于紅博

作者單位：132011 吉林吉林，吉林市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種全身性結(jié)締組織疾病，是由于免疫系統(tǒng)對(duì)正常關(guān)節(jié)組織進(jìn)行錯(cuò)誤攻擊所導(dǎo)致的關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)，以慢性、破壞性、進(jìn)展性多關(guān)節(jié)功能障礙為主要特征，四肢小關(guān)節(jié)最常被侵犯?；颊哂诔科饡r(shí)關(guān)節(jié)有僵硬感，晨僵持續(xù)時(shí)間與病情活動(dòng)程度密切相關(guān)，同時(shí)伴隨關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、畸形等癥狀，在進(jìn)行穿衣、洗漱、行走等日?；顒?dòng)時(shí)可受到不同程度影響，甚至累及血液、神經(jīng)、心臟、肺等全身多器官系統(tǒng)，嚴(yán)重降低患者的生活質(zhì)量［1］。RA 是一種世界性疾病，在全球發(fā)病率約為1.0%，我國有約500 萬名RA 患者。近年來，受環(huán)境、人民生活方式和飲食結(jié)構(gòu)等多方面因素影響，RA 發(fā)病率逐年升高，已成為導(dǎo)致我國人群喪失勞動(dòng)力和致殘的主要原因［2-3］。RA 發(fā)病隱匿，病情反復(fù)遷延，可造成關(guān)節(jié)永久性破壞，因此早期診斷和治療對(duì)提高患者康復(fù)效果具有重要意義。RA 在早期無明顯臨床表現(xiàn)，根據(jù)體格檢查、關(guān)節(jié)X線等結(jié)果進(jìn)行診斷準(zhǔn)確率不高，很容易出現(xiàn)誤診和漏診，使患者錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)，造成病情延誤，加大臨床治療難度，影響患者預(yù)后［4］。

類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）是RA 一種常用檢測指標(biāo)，具有較高的敏感度，但特異度不高，在早期診斷和治療中應(yīng)用效果并不理想，因此，臨床需尋找敏感度高和特異性強(qiáng)的檢測指標(biāo)來對(duì)RA 進(jìn)行早期診斷，可為后續(xù)治療方案的確定提供參考依據(jù)。本研究以2021 年1—12 月在吉林市中心醫(yī)院就診的84 例RA 患者和84 例非RA 自身免疫疾病患者作為研究對(duì)象，分析RF、抗環(huán)瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）及抗角蛋白抗體聯(lián)合檢測對(duì)RA 的診斷效果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象與分組 選擇2021年1—12月本院收治的84 例RA 患者作為RA 組，另外選擇同期84 例非RA 自身免疫疾病患者作為自身免疫疾病組，其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡22 例（占26.19%），原發(fā)性干燥綜合征10 例（占11.90%），痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎30 例（占35.71%），結(jié)締組織病患者8 例（占9.52%），骨性關(guān)節(jié)炎14 例（占16.67%）。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ① RA 組均符合RA 診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；② 年齡18～80 歲；③ 入選對(duì)象認(rèn)知清晰，可配合開展檢測工作；④ 在對(duì)研究知情的基礎(chǔ)上自愿參與，簽署書面同意書。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ① 伴有重度肝、腎、心腦血管原發(fā)性疾病者；② 存在精神類疾病、認(rèn)知功能障礙或意識(shí)不清者；③ 妊娠期、哺乳期女性；④ 臨床資料部分缺失者。

1.1.3 倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)本院倫理審批（審批號(hào)：2021030），所有檢測均獲得過患者或家屬知情同意。

1.2 檢測指標(biāo)及方法 采集所有患者清晨空腹肘靜脈血3～4 mL，以4 000 r/mim（離心半徑13.5 cm）離心15 min，分離血清于-20 ℃保存。

1.2.1 RF檢測 使用日立7600-110全自動(dòng)生化分析儀（上海執(zhí)誠生物技術(shù)有限公司）和配套試劑，采用免疫散射比濁法檢測RF，檢測值＞20 kU/L 為陽性。

1.2.2 抗CCP檢測 采用德國歐蒙公司抗體免疫球蛋白G（immunoglobin G，IgG）檢測試劑盒，嚴(yán)格遵照試劑說明書以及實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程執(zhí)行，將樣本血清用1∶101 緩沖液稀釋，加入微孔，室溫孵育60 min，用稀釋后的清洗緩沖液洗滌3 次，去除殘留清洗液后添加酶結(jié)合物100 μL，室溫孵育30 min，重復(fù)清洗。避光于每個(gè)微孔中加入底物液，30 min 后滴加100 μL 反應(yīng)終止液，檢測結(jié)果為≥25 kU/L 為陽性，反之則為陰性。

1.2.3 抗角蛋白抗體檢測 采用德國歐蒙公司生產(chǎn)的免疫熒光試劑盒（間接免疫熒光法），將待測血清用洗滌液以1∶10 稀釋，將抗角蛋白抗體抗原片加入其中浸泡5 min（注意避免產(chǎn)生氣泡），于室溫孵育30 min，確?？乖|(zhì)與標(biāo)本充分接觸，加入熒光標(biāo)記的二抗，在蓋玻片上滴加封片劑，將多余液體擦除，完成封片后于熒光顯微鏡下觀察結(jié)果，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行檢測，熒光顯微鏡下角質(zhì)層顯示有清楚片狀（層狀）熒光模式則為陽性。

1.3 觀察指標(biāo) ① 統(tǒng)計(jì)RF、抗CCP 及抗角蛋白抗體單獨(dú)檢測RA 的陽性率。② 計(jì)算單一抗體檢測對(duì)RA的診斷效能：陽性檢出率＝（真陽性+假陽性）/（真陽性+假陽性+假陰性+真陰性）×100.00%，敏感度＝真陽性/（真陽性+假陰性）×100.00%，特異度＝真陰性/（假陽性+真陰性）×100.00%，陽性預(yù)測值＝真陽性/（真陽性+假陽性）×100.00%，陰性預(yù)測值＝真陰性/（假陰性+真陰性）×100.00%，診斷符合率＝（真陽性+真陰性）/（真陽性+假陽性+假陰性+真陰性）×100.00%。③ 比較RF+抗角蛋白抗體、RF+抗CCP、抗角蛋白抗體+抗CCP、RF+抗CCP+抗蛋白抗體的陽性檢出率。④ 檢測超敏C-反應(yīng)蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）和紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR），比較RF、抗CCP 及抗角蛋白抗體陽性和陰性患者兩項(xiàng)指標(biāo)水平的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析和處理數(shù)據(jù)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述符合正態(tài)分布的計(jì)量資料，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 兩組性別、年齡等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），有可比性。見表1。

表1 RA 組和自身免疫疾病組的一般資料比較

2.2 RF、抗CCP 及抗角蛋白抗體對(duì)RA 的檢出結(jié)果比較 RF 檢出RA 93 例，抗CCP 檢出RA 69 例，抗角蛋白抗體檢出RA 68 例，3 種檢測方法對(duì)RA 的檢測結(jié)果見表2。

表2 RF、抗CCP 及抗角蛋白抗體對(duì)RA 的檢出結(jié)果

2.3 單一指標(biāo)檢測對(duì)RA 的診斷效能 單一抗體檢測中，RF 的敏感度為89.29%，高于抗CCP（75.00%）和抗角蛋白抗體（70.24%）；RF 的特異度（78.57%）低于抗CCP（92.86%）和抗角蛋白抗體（89.29%）；相較于RF（80.65%）和抗角蛋白抗體（86.76%），陽性預(yù)測值最高為抗CCP（91.30%）。見表3。

表3 單一抗體檢測對(duì)RA 的診斷效能

2.4 各指標(biāo)組合聯(lián)合檢測對(duì)RA 的陽性率比較RA 組聯(lián)合檢測中以RF+抗CCP+抗角蛋白抗體的陽性率最高（89.29%），明顯高于其他指標(biāo)組和聯(lián)合檢測，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表4。2.5 RA 組各指標(biāo)檢測RA 陽性和陰性患者h(yuǎn)s-CRP與ESR 水平比較 RF、抗角蛋白抗體陽性和陰性RA 患者的hs-CRP 與ESR 水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；抗CCP 陽性RA 患者的hs-CRP和ESR水平明顯均高于抗CCP陰性RA患者（均P＜0.05）。見表5。

表4 各指標(biāo)聯(lián)合檢測的陽性率比較

表5 RA 組各指標(biāo)陽性和陰性患者h(yuǎn)s-CRP與ESR 水平比較（±s）

表5 RA 組各指標(biāo)陽性和陰性患者h(yuǎn)s-CRP與ESR 水平比較（±s）

注：RA 為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，hs-CRP 為超敏C-反應(yīng)蛋白，ESR 為紅細(xì)胞沉降率，RF 為類風(fēng)濕因子，CCP 為環(huán)瓜氨酸肽；與同指標(biāo)陽性比較，aP＜0.05

組別 例數(shù)（例） hs-CRP（mg/L） ESR（mm/h）RF 陽性 75 24.57±4.51 42.12±4.06陰性 9 22.87±4.32 39.98±4.54抗CCP 陽性 63 25.67±5.19 45.87±5.63陰性 21 16.24±4.16 a 31.08±5.17 a抗角蛋白 陽性 59 23.67±5.17 42.19±7.88抗體 陰性 25 22.64±5.08 40.74±5.33

3 討論

RA 患者通常于40～60 歲發(fā)病，目前其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床研究顯示，遺傳和自身免疫反應(yīng)為RA 發(fā)生的關(guān)鍵因素，存在微生物感染、吸煙、職業(yè)暴露等人群患病風(fēng)險(xiǎn)會(huì)大幅提高［6-7］。RA可影響患者雙手近端指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)、趾關(guān)節(jié)、膝關(guān)節(jié)等，目前尚無徹底根治手段，但有研究數(shù)據(jù)顯示，RA 發(fā)病早期存在短暫的治療窗口期，在這一時(shí)間段中關(guān)節(jié)滑膜炎癥的改變是可逆的，通過早期規(guī)范化治療，可緩解患者的臨床癥狀，提高關(guān)節(jié)功能，避免出現(xiàn)關(guān)節(jié)畸形和功能喪失，提升患者預(yù)后和康復(fù)效果［8-10］。

目前對(duì)RA 的診斷方法主要為臨床表現(xiàn)、關(guān)節(jié)X 線檢查和RF 水平檢測，患者早期臨床癥狀不明顯，對(duì)病程小于半年的患者，關(guān)節(jié)X 線可能并無明顯異常，因此難以診斷。RF 是一種變性的免疫球蛋白，是人類最早發(fā)現(xiàn)的RA 相關(guān)抗體，正常參考值范圍為小于20 kU/L，主要存在于RA 患者的血清和關(guān)節(jié)液中，也可出現(xiàn)在干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等其他各種自身免疫系統(tǒng)紊亂性疾病患者中，臨床可作為協(xié)助診斷RA 的指標(biāo)，與其他類型關(guān)節(jié)炎以及可能引起關(guān)節(jié)疼痛和四肢僵硬等癥狀的疾病進(jìn)行區(qū)分，有70%～80%的RA患者RF檢測結(jié)果為陽性，高滴度RF 陽性提示預(yù)后不良，可能引起關(guān)節(jié)侵蝕性病變，RF 敏感度較高，但特異度不高，不利于RA的早期診斷和治療［11-12］。本研究結(jié)果顯示，RF 的敏感度高于抗CCP 和抗角蛋白抗體；RF 的特異度低于抗CCP 和抗角蛋白抗體，相較于RF 和抗角蛋白抗體，抗CCP 的陽性預(yù)測值最高。

抗CCP 抗體由Schellekens 在2000 年首次人工合成并報(bào)道，其對(duì)RA 具有良好的敏感度和特異度，在患病早期即可被檢測到，抗CCP 抗體陽性是侵蝕性關(guān)節(jié)損傷的一個(gè)重要標(biāo)志，其主要由RA 患者機(jī)體B 細(xì)胞分泌，具有較強(qiáng)的特異性，當(dāng)顯示為高滴度陽性時(shí)則很有可能為RA，可用于疾病進(jìn)展監(jiān)測和預(yù)后判斷，但該指標(biāo)敏感度較低，漏診風(fēng)險(xiǎn)較高［13-14］。

抗角蛋白抗體是一種常用的自身免疫性抗體，對(duì)RA 的診斷和鑒別具有較高的特異性，與疾病嚴(yán)重程度和活動(dòng)性有緊密關(guān)系，可以先于臨床表現(xiàn)被檢測出來，對(duì)臨床治療有指導(dǎo)意義，但檢測結(jié)果需在熒光顯微鏡下觀察，結(jié)果容易受主觀因素影響，抗CCP 和抗角蛋白抗體可作為RF 早期診斷RA 的補(bǔ)充檢測指標(biāo)［15-17］。本研究顯示，RA 組各指標(biāo)聯(lián)合檢測中，RF+抗CCP+抗角蛋白抗體的陽性率明顯高于其他指標(biāo)組合聯(lián)合檢測，表明RF、抗CCP 及抗角蛋白抗體聯(lián)合檢測在RA 診斷中應(yīng)用優(yōu)勢，相較于單一檢測可促進(jìn)疾病早期診斷。在本研究中對(duì)RA 組各指標(biāo)陽性和陰性患者的hs-CRP 與ESR 水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示RF、抗角蛋白抗體陽性和陰性患者h(yuǎn)s-CRP 和ESR 水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；抗CCP 陽性患者的hs-CRP、ESR 水平明顯高于陰性患者，表明抗CCP 在評(píng)估RA 活動(dòng)性方面發(fā)揮一定作用。

綜上所述，RF、抗CCP及抗角蛋白抗體聯(lián)合檢測可提高RA 早期診斷率，為臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。

利益沖突作者聲明不存在利益沖突