王 迪，龍世群

重慶市萬(wàn)州區(qū)婦幼保健院百安分院，重慶 404100

肝纖維化為慢性肝炎患者病情進(jìn)展為肝癌的重要危險(xiǎn)因素，對(duì)肝纖維化程度的準(zhǔn)確評(píng)價(jià)有利于判斷患者病情以及制訂治療方案，同時(shí)對(duì)于緩解患者病情以及改善預(yù)后也具有積極意義[1]。臨床上一般使用肝組織病理活檢進(jìn)行病情嚴(yán)重程度判斷以及肝纖維化程度評(píng)定，但此種檢查方式為侵入式檢查，會(huì)對(duì)患者身體造成損傷，影響患者的檢查配合度且檢查時(shí)一般需要住院。因此，需要尋找一種簡(jiǎn)單、有效、微創(chuàng)的方法進(jìn)行肝纖維化程度評(píng)價(jià)[2]。臨床上用于肝纖維化無(wú)創(chuàng)檢查的方法一般為血清指標(biāo)檢測(cè)以及影像學(xué)檢查。有研究顯示，Mac-2結(jié)合蛋白(Mac-2BP)在預(yù)測(cè)慢性肝炎患者肝纖維化程度的臨床應(yīng)用價(jià)值較高，但其特異性尚需要進(jìn)一步改善[3]。巖藻糖基化觸珠蛋白(FUC-HPT)為觸珠蛋白上特定蛋白經(jīng)巖藻糖基化修飾，用于肝臟疾病的診斷效能尚需改進(jìn)[4]。臨床上聯(lián)合應(yīng)用Mac-2BP和FUC-HPT兩種蛋白進(jìn)行慢性肝炎患者肝纖維化程度預(yù)測(cè)的研究較少見(jiàn)報(bào)道。本研究選取本院收治的慢性肝炎患者，使用Mac-2BP結(jié)合FUC-HPT預(yù)測(cè)病情嚴(yán)重程度，以明確其應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2016年8月至2018年8月收治的143例慢性肝炎患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合慢性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[5-6]；(2)主要為乙型肝炎和丙型肝炎；(3)患者意識(shí)清楚，可以自行配合相關(guān)檢查；(4)患者對(duì)本研究知情同意；(5)本研究由本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)由脂肪肝、酒精性肝病、免疫缺陷性肝病、其他病毒性肝病等原因?qū)е碌母喂δ墚惓＃?2)并發(fā)糖尿病、免疫缺陷病或者甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病；(3)重要器官功能障礙；(4)檢查前已接受相關(guān)治療；(5)意識(shí)不清，不能配合各種檢查。所有患者中男68例，女75例；年齡19～69歲，平均(46.33±2.57)歲；體質(zhì)量指數(shù)19.3～26.5 kg/m2，平均(23.34±1.29)kg/m2；慢性乙型肝炎83例，慢性丙型肝炎60例。

1.2方法

1.2.1肝組織病理活檢 患者在超聲引導(dǎo)下進(jìn)行穿刺獲得肝組織，隨后使用甲醛進(jìn)行固定，使用石蠟對(duì)肝組織予以包埋，包埋完成后切片，由3名病理醫(yī)生對(duì)蘇木精染色后的切片進(jìn)行互不干擾閱片。肝纖維化分期以及炎性反應(yīng)分級(jí)依據(jù)《病毒性肝炎防治方案》(2001)中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定[7]。

1.2.2血清Mac-2BP和FUC-HPT水平檢測(cè) 抽取患者晨起空腹靜脈血離心后保留上清液，血清中Mac-2BP和FUC-HPT水平檢測(cè)使用酶聯(lián)免疫吸附法，由專(zhuān)人依據(jù)Mac-2BP(日本神戶(hù)Sysmex公司；批號(hào)：79370)和FUC-HPT(英國(guó)Abcam公司；批號(hào)：ab13429)試劑盒操作步驟進(jìn)行檢測(cè)。

1.3觀(guān)察指標(biāo) 分析所有患者肝組織病理活檢結(jié)果，比較不同肝纖維化程度患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平，分析兩種蛋白檢測(cè)結(jié)果與肝纖維化程度的相關(guān)性，計(jì)算兩種蛋白診斷肝纖維化程度的截?cái)嘀?，比較兩種蛋白單用以及聯(lián)合應(yīng)用判斷病情嚴(yán)重程度的價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1患者肝組織病理活檢結(jié)果分析 143例患者均成功進(jìn)行肝組織穿刺后病理活檢，所有經(jīng)穿刺獲得的肝組織均達(dá)到病理活檢標(biāo)準(zhǔn)?；顧z結(jié)果顯示，纖維化S0、S1、S2、S3和S4級(jí)患者分別為25、54、42、19、3例。

2.2不同肝纖維化程度患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平比較 患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平隨著肝纖維化程度加重而上升，且上述兩種蛋白在不同肝纖維化程度患者血清中的水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 不同肝纖維化程度患者血清Mac-2BP和FUC-HPT水平比較

注：與S0級(jí)比較，aP<0.05；與S1級(jí)比較，bP<0.05；與S2級(jí)比較，cP<0.05；與S3級(jí)比較，dP<0.05。

2.3兩種蛋白水平與肝纖維化程度的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)結(jié)果顯示，Mac-2BP、FUC-HPT水平與肝纖維化程度均為正相關(guān)關(guān)系(r=0.614、0.442，P<0.05)。

2.4兩種蛋白診斷肝纖維化程度的截?cái)嘀蹬c診斷價(jià)值分析 Mac-2BP、FUC-HPT診斷肝纖維化程度≥S2級(jí)的截?cái)嘀捣謩e為1 295 ng/mL、359 U/mL，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為78.57%和75.81%；≥S3級(jí)的截?cái)嘀捣謩e為2 157 ng/mL、396 U/mL，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為79.37%和77.69%；S4級(jí)的截?cái)嘀捣謩e為2 482 ng/mL、493 U/mL，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為89.55%和82.38%。診斷肝纖維化程度時(shí)，兩種蛋白聯(lián)合應(yīng)用的靈敏度和特異度優(yōu)于單一檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)圖1和表2。

注：A為肝纖維化程度≥S2級(jí)；B為肝纖維化程度≥S3級(jí)；C為肝纖維化程度S4級(jí)。

圖1兩種蛋白單用及聯(lián)合應(yīng)用診斷肝纖維化程度的ROC曲線(xiàn)

表2 兩種蛋白單用及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)肝纖維化程度的診斷價(jià)值比較

3 討 論

肝纖維化為患者肝臟內(nèi)部因?yàn)榧?xì)胞外基質(zhì)含量過(guò)高所致慢性炎癥發(fā)生的過(guò)程，其最終結(jié)果為肝臟出現(xiàn)硬化病變[8]。慢性乙型肝炎和丙型肝炎患者肝臟進(jìn)一步纖維化會(huì)致使患者病情進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌。正確評(píng)價(jià)慢性肝炎患者肝纖維化程度有利于患者肝臟疾病的控制與治療。研究顯示，常規(guī)肝纖維化血清指標(biāo)如層粘連蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶以及透明質(zhì)酸不能對(duì)肝纖維化程度進(jìn)行精確分期，特異性不佳，需要開(kāi)發(fā)新型纖維化血清指標(biāo)[9]。

Mac-2BP為分布于血漿、細(xì)胞質(zhì)以及組織液中的糖蛋白物質(zhì)，主要由多種含有7個(gè)N糖基的單體組成，N糖基單體在血清中能夠互相聚集形成大分子N聚糖多聚物[10]。血清中纖連蛋白、整聯(lián)蛋白等可與這些N聚糖結(jié)合成為細(xì)胞與基質(zhì)、細(xì)胞之間連接的橋梁。已有研究顯示，Mac-2BP在各種傳染性疾病、腫瘤以及炎癥類(lèi)疾病患者體內(nèi)水平上升[11]。本研究中，隨著肝纖維化程度加重，患者血清中Mac-2BP水平上升，且不同肝纖維化程度其水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與上述研究結(jié)果一致。蛋白被巖藻糖基化修飾后可以對(duì)糖蛋白鏈與蛋白質(zhì)之間的作用進(jìn)行調(diào)節(jié)，正常生理狀態(tài)下巖藻糖基化蛋白水平較低，但其在患者病情加重時(shí)會(huì)增加[12]。巖藻糖基化甲胎蛋白可用于診斷肝癌，可見(jiàn)巖藻糖基化蛋白水平發(fā)生變化對(duì)于疾病診斷意義重大。觸珠蛋白又被稱(chēng)為結(jié)合珠蛋白，為主要在肝臟合成、分泌以及降解的急性反應(yīng)蛋白，各種炎癥、創(chuàng)傷以及腫瘤均會(huì)使其水平上調(diào)。ASAZAWA等[13]研究認(rèn)為，大部分肝癌患者在疾病進(jìn)展期間FUC-HPT水平上升，提示FUC-HPT可作為預(yù)測(cè)肝臟疾病進(jìn)展和肝癌發(fā)生的一種新型、有潛在價(jià)值的生物標(biāo)志物。本研究中患者血清FUC-HPT水平隨著肝纖維化程度加重而上升，且不同肝纖維化程度患者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。研究顯示，F(xiàn)UC-HPT可以調(diào)節(jié)正常極性肝細(xì)胞中糖蛋白的分泌，當(dāng)細(xì)胞極性崩潰時(shí)，由于細(xì)胞內(nèi)極化傳遞受到破壞，細(xì)胞無(wú)法維持正常的功能，導(dǎo)致血清中FUC-HPT水平升高，這種升高與肝細(xì)胞極性崩潰有關(guān)，即與纖維化程度呈正相關(guān)[14]。本研究中相關(guān)性分析結(jié)果同樣顯示，F(xiàn)UC-HPT與肝纖維化程度呈正相關(guān)關(guān)系。

本研究結(jié)果證實(shí)，Mac-2BP與FUC-HPT水平與患者肝纖維化程度存在相關(guān)性，但是二者在肝纖維化程度方面的診斷價(jià)值仍需進(jìn)一步探討。有研究顯示，Mac-2BP可能與肝纖維化程度有關(guān)，在肝臟發(fā)生炎癥時(shí)激活免疫反應(yīng)，使肝細(xì)胞Mac-2BP分泌增多，促進(jìn)纖維化以及細(xì)胞黏附。肝炎患者在后期容易出現(xiàn)肝細(xì)胞極性崩潰，血清FUC-HPT水平升高可能反映了患者肝硬化程度[15]。本研究中ROC曲線(xiàn)分析結(jié)果顯示，診斷肝纖維化程度時(shí)單用Mac-2BP早期(S2級(jí))靈敏度較高，單用FUC-HPT晚期(S3和S4級(jí))特異度較高，而Mac-2BP與FUC-HPT聯(lián)合應(yīng)用于診斷肝纖維化程度時(shí)其靈敏度和特異度均優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果，提示Mac-2BP與FUC-HPT聯(lián)合診斷肝纖維化程度的效能較高，可以作為慢性肝炎病情嚴(yán)重程度診斷與預(yù)測(cè)指標(biāo)。

綜上所述，對(duì)慢性肝炎患者進(jìn)行病情嚴(yán)重程度診斷時(shí)，聯(lián)合應(yīng)用Mac-2BP和FUC-HPT的價(jià)值優(yōu)于單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)，可作為判斷慢性肝炎患者病情嚴(yán)重程度的新型預(yù)測(cè)指標(biāo)。