武莉娜，許國棟，張雅安，宋景貴，張朝輝

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 新鄉(xiāng) 453003；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河南 新鄉(xiāng) 453003；3.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院，河南 新鄉(xiāng) 453003；4.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 衛(wèi)輝 453100；5.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院精神科，河南 新鄉(xiāng) 453002)

卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)是腦卒中后常見的并發(fā)癥，主要表現(xiàn)為興趣下降、乏力、食欲減退、情緒低落、睡眠障礙、易激惹等[1]。PSD嚴(yán)重影響患者的康復(fù)及生活質(zhì)量，增加患者家庭和社會負(fù)擔(dān)。因此，探討PSD的發(fā)病機制及有效的防治策略成為目前關(guān)注的焦點。PSD發(fā)病機制復(fù)雜，涉及遺傳、人格和社會環(huán)境等諸多因素，并伴隨5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)和去甲腎上腺素(noradrenalin，NE)等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平下降、下丘腦-垂體-腎上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)軸功能失調(diào)、神經(jīng)營養(yǎng)因子表達減少和炎癥反應(yīng)等病理生理改變[2-3]。免疫炎癥抑郁假說認(rèn)為，機體的免疫系統(tǒng)被激活后引起炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激，從而參與抑郁癥的發(fā)病過程[4]，這為探討PSD的病因及防治提供了新方向，也開啟了炎癥因子拮抗劑的實驗與應(yīng)用研究，其中，環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制劑備受關(guān)注。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是神經(jīng)生長因子家族最具代表性成員之一，是相對分子質(zhì)量為12 300的堿性蛋白質(zhì)，以海馬組織內(nèi)含量最高。BDNF與PSD密切相關(guān)，其能促進多種神經(jīng)元的生存、發(fā)育、分化及修復(fù)，促進突觸可塑性，參與長時程記憶增強效應(yīng)[5]。本研究旨在觀察COX-2抑制劑塞來昔布對PSD大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬組織中BDNF表達的影響。

1 材料與方法

1.1實驗動物清潔級健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠60只，由鄭州大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號：SCXK(豫)2005-0001，合格證號：0003908。大鼠在河南省生物精神病學(xué)重點實驗室動物房預(yù)養(yǎng)2周，自由攝食和飲水，室溫20～22 ℃，相對濕度為60%～70%，光照周期為12 h/12 h(700～1900光照，1900～700黑暗)；進入實驗時體質(zhì)量(250.0±50.0)g。

1.2主要試劑與儀器塞來昔布(美國輝瑞制藥有限生物公司，國藥準(zhǔn)字J20120063)，莫洛尼鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(美國Promega公司)，總RNA提取試劑、Oligo(dT)18 引物、DRR081S熒光定量試劑盒、FTC-2000型實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)儀(日本TaKaRa公司)，BDNF(H-117)兔多克隆抗體(美國Santa Cruz公司)，鏈霉親和素-生物素復(fù)合物(strept avidin-biotin complex,SABC)免疫組織化學(xué)染色試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)，濃縮型二氨基聯(lián)苯胺(diaminobenzidine,DAB)顯色試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)；GAS7001B紫外光凝膠成像系統(tǒng)(英國UVL公司)，高速冷凍離心機(北京恒奧德儀器儀表有限公司)，DYY-10型三恒電泳儀(北京市六一儀器廠)，F(xiàn)TC-2000熒光定量基因擴增儀(上海楓嶺生物技術(shù)有限公司)，YD-1058B石蠟切片機(浙江金華益迪醫(yī)療設(shè)備廠)，CHK光學(xué)顯微鏡(日本Olympus公司)，DM-2000圖像采集與分析系統(tǒng)(德國Leica公司)。

1.3實驗方法

1.3.1動物分組及處理預(yù)養(yǎng)期間進行蔗糖水消耗訓(xùn)練，2周后進行曠場實驗(open field test,OFT)行為評分，測定蔗糖水消耗和OFT基線值[6-7]，從中篩選50只行為評分均一的大鼠，隨機分為正常組、卒中組、抑郁組、PSD組和PSD干預(yù)組，每組10只。卒中組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠采用線栓法制備大腦中動脈阻塞模型(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型[8]，模型制作后根據(jù)Longa 5分法評定大鼠神經(jīng)功能缺陷情況，選擇MCAO后神經(jīng)功能評分≥1分且<4分的大鼠。正常組及抑郁組大鼠給予假手術(shù)處理，除栓線不插入頸總動脈外，其余操作同卒中組。抑郁組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠MCAO后給予孤養(yǎng)聯(lián)合慢性不可預(yù)見性溫和應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)制備抑郁大鼠模型[9]，具體步驟：將大鼠禁食、禁水 24 h；24 h 內(nèi)持續(xù)將鼠籠傾斜45°；24 h內(nèi)晝夜顛倒；向鼠籠內(nèi)倒入300～500 mL水，濕墊料維持 24 h；夾大鼠尾巴2 min；水平震蕩5 min；將大鼠放入4 ℃冷水中游泳5 min；每日隨機采取上述刺激方法中的1種，持續(xù)29 d。PSD干預(yù)組大鼠于CUMS第1～29天給予塞來昔布25 mg·kg-1經(jīng)口灌胃，每日2次。與此同時，正常組、卒中組、抑郁組及PSD組大鼠分別給予等體積5 g·L-1羧甲基纖維素鈉溶液灌胃。最終每組選擇6只符合實驗要求的大鼠

1.3.2大鼠行為學(xué)觀察

1.3.2.1大鼠體質(zhì)量分別于MCAO前、MCAO后、CUMS后稱5組大鼠體質(zhì)量。

1.3.2.2糖水消耗實驗5組大鼠分別于MCAO前、MCAO后、CUMS后進行糖水消耗實驗。實驗前所有大鼠單籠放置并訓(xùn)練其適應(yīng)含糖飲水：第1個 24 h，每只大鼠給予2瓶10 g·L-1蔗糖水，隨后的 24 h，每只大鼠分別給予純水和10 g·L-1蔗糖水各1瓶，并每2 h調(diào)換1次水瓶位置，期間正常進食。訓(xùn)練結(jié)束后，進行24 h的禁水禁食，給予大鼠事先稱量過的純水和10 g·L-1蔗糖水各1瓶，1 h后測量大鼠蔗糖水與純水的消耗量，計算大鼠糖水偏好率。糖水偏好率=蔗糖水消耗量/(蔗糖水消耗量+純水消耗量)×100%。

1.3.2.3OFT5組大鼠分別于MCAO前、MCAO后、CUMS后進行OFT。敞箱大小為100 cm×100 cm×50 cm，四周箱壁為黑色、不透明，底部用白線劃分為25個等面積的方格。觀察時將單個大鼠置于敞箱的中央方格內(nèi)，記錄大鼠3 min內(nèi)的行為表現(xiàn)，包括：(1)水平運動：以穿行的方格數(shù)記錄水平運動得分，穿行方格的定義為大鼠 4 只腳都進入同一格子中。(2)垂直運動：以大鼠后肢直立即兩前爪騰空或攀爬墻壁的總次數(shù)為垂直運動得分。徹底清潔敞箱后再進行下一只大鼠的觀察。行為評定時間固定在上午800～1200，在安靜房間內(nèi)由2名觀察者進行，取均值。

1.3.2.4被動規(guī)避實驗5組大鼠分別于MCAO前、MCAO后、CUMS后進行被動規(guī)避實驗[10]。首先進行訓(xùn)練實驗，把大鼠放入白箱子中，關(guān)上中間的門，讓其熟悉環(huán)境約3 min，然后打開門，記錄大鼠進入黑箱所用的時間；若大鼠在規(guī)定時間未進入黑箱，實驗終止，剔除此大鼠。一旦大鼠進入黑箱子，關(guān)上門，在短暫電擊后，取出大鼠放回鼠籠，徹底清潔黑白箱。訓(xùn)練結(jié)束24 h以后，再把動物放在白箱子中約3 min以熟悉環(huán)境，中間門打開時開始計時，到大鼠進入黑箱子時為止，此時間記為潛伏期。

1.3.3免疫組織化學(xué)法檢測大鼠海馬組織中BDNF蛋白相對表達量CUMS后，各組大鼠最后一次行為學(xué)指標(biāo)評估后腹腔注射100 g·L-1水合氯醛(3 mL·kg-1)麻醉，快速斷頭取腦組織，參照大鼠腦立體定位圖譜快速取右側(cè)半球海馬組織置入收集管中，液氮中保存，實時熒光定量PCR實驗備用。另將左半球腦組織保存于-80℃冰箱中備用。將大鼠的左半球腦組織石蠟包埋并制作切片，進行免疫組織化學(xué)SABC法實驗，主要步驟：石蠟切片60 ℃恒溫干燥箱內(nèi)預(yù)熱30 min，常規(guī)脫蠟至水；體積分?jǐn)?shù)3%過氧化氫孵育10 min，以滅活內(nèi)源性過氧化物酶；蒸餾水沖洗；將切片浸入0.01 mol·L-1檸檬酸鹽緩沖液(pH 6.0)，微波爐中加熱沸騰后改為60%微波火力加熱15 min，控制溫度波動于92～98 ℃，自然冷卻；添加正常山羊血清封閉液(110稀釋)，室溫靜置20 min；去除多余液體；滴加一抗，4 ℃過夜。BDNF(H-117)兔多克隆抗體的稀釋度為1300。以磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對照。PBS沖洗；DAB顯色，取1 mL蒸餾水，加試劑盒中A、B、C試劑各1滴，混勻后加至切片；室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時間；蒸餾水充分洗滌，終止顯色；蘇木精復(fù)染5 min，自來水沖洗。體積分?jǐn)?shù)1%鹽酸乙醇分化20 s，自來水沖洗；脫水、透明、切片，中性樹膠封片，鏡下觀察。每一腦組織隨機選擇3張切片，利用Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件測定每張切片的吸光度，取均值，對BDNF蛋白表達進行定量分析。

1.3.4實時熒光定量PCR檢測大鼠海馬組織中BDNFmRNA相對表達量取液氮凍存的大鼠海馬組織100 mg迅速移至用液氮預(yù)冷的研缽中，將組織破碎后提取總RNA，然后反轉(zhuǎn)錄為cDNA。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH )基因作為內(nèi)參基因，大鼠BDNF基因引物由美國Invitrogen公司合成。BDNF引物序列：上游為5′-CACACACAGCGCTCCTTA-3′，下游為5′-AGTGGTGGTCTGAGGTTGG-3′。GAPDH引物序列：上游為5′-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3′，下游為5′-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3′。取反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA液，采用DRR081S嵌合熒光實時PCR試劑盒進行熒光定量PCR，在PCR反應(yīng)過程中設(shè)定無cDNA樣品的空白管作為陰性對照。PCR循環(huán)參數(shù)為：95℃預(yù)變性120 s；95 ℃變性20 s，57 ℃ 退火45 s，72 ℃延伸60 s，共40個循環(huán)?？偡磻?yīng)體系25 μL：SYBR Green 12.5 μL，cDNA模版液 2 μL，10 μmol·L-1上游引物1 μL，10 μmol·L-1下游引物1 μL，去離子雙蒸水8.5 μL。采用2-△△Ct法獲取BDNF mRNA相對表達量。

2 結(jié)果

2.15組大鼠體質(zhì)量變化結(jié)果見表1。MCAO前5組大鼠體質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。MCAO后，卒中組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠體質(zhì)量低于抑郁組和正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；抑郁組與正常組大鼠體質(zhì)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；卒中組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠體質(zhì)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。CUMS后，抑郁組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠體質(zhì)量均低于正常組與卒中組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；卒中組與正常組大鼠體質(zhì)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；PSD干預(yù)組大鼠體質(zhì)量高于PSD組和抑郁組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；PSD組大鼠體質(zhì)量低于抑郁組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表15組大鼠體質(zhì)量比較

組別n體質(zhì)量/gMCAO前MCAO后CUMS后正常組6290.92±7.90 303.92±8.12 323.08±7.44 卒中組6294.83±7.70293.33±6.85ab321.67±6.31抑郁組6293.42±7.64302.33±8.13300.08±8.24bcPSD組6298.50±6.56292.83±7.39ab291.83±7.53abcPSD干預(yù)組6297.53±6.70291.63±7.58ab310.98±6.44abcd

注：與正常組比較aP<0.05;與抑郁組比較bP<0.05；與卒中組比較cP<0.05；與PSD組比較dP<0.05。

2.25組大鼠糖水偏好率比較結(jié)果見表2。MCAO前及MCAO后5組大鼠糖水偏好率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；5組大鼠MCAO后糖水偏好率與MCAO前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；抑郁組、PSD組及PSD干預(yù)組大鼠CUMS后糖水偏好率低于MCAO前和MCAO后，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。CUMS后，抑郁組、PSD組及PSD干預(yù)組大鼠糖水偏好率均低于正常組和卒中組，PSD干預(yù)組大鼠糖水偏好率高于PSD組和抑郁組，PSD組大鼠糖水偏好率低于抑郁組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；但正常組和卒中組大鼠糖水偏好率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表25組大鼠糖水偏好率比較

組別n糖水偏好率/%MCAO前MCAO后CUMS后正常組682.52±5.96 83.31±5.74 83.59±6.01 卒中組683.12±2.8782.88±4.0183.75±4.64抑郁組683.81±4.1283.97±3.9166.98±8.35abPSD組682.48±4.7182.01±4.8862.38±7.99abcPSD干預(yù)組683.43±3.9882.09±4.1177.69±6.33abcd

注：與正常組和卒中組比較aP<0.05；與MCAO前和MCAO后比較bP<0.05；與抑郁組比較cP<0.05；與PSD組比較dP<0.05。

2.35組大鼠OFT結(jié)果比較結(jié)果見表3。MCAO前及MCAO后5組大鼠水平運動得分、垂直運動得分比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；5組大鼠MCAO后水平運動得分、垂直運動得分與MCAO前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；抑郁組、PSD組及PSD干預(yù)組大鼠CUMS后水平運動得分、垂直運動得分低于MCAO前和MCAO后，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。CUMS后，抑郁組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠水平運動得分、垂直運動得分均低于正常組與卒中組，PSD干預(yù)組大鼠水平運動得分、垂直運動得分高于PSD組與抑郁組，PSD組大鼠水平運動得分、垂直運動得分低于抑郁組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；但正常組與卒中組大鼠水平運動得分、垂直運動得分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表35組大鼠OFT結(jié)果比較

組別n水平運動得分MCAO前MCAO后CUMS后垂直運動得分MCAO前MCAO后CUMS后正常組662.67±11.0260.17±10.5062.17±9.9121.83±3.3120.00±3.2221.83±2.99 卒中組665.33±9.8761.17±9.1165.00±9.7822.17±2.9319.33±2.4221.50±2.74抑郁組666.00±7.9264.33±8.0717.00±3.74ab22.17±2.6320.67±2.944.00±1.41abPSD組667.33±7.0662.50±7.236.17±2.14abc21.67±3.5619.33±3.831.33±1.21abcPSD干預(yù)組666.31±6.0662.14±8.2745.07±7.15abd21.77±4.0619.87±2.8117.93±2.28abcd

注：與正常組和卒中組比較aP<0.05；與MCAO前和MCAO后比較bP<0.05；與抑郁組比較cP<0.05；與PSD組比較dP<0.05。

2.45組大鼠被動規(guī)避實驗結(jié)果比較結(jié)果見表4。MCAO前及MCAO后5組大鼠潛伏期比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；5組大鼠MCAO后潛伏期與MCAO前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；抑郁組、PSD組及PSD干預(yù)組大鼠CUMS后潛伏期短于MCAO前和MCAO后，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。CUMS后，抑郁組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠潛伏期短于正常組與卒中組，PSD干預(yù)組大鼠潛伏期長于抑郁組和PSD組，PSD組大鼠潛伏期短于抑郁組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；但正常組與卒中組大鼠潛伏期無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

表45組大鼠被動規(guī)避實驗結(jié)果比較

組別n潛伏期/sMCAO前MCAO后CUMS后正常組6142.52±88.06146.31±75.74168.32±89.43卒中組6136.12±92.87140.88±84.01163.52±92.80抑郁組6137.81±94.12141.97±63.9156.20±37.18abPSD組6140.48±74.71142.01±94.8837.24±41.56abcPSD干預(yù)組6139.43±93.98140.09±84.1199.26±70.81abcd

注：與正常組和卒中組比較aP<0.05；與MCAO前和MCAO后比較bP<0.05；與抑郁組比較cP<0.05；與PSD組比較dP<0.05。

2.55組大鼠海馬組織中BDNF蛋白和mRNA相對表達量比較結(jié)果見表5。抑郁組、PSD組和PSD干預(yù)組大鼠海馬組織中BDNF蛋白和mRNA相對表達量均低于正常組和卒中組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；正常組與卒中組大鼠海馬組織中BDNF蛋白和mRNA相對表達量比較差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。PSD干預(yù)組大鼠海馬組織中BDNF蛋白和mRNA相對表達量高于抑郁組和PSD組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。抑郁組與PSD組大鼠海馬組織中BDNF蛋白和mRNA相對表達量比較差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

表55組大鼠海馬組織中BDNF蛋白和mRNA相對表達量比較

組別nBDNF蛋白相對表達量BDNF mRNA相對表達量正常組60.23±0.01 1.19±0.07 卒中組60.22±0.011.18±0.04抑郁組60.16±0.01a0.87±0.10aPSD組60.15±0.01a0.85±0.10aPSD干預(yù)組60.19±0.01ab0.98±0.10ab

注：與正常組和卒中組比較aP<0.05；與抑郁組和PSD組比較bP<0.05。

3 討論

PSD是一種常見的精神疾病，其可導(dǎo)致患者神經(jīng)功能恢復(fù)延遲及認(rèn)知障礙加重[11]。目前，PSD的病因仍然存在爭議，在腦損傷背景下的抗抑郁機制仍然存在許多未知領(lǐng)域。近年來，有學(xué)者提出PSD的炎癥假說，即腦卒中引起促炎細胞因子產(chǎn)生增多，進而導(dǎo)致PSD的發(fā)生[12]。GUDASHEVA等[13]提出，BDNF在神經(jīng)發(fā)生和神經(jīng)可塑性調(diào)節(jié)機制中起核心作用，這些機制被認(rèn)為是抑郁癥的主要病因之一。CASTRéN等[14]研究顯示，抑郁癥患者腦組織和血清BDNF水平降低，但治療后是可逆的。

本實驗旨在探討塞來昔布對PSD大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬組織中BDNF表達的影響，采用線拴法建立大鼠MCAO腦卒中模型，并結(jié)合CUMS及孤養(yǎng)法制備PSD模型，通過行為學(xué)改變(體質(zhì)量改變、糖水消耗實驗、OFT)評估大鼠的抑郁狀態(tài)，運用被動規(guī)避實驗評估大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，結(jié)果顯示，與正常組及卒中組比較，PSD組大鼠體質(zhì)量減輕，糖水偏好率降低、OFT實驗水平和垂直運動減少、被動規(guī)避缺陷，成功模擬了抑郁癥的核心癥狀(食欲減退、快感缺乏、困倦乏力、興趣下降、學(xué)習(xí)記憶能力下降等)，證明PSD模型制備成功。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)可能是抑郁癥諸多促發(fā)因素的共同基礎(chǔ)及中間環(huán)節(jié)。COX-2作為主要的炎癥介質(zhì)，是介導(dǎo)細胞毒性的決定因素之一。COX-2是花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代謝的限速酶，產(chǎn)生的前列腺素及血栓素是炎癥級聯(lián)反應(yīng)的重要介質(zhì)，其代謝產(chǎn)物可導(dǎo)致白細胞介素-1、腫瘤壞死因子-α及一氧化氮增多[15-17]；以上炎性因子增多可導(dǎo)致HPA軸功能失調(diào)，糖皮質(zhì)激素水平升高[18]，降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-HT 水平，并抑制膠質(zhì)細胞釋放神經(jīng)營養(yǎng)因子[19]，增加神經(jīng)毒性，影響海馬神經(jīng)元的再生[20]。羅映[21]研究表明，AA/COX2 通路激活可引發(fā)大鼠海馬炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致腦組織氧化應(yīng)激損傷，影響單胺遞質(zhì)系統(tǒng)功能，且通過下游產(chǎn)物前列腺素E2激活不同的前列腺素E2受體，調(diào)控環(huán)磷酸腺苷的生成(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、增加細胞內(nèi)鈣離子濃度、激活磷脂酰肌醇3-激酶等途徑，影響cAMP-cAMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)-BDNF信號通路，調(diào)節(jié)BDNF的釋放，促進炎性細胞因子的生成、誘導(dǎo)一氧化氮合酶的活性等，介導(dǎo)大腦的神經(jīng)毒性，影響海馬神經(jīng)元突觸可塑性，從而導(dǎo)致大鼠抑郁癥發(fā)生，學(xué)習(xí)記憶功能障礙，而針對 COX2進行干預(yù)能改善抑郁癥大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。MORGESE等[22]研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腦內(nèi)注射β-淀粉樣蛋白(amyloid-β peptides,Aβ)可以引起抑郁樣狀態(tài)，并伴有神經(jīng)化學(xué)和神經(jīng)內(nèi)分泌改變，而塞來昔布可以防止Aβ處理的大鼠前額葉皮層中5-HT水平降低，通過降低血漿Aβ水平而預(yù)防Aβ相關(guān)的抑郁癥狀。FOURRIER等[23]研究發(fā)現(xiàn)，塞來昔布聯(lián)合抗抑郁藥物治療重癥抑郁癥患者較單獨抗抑郁藥物治療效果顯著，蒙哥馬利-阿斯伯格抑郁量表評分顯著降低。本研究結(jié)果顯示，PSD干預(yù)組較PSD組大鼠體質(zhì)量、糖水偏好率、OFT水平和垂直運動評分均明顯提高，被動規(guī)避時間顯著延長，提示PSD干預(yù)組大鼠的食欲減退、快感缺乏、困倦乏力、興趣下降、學(xué)習(xí)記憶能力下降等抑郁癥狀明顯改善，并且PSD干預(yù)組大鼠海馬組織中BDNF蛋白及mRNA表達水平顯著高于PSD組。

綜上所述，塞來昔布能夠改善PSD大鼠的抑郁行為及學(xué)習(xí)記憶能力，并提高海馬組織中BDNF mRNA和蛋白的表達水平。