韓啟福,刁曉艷,聶靜,李子安，彭海，阿祥仁(青海省人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，西寧 810007)

Sysmex UC-3500全自動尿液分析儀(簡稱UC-3500)以其操作簡便、檢測項目較多、檢測速度快、數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)化的特點在各類中小型醫(yī)療機構普遍應用。目前該儀器的檢測項目只有比重項目有標準液，其他半定量檢測項目缺乏標準液或標準品，其檢測項目準確性難以驗證。本文用貝克曼AU5831全自動生化分析儀(簡稱AU5831)來驗證UC-3500部分檢測項目的準確性。

1 資料和方法

1.1一般資料 選擇2019年1月本實驗室患者血清標本30份(直接膽紅素≥17.0 μmol/L)，尿液檢驗樣本289份，其中84份用于基質(zhì)尿液制作(選取常規(guī)體檢中尿干化學檢測各項目均為陰性，比重、pH值均在參考范圍內(nèi)的尿液)，余205份尿液樣本用于一致性分析。

1.2儀器與試劑 UC-3500尿液分析儀及其配套MEDITAPE UC-11A試紙(批號AC8006)、質(zhì)控品(批號UCC01902)(日本Sysmex公司)；AU5831生化分析儀、直接膽紅素檢測試劑(批號：AUZ6782)、清蛋白檢測試劑(批號：AUZ6531)、葡萄糖(Glu)檢測試劑(批號：AUZ6146)、生化多項質(zhì)控品CONTROL SERUM 1(批號：1041C)和CONTROL SERUM 2(批號：1042C)、生化多項校準品(批號：1121D)(美國貝克曼公司)；重組人血清蛋白(杭州紐龍公司)；葡萄糖粉(中國大冢制藥公司) 。

1.3方法

1.3.1質(zhì)量控制 UC-3500及AU5831均在計量檢定周期內(nèi)完成校準，且校準結果符合相關規(guī)定的要求，UC-3500每日檢測標本前室內(nèi)質(zhì)控結果均在控(在說明書標注的質(zhì)控限范圍內(nèi))，AU5831室內(nèi)質(zhì)控累積變異系數(shù)(CV)均在實驗室目標CV范圍內(nèi)(直接膽紅素：1.46%、清蛋白：1.31%、葡萄糖：1.23%)，參加青海省臨床檢驗中心和國家衛(wèi)健委臨床檢驗中心室間質(zhì)評的結果均為100%。

1.3.2參考標準液配制 按照MEDITAPE UC-11A說明書中測定結果判定表中標示濃度范圍，將重組人清蛋白和葡萄糖用蒸餾水配制成接近說明書中檢測上限的濃度。挑選在AU5831上已經(jīng)檢測過的直接膽紅素高值血清樣本，結果接近說明書中測定范圍表中檢測上限。將上述樣本按說明書等量級的半定量值用基質(zhì)尿液按比例稀釋，每個梯度至少稀釋成10 mL，稀釋后不同濃度梯度的樣本在AU5831檢測，每個梯度檢測3次，測得結果在尿液分析儀等量級的半定量值附近時則為標準參考液制作完成，3次結果的均值為標準液參考值。Glu、蛋白質(zhì)(Pro)、膽紅素(直接膽紅素)3個項目標準參考液濃度及對應量級見表1。

表1 葡萄糖(Glu)、蛋白質(zhì)(Pro)、膽紅素(直接膽紅素)項目標準參考液濃度及對應量級(示值)

1.3.3準確度和符合率驗證 將不同濃度梯度的標準參考液在UC-3500上各檢測20次，統(tǒng)計后分析評價符合率和準確度。準確度判斷標準：檢測結果與相應參考濃度的標示值相差同向不超過一個量級，不得出現(xiàn)反向相差；且陽性參考溶液不得出現(xiàn)陰性結果，陰性參考溶液不得出現(xiàn)陽性結果為符合標準。符合率判斷標準：按MEDITAPE UC-11A說明書中要求，檢測結果的符合率不低于90%。

1.3.4一致性分析 隨機收集我院住院患者205份尿液樣本在UC-3500上檢測完成后，1 h內(nèi)在AU5831上檢測直接膽紅素、葡萄糖、清蛋白3項，收集數(shù)據(jù)后按照MEDITAPE UC-11A說明書，對AU5831檢測的結果進行半定量人為分級(見表2)，統(tǒng)計分析2種方法檢測結果的一致性。

表2 2種方法檢測膽紅素(直接膽紅素)、葡萄糖、蛋白質(zhì)(清蛋白)結果的分級方式

1.4統(tǒng)計學分析 用SPSS 22.0軟件進行。計數(shù)資料以n表示，采用一致性檢驗(Kappa檢驗)比較2種方法檢測結果的一致性；Kappa結果判讀：Kappa計算結果為-1～1，但通常Kappa值為0～1，可分為5組來表示不同級別的一致性：0.0～0.20為極低的一致性，0.21～0.40為一般的一致性，0.41～0.60為中等的一致性，0.61～0.80為高度的一致性，0.81～1幾乎完全一致。

2 結果

2.1符合率和準確度 2種方法檢測膽紅素(直接膽紅素)、葡萄糖、蛋白質(zhì)(清蛋白)3個項目的總符合率分別為96.6%、99%、94%，準確度符合MEDITAPE UC-11A說明書的要求(≥90%)，見表3。

表3 各項目標準參考液濃度符合率和準確度

2.2一致性分析 對205份尿液樣本用2種方法檢測膽紅素(直接膽紅素)、葡萄糖(Glu)、蛋白質(zhì)(清蛋白)3個項目，其Kappa值分別為0.788、0.843、0.741，說明這3個項目在UC-3500的半定量結果與AU5831的定量結果之間有較高的一致性。

3 討論

按CLSI GP16-A3文件敘述，尿液干化學分析試帶結果有疑問時，應做確證試驗，建議采用相同或更高靈敏度或特異度的相同或不同方法來檢測同一物質(zhì)，但采用相同尿干化學試帶重復檢測不能作為確證試驗[1]。中國臨床檢驗標準化委員會推薦的參考方法：尿蛋白、葡萄糖和膽紅素項目是室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評結果合格的生化分析儀檢測結果。UC-3500尿液分析儀在國內(nèi)已有多家實驗室使用，在儀器及配套試紙條的廠家說明書中并無各項目確證物質(zhì)的說明，除比重外其他檢測項目亦無相關確證產(chǎn)品。本文參照中國臨床檢驗標準化委員會推薦的參考方法對尿蛋白、葡萄糖和膽紅素3個項目進行準確性驗證，被驗證的項目各等量級符合率均≥90%，準確性驗證結果均符合試劑說明書的要求。2種方法尿液中蛋白質(zhì)、膽紅素、葡萄糖、蛋白質(zhì)均有較高的一致性，3個項目的Kappa值分別為0.788、0.843、0.741。ISO 15189醫(yī)學實驗室認可相關條款中要求對尿液分析儀進行性能驗證。在日常工作中為確保檢驗結果的準確性應該進行準確度驗證或方法學比較，也可以和其他檢測系統(tǒng)(或方法)進行一致性分析[2-3]。

綜上所述，UC-3500尿液分析儀和AU5831生化分析儀2種方法尿液中蛋白質(zhì)、膽紅素、葡萄糖檢測結果均有較高的一致性，在日常工作中需要對尿液干化學分析儀進行準確度驗證時，可用溯源性較好的生化檢測系統(tǒng)制備相應的標準參考液作準確度驗證，可作為無標準參考液時替代方案。目前國內(nèi)外并未針對尿干化學分析出臺統(tǒng)一的性能驗證標準或者指南，關于檢測項目準確性的驗證方法仍需探討。