顧玉蘭，丘佳明，陳麗芳，宛傳丹△

(1.江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院腫瘤科 215500;2.江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院病理科 215500;3.江蘇省常熟市醫(yī)學(xué)檢驗所 215500)

細胞角質(zhì)蛋白作為上皮細胞的骨架重要分子，廣泛分布于正常組織細胞表面。在惡性上皮細胞中，因為異?；钴S的蛋白酶類促進了細胞的降解，使得大量細胞角質(zhì)蛋白可溶性片段釋放進入血液[1- 2]。其中細胞角質(zhì)蛋白19可溶性片段(CYFRA21- 1)是一種可用于診斷及評價非小細胞肺癌的腫瘤標記物，具有較高的敏感度和特異度[3- 5]。

指標的量化檢驗涉及參考區(qū)間的建立，其直接影響到臨床醫(yī)生對疾病的判斷。而腫瘤指標參考區(qū)間常受到種族、地域、年齡、性別及地區(qū)飲食習(xí)慣等眾多因素的影響。因此，國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(IFCC)建議應(yīng)結(jié)合本地區(qū)建立適用本地區(qū)實驗室的參考區(qū)間[6]。本文以統(tǒng)計學(xué)線性擬合法分析基于常熟市醫(yī)學(xué)檢驗所實驗室信息管理系統(tǒng)(LIS)現(xiàn)有的CYFRA21- 1檢驗數(shù)據(jù)建立間接參考區(qū)間，并與美國臨床和實驗室標準化委員會(CLSI)推薦的非參數(shù)法建立的參考區(qū)間進行比較，探尋更為便捷、省力且有效的參考區(qū)間驗證方案，為本地區(qū)提供更為精準的CYFRA21- 1參考區(qū)間。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集江蘇省常熟市LIS中2017年6月至2018年6月所有CYFRA21- 1的檢測數(shù)據(jù)。這些標本來源于本地區(qū)3家大型綜合醫(yī)院(江蘇省常熟市第一人民醫(yī)院、江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院和江蘇省常熟市中醫(yī)院)及各鄉(xiāng)鎮(zhèn)二級醫(yī)院、衛(wèi)生院等，記為臨床檢測組。納入標準為經(jīng)全面體檢和影像學(xué)檢查排除患有嚴重心、肺、腎、肝、腸、胃等基礎(chǔ)疾病；無內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等疾??；無腫瘤病史。排除妊娠期及哺乳期的女性。將2018年1-6月各醫(yī)院送檢的體檢健康者記為健康體檢組，兩組分別以不同的方法進行統(tǒng)計計算。

1.2CFYRA21- 1檢測 所有受檢者均在早晨、空腹、安靜狀態(tài)下采集靜脈血5 mL左右，室溫靜置30 min以上，2 h 內(nèi)分離血清，以3 000×g離心5 min。采用美國雅培公司的Architecti全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)及配套試劑進行檢測分析。方法為化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測法，質(zhì)控品及校準品均由美國雅培公司提供。每天質(zhì)控均在控，并做好記錄。

1.3數(shù)據(jù)整理 導(dǎo)出的原始數(shù)據(jù)剔除同一患者重復(fù)檢測數(shù)據(jù)，保存第1次有效數(shù)據(jù)。排除臨床診斷為腫瘤相關(guān)疾病的患者檢測數(shù)據(jù)。以統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS20.0四分位法將大于P75+3×(P75-P25)的數(shù)據(jù)作為離群值剔除。將最終有效數(shù)據(jù)用SPSS20.0軟件分析其頻數(shù)分布。

2 結(jié) 果

2.1原始數(shù)據(jù)與篩選結(jié)果 2017年6月至2018年6共檢測CYFRA21- 1 28 899例，依據(jù)四分位法統(tǒng)計分析檢測值，將大于P75+3(P75-P25)的數(shù)據(jù)作為離群值剔除。再根據(jù)納入標準剔除無效數(shù)據(jù)，最后經(jīng)過篩選后得臨床檢測組有效數(shù)據(jù)16 550例，年齡20～100歲，平均(63.11±14.43)歲；其中男9 624例，女6 926例。健康體檢組共818例，經(jīng)過篩選后得有效數(shù)據(jù)806例，年齡19～84歲，平均(41.11±12.10)歲；其中男570例，女236例。將數(shù)據(jù)依次按性別、年齡進一步分為男青年組、男老年組、女青年組、女老年組進行研究，結(jié)果見表1。年齡與CYFAR21- 1數(shù)據(jù)頻率分布直方圖，見圖1、2。

A：臨床檢測組；B：健康體檢組

圖1CYFAR21-1檢測值頻率分布直方圖

A：臨床檢測組；B：健康體檢組

圖2年齡頻率分布直方圖

2.2線性擬合法計算參考區(qū)間 通過R語言軟件利用LIS信息系統(tǒng)里存儲的CYFRA21- 1臨床檢測數(shù)據(jù)建立的累積頻率分布直方圖見圖1，通過擬合線性回歸方程，求得95%參考區(qū)間，見表1。

表1 LIS存儲臨床數(shù)據(jù)組血清CYFRA21- 1間接參考區(qū)間

A：男青年組;B:女青年組;C：男老年組;D:女老年組

圖3CYFRA21-1累積頻率分布圖(A、B兩點

間數(shù)據(jù)代表最佳線性)

2.3非參數(shù)法計算參考區(qū)間 對CYFRA21- 1進行正態(tài)分布檢驗顯示，樣本各組數(shù)據(jù)呈現(xiàn)偏態(tài)分布(P<0.05)，參考區(qū)間的建立應(yīng)取其右單側(cè)第95百分位數(shù)作為參考上限。采用中位數(shù)M及四分位數(shù)(P25,P75)來描述各組數(shù)據(jù)。見表2。

表2 健康體檢組血清CFRA21- 1參考區(qū)間

2.4兩種方案參考區(qū)間比較 兩種方案數(shù)據(jù)來自不同人群樣本，通過t檢驗比較發(fā)現(xiàn)兩種方案得出的各分組參考區(qū)間之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 兩種方案參考區(qū)間比較分析

3 討 論

血清CYFRA21- 1是肺癌，特別是非小細胞肺癌最為敏感的腫瘤標記物，常用于監(jiān)測非小細胞肺癌的病程[5]。其特異性較強，可用于肺癌與肺炎、肺結(jié)核、慢性阻塞性肺炎等肺部疾病的鑒別診斷。同時，血清CYFRA21- 1針對非小細胞肺癌化療等效果的評價與預(yù)后評估也具有十分重要的臨床意義[3，9]。血清CYFRA21- 1參考區(qū)間對于臨床上非小細胞肺癌診斷至關(guān)重要，而不同種族人群、不同地區(qū)及年齡、性別等均可影響到參考區(qū)間的設(shè)立。文獻檢索顯示，國內(nèi)僅有3篇論文涉及CYFRA21- 1的參考區(qū)間建立與設(shè)定[7- 8]。3個地區(qū)(上海、蘇州、南通)所采用的方法不完全相同，且得出的結(jié)論之間存在差異。上海、蘇州地區(qū)均以非參數(shù)百分位法建立參考區(qū)間，取95%百分位數(shù)為上限[10- 11]。該方法樣本較小，粗略地估算了參考區(qū)間。南通地區(qū)以體檢與醫(yī)院存儲數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，以科學(xué)統(tǒng)計方法評估出最適用于該地區(qū)的參考范圍，數(shù)據(jù)精準可靠。常熟地區(qū)自2010年江蘇省常熟市醫(yī)學(xué)檢驗所成立后，將本地區(qū)所有檢驗資源整合一起，質(zhì)量管理體系通過ISO15189認可，建立了完善的LIS，保存了大量臨床樣本檢測數(shù)據(jù)。據(jù)國外文獻研究，參考區(qū)間可以基于當前數(shù)據(jù)，通過相關(guān)統(tǒng)計算法建立[12- 13]。

本文研究以兩種常用的方法來推導(dǎo)參考區(qū)間，一是建立在本地區(qū)成年人人群檢驗數(shù)據(jù)基礎(chǔ)之上；二是建立在健康成年人群樣本庫，以統(tǒng)計學(xué)方法演算出參考區(qū)間。通過分析，兩種方法的結(jié)果與廠家提供的均存在一定差異。廠家說明書的參考區(qū)間為0～3.3 ng/mL，該參考區(qū)間不分青年組(20～45歲)及老年組(>45歲)。而本研究建立在LIS大數(shù)據(jù)分析基礎(chǔ)上，得出的常熟地區(qū)血清CYFRA21- 1男青年組95%間接參考區(qū)間為0～3.49 ng/mL；男老年組95%間接參考區(qū)間為0～3.84 ng/mL。女青年組95%間接參考區(qū)間為0～2.74 ng/mL；女老年組95%間接參考區(qū)間為0～3.03 ng/mL。男性參考區(qū)間上限高于女性，且老年組要高于青年組，與原參考區(qū)間上限也存在差異。另一方案通過建立在本地區(qū)健康人群的血清CYFAR21- 1檢測數(shù)據(jù)上的分析顯示，血清CYFAR21- 1 男青年組95%參考區(qū)間上限為3.35 ng/mL；男老年組95%參考區(qū)間上限為3.52 ng/mL；女青年組95%參考區(qū)間上限為3.18 ng/mL；女老年組95%參考區(qū)間上限為3.21 ng/mL。此方案與第一種方案得出的參考區(qū)間相比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這與周邊地區(qū)研究報道結(jié)果相一致[10- 11]。常熟地區(qū)成年人血清CYFAR21- 1參考區(qū)間上限男性要高于女性，老年組高于青年組。年齡與性別是影響常熟地區(qū)成年人血清CYFAR21- 1參考區(qū)間的重要因素，實驗室在設(shè)立參考區(qū)間應(yīng)區(qū)別對待，分組設(shè)定[14]。

通過臨床檢測數(shù)據(jù)計算參考區(qū)間的主要不足在于臨床送檢數(shù)據(jù)中包含大量疾病患者數(shù)據(jù)。因此對數(shù)據(jù)進行仔細篩選十分重要，這將直接影響到結(jié)果的正確性[15]。本文通過仔細篩選，統(tǒng)計分析得到的結(jié)果與以健康人群建立的參考區(qū)間，兩者間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，說明該方法可以運用于臨床檢驗計量項目參考區(qū)間的建立。而該方法的主要優(yōu)勢在于其針對的主要人群與該指標的適用人群相對應(yīng)，即不以另一人群的參考值來判別本人群的異常情況。同時，該方法基于的數(shù)據(jù)雖然龐大，但不需另行設(shè)計實驗來進行抽樣分析，可以節(jié)省大量的人力與物力。

綜上所述，通過對常熟地區(qū)成年人血清CYFRA21- 1參考區(qū)間的精準設(shè)定，既能指導(dǎo)醫(yī)師對病情做出準確判斷，又能避免給患者造成不必要的心理恐慌與過度的醫(yī)療檢查。