■王淑媛 宋 慧，2*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；2.食藥用菌教育部工程研究中心，吉林長(zhǎng)春130118）

金針菇菇腳(flammulina velutipes stembase,FVS)是金針菇生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢棄料。隨著菌物資源的開發(fā)利用日益受到重視，及富含營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的金針菇大量栽培食用，F(xiàn)VS等廢棄料大量產(chǎn)生。但目前對(duì)具有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的FVS等下腳料資源的開發(fā)利用較少，造成資源浪費(fèi)及環(huán)境污染，因此對(duì)FVS合理開發(fā)利用的問題亟待解決。金針菇富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、礦物質(zhì)元素、維生素和粗纖維，含脂肪較低，是一種不可多得的高營(yíng)養(yǎng)食品[1-3]。金針菇還具有良好的抗氧化和抗腫瘤作用[4-6]。本試驗(yàn)選用以工廠生產(chǎn)中產(chǎn)生的FVS為主要試驗(yàn)材料，以AA肉雞為試驗(yàn)對(duì)象，研究日糧中添加FVS對(duì)AA肉雞生長(zhǎng)性能、腸道發(fā)育和VFA的影響，旨在為FVS在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用AA肉雞購(gòu)自吉林省東豐縣鵬翔牧業(yè)有限責(zé)任公司孵化場(chǎng)。FVS購(gòu)自當(dāng)?shù)亟疳樄椒N植場(chǎng)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

選用4 550只1 d AA肉雞，隨機(jī)分成5組，每組7個(gè)重復(fù)。5個(gè)處理組分別為空白組（基礎(chǔ)日糧）、2%FVS組（基礎(chǔ)日糧+2%FVS）、4%FVS組（基礎(chǔ)日糧+4%FVS）、6%FVS組（基礎(chǔ)日糧+6%FVS）和6%FVS階段組（基礎(chǔ)日糧+在試驗(yàn)第1、3、5周飼喂含有6%FVS的日糧，于試驗(yàn)2、4、6周飼喂基礎(chǔ)日糧）。試驗(yàn)為期42 d。飼養(yǎng)管理按《AA肉仔雞的飼養(yǎng)管理手冊(cè)》進(jìn)行。試驗(yàn)在吉林省東豐鵬翔牧業(yè)有限責(zé)任公司孵化場(chǎng)進(jìn)行，雙層籠養(yǎng)，飼喂次數(shù)、舍內(nèi)溫度、濕度、光照、通風(fēng)等飼養(yǎng)管理?xiàng)l件均保持一致，自由采食和飲水。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.3 生長(zhǎng)性能測(cè)定

分別于試驗(yàn)1 d和42 d，每處理組隨機(jī)抽取21只肉雞進(jìn)行稱重，同時(shí)記錄每日耗料量，計(jì)算料重比。

1.4 樣品采集

分別于試驗(yàn)第21 d和42 d，每個(gè)處理組隨機(jī)取3只雞屠宰，剪取左右盲腸，置于自封袋中標(biāo)記，-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.1 十二指腸、空腸、回腸和盲腸長(zhǎng)度、重量測(cè)定

將小腸、左右盲腸于冰水上解凍，用軟尺分別量取每只雞的左右盲腸長(zhǎng)度，取平均值；并測(cè)量雞十二指腸、空腸和回腸的長(zhǎng)度。用電子天平分別稱取每只雞的左右盲腸重量，取平均值；并稱量雞十二指腸、空腸和回腸的重量。

1.4.2 盲腸食糜VFA含量測(cè)定

方法參照朱沛霽等[7]和Lei等[8]，取0.5 g肉雞盲腸混合食糜于2 ml離心管中，編號(hào)，各管加入1.25 ml超純水（按照1∶2.5的比例），漩渦振蕩5 min左右，待充分溶解后10 000 r/min離心10 min，取上清液1 ml于2 ml離心管中，加入0.2 ml 25%偏磷酸溶液（按照5∶1的比例），充分混勻后置冰水浴30 min，然后10 000 r/min離心10 min，取上清液1 ml于進(jìn)樣瓶中，待測(cè)。參照馬玉龍等[9]和李婉等[10]實(shí)驗(yàn)條件，色譜柱為DB-FFAP毛細(xì)管柱（30 m×250 μm×0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度220℃；檢測(cè)器FID，溫度250℃；柱溫升溫程序：初始溫度65℃，然后以20℃/min升溫速率升至190℃，分流比25∶1；氣體流速：載氣為氮?dú)?N2)25 ml/min，氫氣(H2)40 ml/min，空氣400 ml/min。使用安捷倫氣相色譜儀7890A進(jìn)行檢測(cè)盲腸食糜中乙酸、丙酸和丁酸等主要VFA含量。1.4.3 盲腸食糜pH值測(cè)定

參照馬書宇[11]和Manzanilla等[12]測(cè)腸道食糜pH值的方法，將左右盲腸置于冰水上解凍，將每只雞的左右盲腸食糜混合均勻，并取0.5 g混合食糜溶于4.0 ml超純水中（按照1∶8的比例），漩渦振蕩混勻后，直接采用PHS-3C型精密pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Microsoft Excel初步處理后，利用SPSS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，使用One-way ANOVA進(jìn)行方差分析，采用Duncan′s法進(jìn)行多重比較，使用Quantity one進(jìn)行聚類分析。數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

2 結(jié)果與分析

2.1 FVS對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響(見表2)

表2 FVS對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，2%FVS組和4%FVS組平均日增重高于空白組，但差異不顯著；6%FVS階段組肉雞平均日增重顯著高于其他組。2%FVS、4%FVS組和6%FVS組平均日采食量顯著低于空白組；6%FVS階段組與空白組無顯著性差異。2%FVS、4%FVS組和6%FVS階段組料重比顯著低于空白組；6%FVS階段組料重比顯著低于2%FVS、4%FVS組和6%FVS組。

2.2 FVS對(duì)肉雞腸道發(fā)育的影響(見表3)

如表3所示，21 d相比空白組，各FVS組的空腸長(zhǎng)度和重量均有增加趨勢(shì)，且6%FVS階段組顯著增加；各FVS組的回腸長(zhǎng)度無顯著性增加，2%FVS組和6%FVS階段組的回腸重量顯著增加；4%FVS組和6%FVS階段組的十二指腸長(zhǎng)度顯著性增加，6%FVS階段組的十二指腸重量增加顯著；各組間盲腸長(zhǎng)度無顯著性差異，2%FVS組和4%FVS組的盲腸重量比空白組顯著升高，其他各組間無顯著差異。42 d，與空白組相比，各FVS組空腸長(zhǎng)度無顯著性變化，6%FVS階段組的空腸重量顯著增加；4%FVS組和6%FVS階段組的回腸長(zhǎng)度顯著增加，6%FVS階段組的回腸重量增加顯著；2%FVS、4%FVS組和6%FVS組的十二指腸長(zhǎng)度增加顯著，4%FVS和6%FVS階段組的十二指腸重量顯著增加；4%FVS組盲腸長(zhǎng)度顯著增加，2%FVS、4%FVS組和6%FVS組盲腸重量顯著增加。

表3 FVS對(duì)肉雞十二指腸(D)、空腸(J)、回腸(I)和盲腸(C)長(zhǎng)度(cm)、重量(g)的影響

2.3 FVS對(duì)肉雞盲腸食糜VFA含量的影響(見表4)

如表4所示，21 d，與空白組相比，2%FVS、4%FVS組和6%FVS階段組盲腸食糜乙酸和丙酸含量均顯著增加，各FVS組盲腸食糜丁酸含量顯著增加；2%FVS組盲腸食糜乙酸、丙酸和丁酸含量顯著高于其他各FVS組。42 d，與空白組相比，2%FVS、4%FVS組和6%FVS階段組盲腸食糜乙酸、丙酸和丁酸含量均顯著增加；6%FVS階段組盲腸食糜乙酸、丙酸和丁酸含量顯著高于其他各FVS組。

2.4 FVS對(duì)肉雞盲腸食糜pH值的影響(見表5)

表4 FVS對(duì)肉雞盲腸食糜VFA含量的影響(mmol/l)

表5 FVS對(duì)肉雞盲腸食糜pH值的影響

如表5所示，21 d，與空白組相比，F(xiàn)VS各組盲腸食糜pH值均有下降趨勢(shì)，且4%FVS組和6%FVS階段組顯著降低；各FVS組間無顯著差異。42 d，與空白組相比，4%FVS組和6%FVS組盲腸食糜pH值顯著降低；4%FVS組和6%FVS組盲腸食糜pH值顯著低于2%FVS組和6%FVS階段組。

3 討論

3.1 FVS對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

Mr.Tlabela Chuene Phillemon[13]報(bào)道，飼喂金針菇菌絲的豬平均日增重和平均日采食量顯著低于對(duì)照組，飼料轉(zhuǎn)化率卻沒有顯著降低。本試驗(yàn)中，2%FVS組和4%FVS組平均日增重高于空白組，但差異不顯著；6%FVS階段組肉雞平均日增重顯著高于其他組。表明6%FVS階段組能增加肉雞體重。2%FVS、4%FVS組和6%FVS組平均日采食量顯著低于空白組；6%FVS階段組與空白組平均日采食量無顯著性差異。表明FVS組能降低肉雞采食量。2%FVS、4%FVS組和6%FVS階段組料重比顯著低于空白組；6%FVS階段組料重比顯著低于2%FVS、4%FVS組和6%FVS組。表明2%FVS、4%FVS組和6%FVS階段組能顯著降低料重比。這與曾巧莉等[14]研究結(jié)果一致，在肉雞整個(gè)生長(zhǎng)過程中FVS可以增加平均日增重，降低料肉比，提高肉雞生長(zhǎng)性能。由此可知，日糧中添加FVS可有效提高肉雞的生長(zhǎng)性能，這一發(fā)現(xiàn)將為FVS在畜禽養(yǎng)殖中的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)和應(yīng)用提供重要理論依據(jù)和實(shí)踐參考。

3.2 FVS對(duì)肉雞腸道發(fā)育的影響

腸道長(zhǎng)度和重量的增加有助于擴(kuò)大食物消化面積，促進(jìn)消化吸收。陳五湖等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平均相近的情況下，纖維能夠提高揚(yáng)州鵝盲腸的長(zhǎng)度。王繼強(qiáng)[16]試驗(yàn)結(jié)果表明仔豬飼喂高水平纖維有較好的腸道重量。Adam等[17]研究表明，飼喂果膠或高豌豆蛋白能增加大鼠盲腸重量。相反，李燕等[18]研究表明日糧中添加木寡糖能促進(jìn)蛋雛雞腸道發(fā)育，其中十二指腸長(zhǎng)度略有增加，空腸和回腸的長(zhǎng)度均有明顯增加，盲腸長(zhǎng)度略有減小。這可能是由于飼料中添加不同成分對(duì)腸道發(fā)育的影響不同，亦或飼料中添加相同成分對(duì)不同動(dòng)物腸道發(fā)育有不同作用。本試驗(yàn)在日糧中添加FVS飼喂肉雞，結(jié)果顯示肉雞十二指腸、空腸、回腸和盲腸長(zhǎng)度和重量均有增加趨勢(shì)，表明FVS能促進(jìn)肉雞腸道發(fā)育，有益于消化吸收。

3.3 FVS對(duì)肉雞盲腸食糜VFA含量和pH值的影響

VFA在體內(nèi)的主要來源是食物直接攝取和腸道菌群發(fā)酵[19]。厭氧微生物是腸道中產(chǎn)生VFA的主要菌群[20]。VFA不僅能為厭氧菌自身生長(zhǎng)提供能量來源，而且能降低腸道內(nèi)pH值，提高其酸性環(huán)境，抑制有害菌的生長(zhǎng)從而起到促進(jìn)腸道功能健康的作用[21]。Karwan等[22]研究表明，飼喂一定劑量的FVS和菊粉能增加肉雞糞便中乙酸和丙酸的含量，降低肉雞糞便pH值。本試驗(yàn)表明FVS能降低腸道pH值，有利于維持腸道內(nèi)酸性環(huán)境。郭傳珍等[23]研究發(fā)現(xiàn)，21日齡時(shí)，飼喂添加200 g/t丁酸鈉組，乳酸桿菌數(shù)量有增加趨勢(shì)，而大腸桿菌數(shù)量有減少趨勢(shì)；42日齡時(shí)，飼喂添加100 g/t丁酸鈉組，乳酸桿菌數(shù)量顯著增加，大腸桿菌數(shù)量顯著減少。Van Der Wielen等[24]研究發(fā)現(xiàn)，在盲腸中腸桿菌數(shù)量和乙酸、丙酸、丁酸均呈負(fù)相關(guān)。腸球菌數(shù)量和乙酸、丙酸和丁酸呈負(fù)相關(guān)。乳酸桿菌和乙酸、丙酸和丁酸沒有顯著相關(guān)性。Van Immerseel F等[25]研究發(fā)現(xiàn)，與甲酸處理組相比，乙酸處理組雞盲腸中腸炎沙門氏菌定植增加；丙酸處理組對(duì)雞盲腸中腸炎沙門氏菌定植無影響；丁酸處理組雞盲腸中腸炎沙門氏菌定植減少。本試驗(yàn)結(jié)果表明FVS能增加盲腸VFA含量，這可能有利于增加腸道內(nèi)有益菌數(shù)

量，降低有害菌數(shù)量，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，維持腸道健

康，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體健康。

4 結(jié)論

①FVS可增加AA肉雞日增重，減少AA肉雞平均日采食量，提高AA肉雞生長(zhǎng)性能；②FVS可增加AA肉雞十二指腸、空腸、回腸和盲腸的長(zhǎng)度、重量，促進(jìn)腸道發(fā)育，有利于促進(jìn)AA肉雞消化吸收；③FVS可提高AA肉雞盲腸VFA含量，降低盲腸pH值，維持腸道酸性環(huán)境。有助于改善AA肉雞腸道微生物區(qū)系；其中6%FVS階段組的效果最好。