[摘要]目的：對(duì)葛根素分散片的制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)其溶出進(jìn)行考察。方法：采用單因素及正交實(shí)驗(yàn)，以崩解時(shí)間為指標(biāo)對(duì)工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定輔料的種類(lèi)及用量，并對(duì)工藝確證后的樣品進(jìn)行溶出度研究。結(jié)果：得到最佳處方組成：每片中含葛根素磷脂復(fù)合物固體分散體0.35 g，微晶纖維素0.45 g，交聯(lián)羧甲纖維素鈉0.09 g，微粉硅膠0.07 g，其他由矯味劑補(bǔ)足處方量。同時(shí)測(cè)得葛根素分散片在0.1 mol/L的鹽酸溶液中15 min的累積溶出已達(dá)90%。結(jié)論：本研究工藝制備的葛根素分散片溶出速率快、分散均勻，值得進(jìn)一步開(kāi)展工業(yè)化生產(chǎn)。

[關(guān)鍵詞]葛根素;分散片;制備工藝;溶出度

[中圖分類(lèi)號(hào)]TQ 461[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A[文章編號(hào)]1005-0310（2019）04-0052-05

A Study on the Optimization of Preparation Technology and

Dissolution of Puerarin Dispersible Tablets

Cao Xu

（Jiangsu Jibrier Pharmaceutical Joint Stock Co.， Ltd.， Zhenjiang Jiangsu 212009， China）

Abstract： Objective： The preparation technology of puerarin dispersible tablets was optimized and its dissolution was investigated. Methods： Single factor and orthogonal experiments were used to optimize the process with disintegration time as the index， so as to determine the types and dosage of excipients， and to study the dissolution of the samples after the process was confirmed. Results： The optimum prescription composition was obtained as follows： solid dispersion containing puerarin phospholipid complex 0.35g， microcrystalline cellulose 0.45g， croscarmellose sodium 0.09g， aerosol 0.07g in each tablet， and other prescriptions were supplemented by flavor modifiers. At the same time， the cumulative dissolution of puerarin dispersible tablets in 0.1 mol/L hydrochloric acid solution for 15 minutes reached 90%. Conclusion： The puerarin dispersible tablets prepared by this technology have fast dissolution rate and uniform dispersion， which is worthy of further industrial production.

Keywords： Puerarin; Dispersible tablets; Preparation technology; Dissolution

葛根為豆科植物野葛Pueraria Lobata （Willd.） Ohwi的干燥根，味甘、辛，性涼，歸脾、胃、肺經(jīng)，具有解肌退熱、生津止渴、透疹、升陽(yáng)止瀉、通經(jīng)活絡(luò)、解酒毒之功效[1]。葛根素是中藥葛根的指標(biāo)性成分，現(xiàn)代藥理研究表明其能降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)血脂和抗氧化、抗癌及保護(hù)視網(wǎng)膜等作用[2-7]。但葛根素水溶性較差，口服生物利用度低，限制了其臨床應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)將葛根素制成固體速釋分散片，提高其溶解度，改善吸收，以便有效提高生物利用度，為其藥品及保健食品的開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1材料

1.1儀器

島津UV2600紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，超聲波清洗機(jī)，RC806D溶出試驗(yàn)儀，電子天平，真空干燥箱，微型粉碎機(jī)。

1.2藥品與試劑

葛根藥材（購(gòu)于安徽亳州）;葛根素對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，純度≥98%，批號(hào)：110752-201514）;卵磷脂、乳糖、甘露醇、淀粉、微晶纖維素（MCC）、羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、交聯(lián)聚維酮（PVPP）、交聯(lián)羧甲纖維素鈉（CCNa）、碳酸鈣、碳酸氫鈣及微粉硅膠為藥用輔料級(jí);注射用水（自制）;其他試劑均為分析純。

2方法和結(jié)果

2.1葛根素的提取純化工藝

取葛根藥材，粉碎，過(guò)40目篩，12倍量的50%乙醇80 ℃回流提取2次，合并兩次提取液，回收乙醇至無(wú)醇味，采用AB-8大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，依次用水、20%乙醇、40乙醇各洗脫2BV以除水溶性雜質(zhì)及醇溶性雜質(zhì)，50%乙醇洗脫并收集洗脫液，回收乙醇并真空干燥得葛根素樣1。將此葛根素樣1經(jīng)硅膠柱層析純化，二氯甲烷∶甲醇（5∶1）洗脫并重結(jié)晶，經(jīng)HPLC檢測(cè)葛根素純度為95.73%。

2.2葛根素分散片的制備

將一定量的葛根素和卵磷脂（1∶1）混合溶于無(wú)水乙醇中，于30 ℃水浴中反應(yīng)2 h，減壓除去乙醇，收集固化物。取一定量的固化物和PEG4000

按1∶2比例混合，充分研磨，噴入少量無(wú)水乙醇，繼續(xù)研磨成均一的棕黃色半固體物，60 ℃真空干燥3 h，轉(zhuǎn)至-20 ℃冰箱中固化24 h，取出粉碎過(guò)80目篩，置棕色試劑瓶?jī)?chǔ)存?zhèn)溆?。將葛根素磷脂?fù)合物固體分散體與一定量的抗粘劑初混后過(guò)100目篩，按等量遞增的方法與其他輔料（如填充劑、崩解劑、矯味劑等）混合均勻后全粉末直接壓片制備。

2.3葛根素分散片的處方篩選

對(duì)分散片處方中的填充劑、崩解劑、抗粘劑的種類(lèi)和用量進(jìn)行考察，矯味劑暫不列入處方篩選中考察。

2.3.1不同填充劑對(duì)分散片的影響

選擇分散片常用的乳糖、甘露醇、淀粉、微晶纖維素（MCC）等填充劑進(jìn)行考察，將上述填充劑烘干后過(guò)100目篩，與葛根素磷脂復(fù)合物固體分散體混合均勻，同壓力下壓片，對(duì)分散片的硬度及崩解時(shí)間進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果顯示，不同種類(lèi)的填充劑對(duì)分散片的崩解時(shí)間有顯著影響。以MCC為填充劑時(shí)片劑硬度較大且崩解時(shí)間較短，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中也發(fā)現(xiàn)其崩解的顆粒最小，故選擇MCC作為填充劑。

2.3.2不同崩解劑對(duì)分散片的影響

選擇常用的羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、交聯(lián)聚維酮（PVPP）、交聯(lián)羧甲纖維素鈉（CCNa）等崩解劑進(jìn)行考察，將填充劑及上述各崩解劑烘干后過(guò)100目篩，與藥物混合均勻，同壓力下壓片，對(duì)分散片的硬度及崩解時(shí)間進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)表2。

結(jié)果顯示，采用CCNa崩解時(shí)間最短，硬度合適，故選擇CCNa作為崩解劑。

2.3.3不同抗粘劑對(duì)分散片的影響

選擇碳酸鈣、碳酸氫鈣及微粉硅膠等抗粘劑進(jìn)行考察，各處方填充劑及崩解劑用量相同，各輔料均在60℃烘干并經(jīng)100目篩，與藥物混合均勻，壓片，測(cè)定各處方片劑的硬度和崩解時(shí)間，結(jié)果見(jiàn)表3。

結(jié)果顯示，加入抗粘劑微粉硅膠可以顯著改善分散片的崩解時(shí)間，并能夠保持一定的硬度，故選擇微粉硅膠作為抗粘劑。

2.4葛根素分散片的處方優(yōu)化

通過(guò)上述單因素篩選實(shí)驗(yàn)，選擇以MCC作為填充劑，CCNa作為崩解劑，微粉硅膠作為抗粘劑，采用粉末直接壓片制備葛根素分散片。為考慮病人的服用劑量與順應(yīng)性，認(rèn)為片重1 g較合適。

2.4.1正交實(shí)驗(yàn)

以崩解時(shí)間為考察指標(biāo)，以MCC、CCNa及微粉硅膠為影響因素，每個(gè)因素確定3個(gè)水平，選用L9（34）正交表確定主要輔料的最佳組合，見(jiàn)表4、表5所示。每片含葛根素磷脂復(fù)合物固體分散體0.35 g，按正交表的輔料組合制備分散片，按《中華人民共和國(guó)藥典》四部0101片劑分散片的“分散均勻性”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測(cè)定各處方的崩解時(shí)間，從而進(jìn)行直觀及方差分析，見(jiàn)表6。

由正交結(jié)果直觀分析，能夠有效降低分散片崩解時(shí)間的輔料排序?yàn)椋篊CNa>微粉硅膠>MCC，且由方差分析可知，三者對(duì)崩解時(shí)間均有顯著影響。由上述可知，最優(yōu)的處方組成為A2B3C3，即每片中含葛根素磷脂復(fù)合物固體分散體0.35 g，MCC 0.45 g，CCNa 0.09 g，微粉硅膠0.07 g，其他由矯味劑補(bǔ)足處方量。

2.4.2片劑硬度對(duì)分散片崩解的影響

分別在不同的壓力下壓片，各個(gè)硬度范圍的分散片取3片測(cè)定崩解時(shí)間，結(jié)果見(jiàn)表7。

結(jié)果顯示，片劑硬度對(duì)分散片的崩解時(shí)間影響較大，崩解時(shí)間均符合藥典要求，但實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，樣品1易碎，樣品3硬度最高，考慮隨著儲(chǔ)藏過(guò)程延長(zhǎng)使崩解進(jìn)一步變慢，以致崩解不合格，綜合考慮硬度在6～8 kg最為合適。

2.4.3工藝確證實(shí)驗(yàn)

按上述優(yōu)化的處方組合，放大制備3批葛根素分散片，每批1 000片，按《中華人民共和國(guó)藥典》四部0101片劑分散片的“分散均勻性”測(cè)定每批的樣品崩解時(shí)間，見(jiàn)表8。

2.5溶出度考察

2.5.1測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

配制一定量的葛根素對(duì)照品溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，結(jié)果葛根素在250 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，且全輔料的陰性對(duì)照溶液在此波長(zhǎng)處無(wú)吸收，不干擾其測(cè)定，故確定250 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系

稱(chēng)取葛根素對(duì)照品適量于25 mL容量瓶中，精密稱(chēng)定，用0.1 mol/L的HCl溶液溶解并定容至刻度，得質(zhì)量濃度為0.404 8 mg/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別精密吸取上述對(duì)照品儲(chǔ)備溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL于10 mL容量瓶中，用0.1 mol/L的HCl溶液定容至刻度，搖勻，分別得0.004 048、0.008 096、0.012 144、0.016 192、

0.02 024 mg/mL的葛根素對(duì)照品溶液。在250 nm處測(cè)定吸光度（Y），以吸光度（Y）對(duì)質(zhì)量濃度（X）進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=60.18X+0.027 5（r=0.999 9），結(jié)果表明葛根素在0.004 048～0.020 24 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5.3精密度

取同一葛根素對(duì)照品溶液，在250 nm處重復(fù)測(cè)定6次，記錄吸光度，得吸光度的RSD為0.27%，表明儀器精密度良好。

2.5.4重復(fù)性

取葛根素分散片10片，研磨充分，精密稱(chēng)取細(xì)粉0.2 g（相當(dāng)于葛根素11.17 mg）于100 mL量瓶中，加0.1 mol/L的HCl溶液適量，超聲5 min，再加0.1 mol/L的HCl溶液定容至刻度，搖勻。精密量取上述溶液1 mL于10 mL量瓶中，加0.1 mol/L的HCl溶液定容至刻度，搖勻，在250 nm處測(cè)定6次，計(jì)算得葛根素含量為98.95%，RSD為0.86%，表明方法重復(fù)性良好。

2.5.5穩(wěn)定性

取“2.5.4重復(fù)性”的同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12 h在250 nm處測(cè)定吸光度，結(jié)果吸光度的RSD為0.98%，表明樣品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5.6溶出度方法

采用《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版四部0931第一法裝置[8]，以pH值1.0的鹽酸溶液900 mL作為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度37 ℃±0.5 ℃，定時(shí)取樣5 mL，并及時(shí)補(bǔ)加等量溶液，樣液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，棄去初濾液，取2 mL續(xù)濾液稀釋定容至10 mL，在250 nm處測(cè)定吸光度，并計(jì)算葛根素的累積釋放度，結(jié)果見(jiàn)圖1。

3討論

固體分散體制備方法較多，但本研究中葛根素與卵磷脂只是以氫鍵等分子作用力結(jié)合，溶劑法、噴霧干燥法或者熔融法等會(huì)降低其分子間作用力或者降低其復(fù)合物的穩(wěn)定性，故采用研磨法將其與親水性基質(zhì)PEG4000制備固體分散體較為合適。

分散片的工藝篩選關(guān)鍵是使得片劑在遇水后3 min崩解成分散均勻的顆粒，以顯著提高其溶出度。本研究進(jìn)一步考察了填充劑、崩解劑及抗粘劑的種類(lèi)與用量。MCC作為填充劑，亦具有較好的崩解作用，它具有很高的水合能力，能夠?qū)⑺杆傥盏狡瑒┲?，增加片劑?nèi)部的溶脹力，與崩解劑CCNa合用增強(qiáng)片劑的崩解效果。CCNa的親水性與溶脹性均很強(qiáng)，能破壞分子間氫鍵，但CCNa的用量需適宜，過(guò)多的CCNa會(huì)形成凝膠反而抑制其溶出。微粉硅膠是表面疏松多孔的水不溶性惰性輔料，可使得葛根素磷脂復(fù)合物固體分散體的粘性顯著降低，并提高片劑的硬度，使得片劑在較硬的硬度下仍具有較快的崩解。

本研究以崩解時(shí)間為指標(biāo)，采用單因素考察了片劑中填充劑、崩解劑、抗粘劑的種類(lèi)并采用L9（34）正交設(shè)計(jì)對(duì)處方中填充劑、崩解劑、抗粘劑的用量進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳處方組合。結(jié)果表明，最佳處方組合為每片中含葛根素磷脂復(fù)合物固體分散體0.35 g，MCC 0.45 g，CCNa 0.09 g，微粉硅膠0.07 g，其他由矯味劑補(bǔ)足處方量。該處方全粉末壓片制備葛根素分散片硬度合適、崩解迅速、分散均勻、工藝穩(wěn)定，且溶出度高，值得進(jìn)一步開(kāi)展工業(yè)化生產(chǎn)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典：一部[S]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015： 333.

[2]楊蕾，舒孌，姚冬冬，等. 葛根素對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠降糖作用[J]. 中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2014， 34（16）： 1338-1342.

[3]徐婷，褚江洪，丁萍英，等. 葛根素對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制作用機(jī)理的探討[J]. 中國(guó)生化藥物雜志，2015， 35（1）： 43-45.

[4]劉劍，段素萍，喬著意，等. 葛根素對(duì)肥胖型高血壓大鼠血壓和血管功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012， 12（10）： 1858-1861.

[5]方新華，盧曉，吳國(guó)清. 葛根素對(duì)妊娠期糖尿病大鼠調(diào)節(jié)血脂和抗氧化作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2016， 34（6）： 1504-1507.

[6]張衛(wèi)國(guó). 葛根素對(duì)人肝癌細(xì)胞系SMMC-7721細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其分子機(jī)制研究[D]. 山東：山東大學(xué)，2016.

[7]張益群，張麗敏. 葛根素對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變血流動(dòng)力學(xué)及流變學(xué)的影響[J]. 國(guó)際眼科雜志，2013， 13（10）： 2057-2059.

[8]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典：四部[S]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015： 122-124.

（責(zé)任編輯李亞青）

[收稿日期]2019-05-24

[作者簡(jiǎn)介]曹旭（1988—），男，江蘇揚(yáng)中人，江蘇吉貝爾藥業(yè)股份有限公司工程師，碩士，主要從事新藥制劑及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E-mail：yz.caoxu@foxmail.com