張豐萍 于樂 李剛 馮曉然

332000 九江,江西省九江市第一人民醫(yī)院腎內(nèi)科

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種多因素參與的累及多臟器的自身免疫炎癥性結(jié)締組織病，狼瘡腎炎(lupus nephritis，LN)是其最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一。免疫調(diào)節(jié)功能紊亂貫穿其整個(gè)發(fā)病過程，特別是輔助性T淋巴細(xì)胞亞群(Helper T cell，Th)及其細(xì)胞因子平衡失調(diào)起著重要影響。白細(xì)胞介素-31(interleukin-31，IL-31)是一種由活化的CD4+Th2細(xì)胞分泌的新型細(xì)胞作用因子。近年國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，其在特應(yīng)性皮炎、哮喘、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、川崎病和變應(yīng)性鼻炎等自身免疫和炎癥性疾病中起著重要作用[1-4]。但在LN患者體內(nèi)有無(wú)表達(dá)異常，與LN活動(dòng)性及嚴(yán)重程度是否相關(guān)目前少有研究。因此，進(jìn)一步研究IL-31水平在LN疾病中的表達(dá)或許能為L(zhǎng)N治療提供新的方向。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2018年1月至2019年10月在九江市第一人民醫(yī)院腎內(nèi)科及風(fēng)濕科住院的首次確診未開始治療的LN患者54例為觀察組，其中男6例，女48例。根據(jù)系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)指數(shù)(systemic lupus erythematosus disease aotivity index,SLEDAI)評(píng)分是否≥10分，將54例患者分為活動(dòng)組(38例)，其中男4例、女34例；穩(wěn)定組16例，其中男2例、女14例。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)滿足2009年SLICC修改的ACR關(guān)于SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。(2)腎活檢證實(shí)或尿蛋白>0.5 g/24 h或(+++)或管型或鏡下血尿。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)腎小球?yàn)V過率小于60 mL/min；(2)合并惡性腫瘤；(3)合并嚴(yán)重感染。對(duì)照組為無(wú)自身免疫疾病及慢性腎臟病史的健康人28名。

二、實(shí)驗(yàn)室檢查

ELISA法檢測(cè)觀察組(基線值及至少治療6個(gè)月無(wú)嚴(yán)重感染時(shí)期)、對(duì)照組血清中IL-31水平。ELISA法檢測(cè)觀察組細(xì)胞因子IL-6、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)等水平。觀察組常見臨床指標(biāo)包括尿常規(guī)、24h尿蛋白、血生化、抗可提取的核抗原抗體(ENA)、抗雙鏈DNA(抗ds-DNA)、抗核抗體(ANA)、補(bǔ)體C3、C4、Ig抗體、血沉、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)、SLEDAI評(píng)分等。

三、腎臟病理

LN病理活動(dòng)性指數(shù)(AI,Austin評(píng)分)[6]：共28例患者行腎臟病理活檢，腎標(biāo)本行HE、PAS染色及電鏡?；顒?dòng)性病變包括腎小球毛細(xì)血管內(nèi)增生、腎小球中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、內(nèi)皮下透明物質(zhì)沉積、核碎裂/纖維素壞死、細(xì)胞性新月體和腎間質(zhì)炎癥反應(yīng)等。各項(xiàng)按缺如、輕、中、重分別評(píng)為0、1、2、3分，其中纖維素壞死、細(xì)胞性新月體因?qū)︻A(yù)后影響較大而積分加倍，以上所有相加得總積分(0～24分)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、一般資料

觀察組54例患者中，男6例(11.1%)，女48例(88.9%)，年齡(39.5±14.2)歲；健康對(duì)照組28例中，男3例(10.7%)，女25例(81.3%)，年齡(37.6±13.8)歲，兩組之間性別構(gòu)成比(卡方檢驗(yàn)χ2=0.003，P>0.05)及年齡(t=0.580，P>0.05)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組合并系統(tǒng)性血管炎1例(1.85%)、高血壓12例(22.2%)、糖尿病 2 例(3.7%)，28例行腎活檢病理明確分型：狼瘡腎炎Ⅱ型2例(7.1%)；Ⅲ型5例(17.9%)；Ⅳ型18例(64.3%)；Ⅴ型1例(3.5%)；Ⅴ+Ⅳ型2例(7.1%)。

二、IL-31的表達(dá)

觀察組患者根據(jù)SLEDAI評(píng)分是否≥10分，分為活動(dòng)組及穩(wěn)定組，兩組之間血清IL-31表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(83.7±16.2)ng/L比(72.5±14.1)ng/L](t=2.405，P=0.019)。兩組與健康對(duì)照組IL-31表達(dá)水平(30.6±9.8)ng/L比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組患者未治療前血清IL-31水平(81.2±15.7)ng/L，明顯高于免疫抑制劑治療后(71.4±16.3)ng/L(t=3.182，P=0.001)。(圖1、2)

三、IL-31與狼瘡腎炎活動(dòng)度的相關(guān)性

Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，觀察組患者血清IL-31水平與SLEDAI評(píng)分、24h尿蛋白定量、LN病理活動(dòng)指數(shù)Austin評(píng)分呈正相關(guān)，與細(xì)胞因子IL-6、TNF-α等呈一致性表達(dá)，而與補(bǔ)體C3水平呈負(fù)相關(guān)。此外，血清IL-31水平與中性粒細(xì)胞、血小板、血紅蛋白、ANA滴度、C4、血沉、CRP等相關(guān)性無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(表1、圖3)

討 論

IL-31在正常機(jī)體生理狀態(tài)下表達(dá)水平偏低。本研究顯示，觀察組患者IL-31水平表達(dá)均顯著高于正常健康人群。國(guó)外研究證實(shí)，IL-31屬于gp130/IL-6細(xì)胞因子家族中最新發(fā)現(xiàn)的成員，其編碼基因位于人體12q24.31上，主要由活化的Th2細(xì)胞產(chǎn)生。gp130/IL-6家族中包含IL-6、IL-11、IL-27、人制瘤素M、白血病抑制因子、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、心肌營(yíng)養(yǎng)素-1等。IL-31與IL-31受體α(IL-31RA)、人制瘤素M受體在胞外區(qū)結(jié)合后，激活PI3K/AKT、JAK/STAT及MAPK等，誘導(dǎo)ERK、P38和JNK等多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)靶基因轉(zhuǎn)錄，從而調(diào)控細(xì)胞炎癥因子表達(dá)、抗原遞呈、造血作用、細(xì)胞遷移與增殖，參與多種免疫反應(yīng)等生物學(xué)作用效應(yīng)[7-9]。

表1 觀察組IL-31水平與臨床常見指標(biāo)的相關(guān)性(Spearman相關(guān)分析)

新近研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者血中T細(xì)胞磷酸化STAT3水平明顯偏高，而IL-31作為JAK/STAT信號(hào)通路激活因子，控制STAT信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，可抑制SLE患者T細(xì)胞的遷移。此外，在SLE患者中亦存在IL-31基因rs7977932C/G多態(tài)性[10]。本課題將根據(jù)疾病活動(dòng)度評(píng)分，分為活動(dòng)組38例及穩(wěn)定組16例，結(jié)果顯示LN活動(dòng)組患者IL-31表達(dá)水平明顯升高(P=0.019)，而免疫抑制治療后患者IL-31水平明顯低于治療前(P=0.001)。因此，本研究在一定程度證實(shí)IL-31與LN患者疾病活動(dòng)有關(guān)這一觀點(diǎn)。既往研究證實(shí)，SLE患者存在多種炎癥細(xì)胞因子的高表達(dá)[11]，進(jìn)一步通過Spearman分析IL-31與SLE常見炎癥細(xì)胞因子IL-6(r=0.670，P=0.026)、TNF-α(r=0.597，P=0.019)等水平呈高度正相關(guān)性表達(dá)。眾多研究證實(shí)，IL-31可通過促進(jìn)IL-6、TNF-α、基質(zhì)金屬蛋白酶等細(xì)胞因子的分泌，可誘導(dǎo)趨化因子(CCL)17、CCL19、CCL22、CCL4及CCL1等表達(dá)，在自身免疫性疾病中發(fā)揮活動(dòng)性致病作用[12-13]。

過往研究證實(shí)，補(bǔ)體、免疫球蛋白、24h尿蛋白定量及腎臟病理活動(dòng)性指數(shù)AI(Austin評(píng)分)等對(duì)LN患者的腎臟整體預(yù)后具有明顯意義[14]。而本研究則分析得出LN患者血清IL-31水平與腎臟病理活動(dòng)度存在明顯相關(guān)性，24h尿蛋白定量水平越大者其IL-31水平表達(dá)亦越高。據(jù)此推測(cè)，IL-31水平對(duì)LN腎臟受累程度評(píng)估可能具有顯著意義，其與腎臟預(yù)后結(jié)局可能存在前瞻性預(yù)測(cè)作用。

綜上所述，本研究證實(shí)LN患者IL-31水平呈高表達(dá)，且與腎炎疾病活動(dòng)性呈正相關(guān)，針對(duì)其靶向干預(yù)可能是治療LN的新思路之一。當(dāng)然，本文僅分析出LN患者血清IL-31水平的表達(dá)及疾病活動(dòng)相關(guān)性，但二者之間是否存在臨床因果關(guān)系，干預(yù)其表達(dá)是否有意義等問題，尚需進(jìn)一步基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)及大樣本前瞻性研究加以證明。