謝曉燕

[摘要] 目的 探討目標(biāo)教學(xué)法對(duì)金銀花提取物中綠原酸含量測(cè)定質(zhì)量的影響，為綠原酸的測(cè)定提供理論依據(jù)。方法 選取2015年6月—2016 年6月以及選取2016 年7月—2017年7月在該院實(shí)習(xí)的實(shí)習(xí)生各12名，其中前者采取常規(guī)教學(xué)法，稱之為對(duì)照組，后者采取目標(biāo)教學(xué)法稱之為觀察組，對(duì)比兩組金銀花提取物中綠原酸含量的測(cè)定值、檢測(cè)方法的穩(wěn)定性、精密度等結(jié)果。結(jié)果 經(jīng)過(guò)目標(biāo)教學(xué)法后，考試成績(jī)觀察組為（96.81±2.85）分，對(duì)照組（72.21±8.94）分，研究組成績(jī)明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組測(cè)得金銀花提取物中綠原酸的含量明顯高于對(duì)照組，含量分別為24.1%和21.8%，精密度、加樣回收率、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等結(jié)果均好于對(duì)照組。經(jīng)比較，結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 通過(guò)目標(biāo)教學(xué)法后，金銀花提取物中綠原酸的測(cè)定方法準(zhǔn)確可靠，操作簡(jiǎn)單，值得推廣。

[關(guān)鍵詞] 金銀花提取物；綠原酸；含量測(cè)定；目標(biāo)教學(xué)；穩(wěn)定性

[中圖分類號(hào)] R95 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2018）01（b）-0115-02

金銀花具有清熱解毒，涼散風(fēng)熱等功效，用于癰腫疔瘡，丹毒，喉痹，熱毒血痢，溫病發(fā)熱，風(fēng)熱感冒等癥[1]。綠原酸是金銀花中的有效成分之一，具有廣泛的生物活性，如抗病毒、抗菌、保肝利膽、增高白血球、抗腫瘤、降血脂、降血壓、興奮中樞神經(jīng)、清除自由基等。綠原酸具有廣泛的抗菌作用，但是在體內(nèi)會(huì)被蛋白質(zhì)滅活，口服或者腹腔注射后，可以興奮大鼠中樞神經(jīng)，增加大鼠小腸蠕動(dòng)及子宮張力，增進(jìn)大鼠膽汁分泌，對(duì)人體有致敏作用，可以誘發(fā)皮炎、氣喘等疾病[2]。中國(guó)藥典規(guī)定，金銀花干燥品中，綠原酸含量不得少于1.5%[3]，該文選取2015年6月—2016 年6月及選取2016 年7月—2017年7月，實(shí)習(xí)生12名研究目標(biāo)教學(xué)法對(duì)金銀花提取物中綠原酸含量測(cè)定質(zhì)量的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院實(shí)習(xí)的實(shí)習(xí)生各12名，其中前者采取常規(guī)教學(xué)法，稱之為對(duì)照組，后者采取目標(biāo)教學(xué)法稱之為觀察組。

1.2 樣品及藥材

該文選用的金銀花購(gòu)買于中藥大市場(chǎng)，自制金銀花提取物；綠原酸對(duì)照品購(gòu)買于中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.3 試劑及儀器

試劑：色譜純乙腈；分析純甲醇、乙醇；磷酸鹽緩沖液等；儀器：pHS-3C型pH計(jì)；Sartorius 1 712型1/10萬(wàn)電子分析天平；Agilent 1 100 LC；中藥煎藥機(jī)；RZ-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；SHB-B循環(huán)水式多用真空泵等。

1.4 方法

1.4.1 金銀花提取 取金銀花500 g，干燥，粉碎，在70℃條件下，用8倍量的60%乙醇加熱回流提取3次，2 h/次，過(guò)濾，合并提取液，減壓回收乙醇，干燥，得金銀花提取物，平均分為對(duì)照組和觀察組兩組，用于綠原酸含量的測(cè)定。

1.4.2 兩種教學(xué)方法對(duì)綠原酸含量的質(zhì)量影響 （1）對(duì)照組采取常規(guī)教學(xué)法。對(duì)照組采取常規(guī)教學(xué)法講解金銀花提取物高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，色譜條件：C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-0.4%磷酸溶液（20：80），流速：1 mL/min，柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：327 nm。

（2）觀察組采取目標(biāo)教學(xué)法。觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上采取目標(biāo)教學(xué)法，突出測(cè)定質(zhì)量達(dá)到的目標(biāo)，具體方法如下。①測(cè)定用玻璃器皿處理。實(shí)驗(yàn)用的所有玻璃器皿均用洗滌劑清洗，再用水沖洗3遍，之后用稀硫酸浸泡過(guò)夜，水沖洗3遍，最后用去離子水沖洗，干燥備用。②樣品處理。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣品的前處理非常重要，如金銀花要完全干燥后再進(jìn)行稱重；金銀花粉末不宜過(guò)細(xì)；提取溫度不能過(guò)高，否則會(huì)破壞有效成分；回收乙醇溫度不可太高；濃縮時(shí)溫度不能過(guò)高，當(dāng)溶液變稠時(shí)要注意不要糊化。③空白實(shí)驗(yàn)的設(shè)置。影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素很多，實(shí)驗(yàn)用水的質(zhì)量、試劑的純度、實(shí)驗(yàn)操作是否規(guī)范，器皿的潔凈程度等均可造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，因此要嚴(yán)格控制，減少系統(tǒng)誤差。④回收實(shí)驗(yàn)?；厥諏?shí)驗(yàn)的好壞，決定了樣品含量是否在可控范圍內(nèi)。在同樣條件下進(jìn)行測(cè)定，如果標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的測(cè)定值在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，則樣品的檢測(cè)結(jié)果即為可靠，否則，要查找原因，重新測(cè)定。⑤標(biāo)準(zhǔn)品的選擇。實(shí)驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)品要購(gòu)買正規(guī)廠家生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)品，要標(biāo)有確切數(shù)值，對(duì)于不確定的標(biāo)準(zhǔn)品，不可使用。⑥ 平行樣的測(cè)定。樣品取樣時(shí)稱量不可太少，一般在1～2 g，平行樣檢測(cè)結(jié)果是否合格，依據(jù)兩次獨(dú)立測(cè)定樣品測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差值而定，如果偏差值超出范圍，要重復(fù)測(cè)定直至結(jié)果合格為止。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，并用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分率表示，并用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.6 判定標(biāo)準(zhǔn)

①臨床實(shí)習(xí)教學(xué)結(jié)束時(shí)，對(duì)所有學(xué)生進(jìn)行考試，試卷滿分100分，比較兩組學(xué)生的教學(xué)效果；②含量值：綠原酸檢測(cè)含量越高，表明檢測(cè)方法越有效，靈敏度越高；精密度RSD值：RSD值越小，表明檢測(cè)方法精密度越好；加樣回收率RSD值：RSD值越小，表明檢測(cè)方法準(zhǔn)確度越好；重現(xiàn)性RSD值：RSD值越小，表明檢測(cè)方法重現(xiàn)性越好；穩(wěn)定性RSD值：RSD值越小，表明檢測(cè)方法的穩(wěn)定性越好[4]。

2 結(jié)果

2.1 兩組教學(xué)前后考試成績(jī)比較

考試成績(jī)觀察組為（96.81±2.85）分，對(duì)照組（72.21±8.94）分，研究組結(jié)果明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組實(shí)習(xí)生檢測(cè)結(jié)果比較

觀察組測(cè)得金銀花提取物中綠原酸的含量明顯高于對(duì)照組，含量分別為24.1%和21.8%，精密度、加樣回收率、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等結(jié)果均好于對(duì)照組。經(jīng)比較，結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

金銀花，又稱雙花、二花、銀花等，為忍冬科植物忍冬、紅腺忍冬、山銀花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花，夏初開(kāi)放前采收，干燥既得。金銀花呈棒狀，上粗下細(xì)，略有彎曲，長(zhǎng)約2 cm，表面黃白色或綠白色，密被短絨毛；花萼綠色，先端5裂，裂片有絨毛，長(zhǎng)約2 mm；花冠筒狀，先端二唇形，雄蕊5，附著于筒壁，黃色，雌蕊1，子房無(wú)毛；氣清香，味淡、微苦。金銀花具有清熱解毒，涼散風(fēng)熱等功效，用于癰腫疔瘡，丹毒，喉痹，熱毒血痢，溫病發(fā)熱，風(fēng)熱感冒等癥[5]。

綠原酸，又稱氯原酸、咖啡鞣酸、1，3，4，5-四羥基環(huán)己烷羧酸-（3，4-二羥基肉桂酸酯）等，是金銀花中的有效成分之一，具有廣泛的生物活性，如抗病毒、抗菌、保肝利膽、增高白血球、抗腫瘤、降血脂、降血壓、興奮中樞神經(jīng)、清除自由基等。綠原酸具有廣泛的抗菌作用，但是在體內(nèi)會(huì)被蛋白質(zhì)滅活，口服或者腹腔注射后，可以興奮大鼠中樞神經(jīng)，增加大鼠小腸蠕動(dòng)及子宮張力，增進(jìn)大鼠膽汁分泌，對(duì)人體有致敏作用，可以誘發(fā)皮炎、氣喘等疾病。氯原酸半水合物為針狀結(jié)晶，在110 ℃時(shí)變?yōu)闊o(wú)水化合物，熔點(diǎn) 208 ℃，在25 ℃的水中溶解度為 4%，熱水中溶解度更大；易溶于乙醇、丙酮，極微溶于乙酸乙酯，難溶于乙醚、三氯甲烷、苯等親脂性有機(jī)溶劑。

研究結(jié)果顯示，經(jīng)過(guò)目標(biāo)教學(xué)法后，考試成績(jī)觀察組為（96.81±2.85）分，對(duì)照組（72.21±8.94）分（P<0.05），研究組成績(jī)明顯高于對(duì)照組，差異存在顯著性，觀察組測(cè)得金銀花提取物中綠原酸的含量明顯高于對(duì)照組，含量分別為24.1%和21.8%，精密度、加樣回收率、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性等的RSD值結(jié)果均好于對(duì)照組。經(jīng)比較，結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

金銀花為常用藥材之一，藥用歷史悠久，近年來(lái)隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和醫(yī)療事業(yè)的進(jìn)步，金銀花逐漸成為了研究的熱點(diǎn)。金銀花中的主要有效成分為綠原酸，綠原酸為苯丙素類化合物，易溶于乙醇、丙酮、熱水，具有抗菌抗病毒等活性。通過(guò)目標(biāo)教學(xué)法后，金銀花提取物中綠原酸的測(cè)定方法準(zhǔn)確可靠，操作簡(jiǎn)單，值得推廣。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 買凌燕.山銀花不同炮制品中綠原酸含量測(cè)定[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2017，13（6）：23.

[2] 范婉思.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方金銀花顆粒中綠原酸的含量[J].中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)，2017，12（2）：22.

[3] 劉開(kāi)萍.蜘蛛香中綠原酸及總酚酸的含量測(cè)定[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，56（2）：288.

[4] 周惠燕.金銀花提取物中綠原酸含量測(cè)定[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2011，18（11）：61.

[5] 林以寧.金銀花-連翹配伍比例對(duì)有效成分溶出和大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（17）：180.（收稿日期：2017-10-19）