王波，王妃，劉天媚

作為最常見(jiàn)的胃腸道疾病之一，功能性消化不良（Functional Dyspepsia，F(xiàn)D）被定義為是一種具有持續(xù)上消化道癥狀的慢性疾病，目前尚沒(méi)有明確的病因［1］。大量研究顯示人群的FD的患病率為10%～30%［2］。關(guān)于FD 的發(fā)病機(jī)制目前已提出了幾種機(jī)制：胃排空延遲、胃酸分泌過(guò)多、心理因素、內(nèi)臟超敏反應(yīng)以及幽門(mén)螺桿菌感染［3］。有研究表明，在胃潰瘍和十二指腸潰瘍病人中存在幽門(mén)螺桿菌（Heli-cobacter pylori，Hp）感染的病人超過(guò)90%［4-7］。FD 作為一種最常見(jiàn)的功能性胃腸道疾病，其與Hp 感染之間的關(guān)系尚未明確報(bào)道。胃腸激素又被稱(chēng)為腦腸肽，近些年來(lái)，有關(guān)腦腸肽的研究得到了飛速的發(fā)展，許多的疾病機(jī)制研究中腦腸肽都參與其中，并且已大量應(yīng)用于疾病的診斷和臨床［8］。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)瘦素（Leptin）、生長(zhǎng)素（Ghrelin）及酪酪肽（PYY）這三種胃腸激素均與攝食相關(guān)，其中生長(zhǎng)素是一種饑餓激素，它的主要作用是促進(jìn)食欲，而瘦素和酪酪肽屬于飽食激素，它們的主要作用是抑制食欲［9］。在臨床表現(xiàn)上，F(xiàn)D病人經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)早飽、厭食、嘔吐和惡心等癥狀，這可能與上述胃腸激素密切相關(guān)。因此，本課題擬采用ELISA 法檢測(cè)病兒血漿中的瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽水平，并分析這三種胃腸激素與FD病兒Hp感染之間的關(guān)系，為FD病兒的臨床治療與發(fā)病機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料2017 年 3 月至 2019 年 3 月在瓊海市中醫(yī)院就診的140例6～13歲兒童，男86例，女54例，年齡（9.1±2.3）歲，根據(jù)年級(jí)將病兒分為≤9 歲組63 例（1～3 年級(jí)）和＞9 歲組77 例（4 年級(jí)及以上）。病兒監(jiān)護(hù)人或近親屬知情同意，本研究符合《世界醫(yī)學(xué)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 診斷依據(jù)依據(jù)羅馬Ⅳ標(biāo)準(zhǔn)診斷兒童是否患功能性消化不良，即符合以下1項(xiàng)或多項(xiàng)條件：①餐后飽脹；②早飽；③上腹疼痛或燒灼感，與排便無(wú)關(guān)；④沒(méi)有可解釋該癥狀的器質(zhì)性疾病。且在過(guò)去的6個(gè)月中，癥狀發(fā)生3個(gè)月以上。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料尿素13C呼氣試驗(yàn)診斷試劑盒（北京勃然制藥有限公司），人生長(zhǎng)激素釋放肽生長(zhǎng)素（GHRP-生長(zhǎng)素）ELISA檢測(cè)試劑盒、人瘦素ELISA試劑盒、人酪酪肽ELISA 試劑盒（美國(guó)R&D 公司），13C呼氣質(zhì)譜儀離心機(jī)，-80 ℃超低溫冰箱，酶標(biāo)儀。

1.413C 呼氣試驗(yàn)對(duì)通過(guò)羅馬Ⅳ標(biāo)準(zhǔn)診斷為FD的病兒進(jìn)行13C呼氣試驗(yàn)，檢查Hp的感染情況。

試驗(yàn)方法：①病兒1個(gè)月內(nèi)未服用抗生素或7 d內(nèi)未服用抗酸藥物，對(duì)病兒進(jìn)行空腹檢查。②收集0 min 呼氣：先將吸管插入樣品管底部，病兒維持正常呼氣時(shí)，用吸管將氣慢慢通進(jìn)樣品管底部，維持4～5 s后拔出吸管，立刻旋緊試管蓋。③30 min的呼氣：病兒用100 mL礦泉水送服一粒尿素13C膠囊，靜坐30 min，再按步驟②收集服用尿素13C 的呼氣，旋緊試管蓋。④將收集的0 min 和30 min 的樣品管，在質(zhì)譜儀上進(jìn)行13CO2檢測(cè)。⑤陽(yáng)性判斷值：診斷結(jié)果是以30 min時(shí)樣品中所測(cè)13CO2的δ‰（千分差值）與0 min呼氣樣品的δ‰值的差值表示，即檢測(cè)值＝δ‰（30 min）-δ‰（0 min）。陽(yáng)性判斷值≥（4.0±0.4）時(shí)，可判定病兒為Hp陽(yáng)性。

1.5 ELISA法檢測(cè)病兒血漿中瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽的表達(dá)水平。

1.5.1收集血漿 140例病兒上午空腹采集靜脈血3 mL。在樣品中分別加入30μL的EDTA和20μL的抑肽酶，充分混勻后靜置4 h，離心樣品2 000 r/min 15 min，收集血漿，置于-80 ℃超低溫冰箱凍存。

1.5.2采用相關(guān)試劑盒檢測(cè) 血漿中瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽的相對(duì)表達(dá)量，具體操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本研究中數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組間兒童臨床癥狀如表1 所示，140 例病兒中上腹痛的發(fā)生率最高（93.57%），其次為惡心和（或）嘔吐（74.29%）、早飽（55.00%）和腹脹（31.43%）。研究結(jié)果顯示：≤9歲組與＞9歲組相比，腹痛、惡心和（或）嘔吐差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；早飽、腹脹差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 不同組間功能性消化不良兒童臨床癥狀比較/例（%）

2.2 不同組間兒童Hp 陽(yáng)性率比較140 例病兒中Hp陽(yáng)性87例，總陽(yáng)性率為62.14%，其中≤9歲組與＞9歲組病兒中Hp陽(yáng)性率分別為39例（39/63,61.90%）與48 例（48/77,62.34%），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；≤9歲組與＞9歲組病兒中男性女性比例分別為40/23和46/31，其組內(nèi)男女性Hp陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.253、1.675，P=0.546、0.288）。

2.3 不同Hp 感染組間兒童瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽水平根據(jù)病兒Hp感染情況，在87例Hp陽(yáng)性病兒中隨機(jī)抽取53例病兒，將這53例Hp陽(yáng)性病兒編為Hp陽(yáng)性組；將另53例Hp陰性病兒編為Hp陰性組。采用t檢驗(yàn)比較Hp陽(yáng)性組與Hp陰性組病兒血漿中瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽水平，見(jiàn)表2。研究結(jié)果顯示：兩組病兒血漿中瘦素水平比較，Hp 陽(yáng)性組病兒血漿中瘦素水平顯著高于Hp 陰性組；兩組病兒血漿中生長(zhǎng)素水平比較，Hp陽(yáng)性組病兒血漿中生長(zhǎng)素水平顯著低于Hp 陰性組；兩組病兒血漿中酪酪肽水平比較Hp陽(yáng)性組病兒血漿中酪酪肽水平與Hp陰性組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 不同Hp感染組間功能性消化不良兒童瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽水平/（ng/L，±s）

表2 不同Hp感染組間功能性消化不良兒童瘦素、生長(zhǎng)素及酪酪肽水平/（ng/L，±s）

組別Hp陽(yáng)性Hp陰性t值P值例數(shù)53 53瘦素2 435.32±256.13 1 898.45±304.88-3.082 0.004生長(zhǎng)素212.06±19.81 296.27±26.57 7.125 0.000酪酪肽70.22±16.32 51.25±10.92 1.629 0.072

3 討論

兒童胃腸道發(fā)育尚不完全，易發(fā)生功能性消化不良等消化系統(tǒng)疾病。由于兒童FD 發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，可能由多種因素如生活習(xí)慣、幽門(mén)螺旋桿菌、微量元素缺乏等的影響，造成經(jīng)常性發(fā)作、疾病難愈［10］，易造成飲食量減少、活動(dòng)降低，影響病兒的發(fā)育和生活。近年來(lái)，有研究發(fā)現(xiàn)，兒童FD與Hp感染的關(guān)系十分密切［11］。Hp感染會(huì)影響兒童FD病人胃腸功能紊亂，造成胃延遲排空，最終可能導(dǎo)致病兒的慢性器質(zhì)性病變［12］。

脂肪中能量?jī)?chǔ)存狀態(tài)可影響瘦素表達(dá)，因?yàn)樗⑸涞绞菟厝狈Φ恼Ｐ∈笾幸鹗澄飻z入、體質(zhì)量和體脂的顯著減少［13］。研究顯示瘦素水平升高，通過(guò)大腦作用降低食欲和增加產(chǎn)熱來(lái)預(yù)防肥胖［14］，肥胖人類(lèi)和其他哺乳動(dòng)物的脂肪含量中血清瘦素水平增加就證明了這一點(diǎn)。在嚙齒動(dòng)物過(guò)量喂食和人類(lèi)餐后過(guò)量飲食數(shù)天后，瘦素水平在數(shù)小時(shí)內(nèi)增加，而在開(kāi)始禁食后，瘦素水平可在數(shù)小時(shí)內(nèi)降低［15-16］。下丘腦和腦干被認(rèn)為是負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)體質(zhì)量的主要穩(wěn)態(tài)腦區(qū)。生長(zhǎng)素與其受體的合成激動(dòng)劑一樣，是生長(zhǎng)激素中的促分泌素［17］。除此之外，最近對(duì)嚙齒動(dòng)物的研究表明，生長(zhǎng)素釋放肽可以為大腦提供外周信號(hào)，刺激食物攝入和嚙齒動(dòng)物肥胖。據(jù)報(bào)道，慢性生長(zhǎng)素給藥也會(huì)導(dǎo)致嚙齒動(dòng)物體質(zhì)量增加和肥胖［18］。有研究顯示給大鼠注射酪酪肽3-36可抑制食物攝入和大鼠體質(zhì)量增加。在人類(lèi)中，輸入一定濃度的酪酪肽3-36可顯著降低食欲，并在24 h內(nèi)減少33%的食物攝入量。

瘦素主要是一種由脂肪細(xì)胞分泌的飽食激素；而生長(zhǎng)素是一種饑餓激素，它的主要作用是促進(jìn)食欲；酪酪肽主要是由結(jié)腸和回腸分泌的，它也是一種飽食激素。本研究結(jié)果顯示：FD病兒感染Hp后增加了血漿中的瘦素水平而降低了血漿中的生長(zhǎng)素水平，而FD病兒感染Hp不影響血漿中酪酪肽水平。