全 霞 趙智娟

1.呼和浩特市蒙醫(yī)中醫(yī)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000；2.科爾沁左翼中旗食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 通遼 029300

蒙藥復(fù)方制劑草果四味湯散又名嘎古拉-4湯，收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(蒙藥分冊(cè))，可調(diào)節(jié)“赫依”、健脾胃[1]。蒙醫(yī)臨床上用于上行“赫依”、持命“赫依”之病。本方出自經(jīng)典蒙醫(yī)藥著作《醫(yī)方封集》，本方性溫，為脾赫依病主方，方中以祛脾胃寒氣之草果為主藥；以抑赫依，止痛之良藥丁香和木香為輔藥；配以小茴香為伍；共研細(xì)末，制成散劑[2]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究[3]表明，草果四味湯散具有抗胃炎、抗鎮(zhèn)靜、抗鎮(zhèn)痛及一定的保護(hù)心肌細(xì)胞損傷等作用。在蒙醫(yī)臨床上治療赫依病的藥材多數(shù)含有揮發(fā)性成分，也是蒙醫(yī)藥治療疾病的特色之處。本方草果四味湯散中的草果、丁香、木香和小茴香均含有揮發(fā)油性[4-7]成分，但是未見(jiàn)到對(duì)于草果、丁香、木香和小茴香組成的蒙藥復(fù)方制劑草果四味湯散的揮發(fā)油分析的報(bào)道，因此，筆者從草果四味湯散中揮發(fā)性成分治療赫依病為出發(fā)點(diǎn)，采用GC-MS法分析本方中的揮發(fā)性成分，為該復(fù)方組成后揮發(fā)性成分的變化規(guī)律及復(fù)方配伍規(guī)律的進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

5977B-8890型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)安捷倫)；環(huán)己烷為分析純(天津市大茂化學(xué)試劑廠)；試驗(yàn)用草果四味湯散購(gòu)買于內(nèi)蒙古庫(kù)倫蒙藥有限公司(批號(hào)：200710)。

2 方法

2.1 色譜條件 色譜柱HP-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；載氣為氦氣(99.999%)；載氣流速為1.0 mL·min-1；檢測(cè)器溫度為250 ℃；分流比為20∶1；進(jìn)樣口溫度260 ℃；柱溫采取程序升溫：起始溫度為60 ℃柱溫，以流速10 ℃·min-1速率升至120 ℃，恒溫5 min；再以10 ℃·min-1速率升至180 ℃，恒溫10 min；再以5 ℃·min-1速率升至240 ℃,進(jìn)樣量為 1 μL，溶劑延遲2 min。

2.2 質(zhì)譜條件 電離方式為電子轟擊離子源(EI)；電子能量為70 eV；傳輸線溫度280 ℃；離子源溫度230 ℃；四級(jí)桿溫度為150 ℃；質(zhì)量掃描范圍50～550 amu；溶劑延遲2 min；草果四味湯散的GC-MS圖譜如圖1所示。

2.3 草果四味湯散揮發(fā)性成分的提取與供試品的制備 稱取草果四味湯散200 g，置500 mL的圓底燒瓶中，加2倍量的蒸餾水，采用水蒸氣蒸餾法提取4 h，得到草果四味湯散揮發(fā)油；取100 μL草果四味湯散揮發(fā)油，加環(huán)己烷定容至1 mL，用 0.25 μm 濾頭濾過(guò)，備用。

3 結(jié)果

按照上述“2.1”和“2.2”項(xiàng)下測(cè)定條件下，對(duì)草果四味湯散揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS分析，并將所分離得出的草果四味湯散揮發(fā)油化合物的質(zhì)譜圖與NIST08譜庫(kù)進(jìn)行相關(guān)檢索，以及結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道數(shù)據(jù)對(duì)草果四味湯散揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析；采用峰面積歸一化法計(jì)算草果四味湯散揮發(fā)油各化學(xué)成分的相對(duì)百分含量。草果四味湯散揮發(fā)油主要化學(xué)成分及其相對(duì)百分含量結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 草果四味湯散揮發(fā)油主要化學(xué)成分及其相對(duì)百分含量結(jié)果

續(xù)表1 表1 草果四味湯散揮發(fā)油主要化學(xué)成分及其相對(duì)百分含量結(jié)果

4 討論

揮發(fā)油是草果四味湯散的一類主要化學(xué)物質(zhì)群，治療“赫依”病的藥材大多數(shù)含有揮發(fā)油，本文首次對(duì)草果四味湯散的揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS分析，在圖譜庫(kù)檢索以及文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上，從草果四味湯散揮發(fā)油中共分離出25個(gè)峰，其中鑒定出24種化學(xué)成分，其中主要成分是茴香烯(Anethole)、1,8,11,14-十七烷四烯(1,8,11,14-Heptadecatetraene)、苦艾素(Azuleno[4,5-6]furan-2-(3H)-one)、石竹烯(Garyophyllene)、乙酸香葉酯(Geranyl acetate)等，分別占總揮發(fā)油的19.07%、7.86%、7.24%、5.50%、5.22%等。通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)，從草果四味湯散揮發(fā)油中鑒定的成分與草果、丁香、木香和小茴香所含的揮發(fā)油進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)草果所含的乙酸香葉酯[4]、丁香所含的苦艾素[5]、木香所含的石竹烯[6]、小茴香所含的茴香腦(即茴香烯)[7]等共性成分均被從草果四味湯散揮發(fā)油中鑒定出來(lái)，也有一些丁香酚和木香烴內(nèi)酯等主要成分未被檢出，其化學(xué)成分的變化規(guī)律有待進(jìn)一步深入研究。對(duì)于草果四味湯散來(lái)說(shuō)，它的化學(xué)成分具有復(fù)雜性和多樣性，其中揮發(fā)油是多種成分中的一類，本實(shí)驗(yàn)首次對(duì)其進(jìn)行GC-MS分析，希望通過(guò)進(jìn)一步的深入研究，為闡明其活性部位、作用機(jī)制等提供科學(xué)依據(jù)。

草果四味湯散是由草果、丁香、木香和小茴香組成的經(jīng)典蒙藥驗(yàn)方，其中四味組成藥物均含有揮發(fā)油，揮發(fā)油也是草果四味湯散治療“赫依”病的物質(zhì)基礎(chǔ)，草果、丁香、木香和小茴香組成草果四味湯散后所含有的揮發(fā)油發(fā)生了哪些改變、是結(jié)構(gòu)發(fā)生改變、還是含量有所變化、這些問(wèn)題目前還未待闡明，針對(duì)上述問(wèn)題，作者首先對(duì)草果四味湯散進(jìn)行揮發(fā)油的提取，通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)其進(jìn)行揮發(fā)油成分的分離鑒定，并在草果、丁香、木香和小茴香的揮發(fā)油研究文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上，對(duì)單味藥和復(fù)方中揮發(fā)性成分進(jìn)行比較討論，初步闡明了草果四味湯散組方后揮發(fā)油的變化。