王興宇，胡 海，張 晶

(1.內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 包頭 014040；2.包頭市中心醫(yī)院)

宮頸癌在低收入國(guó)家中是第二常見的診斷性癌癥，同時(shí)也是引起女性死亡的三大癌癥之一[1]。高危人乳頭狀瘤病毒(hrHPV)的持續(xù)感染是高級(jí)宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN2/3)和浸潤(rùn)性宮頸癌(ICC)發(fā)展的必要因素[2]。迄今為止，超過170種基因型可感染肛門上皮細(xì)胞，其中有12個(gè)基因型因其致癌潛力高而被列為是“高危型”[3]。HPV16和HPV18是眾所周知的致癌基因型，另外HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68型也與宮頸癌的發(fā)生有密切關(guān)系[3-4]。

目前，hrHPV測(cè)試法被作為檢查未知意義的非典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS)結(jié)果或與臨床實(shí)踐的宮頸細(xì)胞學(xué)聯(lián)合的一種額外方法[5-6]。最近，美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)將hrHPV測(cè)試作為初步篩查的方法，這些檢測(cè)使用HPV16和HPV18基因分型以及其他12種hrHPV基因型組成的混合型[7]。除HPV篩查方案外，HPV疫苗接種也已被證明是一種針對(duì)HPV感染的有效方案，近期已在大多數(shù)國(guó)家實(shí)行。然而在內(nèi)蒙古包頭地區(qū)尚未進(jìn)行該疫苗接種的計(jì)劃。

高危HPV基因型在世界范圍內(nèi)非常普遍，HPV基因型因地理區(qū)域而異，性傳播HPV可能導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生[8]。本研究可為包頭地區(qū)的HPV篩查奠定基礎(chǔ)。

1 對(duì)象與方法

1.1研究人群 2015年4月至2017年7月，共有4 413名女性到包頭市中心醫(yī)院進(jìn)行HPV檢測(cè)，年齡16～91歲，平均年齡43.1歲。根據(jù)美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)的宮頸癌篩查指南，將研究人群分為11組。本研究得到本院醫(yī)學(xué)倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)。參與者均簽訂了知情同意書。在本院完成的數(shù)據(jù)收集過程中保證了保密性。本研究匿名分析數(shù)據(jù)。

1.2樣本采集 采用亞能生物技術(shù)(深圳)有限公司生產(chǎn)的宮頸脫落細(xì)胞采集器(宮頸刷)進(jìn)行采樣。由婦科醫(yī)生對(duì)標(biāo)本進(jìn)行采集，取出宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉(zhuǎn)4～5周以獲得足量的上皮細(xì)胞標(biāo)本，然后將宮頸刷頭部放入細(xì)胞保存液管中，沿刷柄折痕處將宮頸刷柄折斷，旋緊管蓋，做好標(biāo)本標(biāo)識(shí)，登記編號(hào)后送檢。標(biāo)本一經(jīng)采集，當(dāng)日送檢；標(biāo)本室溫保存<12 h，2～8 ℃保存<7 d，-20 ℃以下保存<3個(gè)月。避免反復(fù)凍融。

1.3儀器與試劑 儀器選用BD公司Step One Plus Real-Time PCR儀進(jìn)行基因分型，所用試劑為上海之江生物醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)的人乳頭瘤病毒基因分型檢測(cè)試劑盒。

1.4統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)處理 所有統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS 13.0進(jìn)行。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，各組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1HPV感染的總流行率 包頭女性人群HPV感染率為15.6 %(690/4 413)。在所有HPV陽(yáng)性的女性中，單基因感染率為76.7 %(529/690)，混合基因感染率為23.3 %(161/690),以單一性感染為主，進(jìn)一步用2檢驗(yàn)分析結(jié)果顯示，單一感染和混合感染的構(gòu)成比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=66.773，P=0.000)。在多發(fā)HPV感染的女性中，81.4 %(131/161)的患者感染了2種基因型，最常見的組合是16+58(14例)、39+68(9例)、52+58(8例)；另外，有11.8 %(19/161)患者感染3種基因型，最常見的為16+31+39型；最后，分別有5.0 %(8/161)和1.9 %(3/161)的患者感染了4種和4種以上的基因型。

我們回顧調(diào)查了3年期間的HPV流行率，以便更詳細(xì)地評(píng)估與HPV感染相關(guān)的年齡趨勢(shì)?；谀挲g分布將患者分為11組，統(tǒng)計(jì)不同年齡組患者的HPV感染率，并進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果顯示不同年齡組之間患者的感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=63.116，P=0.000)。HPV感染的年齡分布在整體HPV流行率中顯示出雙峰曲線，分別為16-20歲(47.2 %)年齡組和56-60歲(25.5 %)年齡組，見圖1。

圖1 2015-2017年HPV在女性中的流行率

2.2HPV基因型分布特征 總體看來，在感染HPV的女性中，HPV16無(wú)論是以單基因型或混合基因型出現(xiàn)均是感染概率最高的基因型(43.2 %)，其次是HPV58(17.2 %)、HPV18(9.4 %)。見表1。

表1 HPV基因型流行率(n=690)

根據(jù)年齡確定HPV基因型的分布見表2。對(duì)于不同年齡組感染率可看出，HPV16基因型的陽(yáng)性率最高。對(duì)于不同年齡組的患者，年輕女性患者患病率均高于年齡較大的女性患者。

表2 HPV在不同年齡階層感染流行性的分布情況

3 討論

目前大量的研究與實(shí)踐結(jié)果表明，嚴(yán)重危害女性健康的宮頸癌是唯一一種可經(jīng)過醫(yī)學(xué)干預(yù)降低發(fā)病率和死亡率的人類惡性腫瘤。根據(jù)宮頸癌的危險(xiǎn)性差異，分為高危型HPV和低危型HPV兩大類。研究證實(shí)，高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的前提條件。

不同地區(qū)之間HPV流行情況存在著較大的差異。本研究發(fā)現(xiàn)的hrHPV陽(yáng)性率(15.6 %)低于?？?31.9 %)[9]、廣東(20.0 %)[10]、重慶(27.3 %)[11]、濟(jì)南(25.7 %)[12]和上海(22.6 %)[13]，但與杭州(19.9 %)[14]和南昌(18.4 %)[15]的比例相似。與中國(guó)人口調(diào)查數(shù)據(jù)相一致，HPV16、52和58基因型是主要的hrHPV類型，但與全球范圍內(nèi)結(jié)果存在差異(HPV16,18和45，HPV16,18和33以及HPV16,18和58是最常見的基因型),在研究人群中，HPV16和58占感染的50.2 %，代表亞洲人群中的常見類型，這一比例明顯高于全球平均感染率(14.0 %)[8]。

年齡特異性分布呈現(xiàn)雙峰曲線，第一個(gè)峰值出現(xiàn)在16～20歲年齡組，中年患病率較低，這反映了HPV感染的自然病史。女性中檢測(cè)HPV通常在15歲以上，在發(fā)生性行為后即應(yīng)開始?，F(xiàn)發(fā)現(xiàn)在年輕女性中患病率高達(dá)80 %，主要是短暫性感染，在1年或2年內(nèi)可清除。在研究人群中，我們觀察到在56～60歲(28.5 %)年齡較大的女性中出現(xiàn)了的第二個(gè)高峰，這與中美洲、東南亞和西非地區(qū)觀察到的趨勢(shì)相似[16-17]。56～60歲年齡組的女性HPV感染率略有增加可能反映了絕經(jīng)期HPV的持續(xù)性或潛在的HPV再激活，可能與激素和HPV活動(dòng)周期的相互作用以及宿主的易感性相關(guān)。

由于經(jīng)濟(jì)條件、文化存在多樣性、遺傳變異、HPV疫苗接種意識(shí)和生活方式存在差異，HPV的流行率具有地區(qū)差異，北京為9.9 %，海口為31.9 %，西方國(guó)家感染率為67.1 %～71.3 %[8]，值得注意的是，中國(guó)HPV疫苗接種率僅為16.0 %。免疫實(shí)踐咨詢委員會(huì)(ACIP)建議二價(jià)HPV疫苗、四價(jià)HPV疫苗和九價(jià)HPV疫苗(9vHPV)進(jìn)行常規(guī)疫苗接種。在中國(guó)，最迫切的公共衛(wèi)生問題是增加HPV疫苗接種覆蓋率，并提高疫苗接種效果。

HPV類型的HPV流行率和分布在不同的女性年齡組之間差異很大。這項(xiàng)研究的數(shù)據(jù)可能對(duì)包頭地區(qū)HPV的宮頸癌篩查工作很有價(jià)值，并可幫助包頭地區(qū)未來的HPV疫苗接種，疾病的篩查、診斷和治療。