付巖松，李春宇，鐘 越，張宸豪審校

(吉林醫(yī)藥學(xué)院檢驗(yàn)學(xué)院,吉林 吉林 132013)

青蒿為菊科植物的地上干燥部分。青蒿素是從青蒿中提取的抗瘧性藥物，經(jīng)四氫硼鈉的氧化作用成為雙氫青蒿素。實(shí)驗(yàn)研究表明其具有抗瘧、抗腫瘤、抗病毒及免疫調(diào)節(jié)等藥理作用，并且與多種抗腫瘤藥物聯(lián)合使用可以降低抗腫瘤藥物的副作用。因此雙氫青蒿素是青蒿素家族成員中目前研究的熱點(diǎn)，本文對(duì)其最新的研究進(jìn)展作一綜述。

1 抗瘧作用

雙氫青蒿素喹啉片是雙氫青蒿素磷酸喹啉和磷酸喹啉的化合物。喹啉是4-氨基喹啉的抗瘧藥，其抗瘧作用與氯喹非常相似。原生動(dòng)物線(xiàn)粒體腫脹，使瘧疾寄生蟲(chóng)的生理功能受損，用這種方法可以殺死原蟲(chóng)，兩種藥物聯(lián)合后沒(méi)有明顯的毒副作用，臨床療效更為顯著。熊紅霞[1]等對(duì)治療組口服雙氫青蒿素喹啉片治療，與對(duì)照組口服奎寧治療相比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)照組總有效率為76.0%，治療組為95.0%；不良反應(yīng)發(fā)生率對(duì)照組為12.7%，治療組為2.7%。隨訪(fǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)治療組復(fù)發(fā)率明顯降低，表明雙氫青蒿素喹啉抗瘧效果更為顯著，不良反應(yīng)發(fā)生率和復(fù)發(fā)率更低。2007年在撒哈拉以南非洲地區(qū)有三千萬(wàn)以上孕婦，懷孕期間的瘧疾據(jù)估計(jì)是高達(dá)20%的分娩時(shí)出生體重低的原因，導(dǎo)致每年超過(guò)10萬(wàn)例嬰兒死亡。世界衛(wèi)生組織建議在非洲流行惡性瘧原蟲(chóng)的所有國(guó)家的孕婦中實(shí)施瘧疾預(yù)防措施。這些措施包括在懷孕期間使用持久性農(nóng)藥處理的蚊帳和間歇性使用磺胺多辛-乙胺嘧啶預(yù)防。然而隨著對(duì)磺胺多辛-乙胺嘧啶的耐藥性的擴(kuò)散，需要新的干預(yù)措施。KAKURU[2]等通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)間歇使用雙氫青蒿素-哌喹對(duì)瘧疾感染發(fā)病率控制較好，妊娠期瘧疾感染和臨床瘧疾發(fā)病率均低于磺胺多辛-乙胺嘧啶。懷孕期間用雙氫青蒿素-哌喹進(jìn)行的間歇預(yù)防性治療在高度傳播的環(huán)境中具有比磺胺多辛胺-乙胺嘧啶具有更好的抗瘧性，使用較高劑量的雙氫青蒿素-哌喹(早在16周妊娠每4周開(kāi)始一次)就可起到保護(hù)孕婦不受瘧疾感染。

2 抗炎作用

炎癥反應(yīng)是一種復(fù)雜的生物反應(yīng)，長(zhǎng)期過(guò)度炎癥會(huì)引起身體亞健康狀態(tài)并導(dǎo)致組織損傷。據(jù)報(bào)道雙氫青蒿素抑制促炎細(xì)胞因子(IL-6、IL-1β、IL-10、TNF-α)的釋放并介導(dǎo)人體的免疫調(diào)節(jié)，如牙周炎、口腔炎等慢性炎癥反應(yīng)性疾病。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，雙氫青蒿素抑制Th分化，促進(jìn)Treg的產(chǎn)生，這表明雙氫青蒿素可以用于炎癥性疾病治療。ZHAO[3]等發(fā)現(xiàn)，在合適的劑量下雙氫青蒿素可以影響T細(xì)胞的特異功能：它抑制Th分化，但促進(jìn)Treg細(xì)胞的產(chǎn)生。盡管雙氫青蒿素消除Th17分化，但不影響白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)或轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的信號(hào)傳遞，并且不影響IL21/IL23-RORγt，IL22-Ahr信號(hào)軸。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)雙氫青蒿素不能影響STAT-3激活，但僅影響STAT-3下游的信號(hào)。因此，雙氫青蒿素的作用與STAT-3無(wú)關(guān)，其抗炎機(jī)制主要通過(guò)調(diào)節(jié)TGF-β/Smad和mTOR途徑。因此，雙氫青蒿素是促進(jìn)炎性疾病的抗原特異性和非特異性治療有希望的藥物。最新研究表明自噬也是防御機(jī)制，包括肝纖維化。因此，自噬可能是治療肝纖維化的新藥物靶點(diǎn)。郭永澤等[4]研究了雙氫青蒿素對(duì)自噬的影響，并進(jìn)一步研究了抗炎作用的分子機(jī)制。他們發(fā)現(xiàn)雙氫青蒿素在控制過(guò)度炎癥中起著至關(guān)重要的作用。在肝纖維化模型中，雙氫青蒿素抑制炎癥并抑制活性肝細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子的表達(dá)。雙氫青蒿素增加活化的肝細(xì)胞的自噬作用，這是雙氫青蒿素的抗炎活性的潛在機(jī)制。自噬損耗降低了雙氫青蒿素的抗炎作用，而自噬對(duì)雙氫青蒿素具有協(xié)同作用?？傊?，這些結(jié)果提供了新的啟示，即使用雙氫青蒿素類(lèi)的藥物很可能用于治療炎癥性疾病。

3 抗腫瘤作用

雙氫青蒿素主要通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，阻斷細(xì)胞周期，介導(dǎo)Fe2+直接殺死腫瘤細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，雙氫青蒿素對(duì)胃癌、白血病、結(jié)腸癌、前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌細(xì)胞具有顯著的殺傷作用。劉玉翠[5]等采用MTT法檢測(cè)不同濃度的雙氫青蒿素作用U87細(xì)胞24、48、72 h，結(jié)果表明，不同濃度的雙氫青蒿素可顯著抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，雙氫青蒿素對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用隨著藥物濃度和時(shí)間的增加而更加明顯。林芳等[6]通過(guò)細(xì)胞周期測(cè)定發(fā)現(xiàn)1 μmol/L雙氫青蒿素作用MCF-7細(xì)胞24 h，周期分析表明G0和G1期、S期細(xì)胞明顯減少。姚麗[7-8]等研究，采用雙氫青蒿素作用K562細(xì)胞24 h，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)被抑制，顯微鏡下可見(jiàn)明顯凋亡。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明藥物作用細(xì)胞后細(xì)胞生長(zhǎng)受抑，表示K562細(xì)胞的增殖被雙氫青蒿素顯著抑制,通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞阻滯在G2期，表明雙氫青蒿素可能影響K562細(xì)胞G2期向M期的轉(zhuǎn)化，使細(xì)胞不能有絲分裂。細(xì)胞周期蛋白B1、細(xì)胞周期蛋白D1、cdk4、cdk2、E2F1、PCNA和chk1的表達(dá)與細(xì)胞周期有關(guān)。雙氫青蒿素可以降低細(xì)胞周期蛋白B1的表達(dá)，使得G2/M期細(xì)胞周期蛋白B1蛋白的合成較少，不足以與Cdc2組合形成MPF(成熟促進(jìn)因子)，MPF是從G2到M的驅(qū)動(dòng)細(xì)胞運(yùn)行一個(gè)重要因素。由于藥物的作用，產(chǎn)生的MPF的量間接減少，使得腫瘤細(xì)胞顯示出G2期至M期的抑制作用。雙氫青蒿素下調(diào)細(xì)胞周期蛋白E1的表達(dá)，抑制細(xì)胞周期蛋白E1蛋白與cdk2的結(jié)合，影響腫瘤細(xì)胞的G1/S轉(zhuǎn)換，抑制細(xì)胞周期。雙氫青蒿素也可以調(diào)低cdk2的表達(dá)，對(duì)以上作用起到協(xié)同作用。最近的研究表明，雙氫青蒿素在嚴(yán)重的缺氧條件下具有顯著的抗腫瘤作用，由于其藥物作用的復(fù)雜性，具體的抗腫瘤機(jī)制需要進(jìn)一步的探索。

4 抗肺纖維化作用

肺纖維化是一種高死亡率的呼吸系統(tǒng)疾病，其發(fā)病率涉及多種機(jī)制，包括上皮細(xì)胞損傷、成纖維細(xì)胞增生、炎癥和膠原凝固。我們以前發(fā)現(xiàn)雙氫青蒿素可以抑制大鼠肺纖維化的發(fā)展。最新研究發(fā)現(xiàn)[9]，博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化中雙氫青蒿素顯著減少炎癥細(xì)胞因子和膠原合成，抑制成纖維細(xì)胞增殖。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的過(guò)度表達(dá)導(dǎo)致肺纖維化的發(fā)展。將巨噬細(xì)胞和其他炎性細(xì)胞暴露于二氧化硅或博來(lái)霉素以在肺中產(chǎn)生TNF-α。IL-1是激活RhoA信號(hào)通路的另一個(gè)關(guān)鍵的炎性細(xì)胞因子，可引起Rho依賴(lài)性細(xì)胞骨架重組，而雙氫青蒿素減少了肺組織中的TNF-α、IL-1，這與通過(guò)組織病理學(xué)方法評(píng)估的肺纖維化程度相關(guān)。雙氫青蒿素對(duì)肺纖維化的減少至少部分是由于其對(duì)成纖維細(xì)胞因子的產(chǎn)生的抑制作用，從而調(diào)節(jié)膠原合成。因此，雙氫青蒿素有望成為治療肺纖維化的新藥。

4 抗其他寄生蟲(chóng)作用

寄生蟲(chóng)病對(duì)人類(lèi)健康和家畜生產(chǎn)危害十分嚴(yán)重。在大部分的發(fā)展中國(guó)家，寄生蟲(chóng)病呈上升趨勢(shì)，對(duì)人們的健康與生命帶來(lái)嚴(yán)重威脅。陳培泉等[10]認(rèn)為，雙氫青蒿素的總劑量為360 mg，治療惡性瘧原蟲(chóng)有性生殖期5 d有顯著抑制作用，可以打斷未成熟的配子體發(fā)育，并可以殺死惡性瘧原蟲(chóng)配子體的早期階段。李紅軍等[11]用日本血吸蟲(chóng)小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)感染了雙氫青蒿素對(duì)日本血吸蟲(chóng)體內(nèi)抗性的影響，結(jié)果表明，二代青蒿素對(duì)7 d幼蟲(chóng)和35 d成蟲(chóng)的影響均十分有效，減蟲(chóng)率分別為64.8%和60.5%，減雌率分別為73.8%和90.5%。但隨著劑量的增加，效果并不隨之提高，表明當(dāng)使用雙氫青蒿素時(shí)劑量效應(yīng)關(guān)系不明顯。余源等[13]通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀(guān)察到，藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)滋養(yǎng)體蛋白質(zhì)在雙氫青蒿素的作用下被明顯殺傷，包括對(duì)細(xì)胞骨架蛋白的損傷。湯自豪等[13]使用掃描電子顯微鏡和電子顯微鏡觀(guān)察雙氫青蒿素對(duì)陰道毛滴蟲(chóng)的影響。雙氫青蒿素對(duì)滴蟲(chóng)的作用后，細(xì)胞膜受損，表面褶皺加深；細(xì)胞膜受損，細(xì)胞質(zhì)流出；細(xì)胞膜剝落后，許多結(jié)構(gòu)暴露出來(lái)，蟲(chóng)體最終死亡。表明雙氫青蒿素可以損傷陰道毛滴蟲(chóng)膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致昆蟲(chóng)死亡。進(jìn)一步的研究表明，雙氫青蒿素與甲硝唑聯(lián)用可顯著提高體外抗陰道滴蟲(chóng)的療效。因此，雙氫青蒿素具有治療寄生傳染病的良好應(yīng)用前景。

雙氫青蒿素除上述藥理作用外還，具有免疫調(diào)節(jié)等作用。除了用于瘧疾的治療,抗腫瘤效應(yīng)已成為研究的熱點(diǎn)。雖然抗腫瘤機(jī)制尚未完全了解，但逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥和緩解傳統(tǒng)化療藥物毒性等方面已達(dá)成共識(shí)。相信隨著其藥物機(jī)制研究的不斷深入，在將來(lái)臨床治療癌癥的過(guò)程將發(fā)揮更大的作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 熊紅霞,李新萍,徐友高.國(guó)產(chǎn)雙氫青蒿素哌喹片治療非洲惡性瘧疾效果評(píng)價(jià)[J].深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志,2016,26(11):54-56.

[2] KAKURU A,JAGANNATHAN P,MUHINDO M K,et al.Dihydroartemisinin-Piperaquine for the Prevention of Malaria in Pregnancy[J].N Engl J Med,2016,374(10):928-939.

[3] ZHAO Y G,WANG Y Q,GUO Z L,et al.Dihydroartemisinin ameliorates inflammatory disease by its reciprocal effects on Th and regulatory T cell function via modulating the mammalian target of rapamycin pathway[J].J Immunol,2012,189(9):4417-4425.

[4] 郭永澤，單鐵英，任海霞，等.雙氫青蒿素對(duì)實(shí)驗(yàn)性小鼠肝纖維化的抑制作用[J].河北醫(yī)學(xué)，2016，38(6)：824-826.

[5] 劉玉翠,楊陽(yáng),金嵩，等.雙氫青蒿素抗惡性腦膠質(zhì)瘤作用的研究[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào),2016,37(1):23-25.

[6] 林芳,錢(qián)之玉,薛紅衛(wèi)，等.青蒿素和青蒿琥酯對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的體外抑制作用比較研究[J].中草藥,2003,34(4):347-349.

[7] 姚麗,何敬和,謝紅，等.青蒿琥酯和二氫青蒿素抑癌作用機(jī)理研究[J].武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,19(1):13-16.

[8] ZHANG Z S,WANG J,SHEN Y B,et al.Dihydroartemisinin increases temozolomide efficacy in glioma cells by inducing autophagy[J].Oncol Lett,2015,10(1):379-383.

[9] YANG D X,YUAN W D,Lü C Y,et al.Dihydroartemisinin supresses inflammation and fibrosis in bleomycine-induced pulmonary fibrosis in rats[J].Int J Clin Exp Pathol,2015,8(2):1270-1281.

[10] 陳沛泉，郭興伯，李廣謙，等.雙氫青蒿素對(duì)惡性瘧原蟲(chóng)有性生殖期的影響[J].中藥新藥與臨床藥理，1999,10(6)：333-336.

[11] 李洪軍，梁幼生，戴建榮，等.雙氫青蒿素抗日本血吸蟲(chóng)作用的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀(guān)察[J].中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志，2009，21(6)：468-472.

[12] 余源，陳陽(yáng)，王衛(wèi)亮，等.雙氫青蒿素對(duì)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)滋養(yǎng)體蛋白質(zhì)的損傷[J].中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)，2010,26(11)：995-999.

[13] 湯自豪，劉可越，梅鈞，等.雙氫青蒿素與甲硝唑體外抗陰道毛滴蟲(chóng)的電鏡觀(guān)察[J].中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志，2010,28(6)：416-420.