李 旎 陳撫州

（南昌結(jié)石病?？漆t(yī)院藥劑科，江西 南昌 330001）

醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥制劑是指醫(yī)療機(jī)構(gòu)根據(jù)本單位臨床需要經(jīng)批準(zhǔn)而配制、自用的固定處方制劑，其特點(diǎn)為組方合理，有較長(zhǎng)的臨床應(yīng)用歷史，療效和安全性均有可靠保證[1]?；陂L(zhǎng)期臨床經(jīng)驗(yàn)積累而產(chǎn)生的醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑，承擔(dān)著填補(bǔ)上市藥品臨床用藥空缺的重要角色[2]。加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥制劑質(zhì)量管理，為醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑臨床療效、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、制劑安全使用等研究提供有效的技術(shù)支撐[3]。

尿石通消糖漿為純中藥制劑，是由石韋、黃芩等藥材和輔料制成的糖漿劑，屬于醫(yī)院制劑（贛藥制字Z20090048）。具清熱利尿、排石消石的功效，用于泌尿系統(tǒng)結(jié)石，制劑質(zhì)量安全穩(wěn)定，療效確切。原標(biāo)準(zhǔn)以黃芩中黃芩苷的薄層鑒別及制劑通則中糖漿劑的要求為主，為加強(qiáng)該制劑的質(zhì)量控制，更好地保證臨床用藥療效，現(xiàn)增加石韋的薄層色譜鑒別，以及對(duì)制劑中黃芩苷含量測(cè)定。

1 材料

1.1 儀器與試藥LC-20AT 液相色譜儀（日本島津）；ODS-3 C18色譜柱（日本島津，5 μ m，4.6 mm×250 mm）；JK-300 超聲波清洗器（合肥金尼克機(jī)械制造有限公司）；BT125D 分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；ZF-2 三用紫外儀（上海市安亭電子儀器廠）；聚酰胺薄膜（浙江臺(tái)州路橋四甲生化塑料廠，10 cm×30 cm）。

1.2 試劑與藥品綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：110753-201314）、黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)：110715-201318）均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院；甲醇（安徽天地高純?nèi)軇┯邢薰荆?hào)：20115029）為色譜純；水為自制純化水；甲醇（西隴化工股份有限公司，批號(hào)：160510）、乙醇（西隴化工股份有限公司，批號(hào)：160402）、乙酸（西隴化工股份有限公司，批號(hào)：160101）、磷酸（西隴化工股份有限公司，批號(hào)：160203）等均為分析純；尿石通消糖漿（批號(hào)：151021、151022、160328、160329、160330)為南昌結(jié)石病專科醫(yī)院制劑室生產(chǎn)（規(guī)格：每瓶200 mL）。

2 方法與結(jié)果

2.1 石韋的薄層色譜鑒別取本品20 mL，加20 mL 70%甲醇超聲30 min，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。取不含石韋藥材的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照溶液。另取綠原酸對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL 含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液3～5 μ L，點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上成條狀，以30%乙酸為展開劑，展開，取出后晾干，置紫外線燈（365 nm）下檢視。色譜中可見綠原酸熒光斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰無(wú)粘連，且無(wú)干擾。見圖1。

圖1 石韋薄層色譜圖

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件島津ODS-3 C18（5 μ m 4.6×250 mm）色譜柱；流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸（47∶53）；檢測(cè)波為280 nm；流速為1.0 mL/min；柱溫40 ℃。黃芩苷峰理論板數(shù)不低于3000。

2.2.2 溶液的制備精密量取樣品2 mL，置100 mL 容量瓶中，加入50%乙醇適量，超聲5 min，再加50%乙醇定容，搖勻，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按尿石通消糖漿處方和工藝，制得不含黃芩藥材的陰性樣品，按供試品溶液方法制備陰性對(duì)照溶液。稱取黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成1 mL 含0.1 mg 的對(duì)照品溶液。

2.2.3 專屬性試驗(yàn)在2.2.1 色譜條件下，分別記錄對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液色譜圖。結(jié)果顯示專屬性良好。見圖2。

圖2 黃芩苷HPLC 色譜圖

2.2.4 線性關(guān)系試驗(yàn)取對(duì)照品儲(chǔ)備液（194.6 μ g/mL），以甲醇稀釋，制得對(duì)照品溶液：194.6 μ g/mL，97.3 μ g/mL、19.46 μ g/mL、9.73 μ g/mL、3.892 μ g/mL。按2.2.1色譜條件分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程為：Y＝3.696 44×10-7X+27 224.7，r2＝0.999 5。結(jié)果顯示，黃芩苷在3.892～194.6 μ g/mL范圍內(nèi)線性良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液，分別于0 h、2 h、4.5 h、7 h、20 h 按2.2.1 色譜條件測(cè)定，計(jì)算黃芩苷峰面積RSD 為0.54%，表明供試品溶液在20 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn)取尿石通消糖漿樣品（批號(hào)：160330），按2.2.2 中方法制備6 份供試品溶液，按2.2.1 色譜條件測(cè)定，得平均峰面積為3 530 325 mV·min，RSD為1.00%，表明該方法重復(fù)性好。

2.2.7 加樣回收率試驗(yàn)取已知含量的尿石通消糖漿樣品（批號(hào)：151022）6 份，每份均精密加入黃芩苷對(duì)照品溶液（0.934 9 mg/mL）5 mL，按2.2.2 中方法制備供試品溶液，在2.2.1 色譜條件下測(cè)定。見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.2.8 樣品的含量測(cè)定取5 批尿石通消糖漿樣品按2.2.2 項(xiàng)下方法分別制成供試品溶液，測(cè)定黃芩苷含量，結(jié)果5 批樣品的黃芩苷含量范圍為4.046 7～5.820 0 mg/mL。見表2。

表2 5 批尿石通消糖漿樣品的含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 石韋薄層鑒別摸索《中華人民共和國(guó)藥典》[4]中未收載石韋藥材的薄層鑒別方法，經(jīng)查詢相關(guān)文獻(xiàn)資料，參照復(fù)方石韋片中石韋的薄層鑒別試驗(yàn)方法，結(jié)合本制劑特點(diǎn)，制定出石韋的薄層色譜鑒別方法。方法中所用試劑毒性小且簡(jiǎn)便易行。經(jīng)過(guò)不同濃度的提取溶劑（50%甲醇、70%甲醇、100%甲醇）的試驗(yàn)對(duì)比，以及對(duì)展開劑乙酸濃度的調(diào)整，確定最終試驗(yàn)方法[5，6]。

3.2 黃芩苷的含量測(cè)定黃芩苷是從唇形科植物黃芩的干燥根中提取出來(lái)的黃酮類化合物，是黃芩的主要活性成分之一[7]。黃芩苷在趨堿性溶液中不穩(wěn)定，在酸性溶液中穩(wěn)定，在有機(jī)溶劑中穩(wěn)定性較好[8]。尿石通消糖漿制劑要求pH 為4.0～6.0，黃芩苷在制劑中比較穩(wěn)定。參照《中華人民共和國(guó)藥典》[4]中黃芩藥材的含量測(cè)定方法，比較了不同提取時(shí)間處理樣品、不同流動(dòng)相和不同柱溫條件下測(cè)定結(jié)果，確定測(cè)定方法。HPLC 法因其高速、高效、高分辨率等技術(shù)優(yōu)勢(shì)，已成為目前控制中藥制劑有效成分的重要手段[9]。樣品中黃芩苷與其他的峰分離效果好，出峰時(shí)間適宜，峰形較好，方法簡(jiǎn)單可行。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)，方法準(zhǔn)確、靈敏、可靠。