已被證明在雌性發(fā)育過程中起關(guān)鍵作用，是目前已知的脊椎動(dòng)物卵巢發(fā)育和分化的一個(gè)關(guān)鍵啟動(dòng)基因^［20］。wt1在魚類的腎臟和性腺中表達(dá)，可能通過直接或間接調(diào)節(jié)foxl2的表達(dá)來影響雌激素的生成。已從黃鱔^［21］和半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）^［22］等魚類中克隆出wt1基因，發(fā)現(xiàn)它在性腺、腎、腸、脾和心臟等組織中均有表達(dá)。半滑舌鰨性腺中wt1的表達(dá)量明顯高于其他組織，而黃鱔中wt1在雌性、間性和雄性性腺中的表達(dá)量在不同時(shí)期呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。此外，在半滑舌鰨中，雄魚的wt1表達(dá)量明顯高于雌魚，而雌魚的表達(dá)量高于偽雄魚。這些結(jié)果表明wt1對(duì)于性腺分化過程可能不起決定性作用。11βHSD是一種與糖皮質(zhì)激素代謝相關(guān)的酶，在稀有鮈鯽^［23］、斑馬魚（Danio rerio）^［24］和南方鲇^［25］等魚類中已被克隆。17βHSD在雌魚體內(nèi)起到重要作用，能夠?qū)⒉G酮轉(zhuǎn)化為雌激素E2^［26］，在精巢中則可轉(zhuǎn)化為雄魚特有的11-KT^［27］，17βHSD是雌素酮（Estrone）和E2互相轉(zhuǎn)化的催化劑。此外，17βHSD在雌雄虹鱒魚中也表現(xiàn)出特異性表達(dá)，并在不同時(shí)期的肝臟中表達(dá)出現(xiàn)差異^［28］。這些激素的轉(zhuǎn)化過程是通過特定的代謝酶催化進(jìn)行的，其中17βHSD在雌魚體內(nèi)起到至關(guān)重要的作用^［29-30］。未來的研究熱點(diǎn)必將聚焦于這些激素代謝酶基因在性腺分化中的功能，以期更深入了解這些基因在彭澤鯽等魚類中的作用。zp在生殖相關(guān)生命活動(dòng)中扮演重要角色，卵母細(xì)胞能夠合成ZP蛋白且在體內(nèi)無卵母細(xì)胞存在時(shí)也能合成。硬骨魚中，ZP蛋白主要在肝臟和卵巢中合成，表達(dá)模式有卵巢特異性、肝臟特異性和共同表達(dá)^［31］。青鳉（Oryziaslatipes）^［32］中，雌激素能調(diào)控肝臟中ZP蛋白的合成；而斑馬魚卵巢ZP蛋白的表達(dá)受雌激素控制影響較小^［33］。zp的表達(dá)與卵細(xì)胞的發(fā)育密切相關(guān)，青鳉中卵巢特異性表達(dá)的zp在卵細(xì)胞直徑達(dá)到45 μm時(shí)可檢測(cè)到表達(dá)；而鯉中，zp在卵黃囊泡階段就有高水平表達(dá)。雄性青鳉肝臟中的zp在正常情況下幾乎不表達(dá)，但在雌激素作用下會(huì)被誘導(dǎo)表達(dá)^［34］。魚體內(nèi)存在三種雌激素受體（ERα、ERβ1和ERβ2），這些受體參與調(diào)節(jié)魚類的生殖發(fā)育。ERα最初是從虹鱒（Oncorhynchus mykiss）中克隆得到的，在對(duì)其后續(xù)的研究中，又發(fā)現(xiàn)了ERα的另一個(gè)亞型ERα2^［35］。隨后ERβ也被從不同種類的魚中克隆。此外，除了虹鱒外，其他魚類如團(tuán)頭魴（Megalobrama amblycephala）^［36］、許氏平鲉（Sebastes schlegelii）^［37］、尼羅羅非魚（Nile tilapia）^［38］和日本鰻鱺（Anguilla japonica）^［39］等也報(bào)道存在ER。雄激素通過與AR結(jié)合在靶細(xì)胞膜上或核內(nèi)發(fā)揮作用，使得信號(hào)傳入細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生一系列生物學(xué)效應(yīng)。AR同樣是一種配體依賴型的轉(zhuǎn)錄因子，最早在非洲爪蟾（Xenopus laevis）^［31］的報(bào)道中發(fā)現(xiàn)AR存在2種亞型（ARα和ARβ），而在一些魚類如鯽和彭澤鯽中只存在一種亞型^［40］。AR介導(dǎo)的信號(hào)途徑對(duì)雄性胚胎發(fā)育、雄性性成熟和雄激素依賴性靶組織的發(fā)育是必要的。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，SO組相對(duì)于FO組的比較中，卵巢組織中11βhsd、17βhsd、ER、foxl2、wt1和AR共6個(gè)性腺發(fā)育相關(guān)基因顯著上調(diào)，唯獨(dú)zp基因表達(dá)顯著下調(diào)。這表明與添加魚油相比，添加豆油更有助于促進(jìn)彭澤鯽親本卵巢的發(fā)育。因此，本試驗(yàn)為進(jìn)一步探究不同脂肪源對(duì)彭澤鯽生長發(fā)育的分子調(diào)控機(jī)制奠定了良好的基礎(chǔ)。

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