遼寧省遼陽市第三人民醫(yī)院 （遼寧 遼陽 111000）

內容提要： 目的：分析對BD血培養(yǎng)儀的假陽性幾種狀況分析和處理。方法：根據儀器在應用過程當中所遇到的假陽性情況設計兩個相關實驗進行調查總結相關的處理方法：①血培養(yǎng)儀陽性對照實驗；②血培養(yǎng)儀回收實驗。結果：對實驗一進行分析，BD血培養(yǎng)儀，自動化連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)存在允許延遲上機的功能，數據之間比較，P＜0.05；對實驗二進行分析，當細菌濃度有足夠大的時候，如果血液不足1mL，則也可以檢測出菌血癥；如果標本量超過1L，細菌量增大，血液標本量增加，儀器報陽時間越短，數據相互比較，P＜0.05。結論：BD血培養(yǎng)儀自動化連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)存在延遲上機的功能，血液標本量越大，那么儀器報陽的時間也就越短，如果不能及時地放置血培養(yǎng)瓶，儀器仍然存在報陽的情況，報陽的總時間會延長。

BD血培養(yǎng)儀具有較高的自動化程度，在進行工作的過程中，主要原理是通過細菌所生成的二氧化碳和熒光指示劑相結合，結合物主要是熒光底物，能夠在LED燈的照射作用之下產生熒光，而且儀器每隔15min會進行一次檢測，對測試槽的吸光度進行檢驗分析結果[1]。而位于培養(yǎng)一中的培養(yǎng)瓶，可以根據某特定時間當中的吸光度的值對吸光度變化曲線進行繪制，并將其作為細菌生長曲線，曲線的斜率可以對培養(yǎng)瓶底物質的變化進行反映，在達到一定斜率的時候，對陽性結果進行匯報，然后進行細菌涂片、染色、轉種等相關工作，通過儀器的不斷震蕩等能夠使細菌獲取更多的營養(yǎng)。本文主要基于此分析BD全自動培養(yǎng)儀出現假陽性的幾種情況，并分析相關的處理策略。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇的儀器為BD BACTEC 9120型全自動血培養(yǎng)儀，兩個實驗所應用的細菌來源于大腸桿菌ATCC25922。理論細菌濃度達到106cfu/mL的時候，涂片可觀察到細菌，因此血培養(yǎng)陽性瓶細菌濃度需要超過106cfu/mL時儀器進行提示，血培養(yǎng)瓶當中存在細菌生長就可以進行下一步的試驗。儀器的血培養(yǎng)瓶陽性試驗所選擇的標本為1mL 0.5麥氏單位的大腸桿菌菌液，并將其接種在培養(yǎng)瓶當中，同時將此瓶和沒有接種標本的培養(yǎng)瓶同時放入儀器當中進行檢測，陽性瓶需要在3d之內報陽，而沒有接種的培養(yǎng)瓶一般始終為陰性。如果不能及時放置血培養(yǎng)瓶，則儀器始終為陽性，報陽結果總時間會出現延長。將培養(yǎng)瓶放置到系統(tǒng)之前會出現報陽時間延長，并且顯示出假陰性的情況，然后進行鑒定和藥敏試驗。為進一步對儀器報陽狀況加以分析，設計兩個小實驗進行進一步的探究。

1.2 方法

①實驗1：選擇濃度為1010cfu/mL的0.5麥氏單位的大腸桿菌細菌懸液10mL放置在4批次20只血培養(yǎng)瓶當中，并且根據不同時間所放置的血培養(yǎng)瓶依次放置在儀器當中，對報陽的時間進行觀察和記錄。

②實驗2：關于陽性瓶不同細菌濃度和報陽時間關系的實驗。首先將0.5麥氏單位的大腸桿菌懸液倍比稀釋成為一定的濃度的細菌懸液，然后選擇10mL分別加入到不同批次的20只血培養(yǎng)瓶當中，對報陽時間進行比較。

1.3 統(tǒng)計學分析

本文采用統(tǒng)計學軟件IBM SPSS25.0對本文中所有的資料標本數據進行統(tǒng)計學檢驗，文中的所有計量資料均選擇采用±s表示，同時選擇采用t值對所有的計量值進行檢驗；本文中的所有計數資料均選擇采用n、%進行表示，并且以χ2檢驗文中的所有計數值；本文的等級資料均采用秩和檢驗和Ridit分析進行檢驗，同時以Z值加以表示；P＜0.05說明差異存在統(tǒng)計學意義。

2.結果

從實驗1的結果來看，延遲放置血培養(yǎng)瓶的時間為30min，報陽時間為（29.25±4.25）h，延遲放置血培養(yǎng)瓶時間為6h，報陽時間為（27.45±3.82）h，延遲放置血培養(yǎng)瓶時間為12h，報陽時間為（23.05±2.16）h，延遲放置血培養(yǎng)瓶時間為24h，報陽時間為（15.45±2.7）h。

實驗結果顯示4批次20只血培養(yǎng)瓶儀器都能夠正常報陽，培養(yǎng)瓶放置到系統(tǒng)之中之前出現一定程度的生長，未出現假陰性讀數，只是總培養(yǎng)時間會存在相對延長，因此結果說明，BD血培養(yǎng)儀，自動化連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)存在允許延遲上機的功能，數據之間比較，P＜0.05。

從實驗2的結果進行分析可以得出，加入血培養(yǎng)瓶中細菌濃度為103，報陽時間為（66.25±83.45）h，加入血培養(yǎng)瓶中細菌濃度為104，報陽時間為（45.28±7.64）h，加入血培養(yǎng)瓶當中細菌濃度為105，報陽時間為（30.25±7.24）h，加入血培養(yǎng)瓶中細菌濃度為106，報陽時間為（27.45±5.81）h，加入血培養(yǎng)瓶中細菌濃度為107，報陽時間為（25.12±4.58）h，加入血培養(yǎng)瓶當中細菌濃度為108，報陽時間為（22.35±3.61）h。

實驗結果顯示4批次20只血培養(yǎng)瓶的儀器都能正常報陽，機器在細菌對數生長期可以及時報陽，能夠有效地排除存在假陽性的可能，而且大多數臨床感染的細菌生長周期為15min。因此結果能夠說明，當細菌濃度有足夠大的時候，如果血液不足1mL，則也可以檢測出菌血癥；如果標本量超過1mL，細菌量增大，血液標本量增加，儀器報陽時間越短，數據相互比較，P＜0.05。

3.討論

本文主要對BD血培養(yǎng)儀進行血液細菌培養(yǎng)的相關應用情況進行簡單的探討，同時總結相關的體會。臨床上因為各種病原菌的生長習性和環(huán)境存在差異，這也會導致在臨床檢驗的過程中明明存在涂片看見細菌的情況，但是實驗室卻無法培養(yǎng)出來的結果[2]。考慮因為可能存在苛養(yǎng)菌和厭氧菌等情況，所以需要對微生物的生長條件和環(huán)境進行細微的改善，實驗室硬條件能夠解決這些問題，但是真菌當中的一些菌種的培養(yǎng)所需時間相對較長，甚至有些需要在10d以上血培養(yǎng)報陽性，而形成的血流感染的真菌培養(yǎng)陽性率也會隨之增高。因為儀器本身存在問題也可能會導致血培養(yǎng)儀在進行檢驗的過程中出現假陽性，在進行檢驗的過程當中，因為血培養(yǎng)儀的培養(yǎng)槽存在不潔凈，會出現假陽性；如果溫度和濕度存在不合理，或者在進行培養(yǎng)的過程當中存在較大的一切噪聲，在極端氣候條件之下，也會出現假陽性的情況；因為人為對培養(yǎng)品檢驗狀態(tài)進行改善，這樣也可能會導致出現假陽性；除此以外，因為檢驗的白細胞濃度相對較高也容易出現假陽性。所以針對于此，BD血培養(yǎng)儀需要通過專門的負責人進行維護，做好整體的清潔和維護工作，如果存在異常，應該進行及時的處理。BD血培養(yǎng)儀雖然存在有延遲上機的功能，但是在培養(yǎng)瓶的運送當中，需要盡量減少延遲的時間；在進行正常的工作過程當中需要注意了解細菌的生長情況，了解細菌的特性，這能在很大程度上避免出現實驗誤差，保證計算的準確性。

綜上所述，BD血培養(yǎng)儀自動化連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)存在延遲上機的功能，血液標本量越大，那么儀器報陽的時間也就越短，如果不能及時地放置血培養(yǎng)瓶，儀器仍然存在報陽的情況，報陽的總時間會延長。