楊 倩，張 鵬，李 宇，王景林，朱莉益，葉麗敏

貴州省人民醫(yī)院消化內(nèi)科，貴州 貴陽 550002

經(jīng)典Wnt/β-catenin通路的主要組成部分包括19種Wnt蛋白，包括Wnt1、Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a、Wnt9b、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11、Wnt13(Wnt2b)及Wnt16[1]。Wnt家族基因在哺乳動物中首次被發(fā)現(xiàn)是因為Wnt1過表達(dá)導(dǎo)致小鼠乳腺腫瘤發(fā)生[2]。而在結(jié)直腸癌中普遍發(fā)現(xiàn)大腸腺瘤性息肉(adenomatous polyposis coli，APC))基因發(fā)生截短突變，APC的突變使連環(huán)蛋白(β-catenin)穩(wěn)定表達(dá)從而促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展[3]。Wnt信號在人類癌癥中的廣泛作用凸顯了靶向該信號通路治療癌癥的重要性和可行性[4-7]。然而，異?；罨腤nt信號通路如何在癌癥發(fā)展的多個方面起作用尚不清楚。本文將通過生物信息學(xué)方法探討Wnt家族基因在各實體腫瘤中的表達(dá)并對Wnt基因變異及其與腫瘤免疫細(xì)胞浸潤相關(guān)性進(jìn)行分析，為針對Wnt通路在腫瘤尤其是腸道腫瘤中的研究提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 Wnt家族基因在各實體瘤中的表達(dá)分析Oncomine[8](https://www.oncomine.org/)是目前最大的癌基因芯片數(shù)據(jù)庫及整合數(shù)據(jù)挖掘平臺，可以查找癌癥中差異表達(dá)的基因。設(shè)置篩選條件：閾值(P值)：1E-4,差異倍數(shù)：2，基因排序：前10%；數(shù)據(jù)類型：所有腫瘤。

1.2 Wnt家族基因表達(dá)驗證UALCAN[9](http://ualcan.path.uab.edu/index.html)是一個全面的、交互式的在線資源，數(shù)據(jù)來源于TCGA3級RNA-seq和31種癌癥類型，可作為驗證靶基因和識別腫瘤亞組特異性生物標(biāo)志物的平臺。篩選設(shè)置：腫瘤數(shù)據(jù)來源“TCGA分析”，“基因名”，“TCGA數(shù)據(jù)集”，“結(jié)直腸癌”。

1.3 基因變異情況分析利用cBioPortal(https://www.cbioportal.org/)對目的基因進(jìn)行變異分析，篩選條件：選擇研究進(jìn)行可視化和分析：TCGA-結(jié)直腸癌,泛癌癥，526個樣本；基因變異分析：選擇基因組數(shù)據(jù)：“GISTIC來源的具有基因突變及假定拷貝數(shù)變異的樣本”。

1.4 腫瘤免疫浸潤分析TIMER：Tumor Immune Estimation Resource[10](https://cistrome.shinyapps.io/timer/)是一個全面分析腫瘤浸潤免疫細(xì)胞的在線網(wǎng)站。“Gene”模塊允許研究者選擇目的基因并可視化其表達(dá)與不同癌癥類型免疫浸潤水平的相關(guān)性。搜索設(shè)置：基因名；腫瘤類型：結(jié)直腸癌；免疫細(xì)胞浸潤：B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞。

1.5 Wnt家族基因在結(jié)腸癌細(xì)胞系中的表達(dá)腫瘤細(xì)胞系百科全書(Broad Institute Cancer Cell Line Encyclopedia，CCLE，https://portals.broadinstitute.org)，目前收集了1 457個腫瘤細(xì)胞系的組學(xué)數(shù)據(jù)，可以檢索感興趣基因在某腫瘤細(xì)胞系中mRNA表達(dá)、突變及甲基化數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 Wnt家族基因在消化系統(tǒng)腫瘤中顯著差異表達(dá)通過Oncomine數(shù)據(jù)庫分析Wnt家族各成員在各種實體腫瘤中表達(dá)情況，如圖1所示：在膀胱癌中Wnt4、Wnt5a、Wnt5b表達(dá)下調(diào)；在腦神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中Wnt2、Wnt7a表達(dá)下調(diào)，Wnt5a表達(dá)上調(diào)；在乳腺癌中Wnt2、Wnt3、Wnt5a、Wnt7b表達(dá)上調(diào)，Wnt6表達(dá)下調(diào)，而Wnt11在1個乳腺癌研究中表達(dá)上調(diào)，3個乳腺癌中表達(dá)下調(diào)；在宮頸癌中僅發(fā)現(xiàn)Wnt5a、Wnt16表達(dá)下調(diào)；在結(jié)腸癌中發(fā)現(xiàn)Wnt2、Wnt3、Wnt5a、Wnt11表達(dá)上調(diào)，Wnt2b(Wnt13)、Wnt5b表達(dá)下調(diào)；在食管癌中發(fā)現(xiàn)Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt13普遍下調(diào)；胃癌中Wnt2、Wnt4、Wnt5a表達(dá)上調(diào)；頭頸腫瘤中，Wnt5a在2個研究中表達(dá)上調(diào)，1個研究中下調(diào)，Wnt4表達(dá)下調(diào)；腎癌中Wnt5a、Wnt16為上調(diào)基因，Wnt7b表達(dá)下調(diào)；僅有1個肝癌研究發(fā)現(xiàn)Wnt11表達(dá)下調(diào)；在肺癌中發(fā)現(xiàn)Wnt2、Wnt2b、Wnt3a、Wnt7a、Wnt11表達(dá)下調(diào)，而Wnt5a、Wnt7b表達(dá)下調(diào)；在卵巢癌中Wnt2b、Wnt5a表達(dá)下調(diào)，Wnt7a及Wnt10表達(dá)上調(diào)；在胰腺癌中發(fā)現(xiàn)Wnt2a、Wnt5a過表達(dá)；前列腺癌中Wnt3a、Wnt6均表達(dá)下調(diào)。從圖1結(jié)果分析我們發(fā)現(xiàn)Wnt家族成員在消化系統(tǒng)腫瘤中顯著差異表達(dá)，尤其是食管、胃及結(jié)腸癌中。而同一個基因如Wnt5a在頭頸部腫瘤及Wnt11在乳腺癌樣本中既有表達(dá)上調(diào)也存在表達(dá)下調(diào)。另外在Oncomine中暫未檢索到關(guān)于Wnt1、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a、Wnt9b、Wnt14、Wnt14b及Wnt15相關(guān)研究。以上結(jié)果表明同一個Wnt家族基因在不同類型實體腫瘤組織中作用機(jī)制可能不同，而不同的Wnt家族成員在同一實體腫瘤中也扮演了不同角色。接下來我們重點在結(jié)腸癌中對Wnt家族基因進(jìn)行分析。

注：紅色代表在腫瘤中高表達(dá)，藍(lán)色代表低表達(dá)，格子中數(shù)字代表基因在對應(yīng)腫瘤中研究數(shù)目。

2.2 Wnt家族基因在結(jié)腸癌中存在顯著差異表達(dá)UALCAN數(shù)據(jù)基于TCGA-COAD，其中包括腫瘤樣本(286個)及正常樣本(41個)，分析驗證Wnt家族基因在結(jié)腸癌中表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與Oncomine數(shù)據(jù)一致Wnt2(P=1E-12)、Wnt3(P=1.62E-12)、Wnt5a(P=1.6E-12)、Wnt11(P=1.7E-12)在結(jié)腸癌中表達(dá)均顯著上調(diào)，而Wnt2b(P=1E-12)、Wnt5b(P=1.68E-06)在結(jié)腸癌中表達(dá)下調(diào)。此外基于TCGA-COAD數(shù)據(jù)，本分析發(fā)現(xiàn)Wnt1(P=1.94E-05)及Wnt9a(P=6.38E-05)在結(jié)腸癌中表達(dá)下調(diào)，Wnt3a(P=0.04)、Wnt7b(P=8.04E-07)、Wnt8b(P=3.33E-16)表達(dá)上調(diào)，而Wnt4、Wnt7a、Wnt8a、Wnt9b、Wnt10a、Wnt10b、Wnt16等在結(jié)腸癌中表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(見圖2)。

注：紅色(Primary tumor)代表腫瘤組，藍(lán)色(Normal)代表正常組。

2.3 Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b及Wnt11在結(jié)腸癌存在突變及拷貝數(shù)變異基于Oncomine與UALCAN分析數(shù)據(jù)進(jìn)一步探討Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b、Wnt11基因在結(jié)腸癌中的變異情況，包括：錯義突變(missense mutation)、截短突變(truncating mutation)、基因擴(kuò)增(amplification)、深缺失(deep deletion)。通過526個樣本(TCGA、Colorectal Adenocarcinoma、Pancancer Atlas)進(jìn)行基因突變及拷貝數(shù)變異分析發(fā)現(xiàn)約13%存在基因變異(見圖3)。其中1.7%發(fā)現(xiàn)Wnt2基因突變，以錯義突變?yōu)橹?，Wnt2b(2.1%)存在錯義突變及深缺失、Wnt3(2.1%)為錯義突變及基因擴(kuò)增、Wnt5a(3%)為錯義突變及深缺失、Wnt5b(3%)為基因擴(kuò)增為主、Wnt11(1.5%)包括錯義突變及基因擴(kuò)增。

注：A：Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b及Wnt11在TCGA結(jié)腸癌中突變及拷貝數(shù)變異分析；B：TCGA Pancancer結(jié)腸癌中基因變異約13%，主要為突變、基因擴(kuò)增及深缺失。

2.4 結(jié)腸癌中Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b及Wnt11基因表達(dá)與腫瘤免疫浸潤相關(guān)腫瘤微環(huán)境(tumor microenvironment，TME)是指腫瘤所處的細(xì)胞環(huán)境，它包括免疫細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞以及炎癥介質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)分子。本研究主要分析結(jié)腸癌中Wnt家族基因表達(dá)與B細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突細(xì)胞免疫浸潤的相關(guān)性。

如圖4所示,在結(jié)腸癌中Wnt2高表達(dá)與腫瘤純度呈負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)，與B細(xì)胞浸潤不相關(guān)。Wnt2b表達(dá)與腫瘤純度及巨噬細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與B細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞不相關(guān)。Wnt3表達(dá)與腫瘤純度、樹突狀細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤不相關(guān)，與B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞浸潤水平呈負(fù)相關(guān)，與中性粒細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞免疫細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)。Wnt5a表達(dá)與腫瘤純度呈負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)，與B細(xì)胞不相關(guān)。Wnt5b表達(dá)與腫瘤純度、B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞浸潤不相關(guān)，與CD4+T細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)。Wnt11與腫瘤純度、樹突細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤不相關(guān)，與B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞及中性粒細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與CD4+T細(xì)胞呈正相關(guān)。

注：tumor purity：腫瘤純度；B Cell：B細(xì)胞；Macrophage：巨噬細(xì)胞;Neutrophil：中性粒細(xì)胞，Dendritic cell：樹突狀細(xì)胞;Partial.cor：皮爾森相關(guān)系數(shù)。

2.5 Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b、Wnt11基因在結(jié)腸癌細(xì)胞系中表達(dá)基于腫瘤細(xì)胞系百科全書數(shù)據(jù)我們分析了Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b、Wnt11等基因在各常見結(jié)腸癌細(xì)胞系中表達(dá)情況：Wnt2基因(見圖5A)及Wnt2b(見圖5B)在所示結(jié)腸癌細(xì)胞系中普遍表達(dá)下調(diào)，Wnt3(見圖5C)及Wnt11(見圖5F)在大多數(shù)結(jié)腸癌細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào)，Wnt5a(見圖5D)及Wnt5b(見圖5E)在結(jié)腸癌細(xì)胞系中既存在表達(dá)上調(diào)也有表達(dá)下調(diào)。因此，腸道腫瘤的異質(zhì)性與細(xì)胞類型的特異性可能存在關(guān)系，了解基因在某種特定類型腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)對腫瘤治療有一定幫助。

圖5 Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b及Wnt11在結(jié)腸癌各細(xì)胞系中表達(dá)水平

3 討論

Wnt信號在正常的發(fā)育和生理過程中發(fā)揮著不同的功能，與細(xì)胞增殖、逃避生長抑制、抵抗細(xì)胞死亡、凋亡、自噬、基因組不穩(wěn)定性和突變、炎瘤轉(zhuǎn)變等過程密切相關(guān)[11]。Wnt通路的一些成分，包括大腸腺瘤性息肉病(APC)基因、軸抑制蛋白2(axis inhibition protein 2，Axin2)和連環(huán)蛋白(β-catenin)直接參與有絲分裂過程，如微管動力學(xué)、紡錘體形成和中心體分裂等從而影響細(xì)胞周期過程[11]，APC基因是結(jié)腸腫瘤中比較常見的突變基因之一，也導(dǎo)致了結(jié)腸癌是較常見基因突變的腫瘤之一。結(jié)直腸癌中的APC基因突變可激活Wnt/β-catenin信號發(fā)生級聯(lián)[1]，而突變的早期識別可引導(dǎo)轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者進(jìn)行可能延長生命的靶向治療[12]。鑒于Wnt在調(diào)控腫瘤形成和進(jìn)展中的不同作用，單獨靶向Wnt信號或與其他小分子抑制劑聯(lián)合使用將會非常有益。

在本研究中通過目前最大癌基因芯片數(shù)據(jù)庫Oncomine對Wnt家族成員基因在各實體瘤中表達(dá)進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Wnt家族基因在乳腺癌、腦神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、結(jié)腸癌、食管癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、宮頸癌等實體瘤中均存在差異表達(dá)，而Wnt家族基因在結(jié)腸癌中的研究共有45項，提示了Wnt信號在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。進(jìn)一步在基于TCGA中結(jié)腸癌表達(dá)譜數(shù)據(jù)對Wnt家族基因表達(dá)進(jìn)行驗證，結(jié)果與Oncomine中數(shù)據(jù)一致Wnt2、Wnt3、Wnt5a及Wnt11為在結(jié)腸癌中表達(dá)上調(diào)的基因，而Wnt2b、Wnt5b在結(jié)腸癌中表達(dá)下調(diào)。在腫瘤發(fā)生過程中獲得的各種生長優(yōu)勢，主要是通過對重要的癌基因和抑癌基因進(jìn)行基因組改變，從而導(dǎo)致最“適合”的細(xì)胞克隆擴(kuò)增而獲得的。本研究發(fā)現(xiàn)Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b及Wnt11在結(jié)腸癌中可能存在一定的基因突變及拷貝數(shù)變異，為探討Wnt家族基因的基因組不穩(wěn)定性和突變提供理論依據(jù)。免疫治療以免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞之間的相互作用為靶點，可以重新激活適應(yīng)性和先天免疫系統(tǒng)，并產(chǎn)生強(qiáng)大的抗腫瘤免疫反應(yīng)，近年來作為經(jīng)典抗癌治療的一種替代方法。例如，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA4)、程序性死亡受體1(PD-1)和程序性死亡配體-1(PD-L1)抑制劑的研發(fā)對轉(zhuǎn)移性黑色素瘤和非小細(xì)胞肺癌具有較好的抗腫瘤作用[13-14]。隨著免疫療法的發(fā)展，Wnts通路在調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞上各種檢查點的表達(dá)以促進(jìn)免疫逃避方面的重要性被研究者們關(guān)注[15]。因此，本文通過分析Wnt家族基因(Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b、Wnt11)表達(dá)與免疫細(xì)胞浸潤相關(guān)性發(fā)現(xiàn)：Wnt2b、Wnt5b在結(jié)腸癌中表達(dá)下調(diào)，均與CD4+T細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)。Wnt2、Wnt3、Wnt5a及Wnt11在結(jié)腸癌中高表達(dá)，均與CD4+T、巨噬細(xì)胞細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)；而Wnt2及Wnt5a的表達(dá)與腫瘤純度呈負(fù)相關(guān)；Wnt3表達(dá)及Wnt11與B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞浸潤呈負(fù)相關(guān)；Wnt2與Wnt5a與CD8+T細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)；Wnt2、Wnt3、Wnt5a與中性粒細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)。TME(又稱腫瘤基質(zhì))在實體腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，其細(xì)胞成分由惡性腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞組成，基質(zhì)細(xì)胞主要包括成纖維細(xì)胞和免疫細(xì)胞[16]。TME對腫瘤組織的基因表達(dá)有重要影響，從而影響臨床預(yù)后[17-19]，因此探討相關(guān)基因表達(dá)與腫瘤免疫細(xì)胞浸潤相關(guān)性有重要意義。作為TME的豐富成分，腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAFs)已被證明能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生和腫瘤侵襲性，有研究[20-21]表明,在結(jié)直腸癌中，Wnt2在CAFs中選擇性升高，導(dǎo)致浸潤和轉(zhuǎn)移增加，而在本研究中發(fā)現(xiàn)Wnt2高表達(dá)與腫瘤純度呈負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)，為Wnt2在腫瘤微環(huán)境中研究提供一些數(shù)據(jù)。研究[22-23]證實，Wnt3在腸癌中表達(dá)上調(diào)與我們分析結(jié)果一致，沉默Wnt3可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡增強(qiáng)大腸癌細(xì)胞對順鉑的敏感性從而發(fā)揮抗瘤作用。Wnt5a在結(jié)腸癌中表達(dá)上調(diào)，頂板特異性蛋白2(roof plate-specific spondin 2，R-spondin2)可通過拮抗Wnt5a驅(qū)動的非典型Wnt信號對結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移發(fā)揮抑制作用[24]。Wnt5a啟動子高甲基化可使接受5-氟尿嘧啶化療的結(jié)腸癌患者得到較好的藥物反應(yīng)和較長的無進(jìn)展生存期，提示W(wǎng)nt5a甲基化狀態(tài)具有預(yù)后判斷作用，可作為大腸癌中潛在的藥物選擇生物標(biāo)志物[25]。結(jié)合腫瘤免疫浸潤分析我們發(fā)現(xiàn),Wnt5a表達(dá)與CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞浸潤有較強(qiáng)的正相關(guān)關(guān)系，提示W(wǎng)nt5a可能通過影響結(jié)腸癌微環(huán)境中的免疫細(xì)胞浸潤水平調(diào)控結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展，Wnt5a可能成為潛在的結(jié)腸癌免疫治療靶點。同樣，文獻(xiàn)表明Wnt11在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)上調(diào)，Wnt11基因沉默可降低結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲能力，Wnt11可能成為侵襲性結(jié)直腸癌患者治療的潛在靶點[26]。目前，針對Wnt2b及Wnt5b在結(jié)腸癌中報道較少，有研究者在構(gòu)建結(jié)直腸癌3D體外轉(zhuǎn)移模型中發(fā)現(xiàn)Wnt2b是Wnt家族中差異表達(dá)最多的基因，Wnt2B可與可溶性跨膜受體7(Frizzled7，F(xiàn)ZD7)相互作用調(diào)控大腸癌的間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化[27]。本分析發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌組織中Wnt5b mRNA水平下調(diào)，而Zhang等[28]研究報道顯示,Wnt5b在COLO205細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，并通過JNK信號通路促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的遷移及侵襲，提示了Wnt5b在結(jié)腸癌中表達(dá)可能存在細(xì)胞特異性。最后我們通過腫瘤細(xì)胞系百科全書提供了這些基因在各種常用結(jié)腸癌細(xì)胞系中的相對表達(dá)水平，以此為進(jìn)一步細(xì)胞分子實驗研究提供參考數(shù)據(jù)。

綜上所述，Wnt家族基因在實體瘤中存在表達(dá)差異，在消化系統(tǒng)腫瘤尤其是結(jié)腸腫瘤中表現(xiàn)最為顯著。在結(jié)腸癌中，Wnt家族基因(特別是Wnt5a及Wnt2)表達(dá)與B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞浸潤存在一定相關(guān)性。研究表明Wnt信號通路的病理激活可引起腸上皮內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡導(dǎo)致微環(huán)境改變，這是結(jié)直腸癌最重要的特征之一[29]，因此未來進(jìn)一步探討靶向Wnt家族基因在腸道腫瘤治療中有較高的臨床價值。

Wnt家族基因在實體腫瘤特別是腸道腫瘤中存在顯著差異表達(dá)，Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt5a、Wnt5b、Wnt11等基因在結(jié)腸癌中表達(dá)與錯義突變、基因擴(kuò)增及深缺失有關(guān)，并且與免疫細(xì)胞(B細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞)浸潤存在一定相關(guān)性，為Wnt家族基因在結(jié)腸癌致病尤其是針對TME研究提供一定的理論依據(jù)。