潘培富，許崇友，韓 勇

1.山東省日照市東港區(qū)陳疃鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，山東 東港 276800；2.山東省日照東港區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，山東 東港 276800；3.山東省日照市動物疫病預(yù)防控制中心，山東 日照 276800

布魯氏菌?。╞rucellosis），又稱馬爾他熱或波狀熱，是由布魯氏菌（Brucella）引起的一種人畜共患的自然疫源性傳染病，布魯氏菌常引起動物流產(chǎn)、不孕，故又被稱之為傳染性流產(chǎn)病[1]。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部將其列為二類動物疫病，可感染人類及多種家畜和野生動物，引起相似的臨床癥狀與病理損傷，如發(fā)熱、流產(chǎn)與不育、慢性關(guān)節(jié)炎及神經(jīng)損害等，嚴(yán)重危害人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)[2]。

為防控和做好布病凈化工作，2021 年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)《關(guān)于開展牛羊布病等動物疫病無疫區(qū)和無疫小區(qū)建設(shè)及評估通知》（農(nóng)辦牧[2021]32 號），要求實施動物疫病區(qū)域化管理，建設(shè)一批無疫區(qū)和無疫小區(qū)，提升布病防控能力。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求各地認(rèn)真總結(jié)防控工作經(jīng)驗，優(yōu)化防控策略和措施，創(chuàng)新工作機制，將無疫區(qū)建設(shè)作為重要舉措來抓，指導(dǎo)有較高生物安全水平的養(yǎng)殖企業(yè)創(chuàng)建無疫小區(qū)，鼓勵有較好天然屏障條件的地區(qū)建設(shè)無疫區(qū)，不斷提高動物疫病區(qū)域化防控能力。

為進一步加快牛羊布魯氏菌病凈化步伐，促進畜牧業(yè)健康發(fā)展、畜產(chǎn)品質(zhì)量安全和公共衛(wèi)生安全，維護人民身體健康，根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《畜間布魯氏菌病防控五年行動方案(2022-2026 年)》《山東省省級牛羊布魯氏菌病凈化場（縣）創(chuàng)建工作方案》和《日照市動物疫病凈化推進實施方案》要求，山東省日照市東港區(qū)開展區(qū)域布病凈化工作，全面落實基線調(diào)查、檢測、檢疫、撲殺、移動控制等布病綜合防控措施，逐步實現(xiàn)全區(qū)畜間布病達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。

1 六大基礎(chǔ)體系的建設(shè)

2016 年，東港區(qū)通過了膠東半島免疫無高致病性禽流感和口蹄疫區(qū)，之后一直處于較好的無疫維持狀態(tài)。2019 年起創(chuàng)建山東省免疫無高致病性禽流感和口蹄疫區(qū)，力爭2022 年通過國家驗收。2014—2021 年間，先后投入無疫區(qū)項目建設(shè)和動物防疫體系建設(shè)資金400 多萬元，建立和完善了區(qū)、鄉(xiāng)二級獸醫(yī)實驗室、動物隔離場和鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站等基礎(chǔ)設(shè)施。通過不斷投入資金，完善基礎(chǔ)設(shè)施，為布病凈化建設(shè)奠定了堅實的物質(zhì)基礎(chǔ)。區(qū)級獸醫(yī)實驗室已通過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸醫(yī)實驗室考核，并全部具備了病原學(xué)檢測能力，動物隔離場建設(shè)于2020 年已全面完成。通過以上無疫區(qū)和無疫省的建設(shè)，東港區(qū)具有創(chuàng)建布病凈化縣的基礎(chǔ)。

1.1 畜牧獸醫(yī)工作體系

2009 年，全區(qū)獸醫(yī)體制改革到位，區(qū)級成立了防控重大動物疫病指揮部。全區(qū)共有9 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，核定人員編制62 人，經(jīng)費全額納入財政預(yù)算管理。2018 年起深入推進村級動物防疫員改革后，村級動物防疫和畜產(chǎn)品質(zhì)量安全協(xié)管員由原來的480 名縮減為48 名，年齡結(jié)構(gòu)和知識結(jié)構(gòu)均得到很大提升。

1.2 動物防疫體系

進一步完善了縣、鄉(xiāng)二級動物疫病診斷和縣、鄉(xiāng)、村三級冷鏈體系建設(shè)，區(qū)級建立了二級生物安全實驗室，實驗室面積達(dá)300 m2，實驗室人員和儀器設(shè)備齊全，具備開展病原學(xué)和血清學(xué)檢測能力。

1.3 動物衛(wèi)生監(jiān)督體系

區(qū)、鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)配備了與動物衛(wèi)生監(jiān)督工作相適應(yīng)的設(shè)施、設(shè)備和執(zhí)法車輛，通過動物衛(wèi)生監(jiān)督網(wǎng)和移動動態(tài)監(jiān)測，實現(xiàn)了縣、鄉(xiāng)鎮(zhèn)資源共享。嚴(yán)格落實了“六條禁令”，扎實開展了動物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法“提素質(zhì)、強能力”行動，通過自查整改、考核、培訓(xùn)等措施，提高了執(zhí)法人員業(yè)務(wù)操作技能、綜合監(jiān)管能力、辦案能力和應(yīng)急處置能力。

1.4 動物疫情監(jiān)測體系

縣動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)在完成省、市疫病監(jiān)測的基礎(chǔ)上，不斷擴大監(jiān)測面和監(jiān)測頻次，科學(xué)指導(dǎo)防控工作。全區(qū)建立了區(qū)、鄉(xiāng)、村三級動物疫情報告網(wǎng)絡(luò)，做到專人、專房、專機、專線，10 名專職疫情報告員和48 名村級動物疫情觀察員密切關(guān)注動物疫情動態(tài)，提高了疫情風(fēng)險評估和疫情預(yù)警預(yù)報能力。

1.5 動物防疫屏障體系

充分利用東港沿海的自然條件優(yōu)勢，建立健全了動物防疫屏障體系。山海天兩城主要交通路口建立了動物衛(wèi)生監(jiān)督檢查站，被指定為膠東半島無疫區(qū)動物及動物產(chǎn)品指定通道；建立和完善了動物隔離場，建立健全了有關(guān)規(guī)章制度等。

1.6 法律法規(guī)體系

2006 年，區(qū)政府出臺了《東港區(qū)突發(fā)重大動物疫情應(yīng)急預(yù)案》，2013 年11 月，區(qū)政府辦公室印發(fā)了《東港區(qū)中長期動物疫病防控規(guī)劃》。同年，區(qū)政府對《東港區(qū)突發(fā)重大動物疫情應(yīng)急預(yù)案》進行了修訂，并出臺了《東港區(qū)動物疫情報告管理辦法》等規(guī)章制度，法規(guī)體系建設(shè)日臻完備。

2 監(jiān)測凈化工作的開展

2.1 凈化技術(shù)路線

全區(qū)2017 年起免疫布病疫苗，經(jīng)過連續(xù)多年免疫，布病防控效果顯著。針對當(dāng)前的現(xiàn)狀，2020 年選擇退出免疫，采取“檢測-撲殺”，并采取移動控制、檢疫監(jiān)管等綜合措施，開展布病凈化。

2.2 基線調(diào)查技術(shù)的研究

各鎮(zhèn)、街道采取實地調(diào)查、問卷調(diào)查等方式了解布病疫情動態(tài)、防控現(xiàn)狀。問卷調(diào)查采用流行病學(xué)調(diào)查方法，每個鄉(xiāng)調(diào)查5 個村，每村至少調(diào)查5戶，研究分析布病流行趨勢和流行規(guī)律；分析移動控制措施對布病傳播的影響。

在前期基礎(chǔ)上完善基線調(diào)查，將轄區(qū)內(nèi)牛羊養(yǎng)殖場戶的數(shù)量、養(yǎng)殖方式、養(yǎng)殖數(shù)量等信息進行了登記造冊。以規(guī)模場、屠宰場、交易市場、隔離場、無害化處理場、村為流行單元進行登記，每村登記散養(yǎng)牛羊，建立抽樣框。同時，按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《畜間布魯氏菌病防控五年行動方案（2022-2026 年）》要求，定期開展牛羊養(yǎng)殖情況摸底調(diào)查及時更新抽樣框。

2.3 流行病學(xué)采樣技術(shù)的研究

創(chuàng)建前，養(yǎng)殖場委托有資質(zhì)的實驗室對本場內(nèi)所有牛羊進行一次全覆蓋采樣監(jiān)測，撲殺所有血清學(xué)陽性牛羊，以后每年對商品牛、羊或者每半年對奶牛、奶山羊、種公畜自行或委托有資質(zhì)的實驗室開展1 次血清學(xué)檢測。

散養(yǎng)戶以村為單位，對所有的牛和羊養(yǎng)殖戶進行登記，分別建立牛羊抽樣框。散養(yǎng)戶采用流行病學(xué)抽樣方式，由于采用實驗室檢測要考慮檢測方法的敏感性，即檢測到陽性動物，按照中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心設(shè)計Epi Sampling Calculator 軟件，以估計流行率的抽樣方法進行抽樣監(jiān)測[3]，抽樣樣本量計算公式[4]為：

其中n為抽樣個數(shù)，CL為置信水平，D為群中的陽性動物數(shù)（等于群內(nèi)個體數(shù)與預(yù)定流行率的乘積），N為群內(nèi)個體數(shù)，Se為檢測方法的敏感性。

全部村均進行檢測，場群內(nèi)牛按照個體陽性率0.2%，羊個體陽性率0.1%抽樣。確定樣品采集數(shù)量后，平均分到每個圈舍中，然后將每個圈舍的牛（羊）隨機分組，每組中選取牛（羊）進行抽樣檢測。

2.4 退出免疫

東港區(qū)先進行基線調(diào)查，淘汰陽性牛羊，然后對牛羊進行免疫，免疫牛羊和非免疫牛羊隔離飼養(yǎng)。采用先期每年免疫1 次，連續(xù)免疫3 年后停止免疫，一段時間后進行監(jiān)測，淘汰陽性動物，并評估免疫效果。根據(jù)疫苗種類，S2 在停止免疫6 個月后，A19、M5 在停止免疫18 個月后，采用抽群的方法進行抽檢，計算陽性率，根據(jù)陽性率情況確定是否采取“檢測-撲殺”凈化。2021 年起東港區(qū)已實行布病免疫退出制度。

2.5 監(jiān)測凈化

規(guī)模場每年至少自行或委托有資質(zhì)的實驗室開展1 次血清學(xué)檢測，符合條件的牛羊全部采樣檢測，每年至少檢測1 次，且檢測記錄保存完整，目前東港區(qū)規(guī)模羊場已開展2 次以上檢測。散養(yǎng)戶以村為單元開展檢測，由區(qū)畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心組織實施。每年開展2 次檢測，目前檢測工作正在開展。

2.6 監(jiān)督抽檢

縣級獸醫(yī)主管部門制定了專門的牛羊布病監(jiān)測凈化工作方案，對轄區(qū)內(nèi)所有牛羊（兼顧散養(yǎng)牛羊）進行監(jiān)督抽檢。要求對轄區(qū)內(nèi)所有符合條件的奶牛、奶山羊和種畜（羊5 個月齡以上、牛8 個月齡以上，懷孕動物產(chǎn)后半個月以上）每年進行2 次血清學(xué)全覆蓋監(jiān)測，商品畜按照場點預(yù)期流行率1%，牛0.2%、羊0.1%個體預(yù)期流行率每年進行1次隨機采樣監(jiān)測。

2.7 凈化撲殺

按有關(guān)規(guī)定撲殺所有血清學(xué)檢測陽性牛羊，并按規(guī)定處置。

2.8 檢測方法

采用國家標(biāo)準(zhǔn)，RBT 或iELISA 進行初篩，陽性樣品使用試管凝集試驗或cELISA 確診。

3 對策建議

3.1 獸醫(yī)基礎(chǔ)體系建設(shè)是凈化工作的有力保障

堅實的獸醫(yī)基礎(chǔ)體系是凈化工作開展的基礎(chǔ)，要繼續(xù)完善加強畜牧獸醫(yī)體制、動物防疫、動物衛(wèi)生監(jiān)督、動物疫情監(jiān)測、動物防疫屏障、法律法規(guī)六大基礎(chǔ)體系建設(shè)，為凈化提供堅實的保障。

3.2 研究適合的科學(xué)有效的凈化技術(shù)尤為重要

在凈化實施過程中，東港區(qū)對采樣、消毒、檢測等關(guān)鍵技術(shù)進行研究，并在凈化過程中應(yīng)用，成效顯著。對于采樣牛羊分別建立抽樣框，采用科學(xué)的流行病學(xué)抽樣方法。消毒劑選擇對布病敏感并且對人畜無害的臭氧等。檢測方法先用RBT 或iELISA進行初篩，陽性樣品使用試管凝集試驗或cELISA確診。

3.3 持續(xù)開展“檢測- 撲殺”是凈化工作的關(guān)鍵

要制定科學(xué)的實施方案，對規(guī)模場和散養(yǎng)戶開展持續(xù)多次的檢測，直到轄區(qū)內(nèi)檢測結(jié)果均為陰性。散養(yǎng)戶由于數(shù)量多，分散度高，是工作的難點，區(qū)縣畜牧獸醫(yī)管理部門要組織實施檢測，每年開展2 次。檢測陽性的群體，要間隔15～20 d 進行強化抽樣檢測，連續(xù)檢測2～3 次，直至檢測結(jié)果為陰性。

3.4 加強檢疫監(jiān)管，做好無疫維持

全區(qū)經(jīng)過連續(xù)多次檢測為陰性后，要做好無疫狀態(tài)的維持。要從傳染源、傳播途徑、傳染對象3 個方面入手，從控制傳染源、切斷傳播途徑、保護易感動物方面考慮，采取嚴(yán)格的生物安全措施，做好無疫維持。同時，要加強檢疫監(jiān)管，實驗室檢測布病為陽性的牲畜禁止調(diào)運，禁止免疫區(qū)牛羊向本區(qū)調(diào)運。自東港區(qū)以外調(diào)入未經(jīng)布病檢測的牛羊，一經(jīng)布病檢測為陽性，無論是否接種布病疫苗，均按陽性畜撲殺處置。