張雅麗 佘文莉 劉暉

[摘要]目的：觀察850nm波長(zhǎng)微激光對(duì)皮膚的美白效果以及聯(lián)合化妝品（無(wú)限極美白精華乳，生產(chǎn)批號(hào)20150915）對(duì)人體皮膚的調(diào)理作用。方法：將60名符合條件的就醫(yī)者隨機(jī)編號(hào)，按照單雙號(hào)分為①組和②組。照射光源為850nm微激光（Near Infrared，NIR），照射區(qū)域?yàn)樽笄氨蹆?nèi)側(cè)區(qū)域。其中手臂內(nèi)側(cè)區(qū)域又分為a和b兩個(gè)小區(qū)域（a區(qū)域最外沿與肘部關(guān)節(jié)線重合），其中b區(qū)域（b區(qū)域最內(nèi)沿與肘部關(guān)節(jié)線重合）用以涂抹美白化妝品。①組每位就醫(yī)者NIR光僅照射左臂2.5min;②組每位就醫(yī)者NIR光僅照射左臂5min，隔天照射1次，每周3次，持續(xù)8周。右前臂內(nèi)側(cè)a區(qū)域不進(jìn)行光照僅作為空白對(duì)照，b區(qū)域涂抹美白護(hù)膚品作為試劑組。以皮膚的黑色素水平為評(píng)價(jià)指標(biāo)，應(yīng)用光纖光譜儀、皮膚黑色素測(cè)試儀測(cè)定試驗(yàn)前后皮膚同一位置的黑色素水平，進(jìn)行定性、定量分析。結(jié)果：試驗(yàn)前后就醫(yī)者手臂內(nèi)側(cè)的黑色素平均值變化較空白對(duì)照組明顯，NIR光照射區(qū)域的黑色素降低率較空白對(duì)照組明顯變小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。試驗(yàn)中選用了兩種劑量，即照射2.5min和5min（均為850nm光源），兩者引起的美白效果差異不顯著;光照與美白護(hù)膚品聯(lián)合使用未發(fā)現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)。結(jié)論：NIR（850nm）微激光照射可以有效地減少皮膚中黑色素的含量，具有較好的美白效果。與護(hù)膚品的聯(lián)合使用在本試驗(yàn)中未得到較好的協(xié)同效果，在試驗(yàn)結(jié)束后的跟蹤觀察中兩者的協(xié)同效應(yīng)表現(xiàn)明顯。

[關(guān)鍵詞]微激光;美白護(hù)膚品;皮膚美白;效果評(píng)價(jià);黑色素水平;協(xié)同效應(yīng)

[中圖分類(lèi)號(hào)]TQ658.2 ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A ? ?[文章編號(hào)]1008-6455（2019）05-0060-04

Evaluation and Effect of Micro Laser on Skin Whitening

ZHANG Ya-li1，SHE Wen-li1，LIU Hui1，XIE Shan1，XIE Guang-hui1，LIU Zhi-ming2，YE Bing-gang2

（1.Department of Plastic Surgery Laser Cosmetology，the First Affiliated Hospital of Jinan University，Guangzhou 510630，Guangdong，China; 2.Institute of Photon Chinese Medicine，South China Normal University，Guangzhou 510631，Guangdong，China）

Abstract： Objective ?Observe the conditioning effect of 850nm wavelength micro-laser on human skin whitening and the conditioning effect of combined cosmetics on human skin. Methods ?Sixty eligible patients were randomly numbered and divided into group 1 and group 2 according to single or double numbers.The irradiation source was 850nm Near Infrared （NIR）， and the irradiation area was the medial area of the left forearm.The inner side of the arm is divided into two small areas， a and b（the outermost edge of area a coincides with the elbow articular line， and the inmost edge of area B coincides with the elbow articular line）， and the b area is used to apply whitening cosmetics.Group 1 per patient left arm only irradiated with NIR light 2.5 min;Group 2 per patient left the NIR light for only 5 min， once every other day， 3 times a week for 8 weeks.The area inside the right forearm was not illuminated as a blank control group， and the b area was painted with a whitening skin care product as a test group.The melanin level of the skin was used as an evaluation index， and the melanin level at the same position of the skin before and after the test was measured by a fiber spectrometer and a skin melanin tester for qualitative and quantitative analysis. Results ?The mean value of melanin in the inner side of the patient's arm before and after the test was significantly higher than that in the control group. The rate of melanin reduction in the NIR light irradiation area was significantly smaller than that in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）.In the experiment， two doses of 2.5 min and 5 min irradiation （both 850nm light source） were selected， and there was no significant difference in whitening effect between the two doses; No synergistic effect was found in the combination of light and whitening skin care products. Conclusion ?NIR （850nm） micro laser irradiation can be effectively reduced content of melanin in the skin and has good whitening effect.The combined use of micro-laser irradiation and skin care products did not achieve a good synergistic effect in this test， and the synergistic effect of the two in the follow-up observation after the end of the experiment was obvious.

Key words： micro laser; skin whitening cosmetics ;skin whitening; effect evaluation; melanin levels;synergistic effect

微激光是指在激光生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域中，光源強(qiáng)度不會(huì)對(duì)生物組織造成不可逆性損傷的低功率激光，主要包括低強(qiáng)度的半導(dǎo)體激光器（Laser Diode，LD）和發(fā)光二極管（Light Emitting Diode，LED）。常見(jiàn)的微激光光源是波長(zhǎng)為632.8nm的He-Ne激光，目前已有大量文獻(xiàn)證明其具有緩解疼痛、加速傷口愈合、減少瘢痕組織、降低血液粘稠度和增加血細(xì)胞變形性等功效。在皮膚學(xué)科領(lǐng)域中，LED作為一種安全、小巧的光源已經(jīng)被用于皮膚的緊致、祛痘及祛斑等用途中，這種基于LED微激光皮膚美容療法是安全、有效的且無(wú)副作用，但這種美容效應(yīng)與LED的波長(zhǎng)直接相關(guān)[1]。目前最常見(jiàn)的美白方法是涂抹含有美白化學(xué)成分的化妝品?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)人工合成的多種化學(xué)物質(zhì)具有祛黑色素的功效，如曲酸、乙二胺四乙酸、對(duì)苯二酚和熊果苷等。然而，這些化學(xué)合成的美白劑常常引起皮膚炎癥反應(yīng)和紅斑等副作用[2]，甚至有文獻(xiàn)報(bào)道其有致癌的可能性[3]，同時(shí)化妝品的效果還會(huì)受到出汗、雨水等環(huán)境因素的干擾。采用物理方法進(jìn)行皮膚美白能夠在很大程度上避免因與皮膚直接接觸帶來(lái)的麻煩。激光祛斑及光子嫩膚是兩種較成熟的祛黑色素的光學(xué)方法。這兩種物理美容方法采用的是強(qiáng)激光或強(qiáng)脈沖光為光源，這類(lèi)光源往往能量大，很容易造成皮膚灼傷、水腫及炎癥后色素沉著等較嚴(yán)重的副作用[4];另外，這類(lèi)美容儀器往往體積龐大，價(jià)格昂貴。作為安全性很高的非熱型光源，LED的光生物調(diào)制效應(yīng)也已經(jīng)受到極大關(guān)注。根據(jù)Kim等[5]的研究成果，本課題組選用850nm微激光作為美白光源，研究其對(duì)皮膚美白效果的影響。

1 ?資料和方法

1.1 臨床資料：就醫(yī)者篩選：①入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡35～55歲的健康就醫(yī)者60例，女性，皮膚Fitzpatrick類(lèi)型為Ⅲ型和Ⅳ型、能?chē)?yán)格遵照研究方案的要求并簽署知情同意書(shū);②排除標(biāo)準(zhǔn)：面部有急性炎癥或其他皮膚疾病者、有過(guò)敏體質(zhì)，30d內(nèi)參加藥物臨床試驗(yàn)或正在參加其他化妝品人體安全性和功效試驗(yàn)者，不能配合試驗(yàn)者;③剔除標(biāo)準(zhǔn)：研究過(guò)程中出現(xiàn)不良反應(yīng)、失訪或違反研究方案以及其他特殊原因要求退出者。

1.2 治療方案：照射光源：NIR光（850nm，40mW/cm2，華南師范大學(xué)光子中醫(yī)學(xué)研究所研制）。照射部位：健康就醫(yī)者左前臂內(nèi)側(cè)區(qū)域（NIR光）。其中手臂內(nèi)側(cè)區(qū)域又分為a和b兩個(gè)小區(qū)域（a區(qū)域最外沿與肘部關(guān)節(jié)線重合），其中b區(qū)域（b區(qū)域最內(nèi)沿與肘部關(guān)節(jié)線重合）用以涂抹美白化妝品。

1.3 操作方法：a.每組就醫(yī)者選用相應(yīng)的NIR光參數(shù)。分組情況：每組30例，組別①每位就醫(yī)者NIR光僅照射左臂2.5min;組別②每位就醫(yī)者NIR光僅照射左臂5min。照射頻率：隔天照射1次，每周3次，持續(xù)8周。單次累積照射劑量分別為①組24J/cm2、②組48J/cm2;b.就醫(yī)者提前30min進(jìn)入測(cè)試環(huán)境，清潔手臂，操作人員對(duì)左右手臂的b區(qū)域進(jìn)行涂抹測(cè)試美白化妝品（美白精華乳，無(wú)限極（中國(guó)）有限公司），靜息15min待測(cè);c.就醫(yī)者等待期間，操作人員對(duì)照射裝置進(jìn)行參數(shù)設(shè)置;d.就醫(yī)者坐于測(cè)試椅上，手臂平伸，保持內(nèi)側(cè)手臂向上，進(jìn)行NIR光照射;e.操作人員根據(jù)示意圖調(diào)整照射裝置保證照射頭正對(duì)照射區(qū)域，以①組或②組的照射劑量開(kāi)始照射。右側(cè)區(qū)域采用虛假光照射（設(shè)為對(duì)照）;f.照射完成后，關(guān)閉照射裝置電源。

1.4 注意事項(xiàng)：①每位就醫(yī)者應(yīng)享有充分的知情權(quán)，并簽署知情同意書(shū);②每次操作完成均需做好微激光照射記錄，并需就醫(yī)者簽名;③就醫(yī)者測(cè)試期間應(yīng)注意受試區(qū)域的保護(hù)，不可涂抹會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)的緊致、美白類(lèi)相關(guān)化妝品，建議用不含活性成分的保濕霜對(duì)該部位進(jìn)行日常護(hù)理。

1.5 效果評(píng)價(jià)：美白評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：皮膚黑色素水平。檢測(cè)儀器：光纖光譜儀（海洋光學(xué)，USB2000+UV-VIS）、皮膚黑色素測(cè)試儀（Skin Analyzer SHM100（德國(guó)CK公司））。

皮膚黑色素測(cè)試儀可測(cè)定皮膚組織中黑色素的吸收光譜，得出皮膚中黑色素含量的量化值。受試前預(yù)先對(duì)皮膚原有黑色素水平進(jìn)行第一次測(cè)定，在左右臂每個(gè)試驗(yàn)區(qū)域?qū)ΨQ(chēng)取3點(diǎn)測(cè)試，測(cè)試結(jié)果計(jì)算平均值。然后在試驗(yàn)期每2周進(jìn)行一次檢測(cè)，測(cè)試方法同前。量化的數(shù)據(jù)用于下一步的統(tǒng)計(jì)分析。再用光纖光譜儀測(cè)定左右臂每個(gè)試驗(yàn)區(qū)域的光譜，各3點(diǎn)，數(shù)據(jù)儲(chǔ)存于計(jì)算機(jī)中，待試驗(yàn)結(jié)束后分析。

1.6 數(shù)據(jù)分析：采用PASW 18.0軟件對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較，結(jié)果以（x?±s）表示。采用t檢驗(yàn)方法進(jìn)行顯著性分析檢驗(yàn)，其中P<0.05表示有顯著性差異，P<0.01表示差異極顯著。

2 ?結(jié)果

2.1 試驗(yàn)前后黑色素水平變化分析：以皮膚中黑色素水平的變化為指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)微激光的美白效應(yīng)。采用光纖光譜儀和黑色素皮膚測(cè)定儀對(duì)黑色素水平進(jìn)行定性及定量分析。數(shù)據(jù)共采集3次（試驗(yàn)前、試驗(yàn)中期、試驗(yàn)結(jié)束），每個(gè)檢測(cè)區(qū)域采集3個(gè)點(diǎn)，取平均值。采用PASW 18.0數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)所有檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

試驗(yàn)前后就醫(yī)者手臂內(nèi)側(cè)的黑色素平均值的變化情況（見(jiàn)表1）?？梢钥吹胶谏仄骄悼傮w上呈現(xiàn)出一個(gè)逐漸變小的趨勢(shì)?？赡苡捎谠囼?yàn)時(shí)間處于冬季，未經(jīng)任何處理的空白對(duì)照組的黑色素值也有一定的降低，但降低幅度不高;試驗(yàn)組降低的幅度更加明顯。試驗(yàn)前后照片見(jiàn)圖1～2。

2.2 各處理組間黑色素降低率比較：進(jìn)一步對(duì)上述黑色素降低趨勢(shì)進(jìn)行量化分析，將試驗(yàn)后的黑色素值除以試驗(yàn)前的值可得到經(jīng)過(guò)NIR光照處理后的黑色素降低率（見(jiàn)表2）?？梢园l(fā)現(xiàn)，因環(huán)境的變化，空白組的黑色素發(fā)生了一定的降低。試劑組區(qū)域涂抹了美白精華乳（無(wú)限極（中國(guó)）有限公司），該組黑色素也有一定的降低，但降低幅度不高，僅與空白組相當(dāng)。選用NIR光照射區(qū)域的降低率明顯減小，在兩個(gè)照射劑量下分別為0.85±0.074（2.5 min）和0.85±0.049（5min），表明NIR照射能夠較明顯地降低皮膚的黑色素含量。采用單因素方差分析方法對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得到結(jié)果如圖3。試劑組與空白組間并未發(fā)現(xiàn)有顯著性差異，可能原因?yàn)榫歪t(yī)者在試驗(yàn)期間使用美白精華乳的次數(shù)較少，僅僅在每次微激光照射時(shí)才涂抹一點(diǎn)，而微激光照射每周才照射3次，遠(yuǎn)少于化妝品的日常使用頻次及用量。NIR光照組的黑色素降低率與空白對(duì)照相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值分別為0.018（2.5min）和0.021（5min）;另外也顯示這兩種劑量的美白效果是相當(dāng)?shù)?。雖然聯(lián)合組的黑色素降低率平均值比空白組小，但是兩者未見(jiàn)顯著性差異。產(chǎn)生這種情況的原因可能是化妝品未起到應(yīng)有的美白療效，反而干擾了NIR光對(duì)皮膚的滲透。NIR光照劑量較高（5min）聯(lián)合處理組的黑色素降低率為（0.87±0.050），低于NIR照射2.5min的聯(lián)合處理降低率（0.89±0.049）。調(diào)整美白精華乳使用方法，增加其使用頻次及時(shí)間，使之發(fā)揮出較好的皮膚美白功效，再與適量NIR光照配合，應(yīng)該會(huì)獲得更好的皮膚美白效果。

2.3 試驗(yàn)前后各組反射光譜比較：在試驗(yàn)前后采用光纖光譜儀對(duì)被試區(qū)域進(jìn)行反射光譜，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖4。試驗(yàn)前各組的反射光譜值均處于一個(gè)較低的水平，主要原因是皮膚內(nèi)的黑色素等生色團(tuán)對(duì)光有很大的吸收，導(dǎo)致反射回去的光子量變少。同時(shí)，還可以看到各組的反射光譜靠得非常緊密，表明在試驗(yàn)前各個(gè)區(qū)域的光譜值基本處于同一水平，僅有細(xì)微的生理差別。NIR光照試驗(yàn)后的反射光譜值明顯高于試驗(yàn)前，說(shuō)明皮膚組織中黑色素等生色物質(zhì)含量明顯減少。而且，不同處理組間的光譜強(qiáng)度差異開(kāi)始變大，這是由于采用NIR光照或化妝品導(dǎo)致的。選取差異最大位置510nm的反射值做比較，可以發(fā)現(xiàn)每個(gè)處理組的反射率均高于空白組，表明不管是采用美白精華乳還是NIR光照處理，或是兩者聯(lián)合處理均顯示出了較好的皮膚美白效果。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，有光照參與的處理組美白效果更好，這與黑色素皮膚測(cè)定儀得出的結(jié)果一致。

3 ?結(jié)論

本試驗(yàn)以健康女性為試驗(yàn)對(duì)象，研究微激光對(duì)人體皮膚的調(diào)理效果，同時(shí)結(jié)合美容化妝品研究了微激光與護(hù)膚品之間的聯(lián)合作用。試驗(yàn)中選用了中心波長(zhǎng)為850nm的微激光源（照射到皮膚功率約為40mW/cm2，華南師范大學(xué)光子中醫(yī)學(xué)研究所研制），每次光照時(shí)間分別為2.5min和5min，配合使用美白護(hù)膚品。以皮膚黑色素水平為評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果顯示，所選擇的微激光光源具有較好的皮膚美白效果。

不同光源參數(shù)及使用方法呈現(xiàn)出的美白效果存在一定的差異。試驗(yàn)中選用了兩種劑量，即照射2.5min和5min，但兩者引起的美白效果差異不顯著;NIR光照與美白護(hù)膚品聯(lián)合使用未發(fā)現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)，原因是所使用的美白精華乳的美白效果在本試驗(yàn)中暫未體現(xiàn)，未來(lái)應(yīng)改善美白護(hù)膚品與微激光配合使用的方法使兩者協(xié)同真正達(dá)到美白效果。

4 ?討論

人類(lèi)皮膚的顏色取決于黑色素的含量與分布，而黑素細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能和數(shù)量直接影響皮膚中黑色素的含量，這也是產(chǎn)生黑色素的決定因素;當(dāng)黑色素過(guò)速增長(zhǎng)且分布不均時(shí)，會(huì)造成局部皮膚過(guò)黑及色素沉著[6]。黑色素的排出途徑包括體內(nèi)分解代謝和隨老化的角質(zhì)細(xì)胞脫落。目前被廣泛使用的祛黑色素方法有涂抹美白化妝品、激光、強(qiáng)脈沖光治療，其作用原理都是從抑制黑色素合成酶（酪氨酸酶為主）活性、還原黑色素中間體、抑制黑色素合成、促進(jìn)角質(zhì)剝離、表皮更新等途徑。美白類(lèi)化妝品通過(guò)作用于酪氨酸酶、黑素細(xì)胞和黑色素的轉(zhuǎn)運(yùn)代謝途徑， 抑制了黑色素生成， 從而增進(jìn)肌膚白皙， 淡化色素及色斑， 但其具有較突出的眼刺激作用[7]。美白類(lèi)產(chǎn)品對(duì)人體造成的刺激性和過(guò)敏作用已在多篇文章中被報(bào)道[8-9]。美白劑通常易被氧化或具有離子性，其穩(wěn)定性受限[10]。美白護(hù)膚品大多為工業(yè)合成，長(zhǎng)期使用易引起皮膚炎癥、紅斑等反應(yīng)，使用時(shí)需做好防曬。激光祛黑色素及強(qiáng)脈沖光嫩膚技術(shù)，在達(dá)到治療目的的同時(shí)對(duì)周?chē)M織也會(huì)產(chǎn)生一定的損傷，往往引起皮膚紅腫、灼熱刺痛、色素沉著等不良反應(yīng)。相比傳統(tǒng)的強(qiáng)激光器，新型的弱激光器因其安全性高、治療效果佳、無(wú)副作用、成本低、價(jià)格廉的優(yōu)勢(shì)逐漸被患者所接受，為臨床治療提供了更多的選擇性，也是光電技術(shù)發(fā)展的一大進(jìn)步。850nm微激光已被發(fā)現(xiàn)能夠減少黑素細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶的表達(dá)，進(jìn)而抑制黑色素的合成[11]。文獻(xiàn)[12]報(bào)道，850nm LED光照射后，多數(shù)就醫(yī)者皮膚干燥粗糙、皺紋粗深、色素沉著表現(xiàn)均有改善。其原理可能是微激光具有良好的生物刺激和調(diào)節(jié)作用，它可以刺激細(xì)胞線粒體的新陳代謝及纖維原細(xì)胞的活性，從而促進(jìn)膠原細(xì)胞和彈性細(xì)胞的產(chǎn)生，以實(shí)現(xiàn)皮膚再生，提升皮膚修復(fù)能力[13-22]。本試驗(yàn)證明了中心波長(zhǎng)為850nm的微激光源具有較好的皮膚美白效果。850nm微激光是通過(guò)抑制黑色素的產(chǎn)生和酪氨酸酶的表達(dá)來(lái)達(dá)到美白效應(yīng)，并且在動(dòng)物模型試驗(yàn)中運(yùn)用非侵入式光譜學(xué)手段、組織學(xué)方法都驗(yàn)證了在光照2min和5min時(shí)，皮膚組織內(nèi)的黑色素水平最低，美白效應(yīng)最好。Kim等[5]也證明了850nm波長(zhǎng)下的LED光照有效減少了黑色素的合成，不僅在正常的人類(lèi)黑素細(xì)胞的單一培養(yǎng)中，而且在一個(gè)3D多細(xì)胞類(lèi)型的共培養(yǎng)模型中，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何細(xì)胞毒性作用。本次試驗(yàn)中微激光與美白護(hù)膚品的協(xié)同效應(yīng)暫未體現(xiàn)，試驗(yàn)結(jié)束后的跟蹤觀察中兩者的協(xié)同效應(yīng)表現(xiàn)明顯，未來(lái)應(yīng)改善美白護(hù)膚品與微激光配合使用的方法，使兩者真正達(dá)到協(xié)同美白效果。綜上所述，這種微激光治療儀具有小巧輕盈，操作方法簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，安全性高，生物效應(yīng)良好的特點(diǎn)，可以在達(dá)到同樣治療目的的同時(shí)避免了像強(qiáng)激光或強(qiáng)脈沖光帶來(lái)的副反應(yīng)。很大程度上，微激光的應(yīng)用不僅解決了強(qiáng)激光治療所伴隨的一系列不良反應(yīng)，而且其良好的生物效應(yīng)也可以滿足各種皮膚疾病的治療需要，如緊致、祛痘、祛斑等，這一光電技術(shù)的進(jìn)步，給臨床治療提供了更多的選擇，值得進(jìn)一步推廣使用。

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[收稿日期]2018-10-29

本文引用格式：張雅麗，佘文莉，劉暉，等.微激光對(duì)皮膚美白的效果評(píng)價(jià)及影響[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2019，28（5）：60-64.