王莉 劉小靜 張建勇

貴州省遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科（貴州遵義 563000）

支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱(chēng)哮喘），是一種慢性氣道疾病，主要特征有氣道慢性炎癥、氣道高反應(yīng)性及氣道黏液高分泌［1］。其中，氣道黏液高分泌是在多種致病因素的刺激下，導(dǎo)致氣道杯狀細(xì)胞肥大和增生所致的分泌高反應(yīng)現(xiàn)象，其產(chǎn)生的大量黏液可引起氣流受限、氣道阻塞，甚至窒息導(dǎo)致哮喘患者死亡［2］，其中，黏蛋白MUC5ac 被認(rèn)為是氣道黏液最主要的成分之一，氣道上皮杯狀細(xì)胞增生及高分泌可引起其過(guò)度表達(dá)［3-4］，因此氣道MUC5ac表達(dá)被作為氣道黏液高分泌的強(qiáng)度的一個(gè)重要指標(biāo)。同時(shí)，多種細(xì)胞因子在哮喘中發(fā)生發(fā)展發(fā)揮作用，如IL-4、IL-5 促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞增多、黏液分泌增加。CXC 趨化因子受體4（CXC chemotactic rese-ptor4，CXCR4）是一種G 蛋白偶聯(lián)受體，其配體是CXCL12，又稱(chēng)基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1（stromal cell-derived factor-1，SDF-1），兩者共同作用可趨化炎癥細(xì)胞、調(diào)節(jié)其他細(xì)胞因子的表達(dá)及促進(jìn)血管新生、重建等。AMD3100 是一種CXCR4 拮抗劑，與CXCR4 有效的結(jié)合可阻斷SDF-1 與CXCR4 之間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)揮作用［5］。WANG 等［6］發(fā)現(xiàn)CXCR4可能在哮喘氣道炎癥和氣道重塑中起作用，表現(xiàn)為CXCR4 在哮喘8 周模型組支氣管壁面積、支氣管平滑肌面積和氣道壁平滑肌細(xì)胞數(shù)量較哮喘4 周模型組表達(dá)增加，但是否參與氣道黏液高分泌，目前尚未明確。本研究通過(guò)卵清白蛋白致敏和激發(fā)構(gòu)建小鼠哮喘模型，觀察AMD3100 干預(yù)CXCR4 蛋白表達(dá)對(duì)哮喘小鼠氣道黏蛋白MUC5ac的影響，探討其抑制哮喘氣道黏液高分泌的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF 級(jí)6～8 周齡，BALB/C 小鼠24 只，體質(zhì)量（18.06 ± 1.24）g ，雌性，由湖南斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司［SCXK（湘）2019-0004］。倫理審查編號(hào)：KLLY（A）-2019-101。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 AMD3100（美國(guó)Sigma 公司）、卵清蛋白（OVA）（Ⅱ和Ⅴ級(jí)）、氫氧化鋁凝膠（英國(guó)invivogen 公司），小鼠IL-4、IL-5 試劑盒（北京四正柏生物技術(shù)有限公司），小鼠CXCR4 試劑盒（上海江萊生物技術(shù)有限公司），AB-PAS 染色（北京索來(lái)寶生物技術(shù)有限公司），兔抗小鼠-MUC5ac 單克隆抗體（北京博奧森生物技術(shù)有限公司），兔抗小鼠-CXCR4 多克隆抗體（Proteintech 中國(guó)公司），免疫組化檢測(cè)（二步法）、二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色試劑盒（北京中杉生物技術(shù)有限公司），RNAiso Reagent、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR?GREEN PCR Master Mix（大連TaKaRa 公司），CXCR4、β-actin 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 引物（上海捷瑞生物工程有限公司）。實(shí)驗(yàn)儀器：標(biāo)準(zhǔn)霧化箱（27 cm × 24 cm × 11 cm，自制），壓縮式霧化器NE-C900（大連歐姆龍有限公司），-80 ℃冰箱及Multiskan spectrum 酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo 公司），離心機(jī)、核酸蛋白測(cè)量?jī)x、熒光定量PCR 儀分別來(lái)自德國(guó)Eppe-ndorf公司、美國(guó)Nanodrop公司及BIO-RAD公司，電子天平（BS210S）。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物模型制備 隨機(jī)將小鼠分為正常組、哮喘組、CXCR4 阻滯劑AMD3100 組，每組8 只。參照KIM 等［7］和CASARO 等［8］方法，結(jié)合本課題多年哮喘小鼠模型制作方法并綜合改進(jìn)，將單獨(dú)腹腔注射或腹腔注射聯(lián)合單個(gè)部位皮下注射OVA致敏，改進(jìn)為腹腔注射聯(lián)合多個(gè)部位皮下注射OVA 致敏。哮喘組、CXCR4 阻滯劑AMD3100 組分別在第1、13 天腹腔注射等劑量40 μg OVA+1 mg氫氧化鋁，共0.2 mL，同時(shí)頸部皮下注射20 μg 0.1 mL OVA+1 mg 0.1 mL 氫氧化鋁及雙側(cè)大腿根部皮下分別注射10 μg 0.1 mL OVA+1 mg 0.1 mL氫氧化鋁注射致敏。第19 ～23 天，通過(guò)自制霧化箱對(duì)小鼠進(jìn)行霧化治療，10% OVA（Ⅱ級(jí)）通過(guò)生理鹽水稀釋形成氣溶膠霧化激發(fā)，每天30 分鐘，共1 次；共計(jì)16 只小鼠成功構(gòu)建哮喘模型，無(wú)小鼠死亡。正常組于第1 天和第13 天腹腔注射PBS 0.2 mL 聯(lián)合頸部、雙側(cè)大腿根部皮下注射0.9%氯化鈉注射液0.1 mL 致敏，第19 ～23 天，小鼠置于密閉霧化箱中霧化，生理鹽水氣溶膠霧化激發(fā)，每天1 次，每次30 min，至第24 天，無(wú)小鼠死亡。

1.2.2 給藥方法 CXCR4 阻滯劑AMD3100 組第19 ～23 天，于每次激發(fā)前30 min 腹腔注射10 mg/kg AMD3100［9］（配制方法：予磷酸鹽緩沖液5 mL 加入5 mg AMD3100 固體粉末中使其溶解，此刻濃度為1 mg/mL，每只小鼠腹腔注射0.2 mL）；正常組和哮喘組采用等劑量PBS 代替OVA 腹腔注射。

1.2.3 標(biāo)本采集 末次激發(fā)24 h 后麻醉處死各組小鼠，打開(kāi)胸腔剪取分別取右肺上中葉、右肺下葉，置于EP 管中-80 ℃冰箱保存及4% 多聚甲醛中常溫固定，分別予備mRNA 提取及制備石蠟標(biāo)本、切片，右肺下葉用于HE、AB-PAS 染色及免疫組化測(cè)定放。右肺下葉置于4% 多聚甲醛中室溫固定，沿頸部正中切開(kāi)，充分暴露頸部氣管并行“V”型切口，留置針于切口處插入氣管，生理鹽水0.3 mL 緩慢注入肺內(nèi)，回抽灌洗液置于EP 管，共3次，回收80%以上，4 ℃離心，上清液保存于-80 ℃冰箱，沉淀涂片行細(xì)胞分類(lèi)及計(jì)數(shù)。

1.2.4 肺組織病理學(xué)檢查及圖像分析 根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)肺組織切片行HE、AB-PAS 染色。在普通光學(xué)顯微鏡下觀察。參照HENDERSON 等［10］方法對(duì)HE 染色進(jìn)行支氣管周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn)評(píng)分，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)有5 個(gè)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，分別為無(wú)、少許、較多分布不均勻、大量均勻不成團(tuán)、大量均勻并成團(tuán)，分?jǐn)?shù)為0 ～4 分；兩位病理科醫(yī)生進(jìn)行盲法評(píng)價(jià)。AB-PAS 染色：有酸性、中性及混合黏液物質(zhì)及細(xì)胞表達(dá)，分別呈現(xiàn)為藍(lán)色、紅色及紫紅色，根據(jù)圖像分析軟件測(cè)量氣道黏液物質(zhì)表達(dá)情況。

1.2.5 各組小鼠BALF 中CXCR4、IL-4、IL-5 含量 使用ELISA 法根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作并計(jì)算BALF 中各檢測(cè)指標(biāo)的濃度。

1.2.6 免疫組化（immunohistochemical，IHC）檢測(cè)肺組織MUC5ac 及CXCR4 蛋白含量 常規(guī)脫蠟至水、微波抗原修復(fù)，3%過(guò)氧化氫去酶，其余操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。陽(yáng)性對(duì)照：MUC5ac 黏蛋白單克隆抗體及兔抗小鼠CXCR4 多克隆抗體的稀釋濃度均為1∶100；空白對(duì)照用：PBS 代替一抗。MUC5ac 蛋白陽(yáng)性染色為細(xì)胞漿、細(xì)胞膜，CXCR4蛋白陽(yáng)性染色位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)之中，光學(xué)顯微鏡下觀察陽(yáng)性細(xì)胞為棕黃色。

1.2.7 RT-PCR 檢測(cè)小鼠肺組織CXCR4 mRNA水平根據(jù)說(shuō)明書(shū)提取小鼠肺組織中的RNA，將mRNA 逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，以此為模板行RT-PCR 擴(kuò)增。設(shè)置CXCR4 mRNA 引物序列：上游引物：5′-ACTGGCATAGTCGGCAA-3，下游引物：5′-TGACAAAGAGGAGGTCAGC-3；βactin 上游引物：5′-GGGAAATCGTGCGTGAC-3，下游引物：5′-AGGCTGGAAAAGAGCCT-3′。由計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算并讀出每個(gè)樣本定量結(jié)果Ct值（threshold cycle）。采用2-△△Ct法計(jì)算CXCR4 mRNA（△Ct=Ctβ-actin-Ct CXCR4）的相對(duì)表達(dá)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠支氣管周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn)病理評(píng)分比較 正常組、哮喘組和AMD3100 組小鼠炎癥浸潤(rùn)評(píng)分分別為（0.50 ± 0.54）、（3.66 ± 0.52）、（2.67± 0.82）分，AMD3100 組小鼠支氣管周?chē)装Y病理評(píng)分較哮喘組降低，但仍高于正常組（P＜0.05，表1）。

表1 各組小鼠支氣管周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn)病理評(píng)分比較Tab.1 Comparison of pathological scores of peribronchial inflammatory cell infiltration in each group ±s

表1 各組小鼠支氣管周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn)病理評(píng)分比較Tab.1 Comparison of pathological scores of peribronchial inflammatory cell infiltration in each group ±s

注：*表示與正常組比較，P ＜0.01；#表示與哮喘組比較，P ＜0.05

組別正常組哮喘組AMD3100 組氣道數(shù)20 20 20支氣管周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn)（分）0.50±0.54 3.66±0.52*2.67±0.82*#

2.2 HE 染色 見(jiàn)圖1。

圖1 肺組織病理學(xué)變化Fig.1 Pathological changes of lung tissue

2.3 各組小鼠氣道上皮AB-PAS 染色結(jié)果 正常組小鼠氣道組織中極少觀察到杯狀細(xì)胞，黏液分泌少；哮喘組小鼠染色后氣道組織中出現(xiàn)大量杯狀細(xì)胞，管腔狹窄，黏液分泌增多，黏液物質(zhì)相對(duì)著色面積較正常組升高（P＜0.01）；AMD3100 組氣道上皮杯狀細(xì)胞和黏液物質(zhì)相對(duì)著色面積較哮喘組降低（P＜0.01）。見(jiàn)表2、圖2。

圖2 各組小鼠肺組織AB-PAS 染色Fig.2 AB-PAS staining of lung tissue in each group of mice

表2 各組小鼠氣道上皮AB-PAS 的變化Tab.2 AB-PAS staining of lung in airway epithelium of mice in each group ±s

表2 各組小鼠氣道上皮AB-PAS 的變化Tab.2 AB-PAS staining of lung in airway epithelium of mice in each group ±s

注：*表示與正常組比較，P ＜0.01；#表示與哮喘組比較，P ＜0.01

組別正常組哮喘組AMD3100 組氣道組織黏液物質(zhì)陽(yáng)性相對(duì)著色面積（%）2.31±0.62 32.14±2.13*22.81±2.05*#

2.4 各組小鼠BALF 中炎癥因子水平比較 AMD 3100 組小鼠BALF 中IL-4、IL-5、CXCR4 水平較哮喘組降低，但仍然高于正常組（P＜0.01），見(jiàn)表3。

表3 各組小鼠BALF 的CXCR4、IL-4、IL-5 的含量變化Tab.3 The contents of CXCR4，IL-4 and IL-5 in BALF of each group were changed ±s

表3 各組小鼠BALF 的CXCR4、IL-4、IL-5 的含量變化Tab.3 The contents of CXCR4，IL-4 and IL-5 in BALF of each group were changed ±s

注：*表示與正常組比較，P ＜0.01；#表示與哮喘組比較，P ＜0.01

組別正常組哮喘組AMD3100 組CXCR4（ng/mL）0.77±0.08 1.82±0.08*1.24±0.02#IL-4（pg/mL）14.80±2.34 55.47±3.35*32.69±1.72#IL-5（pg/mL）123.71±13.64 319.00±6.12*220.86±8.16#

2.5 各組小鼠肺組織MUC5ac 蛋白、CXCR4 蛋白和CXCR4mRNA含量比較 IHC染色顯示MUC5ac蛋白陽(yáng)性表達(dá)主要在氣道上皮杯狀細(xì)胞及管腔內(nèi)；AMD3100 組小鼠肺組織MUC5ac 蛋白、CXCR4蛋白和CXCR4mRNA 含量較哮喘組降低，但仍高于正常組（P＜0.01）。見(jiàn)表4、5 和圖3、4。

表4 各組小鼠肺組織MUC5ac、CXCR4 蛋白水平Tab.4 Protein levels MUC5ac and CXCR4 in kung tissue of mice in each group ±s

表4 各組小鼠肺組織MUC5ac、CXCR4 蛋白水平Tab.4 Protein levels MUC5ac and CXCR4 in kung tissue of mice in each group ±s

注：*表示與正常組比較，P ＜0.01；#表示與哮喘組比較，P ＜0.01

組別正常組哮喘組AMD3100 組Muc5ac 蛋白陽(yáng)性著色面積（IOD）7.41±2.20 114.80±4.95*55.32±3.79#CXCR4 蛋白陽(yáng)性著色面積（IOD）4.84±0.72 76.20±4.19*37.69±2.15#

表5 各組小鼠肺組織CXCR4 mRNA 相對(duì)表達(dá)量Tab.5 The relative expression of XCXR4 mRNA in lung tissue of mice in each group ±s

表5 各組小鼠肺組織CXCR4 mRNA 相對(duì)表達(dá)量Tab.5 The relative expression of XCXR4 mRNA in lung tissue of mice in each group ±s

注：*表示與正常組比較，P ＜0.01；#表示與哮喘組比較，P ＜0.01

組別正常組哮喘組AMD3100 組CXCR4（ΔCT）0.386±0.022 1.530±0.060*1.061±0.027#

圖3 各組小鼠肺組織MAU5ac 表達(dá)Fig.3 MAU5ac Expression in lung tissue in each group mice

圖4 各組小鼠肺組織CXCR4 表達(dá)Fig.4 CXCR4 expression in lung tissue in each group of mice

3 討論

哮喘是一種以反復(fù)發(fā)作性喘息、咳嗽、氣促及胸悶為主要臨床表現(xiàn)，肺組織病理學(xué)變化為發(fā)生、發(fā)展的病理學(xué)基礎(chǔ)［11］的一種慢性氣道炎癥疾病。小鼠的哮喘癥狀以煩躁不安、呼吸急促、抓耳撓腮、弓背直立、腹肌收縮等異常行為為主［12］。本課題組既往以O(shè)VA 腹腔注射致敏改進(jìn)為腹腔注射聯(lián)合多個(gè)部位皮下注射OVA 致敏后激發(fā)制備哮喘模型；小鼠臨床表現(xiàn)為呼吸急促、焦躁不安、弓背直立、抓耳撓腮、二便失禁等。在OVA 激發(fā)前給予小鼠AMD3100 腹腔注射，可觀察到哮喘小鼠焦躁不安、呼吸急促等臨床癥狀減輕。肺組織病理學(xué)結(jié)果顯示，AMD3100 組小鼠支氣管周?chē)装Y病理評(píng)分較哮喘組降低，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減輕，杯狀細(xì)胞增殖及氣道分泌物減少，但仍高于正常組。提示AMD3100 干預(yù)可改善哮喘BALB/c 小鼠的臨床癥狀及肺組織病理學(xué)情況。哮喘的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，多種細(xì)胞及細(xì)胞組分共同參與及相互作用形成氣道炎癥仍是其主要機(jī)制之一，其中，T 淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophilegranulocyte，EOS）在氣道炎癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。正常情況下，Th1/Th2 免疫應(yīng)答處于平衡狀態(tài)，當(dāng)發(fā)生免疫應(yīng)答失衡如以Th2 型輔助T 細(xì)胞發(fā)揮作用時(shí)，會(huì)導(dǎo)致哮喘患者炎癥因子IL-4、IL-5等細(xì)胞因子的過(guò)度產(chǎn)生［13-14］。IL-4 主要參與機(jī)體免疫應(yīng)答，可引起EOS 激活、黏液分泌、IgE 表型轉(zhuǎn)變等而誘發(fā)超敏反應(yīng)［15］；且可直接作用于氣道上皮細(xì)胞，誘導(dǎo)黏液蛋白基因表達(dá)［16］。IL-5 作為哮喘發(fā)作的一個(gè)關(guān)鍵細(xì)胞因子，通過(guò)依賴(lài)和非依賴(lài)途徑共同作用，不僅能調(diào)節(jié)EOS 的增殖、分化，同時(shí)可在IL-13 的參與下誘導(dǎo)EOS 向肺部聚集及對(duì)氣道上皮起作用［17］。研究發(fā)現(xiàn)變應(yīng)原刺激哮喘患者后出現(xiàn)IL-5 水平升高及EOS 大量浸潤(rùn)，同時(shí)吸入重組人IL-5 后，可發(fā)生氣道高反應(yīng)及痰EOS 細(xì)胞增加，證實(shí)IL-5 在哮喘發(fā)病中發(fā)揮重要作用，可作為反映哮喘發(fā)作的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)哮喘組小鼠BALF 中IL-4、IL-5 水平均高于正常組，說(shuō)明兩個(gè)細(xì)胞因子在哮喘急性發(fā)作中均發(fā)揮一定的作用。氣道黏液高分泌現(xiàn)已成為如慢阻肺、哮喘、肺囊性纖維化發(fā)病過(guò)程中主要臨床特征之一，不僅是一種“臨床癥狀”，更是一種高危因素，炎癥刺激下氣道上皮細(xì)胞可引起黏液大量分泌，細(xì)菌滋生，加重氣流受限及氣道阻塞，炎癥反復(fù)，形成惡性循環(huán)［3］，成為了慢性氣道炎癥性疾病的高危發(fā)病因素、加速疾病進(jìn)展的重要組成部分及影響患者預(yù)后的制約因素，MUC5ac 是氣道黏液的主要組成部分，是杯狀細(xì)胞增生及高分泌的標(biāo)志。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)哮喘組小鼠肺組織中MUC5ac 表達(dá)水平顯著高于正常組，與既往研究一致，表明小鼠肺組織中MUC5ac 表達(dá)水平上調(diào)在氣道黏液高分泌中發(fā)揮重要作用。CXCR4是一種G 蛋白偶聯(lián)受體，也屬于CXC 趨化因子家族，參與造血和免疫系統(tǒng)的歸巢和趨化。SDF-1 是CXCR4 的配體，與CXCR4 結(jié)合啟動(dòng)不同了的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，可引起多種反應(yīng)，如細(xì)胞存活、增殖、細(xì)胞內(nèi)鈣增加和基因轉(zhuǎn)錄等。CXCR4 已與HIV感染、癌癥、肺動(dòng)脈高壓和肺損傷［18］等多種疾病相關(guān)。莫碧文等［19］研究表明CXCR4 可能在哮喘氣道炎癥和氣道重塑中起作用。CHEN 等［20］研究指出CXCR4 可能通過(guò)Th17 細(xì)胞通路在哮喘氣道炎癥及氣道高反應(yīng)性中發(fā)揮作用。已有研究證實(shí)支氣管哮喘患兒外周血SDF-1、CXCR4 水平顯著高于對(duì)照組［21］。本實(shí)驗(yàn)中AMD3100 組BALF 中CXCR4 含量減少、肺組織中CXCR4 蛋白水平及CXCR4 的mRNA 相對(duì)表達(dá)量較哮喘組顯著降低，說(shuō)明AMD3100 可以阻滯CXCR4。哮喘組BALF 中CXCR4 含量、肺組織中CXCR4 蛋白水平及CXCR4的mRNA 相對(duì)表達(dá)量較正常組明顯升高，可以說(shuō)明CXCR4 表達(dá)增高與哮喘氣道炎癥、氣道重塑相關(guān)，而氣道黏液高分泌和氣道炎癥、氣道重塑密切相關(guān)，因此有理由相信CXCR4 是哮喘氣道炎癥、氣道重塑及氣道黏液高分泌發(fā)病機(jī)制的重要因子。

AMD3100 是CXCR4 拮抗劑，通過(guò)抑制SDF-1/CXCR4 軸而發(fā)揮作用。在小鼠模型上，通過(guò)減少嗜酸性粒細(xì)胞及免疫細(xì)胞向氣道聚集，隨后減少炎性細(xì)胞因子的釋放而控制哮喘氣道炎癥［22］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)AMD3100 干預(yù)哮喘小鼠后IL-4、IL-5、CXCR4、肺組織HE 染色氣道周?chē)装Y細(xì)胞浸潤(rùn)評(píng)分較哮喘組明顯減低，可以說(shuō)明AMD3100 可減輕哮喘氣道炎癥及氣道重塑；HIROYUKI 等［23］研究發(fā)現(xiàn)CXCR4 在嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)性肺疾病BALF中表達(dá)明顯增高，通過(guò)抗體阻斷CXCR4 時(shí)嗜酸性粒細(xì)胞向炎癥部位轉(zhuǎn)移則減弱。滕捷明等［24］研究表明CXCR4 蛋白在支氣管上皮細(xì)胞表面表達(dá)受IL-4 的調(diào)控，當(dāng)Th2 細(xì)胞因子IL-4 的表達(dá)下降時(shí)，細(xì)胞表面CXCR4 表達(dá)減少影響嗜酸性粒細(xì)胞向炎癥部位的遷移及在炎癥部位的分布，減輕氣道炎癥反應(yīng)。該實(shí)驗(yàn)中，AMD3100組BALF中CXCR4含量減少、肺組織中CXCR4 蛋白水平及CXCR4 的mRNA 相對(duì)表達(dá)量較哮喘組顯著降低，AMD3100干預(yù)可減輕哮喘小鼠氣道炎癥、氣道重塑及氣道MUC5ac 分泌。

綜上所述，AMD3100 干預(yù)可降低CXCR4 蛋白的表達(dá)，抑制哮喘小鼠氣道炎癥反應(yīng)，通過(guò)下調(diào)氣道黏蛋白MUC5ac 的表達(dá)水平，減輕氣道黏液高分泌。