張 磊，朱 艷，冉婭瓊，楊月嬌

重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，重慶 400016

血清二氧化碳總量包含碳酸氫根離子(HCO3-)、H2CO3、CO32-和游離的CO2。臨床實(shí)驗(yàn)室通過檢測HCO3-來反映血清總二氧化碳的含量，評估酸堿平衡。血?dú)夥治鰞x和生化分析儀是兩種不同性質(zhì)和類別的儀器，可用于檢測不同類別標(biāo)本中的HCO3-水平[1-2]。血?dú)夥治鰞x對動脈血進(jìn)行檢測，但動脈血采集比較困難，對采樣人員技術(shù)要求高，創(chuàng)傷大，不易被患者接受，而生化分析儀采用靜脈血進(jìn)行檢測，采集標(biāo)本容易，創(chuàng)傷小，易被患者接受。因此，臨床檢測HCO3-時通常以靜脈血為主。而在臨床實(shí)際工作中，臨床醫(yī)生發(fā)現(xiàn)血清HCO3-檢測值常低于臨床預(yù)期。為了探討血?dú)夥治鰞x和生化分析儀這兩種不同性質(zhì)和類別的儀器檢測不同類別標(biāo)本中HCO3-結(jié)果是否存在差異性及相關(guān)性，以及標(biāo)本放置時間對血清HCO3-檢測結(jié)果的影響，本課題組設(shè)計并進(jìn)行此項(xiàng)研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 隨機(jī)收集2016年9-12月在本院呼吸內(nèi)科就診的患者70例，其中男38例，年齡45～84歲，中位年齡56.5歲；女32例，年齡44～83歲，中位年齡52.9歲。

1.2儀器與試劑 GM3000血?dú)夥治鰞x(以下簡稱GM3000)購自AVL公司，試劑批號：20160319；VITROS4600全自動生化分析儀(以下簡稱VITROS4600)、原裝試劑盒、定標(biāo)物及質(zhì)控品購自強(qiáng)生公司；肝素抗凝液 (6 250 U/mL)、真空采血管及采血針均由重慶開奇有限公司生產(chǎn)。其他檢測儀器還包括7600-020全自動生化分析儀(日本日立，以下簡稱7600-020)；檢測試劑還包括血清CO2測定試劑盒(四川邁克)。

1.3方法

1.3.1GM3000和VITROS4600同時檢測HCO3-70例研究對象均用動脈血采集專用注射器采集動脈血1～2 mL，密封后充分混勻迅速送檢。70例研究對象于1 h內(nèi)采集靜脈血3～4 mL，靜置凝固后離心分離出血清。GM3000和VITROS4600室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在控情況下，分別檢測動脈血和靜脈血中HCO3-水平，所有操作均嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行。

1.3.2試劑開瓶穩(wěn)定性驗(yàn)證 高、低兩個水平的質(zhì)控品復(fù)溶后分裝，置于-20 ℃冰箱內(nèi)封口保存，7600-020每天檢測HCO3-水平，連續(xù)檢測10 d。檢測過程使用同一瓶試劑，試劑于敞口儀器內(nèi)4 ℃保存，計算連續(xù)10 d HCO3-檢測結(jié)果的精密度，以CV值表示精密度大小。

1.3.3儀器精密度驗(yàn)證 兩個水平的質(zhì)控品復(fù)溶后分裝，置于-20 ℃冰箱內(nèi)封口保存，每天檢測1次，連續(xù)檢測20 d，以CV值表示精密度大小。以上檢測使用同一批號但不同盒的試劑。

1.3.4標(biāo)本穩(wěn)定性檢測 隨機(jī)收集70例患者中的20份靜脈血標(biāo)本，于室溫下分別在30、60、120、240 min時檢測血清標(biāo)本的HCO3-水平。檢測過程使用同一批號的試劑。以上檢測，每份標(biāo)本均檢測3次，取平均值。以30 min時的檢測結(jié)果為參考標(biāo)準(zhǔn)，計算其他時間點(diǎn)檢測結(jié)果的偏差。

2 結(jié) 果

2.1兩種儀器檢測不同類型標(biāo)本中HCO3-結(jié)果的差異性與相關(guān)性分析 GM3000檢測的70例患者動脈血中HCO3-水平為(29.6±7.6)mmol/L，VITROS4600的檢測結(jié)果為(27.7±5.6)mmol/L，略低于GM3000的檢測結(jié)果，但二者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。相關(guān)性分析顯示，兩臺儀器所檢測的HCO3-水平之間具有相關(guān)性(r=0.956，P<0.05)，回歸方程為Y=1.3X-6.6(R2=0.914)。見圖1。

圖1 兩種儀器檢測不同類型標(biāo)本中HCO3-結(jié)果的相關(guān)性分析

2.2試劑穩(wěn)定性分析

2.2.1儀器精密度驗(yàn)證 7600-020檢測高、低兩個水平質(zhì)控品的HCO3-批內(nèi)CV%分別為1.43%和1.55%，批間CV%分別為4.10%和3.85%，滿足試劑說明書提供的批內(nèi)CV%要求(<8.00%)及批間CV%要求(<10.00%)。見圖2。

注：A為批內(nèi)結(jié)果；B為批間結(jié)果。

圖2 HCO3-的批內(nèi)精密度和批間精密度驗(yàn)證

2.2.2試劑開瓶穩(wěn)定性驗(yàn)證 7600-020用同一瓶試劑連續(xù)10 d檢測兩個水平質(zhì)控品的HCO3-，CV%分別為3.8%、3.5%，小于試劑說明書可接受標(biāo)準(zhǔn)(±5.0%)。見圖3。

圖3 HCO3-的試劑開瓶穩(wěn)定性驗(yàn)證

2.3標(biāo)本穩(wěn)定性檢測 以30 min時檢測的HCO3-水平作為參考標(biāo)準(zhǔn)，在室溫下保存60 min時，檢測結(jié)果下降了5.1%；保存120 min時，結(jié)果下降了8.8%；保存240 min時，結(jié)果下降了10.0%。隨著標(biāo)本放置時間的延長，HCO3-水平呈逐漸下降趨勢，不同時間點(diǎn)(60、120、240 min)的檢測結(jié)果與30 min時的檢測結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

臨床上常要求用動脈血作為血?dú)夥治鰳?biāo)本，因?yàn)闃?biāo)本的采集和處理對分析結(jié)果影響較大，而且動脈血的采集易給患者帶來疼痛、操作后易留下創(chuàng)傷，故對采血人員的要求較高。全血采集后血細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行代謝，O2不斷被消耗，CO2不斷產(chǎn)生，故應(yīng)盡可能在短時間內(nèi)進(jìn)行檢測。從本研究結(jié)果可以看出，采用靜脈血檢測的HCO3-水平與動脈血的檢測結(jié)果之間具有良好的相關(guān)性。靜脈血標(biāo)本采集簡便，采血后的創(chuàng)傷小，在動脈血檢測儀器出現(xiàn)故障時，可以替換使用，避免檢驗(yàn)報告的延誤[3]。對于需要連續(xù)監(jiān)測的患者，可通過檢測靜脈血中HCO3-水平來幫助臨床判斷患者體內(nèi)是否存在酸堿失衡[4]。

標(biāo)本檢測從前處理到報告完成，有很多因素影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[5]。有報道指出，前處理時標(biāo)本HCO3-水平降低是因?yàn)樵噭┍┞对诳諝庵?，試劑中的磷酸烯醇式丙酮酸與空氣中的CO2反應(yīng)導(dǎo)致檢測值降低[6]。本研究結(jié)果表明，標(biāo)本放置時間明顯影響HCO3-的檢測結(jié)果，與以上報道結(jié)論一致。同時，在同樣的保存時間，標(biāo)本的保存方式和保存溫度對檢測結(jié)果也有較大的影響[7]。在臨床工作中，由于標(biāo)本量大，臨床標(biāo)本離心開蓋后在生化分析儀上等待檢測時間較長，標(biāo)本暴露于空氣中，會導(dǎo)致檢測結(jié)果低于實(shí)際值。有學(xué)者指出，將標(biāo)本放置冰箱中冷藏，檢測時再取出可以達(dá)到減少降解的目的[6]，但該方法較難實(shí)現(xiàn)，現(xiàn)階段只能采樣后在盡可能短的時間內(nèi)進(jìn)行檢測。Westgard給出的HCO3-生物學(xué)變異的最佳變異系數(shù)為2.6%[8]，實(shí)驗(yàn)室通常以5.0%為標(biāo)準(zhǔn)。但室溫敞口狀態(tài)下，60 min時血清HCO3-水平下降已超過5.0%，而實(shí)際工作中，在60 min內(nèi)難以完成所有的標(biāo)本檢測。為了有效解決標(biāo)本放置時間對HCO3-檢測結(jié)果的影響，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，筆者建議單獨(dú)抽血并選用穩(wěn)定性較高的電極法對血清HCO3-水平進(jìn)行檢測[9]。