馬 翼，陳海珍

山西省兒童醫(yī)院/山西省婦幼保健院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，山西太原 030006

感染性肺炎是指細(xì)菌、衣原體等感染引起的肺部感染，是造成新生兒死亡的重要原因之一，感染早期不具典型癥狀，難以區(qū)分感染類別，易造成誤診、漏診，早期診斷、治療可降低患兒病死率[1]。感染性肺炎患兒臨床表現(xiàn)主要為咳嗽、肺部濕羅音、發(fā)熱等，隨著病情發(fā)展可損傷呼吸功能，引起呼吸衰竭甚至死亡，主要以血液病原菌培養(yǎng)結(jié)果作為診斷/評估病情標(biāo)準(zhǔn)，但早期病原菌濃度較低導(dǎo)致時效性不足，C反應(yīng)蛋白等炎性標(biāo)志物常用與診斷感染性肺炎，但特異度、準(zhǔn)確度較低[2]。因而尋找新型血清標(biāo)志物有助于早期診斷感染性肺炎。載脂蛋白C1(APOC1)是運(yùn)輸血脂的脂蛋白，且與肝炎、系統(tǒng)性炎性疾病密切相關(guān)，可評估疾病感染程度[3]。趨化因子C-C基元配體5(CCL5)屬于CC類趨化因子家族，可募集巨噬細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等遷移至炎性部位，并對T細(xì)胞分泌相關(guān)因子發(fā)揮趨化作用，研究表明急性期肺炎支原體肺炎(MPP)患兒血清CCL5水平升高，且與病變程度有關(guān)[4]。MMP-9水平升高可能促使呼吸系統(tǒng)病變，可降解呼吸系統(tǒng)細(xì)胞外基質(zhì)，破壞呼吸系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，參與氣道炎性反應(yīng)，研究表明感染發(fā)生時肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞可產(chǎn)生MMP-9，進(jìn)一步損傷支氣管、肺組織[5]。目前血清APOC1、CCL5、MMP-9在感染性肺炎患兒中表達(dá)狀態(tài)及其臨床意義尚未明確。因此，本研究主要探討感染性肺炎患兒血清APOC1、CCL5、MMP-9表達(dá)情況及其與肺功能的相關(guān)性，進(jìn)一步評價血清各指標(biāo)對感染性肺炎的診斷價值，并對血清各指標(biāo)不同表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性進(jìn)行比較，為臨床治療感染性肺炎患兒提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年2月至2022年2月山西省兒童醫(yī)院108例感染性肺炎患兒作為研究組。研究組根據(jù)感染可能性評分(IPS)分為重癥組49例(IPS≥13分)和輕癥組59例(IPS<13分)[6]。另選取同期65例體檢健康兒童作為對照組。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者及其家屬知情且簽署知情同意書。

表1 兩組臨床資料比較

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患兒均符合感染性肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；(2)母親足月分娩、自然受孕、單胎妊娠；(3)未合并其他肺部疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并先天性疾?。?2)母親早產(chǎn)或其他異常妊娠/分娩；(3)吸入性肺炎；(4)呼吸功能不全；(5)母親合并妊娠期疾病；(6)母親患有艾滋病、病毒性肝炎等；(6)極低體重；(7)重度窒息；(8)合并其他部位感染。

1.3方法 采集研究組患兒入組次日清晨空腹血5 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清置于-80 ℃冰箱保存。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清APOC1、CCL5水平，美國R&D公司提供APOC1檢測試劑盒(批號：20190603)，美國Sigma公司提供CCL5檢測試劑盒(批號：20190308)。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清MMP-9水平，上?？婆d生物工程有限公司提供檢測試劑盒(批號：20190711)。比較兩組血清APOC1、CCL5、MMP-9水平及肺功能指標(biāo)[第1秒用力呼氣容積(FEV1)/用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值的百分比(FEV1%)]。為保證檢測質(zhì)量，均由同一試驗(yàn)小組成員完成檢測，且檢測次數(shù)為3次，取其平均數(shù)。

2 結(jié) 果

2.13組血清各指標(biāo)水平及肺功能比較 輕癥組、重癥組血清APOC1、CCL5、MMP-9水平高于對照組，F(xiàn)EV1/FVC、FEV1%低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重癥組血清APOC1、CCL5、MMP-9水平高于輕癥組，F(xiàn)EV1/FVC、FEV1%低于輕癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清各指標(biāo)水平及肺功能比較

2.2血清各指標(biāo)水平與肺功能相關(guān)性分析 感染性肺炎患兒血清APOC1、CCL5、MMP-9水平與FEV1/FVC、FEV1%均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見圖1。

注：A為血清APOC1水平與FEV1/FVC相關(guān)性分析；B為血清CCL5水平與FEV1/FVC相關(guān)性分析；C為血清MMP-9水平與FEV1/FVC相關(guān)性分析；D為血清APOC1水平與FEV1%相關(guān)性分析；E為血清CCL5水平與FEV1%相關(guān)性分析；F為血清MMP-9水平與FEV1%相關(guān)性分析。

2.3血清各指標(biāo)間相關(guān)性分析 感染性肺炎患兒血清APOC1水平與血清CCL5、MMP-9水平呈正相關(guān)，血清CCL5水平與血清MMP-9水平呈正相關(guān)(分別為r=0.836，P<0.000 1；r=0.805，P<0.000 1；r=0.841，P<0.000 1)。見圖2。

注：A為血清APOC1水平與血清CCL5水平相關(guān)性分析；B為血清APOC1水平與血清MMP-9水平相關(guān)性分析；C為血清CCL5水平與血清MMP-9水平相關(guān)性分析。

2.4血清各指標(biāo)對感染性肺炎的診斷效能 以感染性肺炎兒童血清指標(biāo)為陽性標(biāo)本，以體檢健康兒童血清指標(biāo)為陰性樣本，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清APOC1、CCL5、MMP-9聯(lián)合檢測診斷感染性肺炎的AUC高于各指標(biāo)單項(xiàng)檢測的AUC。見表3、圖3。

表3 血清各指標(biāo)對感染性肺炎的診斷效能

圖3 ROC曲線分析血清各指標(biāo)對感染性肺炎的診斷效能

2.5血清各指標(biāo)不同表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性比較 以2.4結(jié)果中血清APOC1、CCL5、MMP-9的截斷值為界，將感染性肺炎患兒依次分為APOC1、CCL5、MMP-9高表達(dá)、低表達(dá)。APOC1、CCL5、MMP-9高表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性是其低表達(dá)水平患兒的1.589、1.462、1.477倍(P<0.05)，可見APOC1、CCL5、MMP-9高表達(dá)水平可增加感染性肺炎發(fā)生風(fēng)險。見表4。

表4 血清各指標(biāo)不同表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性比較

續(xù)表4 血清各指標(biāo)不同表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性比較

3 討 論

大部分感染性肺炎患兒確診時已發(fā)展至嚴(yán)重階段，血清學(xué)指標(biāo)具有高度靈敏度、特異度等優(yōu)勢，可用于早期診斷感染性疾病[8-9]。感染性肺炎患兒體內(nèi)炎性反應(yīng)加劇，免疫功能損傷，輔助性T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞失衡可促進(jìn)炎性因子釋放，進(jìn)而造成肺組織損傷[10]。

APOC1是評估肺部疾病的敏感性指標(biāo)，可評估疾病感染嚴(yán)重程度、預(yù)后轉(zhuǎn)歸[11]。APOC1在難治性肺炎支原體肺炎中表達(dá)水平升高，且與肺功能有關(guān)[12]。本研究結(jié)果顯示，輕癥組、重癥組血清APOC1水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重癥組血清APOC1水平高于輕癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示APOC1水平與感染性肺炎嚴(yán)重程度有關(guān)。APOC1可將血脂運(yùn)輸至機(jī)體各處并進(jìn)行代謝，調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)、免疫功能[13]。本研究發(fā)現(xiàn)APOC1與FEV1/FVC、FEV1%均呈負(fù)相關(guān)，表明APOC1水平升高可加劇肺部組織炎性反應(yīng)，引起肺組織損傷，進(jìn)而減低肺功能。喘息患兒血清APOC1水平升高，可參與氣道炎性反應(yīng)，可能是影響哮喘/反復(fù)哮喘發(fā)生的危險因素[14]。本研究結(jié)果顯示，APOC1高表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性是其低水平的1.589倍，提示不同病原體感染機(jī)體后APOC1水平升高，可能引起氣道炎性反應(yīng)，并參與脂質(zhì)代謝、炎性反應(yīng)過程，募集炎性細(xì)胞因子轉(zhuǎn)移至肺部組織，促進(jìn)感染性肺炎發(fā)生發(fā)展。CCL5在缺血缺氧性腦病患兒中表達(dá)水平升高，可調(diào)節(jié)細(xì)胞生長/分化，且與其患兒預(yù)后不良有關(guān)[15]。本研究結(jié)果顯示，輕癥組、重癥組血清CCL5水平升高，感染性肺炎患兒血清CCL5水平與FEV1/FVC、FEV1%均呈負(fù)相關(guān)，這與董天津等[16]報道結(jié)果相似。本研究進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，CCL5高表達(dá)水平患兒發(fā)生感染性肺炎的危險性是其低水平患兒的1.462倍，提示CCL5水平升高與肺部功能損傷密切相關(guān)，并可反映感染性肺炎發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。CCL5可與嗜酸性粒細(xì)胞表面受體結(jié)合，參與肺部炎性損傷過程，且與肺部功能損傷呈負(fù)相關(guān)。CCL5在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中表達(dá)水平升高，且與疾病活動程度有關(guān)[17]。CCL5可參與疼痛信號生成、傳遞過程，中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后可激活細(xì)胞核因子κB(NF-κB)信號通路，促進(jìn)CCL5表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子表達(dá)[18]。由此推測，機(jī)體感染條件下，星形膠質(zhì)細(xì)胞活化后產(chǎn)生CCL5，CCL5可作為核嗜酸性粒細(xì)胞、記憶T細(xì)胞趨化因子，募集小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，進(jìn)而促進(jìn)感染性肺炎發(fā)展。

感染性肺炎血清MMP-9水平升高，機(jī)體感染后激活宿主炎性反應(yīng)，MMP-9表達(dá)量增高導(dǎo)致炎性反應(yīng)加劇[19-20]。本研究結(jié)果顯示，輕癥組、重癥組血清MMP-9水平高于對照組，提示MMP-9水平升高可能促進(jìn)感染性肺炎發(fā)生。MMP-9可破壞血腦屏障，反映動脈粥樣硬化等炎性疾病活躍狀態(tài)，可用于腦梗死合并肺炎患者早期診斷及預(yù)后評估[21]。MMP-9與重癥肺炎患者感染病情、預(yù)后不良有關(guān)，研究表明MMP-9可分解肺泡間質(zhì)成分，加快炎性因子擴(kuò)散速度，促使補(bǔ)體C3、C4損傷組織臟器，進(jìn)而促進(jìn)感染性疾病進(jìn)展[22]。感染性肺炎患兒存在氣道炎性反應(yīng)，本研究發(fā)現(xiàn)，MMP-9水平與FEV1/FVC、FEV1%均呈負(fù)相關(guān)，這與謝曼芬等[23]報道結(jié)果相似，肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞/炎性細(xì)胞可分泌大量MMP-9，MMP-9可降解或重塑細(xì)胞外基質(zhì)，促使呼吸道或肺內(nèi)結(jié)構(gòu)復(fù)合物分解，破壞呼吸系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，加重氣道損傷，促使基底膜沉積大量膠原，促進(jìn)巨噬細(xì)胞富集，進(jìn)而促使肺功能惡化。本研究發(fā)現(xiàn)感染性肺炎患兒血清APOC1與CCL5、MMP-9呈正相關(guān)，CCL5與MMP-9呈正相關(guān)。感染激活機(jī)體免疫系統(tǒng)或炎性反應(yīng)，APOC1、CCL5水平升高可加重炎性反應(yīng)，引起支氣管壁充血、水腫，肺泡壁炎性細(xì)胞浸潤可造成肺通氣功能障礙，進(jìn)而加重肺功能損傷，同時MMP-9屬于炎性反應(yīng)下游產(chǎn)物，三者可相互作用促使蛋白酶損傷肺泡上皮細(xì)胞，促進(jìn)感染性肺炎病情進(jìn)展。本研究進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，血清APOC1、CCL5、MMP-9聯(lián)合檢測診斷感染性肺炎的AUC高于各指標(biāo)單項(xiàng)檢測的AUC，提示三者聯(lián)合檢測對感染性肺炎具有一定診斷價值。

綜上所述，感染性肺炎患兒血清APOC1、CCL5、MMP-9水平升高，且與肺功能損傷密切相關(guān)，監(jiān)測三者水平變化有助于提高肺炎診斷效率，其水平升高可增加感染性肺炎發(fā)生風(fēng)險。本研究尚未對感染性肺炎患兒預(yù)后進(jìn)行評估，關(guān)于APOC1、CCL5、MMP-9在該病發(fā)生過程中的作用機(jī)制尚未明確，下一步將擴(kuò)大樣本量評估APOC1、CCL5、MMP-9水平變化對感染性肺炎患兒預(yù)后的診斷價值，進(jìn)一步從分子水平分析三者內(nèi)在作用機(jī)制。