梁小菊,李小娜,曾 萍,梁 軍,常 磊
(鄭州市獸藥飼料質(zhì)量安全檢驗中心,河南 鄭州 450052)
中藥散劑在動物疫病防治及動物保健等方面發(fā)揮著重要作用。由于中獸藥本身的藥理特性及部分人群存在的化藥見效快、中藥見效慢,中藥沒有化藥藥效強等錯誤觀念,中獸藥散劑中非法添加化學藥物的問題比較突出,嚴重影響到動物疾病的治療和畜產(chǎn)品的質(zhì)量安全[1]。中獸藥顯微鑒別法以操作簡單、高效、準確、實用等優(yōu)點備受歡迎。顯微鑒別法能夠快速、準確地檢測出成方制劑中各中藥材組分,又能檢測出具有一定特殊顯微特征的化學藥物。利用顯微鑒別技術(shù)對中獸藥產(chǎn)品質(zhì)量進行快速、簡便的有效分析,是凈化中獸藥市場的一個有效手段[2-7]。
健胃散源自《中華人民共和國獸藥典》,由山楂、神曲、麥芽、檳榔四味藥物組成,具有消食下氣、開胃寬腸之功效,用于治療畜禽傷食積滯、消化不良、食欲不振、生長遲緩[8]等,在獸醫(yī)臨床上應(yīng)用廣泛。目前,健胃散成方制劑中藥材以次充好、非法添加化學藥物等現(xiàn)象時有發(fā)生,嚴重影響產(chǎn)品質(zhì)量與用藥安全。本文就健胃散中添加喹乙醇、乙酰甲喹的顯微鑒別方法進行介紹,以供同行參考。
1.1.1 標準品
喹乙醇(德國Dr.Ehrenstorfer GmbH,批號C15724000);乙酰甲喹(德國WITEGA,批號272221)。
1.1.2 中藥制劑
健胃散。
1.1.3 試劑
水合氯醛試液、甘油乙醇試液。
1.1.4 儀器
Motic麥克奧迪B1顯微鏡 , UV-P顯微鏡成像系統(tǒng)。
1.1.5 供試品的制備
取健胃散成品適量,作為樣品1;另取健胃散適量,按2%比例添加喹乙醇、乙酰甲喹,充分混合均勻,作為樣品2。
1.2.1 健胃散各組分檢查
依據(jù)《中華人民共和國獸藥典》(2015版)二部附錄131顯微鑒別法的制片方法,取樣品1少許,均勻散布于載玻片上,滴加水合氯醛試液少許,加熱使透化后滴加甘油乙醇試液適量,封片[8]。置顯微鏡下(10×10、 40×10)觀察。同時對照《中華人民共和國獸藥典》健胃散各組分,制作單個原藥材涂片對照檢測。
1.2.2 健胃散中添加化學藥物的檢查
依據(jù)2016年發(fā)布的農(nóng)業(yè)部第2448號公告附件2的制片方法,取樣品2少許,置于載玻片上,滴加甘油乙醇溶液2~3滴,攪勻,封片,置顯微鏡下(10×10、 40×10)觀察,同時制作化學藥品標準品的涂片對照檢測。
根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》(2015版)二部,健胃散鑒別項下具體描述之3種組分特征[8],其組織顯微特征:果皮石細胞淡紫紅色、紅色或黃棕色,類圓形或多角形,直徑約至125 μm,為山楂;果皮細胞縱列,常有1個長細胞與2個短細胞相間排列,長細胞壁厚,波狀彎曲,木化,為麥芽;內(nèi)胚乳碎片無色,壁較厚,有較大的類圓形紋孔,為檳榔。詳見圖1。
圖1 健胃散方劑中各組分的顯微圖片
樣品2中添加了喹乙醇和乙酰甲喹。顯微結(jié)構(gòu)特征:淡黃綠色結(jié)晶,呈菱形、三角形或不規(guī)則形,表面有梯形、人字或不定型裂紋,為喹乙醇;鮮黃色結(jié)晶,長短不一,呈棒狀,一端或兩端呈梭形,表面有暗綠色縱裂紋或裂縫,為乙酰甲喹。對照標準品涂片,確定本樣品中添加的化藥成分為喹乙醇和乙酰甲喹。詳見圖2。
健胃散主治畜禽傷食積滯,消化不良。在健胃散制劑中非法加入止痢效果好的乙酰甲喹和促生長的喹乙醇能增加該藥的療效,使該藥的效果更加顯著。本實驗在健胃散樣品中添加喹乙醇、乙酰甲喹,利用顯微鑒別法可檢出該兩種化學藥物的顯微特征,說明顯微鑒別法在健胃散的質(zhì)量鑒定中高效、準確、實用。
顯微鑒別時,一定要按照要求規(guī)范制片,且蓋玻片一定要選擇標準厚度的,蓋玻片太厚或太薄都可能影響所拍圖片的質(zhì)量。觀察制片也有一定的時間要求,當懷疑添加有化學藥物時,制片后應(yīng)立刻觀察,否則化學藥物晶體可能會溶解,影響檢驗結(jié)果的準確性。同時,顯微鑒別檢驗人員應(yīng)牢記常用中藥材粉末的顯微特征,具有一定的中獸藥顯微鑒別經(jīng)驗,以正確區(qū)分藥材組織的細微差別,做出準確判斷。
圖2 添加喹乙醇、乙酰甲喹的顯微圖片