宋慧榮，任小巧，羅亞敏，李 冉，高明慧，頓 珠，陶曉華,＊

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué) 北京 100029；2.西藏藏醫(yī)學(xué)院 拉薩 850000）

偏頭痛是一種常見且復(fù)雜的多因素、多基因疾病[1]，屬于中醫(yī)學(xué)“頭風”范疇，其表現(xiàn)為一側(cè)或雙側(cè)頭部反復(fù)發(fā)作的搏動性疼痛，可伴有惡心、嘔吐、視物異常等先兆性神經(jīng)癥狀和高敏反應(yīng)，其發(fā)生與遺傳、內(nèi)分泌、飲食及精神因素等有一定關(guān)系。偏頭痛是一種疼痛綜合征，是人的一種主觀感受，其發(fā)病機理一直是學(xué)術(shù)界研究難點之一，如何更好的應(yīng)用動物模型來評價醫(yī)療技術(shù)的療效，是學(xué)術(shù)界研究探討的重點，本文主要針對中醫(yī)藥治療研究偏頭痛時動物模型的選擇進行探討，以期對中醫(yī)藥治療偏頭痛研究有所啟示。

1 中藥治療偏頭痛動物模型的研究

實驗性偏頭痛動物模型的研究是偏頭痛機理探討和藥物作用機制探討的重要手段，也是連接實驗研究與臨床應(yīng)用的橋梁。中藥治療偏頭痛的有效性和安全性已經(jīng)得到了廣泛認同，但由于中藥研究的特殊性,要求實驗動物模型不但在發(fā)病機制方面與疾病本身有相似性，而且要有證候相似性，模型選擇正確與否，直接影響研究的成敗[2]。我國目前建立的偏頭痛模型[1-3]有：基于血管學(xué)說的硝酸甘油模型和利血平化低5-HT（5-羥色胺）模型，基于神經(jīng)血管源性學(xué)說的三叉神經(jīng)模型、硬腦膜模型和上矢竇區(qū)硬腦膜模型，基于皮層擴散性抑制學(xué)說的皮層擴散性抑制（Cortical Spreading Deprssion，CSD）模型，基于基因因素的基因工程模型以及原發(fā)性偏頭痛模型等。這些偏頭痛模型在偏頭痛機制及藥物研究方法的應(yīng)用起到了積極的作用?，F(xiàn)將中藥治療部分偏頭痛模型的研究整理如下：

1.1 平抑肝陽、祛風止痛類藥物的研究

該型偏頭痛多由風陽上擾或肝陽上亢，病人常見癥狀為兩側(cè)頭部脹痛、急躁易怒、面紅目赤等，這與“血管擴張”[3]為機理的硝酸甘油模型動物癥狀“雙耳發(fā)紅、前肢頻繁搔頭、爬籠次數(shù)增多、煩躁不安”[3]相似。該模型多用于研究平抑肝陽、祛風止痛類藥物，任永欣等人[4]用硝酸甘油模型進行偏頭痛大鼠實驗研究，顯示頭風飲（川芎、天麻）能顯著抑制偏頭痛模型增強的c-fos、c-jun表達，提示頭風飲具有治療實驗性偏頭痛動物模型的作用。李智等[5]研究經(jīng)天麻鉤藤飲治療后偏頭痛肝陽上亢證大鼠下丘腦蛋白表達上具有差異，而所鑒定的這5個蛋白質(zhì)可能與天麻鉤藤飲的治療機制有關(guān)。

1.2 溫經(jīng)散寒、活血化瘀類藥物的研究

該型偏頭痛多由寒凝血瘀所致，病人常見癥狀為：頭痛如刺、固定不移、畏寒肢冷、精神不振等，與“血管擴張后收縮痙攣”[2]為機理的利血平化低5-HT模型癥狀“閉目、倦伏少動、腹瀉、體溫降低、進食量少、弓背、全身顫抖、強迫性偏頭、翻滾、抽搐”[6]相似。該類模型多用于研究溫經(jīng)散寒、活血化瘀類藥物，潘旭鳴等[7]研究發(fā)現(xiàn)少腹逐瘀湯、補陽還五湯及血府逐瘀湯3種活血化瘀方均能顯著提高偏頭痛小鼠痛閾值，升高肛溫，其中少腹逐瘀湯能升高腦組織5-HT的含量，證明此3種活血化瘀方對利血平所致偏頭痛模型小鼠均有一定的治療作用，其中少腹逐瘀湯的作用機制可能與調(diào)節(jié)模型小鼠腦內(nèi)5-HT等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)，初步反證利血平所致偏頭痛小鼠模型中醫(yī)證型與寒凝血瘀證較為接近。吳燕川等[8]研究發(fā)現(xiàn)溫經(jīng)散寒，化濕降逆的吳茱萸湯能升高虛寒型模型鼠腦組織內(nèi)5-HT、DA（多巴胺），血清內(nèi)NO（一氧化氮）含量，降低腦組織內(nèi)NO含量，能有效治療偏頭痛。

1.3 逐瘀通絡(luò)、熄風化痰類藥物的研究

該型偏頭痛多由痰瘀絡(luò)阻所致，病人常見癥狀為：頭痛攻沖作痛或刺痛、目眩畏光、惡心嘔吐、偏身麻木，或急躁易怒，反復(fù)發(fā)作，與“皮層電活動異常、腦血流量改變”為機理的CSD模型“偏身麻木、閃光幻覺、黑朦等先兆癥狀和亢奮性偏頭痛癥狀”，以及“刺激神經(jīng)血管系統(tǒng)釋放炎癥介質(zhì)”為機理的神經(jīng)血管源性模型先兆性癥狀和頭痛癥狀“惡心、嘔吐、畏光和頭部甩動、前肢頻繁撓頭”[1]相類似。該模型多用于研究逐瘀通絡(luò)、熄風化痰類藥物。如楊洪軍等[9]用皮層擴展性抑制模型研究發(fā)現(xiàn)5-HT可以明顯延長CSD的持續(xù)時間，具有祛風通絡(luò)止痛作用的大川芎丸可以降低正常狀態(tài)CSD的幅度和出現(xiàn)個數(shù)，縮短高5-HT狀態(tài)下的CSD持續(xù)時間，證明5-HT對CSD具有明顯的增強作用，大川芎丸可以抑制CSD,可能是其治療偏頭痛的作用機制之一。劉婷[10]采用電刺激三叉神經(jīng)模型研究發(fā)現(xiàn)具有熄風滌痰、逐瘀止痛的頭痛寧膠囊可明顯抑制急性偏頭痛大鼠頸靜脈血CGRP的含量、減少腦膜血流量，從而有效地治療偏頭痛。

1.4 清肝瀉火、解郁安神類藥物的研究

原發(fā)性頭痛模型鼠和偏頭痛患者有以下相似性[1]：陣發(fā)性的三叉神經(jīng)痛閾值的改變；痛閾值降低的體征可以遺傳；對降鈣素基因相關(guān)肽CGRP等頭痛誘發(fā)劑高敏；對聲音敏感；能被臨床使用的發(fā)作期藥物和預(yù)防性藥物緩解。這些特征癥狀與中醫(yī)肝郁化火型偏頭痛癥狀（頭痛劇烈、急躁煩亂或精神抑郁、睡眠不安）相類似。肝為“將軍之官”，主疏泄條達，主人之情志，主升主動，相火寄于肝臟之中，不良情緒刺激容易引起肝郁化火，即肝的疏泄功能失常，相火不得散布流通于全身，郁于經(jīng)脈之間，氣火沿肝經(jīng)逆沖，升發(fā)太過，而擾動清竅而病發(fā)。目前在中醫(yī)藥研究中的此模型應(yīng)用很少，從臨床研究[11]發(fā)現(xiàn)，使用丹梔逍遙散化裁方治療后患者心煩、失眠、喜太息等精神癥狀的緩解明顯，該方能夠有效的改善不良心理狀態(tài)，緩解精神壓力等疏肝理氣、調(diào)節(jié)情志以及促進患者睡眠質(zhì)量提高的寧心安神作用。

2 中藥治療偏頭痛實驗?zāi)Ｐ偷脑u價

上述所論偏頭痛模型的形成機理各不相同，與中醫(yī)偏頭痛的不同證型的病機尚不能完全對應(yīng)，因此，基于中醫(yī)藥理論正確選擇合適的偏頭痛模型是中醫(yī)藥治療偏頭痛有效性、安全性評價的基本要求。

2.1 硝酸甘油模型在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用評價

文獻顯示，硝酸甘油模型是研究偏頭痛的首選模型，最大優(yōu)點是造模因素單一，只需注射定量硝酸甘油即可，簡單易操作、活體觀察，因此，應(yīng)用廣泛；但細究其用于中醫(yī)藥的研究卻存在理法方藥未明而差強人意。如在行為學(xué)指標的采集方面，付先軍[12]等人建立了一套行為學(xué)評價體系，但耗時長、計數(shù)方法不明，人為計數(shù)觀察偏倚大；有些研究存在藥物作用機制與模型選擇不符的現(xiàn)象，如有學(xué)者[13]用該模型研究正天丸對偏頭痛的治療作用，正天丸中的當歸、桃仁、紅花、細辛、麻黃、附片、雞血藤等藥物活血祛瘀、溫陽止痛，與硝酸甘油模型擴張血管的機理有所差異。其引用文章[14]的表述為“正天丸能降低血管阻力、增加腦血流量、改善微循環(huán)”，但運用的模型為多巴胺和硝酸甘油聯(lián)合造模，血管呈現(xiàn)先收縮后舒張，模擬血管收縮異常的偏頭痛癥狀，值得深究。

2.2 利血平化低5-HT模型在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用評價

利血平化低5-HT模型模擬了血管擴張和收縮的全過程，但在實施過程中只著重了血管收縮：如上述“吳茱萸膠囊”和“少腹逐瘀湯”的偏頭痛實驗研究主要針對該模型后期血管收縮，模糊了藥物在血管擴張時的功效；再者，該模型造模方法周期長，操作技術(shù)要求高、繁瑣，既要用單胺類遞質(zhì)耗竭劑利血平誘發(fā)偏頭痛，又局部注射凝血塊誘發(fā)腦血管痙攣[2]，動物死亡率較高，不適宜在實驗中大批量復(fù)制。

2.3 CSD模型在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用評價

CSD模型會出現(xiàn)一系列的偏頭痛先兆癥狀，楊洪軍[9]等人在老鼠麻醉狀態(tài)下用鉆顱注射氯化鉀直接作用于皮層造成血流改變，模擬頭痛發(fā)作時的血液流變，技術(shù)要求較高，鉆顱過程中易可能引起炎癥，造成誤差，且大鼠始終處于麻醉狀態(tài)，僅適用于研究實驗指標而無法觀察偏頭痛的先兆期和發(fā)作期癥狀特點。

2.4 神經(jīng)血管源性模型在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用評價

神經(jīng)血管源性模型中三叉神經(jīng)模型最為常見，通過刺激三叉神經(jīng)釋放降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）、P物質(zhì)等神經(jīng)肽引起血管擴張和通透性增加，有效模擬了偏頭痛的發(fā)作過程，劉婷[10]運用電刺激三叉神經(jīng)節(jié)，出現(xiàn)刺激側(cè)大鼠咀嚼肌收縮，口鼻分泌物增多前肢頻繁搔頭，煩躁不安等癥狀為造模成功，結(jié)果側(cè)腦膜血管擴張，腦膜血流量增加，并實時監(jiān)測血流變化。但研究也有一定片面性，實驗過程中不僅三叉神經(jīng)可產(chǎn)生疼痛，中樞疼痛調(diào)控紊亂也可產(chǎn)生疼痛；且電刺激法對技術(shù)操作和儀器設(shè)備要求較高，難以在短時間內(nèi)大量復(fù)制。

2.5 基因工程模型在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用評價

現(xiàn)已有通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)建立FHM1和FHM2兩種基因剔除小鼠的模型[1]，研究發(fā)現(xiàn)血液中神經(jīng)遞質(zhì)的的增流與可能神經(jīng)興奮相關(guān)，該模型從基因角度研究偏頭痛機理，發(fā)展前景廣闊，但技術(shù)要求高，研究正在進展中。

2.6 原發(fā)性偏頭痛模型在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用評價

與上述五種人為造成的繼發(fā)性偏頭痛動物模型相比，該模型具有自發(fā)性特點，無需人工干預(yù)即可還原偏頭痛發(fā)作性的痛、視、聽、嗅及面部觸覺敏感性增高的現(xiàn)象。此模型很可能幫助研究者回答偏頭痛是如何自發(fā)產(chǎn)生的，甚至提出新的假說，找到對聲、光等敏感的易患基因[1]，是最有前景的動物模型。但這種大鼠模型如何獲取或如何復(fù)制也將是研究者需要解決的問題。

3 討論與結(jié)論

3.1 根據(jù)干預(yù)手段的主要作用機制選擇偏頭痛動物模型

影響動物模型選擇的因素有研究內(nèi)容、研究藥物的特點和自身的實驗條件等，不同的偏頭痛模型有不同的造模機制，中醫(yī)藥治療手段不同，其作用機制亦明顯不同，開展中醫(yī)藥干預(yù)偏頭痛作用機制研究時，應(yīng)該充分考慮藥物的作用機制與模型的造模機制是否相符，避免研究的盲目性。

硝酸甘油模型的機理為腦血管過度擴張，與肝陽上亢類偏頭痛類似，故此模型適用于研究某種收縮血管或平抑肝陽的藥物，又因為模型動物處于清醒狀態(tài)有利于行為學(xué)觀察方便，故著重觀察動物偏頭痛行為學(xué)變化時可選用，實驗動物可選用易于觀察行為學(xué)的大鼠；利血平化低5-HT模型的機理為血管擴張后又產(chǎn)生收縮和痙攣，與寒凝血瘀類偏頭痛類似，故此模型適用于研究某種擴張血管或溫陽散寒的藥物，因?qū)嶒炛袆游锞裎遥贿m合觀察行為學(xué)，但可用于研究PGE2（前列腺素）、5-HT等外周血炎癥因子，其動物選用大鼠、小鼠皆可；CSD模型的機理為人為直接刺激皮層，造成神經(jīng)元紊亂、皮層電活動異常，神經(jīng)血管性模型的機理為人為直接刺激神經(jīng)血管系統(tǒng)釋放神經(jīng)肽引起血管擴張和通透性增加，此兩類模型與痰瘀阻絡(luò)類偏頭痛類似，故適用于研究某種逐瘀通絡(luò)、熄風化痰的藥物，因?qū)嶒炦^程中動物處于麻醉或抑制狀態(tài)，適合于實時觀測動物血流變化或是測定腦組織中CGRP、P物質(zhì)以及各類神經(jīng)激肽或受體的含量，從免疫組織化學(xué)技術(shù)或基因水平方面研究偏頭痛的機理，實施這兩類實驗?zāi)Ｐ鸵邆浯笮蛯嶒炘O(shè)備和熟練的實驗人員，其動物可選用易于操作的大鼠；基因工程模型和原發(fā)性偏頭痛模型偏向于基因和遺傳性，對偏頭痛的發(fā)病機理還原性高，但對技術(shù)要求高，高端深度研究者可量力選擇。

3.2 根據(jù)偏頭痛動物模型特點選擇治療藥物

臨床治療偏頭痛時患者往往希望快速止痛，因此對于治療偏頭痛藥物（主要是西藥）的起效時間要求較高。中醫(yī)藥治療偏頭痛效果的顯現(xiàn)往往需要較長的周期，因此，應(yīng)用偏頭痛模型研究中醫(yī)藥抗偏頭痛的療效時，需要考慮藥物的藥物作用特點和時效性。

硝酸甘油模型著重于動物在一定的時間段內(nèi)的亢奮性行為變化，要從平抑肝陽、祛風止痛類藥物中選用短時效藥物，如川芎之屬，其性辛溫又秉升散之性，善上行頭目而疏風止痛；藥理方面研究表明其揮發(fā)油具有鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、改善血管功能、保護神經(jīng)細胞、解熱等作用[15]，而且經(jīng)口給藥方式可使川芎揮發(fā)油快速分布于腦部[16]，故可快速改善頭部疼痛癥狀，不必長期用藥；利血平化低5-HT模型著重于偏頭痛發(fā)作抑制性行為表現(xiàn)，癥狀持續(xù)時間長，選用溫經(jīng)散寒、活血化瘀類藥物，如吳茱萸、延胡索之屬，吳茱萸辛溫入脾經(jīng)而散寒止痛，現(xiàn)代藥理研究表明吳茱萸次堿具有舒張血管、抗炎鎮(zhèn)痛等作用[17]；延胡索辛散，行上下四經(jīng)活血散結(jié)止痛，《本草綱目》言之“能行血中氣滯，氣中血滯，故專治一身上下諸痛”，現(xiàn)代藥理研究認為：延胡索生物堿具有較強的鎮(zhèn)痛、擴張冠狀動脈，增加冠脈血流量等藥理作用[18]，長期服用這類藥物均可改善腦部血流量，緩解頭痛癥狀；神經(jīng)血管源性模型和CSD模型都屬于直接刺激腦膜神經(jīng)或皮層，血流變化或頭痛癥狀持續(xù)存在，要從逐瘀通絡(luò)、熄風化痰類藥物中選用起效時間快、作用時間長的藥物，如鉤藤、天麻之屬，兩者入肝經(jīng)，可息風止痙緩解急性頭痛，現(xiàn)代藥理研究表明鉤藤能阻斷鈣離子通道，保護神經(jīng)細胞[19]，且能降低偏頭痛狀態(tài)下產(chǎn)生的NO、前列腺素E、白細胞介素1β細等物質(zhì)[20]，天麻素可以改善小腦前下動脈、小腦后下動脈、椎基底動脈、迷路動脈以及內(nèi)耳供血不足，保護神經(jīng)細胞[21]，兩類藥物均可改善血管內(nèi)環(huán)境，有效緩解偏頭痛癥狀，又可持續(xù)修復(fù)病灶；基因工程偏頭痛模型和原發(fā)性頭痛模型表現(xiàn)與臨床最接近，不可急于求成，需用補益肝腎、解郁養(yǎng)血安神類藥物，如何首烏、白芍、熟地之屬，這類藥物偏于長期服用以補益肝腎，改善自身頭痛敏感基因，改善體內(nèi)環(huán)境，逐漸恢復(fù)平和體質(zhì)，達到治療效果。

通過對各類偏頭痛模型應(yīng)用的評價以及對模型和藥物治療的選擇性建議，為本課題藏藥如意珍寶丸的藥效學(xué)研究做好前期工作，恰當?shù)倪x擇偏頭痛動物模型進一步研究如意珍寶丸對偏頭痛的治療作用。

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