嚴(yán)旭東 劉 佳

(達(dá)州職業(yè)技術(shù)學(xué)院內(nèi)科教研室，四川 達(dá)州 635000)

阿爾茨海默病(AD)以突出的進(jìn)行性認(rèn)知障礙和行為損害為主要表現(xiàn)〔1〕。目前認(rèn)為AD是一種多因異質(zhì)性疾病〔2〕。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛表達(dá)，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元的生長(zhǎng)、生存、功能維持和修復(fù)均起作用〔3〕。超氧化物歧化酶(SOD)是歧化超氧陰離子的專一性酶，是生物體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)，可以對(duì)抗與阻斷氧自由基對(duì)細(xì)胞形成的損害，并對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞修復(fù)起一定作用〔4〕。本文分析AD患者血清中BDNF和SOD的表達(dá)特點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1臨床資料 通過美國(guó)國(guó)立神經(jīng)病語(yǔ)言障礙腦卒中研究所和AD及相關(guān)疾病協(xié)會(huì)(NINCDS-ADRDA)診斷標(biāo)準(zhǔn)選擇2013年1月至2015年12月達(dá)州職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院住院治療的AD患者68例為觀察組，年齡61～88歲，平均70.3歲，其中男38例，女30例。根據(jù)臨床癡呆評(píng)定表(CDR)評(píng)定病變的嚴(yán)重程度。無(wú)明顯神經(jīng)系統(tǒng)疾病及明顯器質(zhì)性疾病的成人血清標(biāo)本21例為對(duì)照組，其中男11例，女10例，年齡38～65歲，中位年齡50歲。

1.2血清中BDNF和SOD的檢測(cè) 觀察組于確診后抽取空腹靜脈血3 ml，對(duì)照組常規(guī)抽取空腹靜脈血3 ml，以2 000 r/min離心15 min后分離血清，置于-20℃冰箱中凍存。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)血清中BDNF的表達(dá)，應(yīng)用化學(xué)比色法檢測(cè)血清中SOD的表達(dá)，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟操作，減少誤差。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、方差分析、線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組BDNF和SOD表達(dá)的比較 兩組BDNF和SOD的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2觀察組不同臨床特征患者血清中BDNF和SOD表達(dá)的比較 觀察組BDNF和SOD表達(dá)與病變嚴(yán)重程度和病程密切相關(guān)(P<0.05)。見表2。

2.3觀察組血清中BDNF和SOD表達(dá)的相關(guān)性 BDNF和SOD表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性(P=0.328 1)。

表1 兩組BDNF和SOD表達(dá)的比較

表2 觀察組不同臨床特征患者血清中BDNF和SOD表達(dá)的比較

3 討 論

AD的發(fā)生機(jī)制中，氧化應(yīng)激學(xué)說受到明顯關(guān)注，主要是機(jī)體生產(chǎn)過?；虿贿m當(dāng)?shù)慕舛荆箽浠镌谀X組織中蓄積，觸發(fā)神經(jīng)細(xì)胞的毒性反應(yīng)，引起神經(jīng)退行性病變〔5，6〕。BDNF是由德國(guó)神經(jīng)生物學(xué)家提取出的一種蛋白質(zhì)，其單體由119個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為13 kD，人的BDNF的前體蛋白由247個(gè)氨基酸組成，水解成119個(gè)殘基單體，兩個(gè)單體以非共價(jià)鍵形式組成成熟蛋白〔7，8〕。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的多種神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞中均有BDNF，其分布也較為廣泛，如大腦皮層、海馬、基底前區(qū)、紋狀體、下丘腦和小腦等部位〔9〕。在中樞系統(tǒng)中BDNF以旁分泌的方式分泌，同時(shí)也有自分泌與神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的順行軸突運(yùn)輸相關(guān)〔10〕。研究顯示BDNF主要通過調(diào)節(jié)細(xì)胞膜上鈣離子通道蛋白的表達(dá)發(fā)揮抗自由基損傷及調(diào)節(jié)神經(jīng)元內(nèi)基因的表達(dá)，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡及壞死〔11〕；其次BDNF與酪氨酸激酶(Trk)B受體結(jié)合后能激活多種信號(hào)通路，促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞產(chǎn)生tau蛋白脫磷酸化；再次BDNF能支持膽堿能神經(jīng)元的生存并上調(diào)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)〔12〕。SOD作為一種主要的自由基清除酶，在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生中具有重要意義〔13〕。SOD在體內(nèi)的主要作用是清除超氧陰離子，在體內(nèi)的含量常受超氧陰離子的影響，當(dāng)機(jī)體內(nèi)超氧陰離子濃度高于正常水平時(shí)，其誘導(dǎo)的SOD合成能力明顯增強(qiáng)，但是SOD清除超氧陰離子的能力有限，如果超氧陰離子的產(chǎn)生超過 SOD的清除能力，使超氧陰離子的濃度明顯增高，產(chǎn)生毒性作用〔14，15〕。其次體內(nèi) SOD活性的大小、清除也對(duì)超氧陰離子濃度有一定的影響〔16〕。本研究結(jié)果提示BDNF和SOD表達(dá)異常與病變形成相關(guān)，BDNF和SOD可能對(duì)預(yù)測(cè)病變嚴(yán)重程度有一定價(jià)值，也可能在一定程度上提示病程長(zhǎng)短。由于BDNF可以對(duì)海馬NMDA受體的功能具有一定的上調(diào)作用，參與突觸長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的形成過程，因此當(dāng)BDNF表達(dá)下調(diào)后，對(duì)突觸的這種調(diào)節(jié)作用下降，形成抑制作用。這種作用被認(rèn)為是BDNF通過與TrkB受體結(jié)合后激活相關(guān)因子起作用的〔17〕。BDNF能支持膽堿能神經(jīng)元的生存并上調(diào)神經(jīng)元乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)，海馬內(nèi)大量乙酰膽堿酯酶陽(yáng)性纖維主要來(lái)源于基底節(jié)的膽堿能神經(jīng)元。當(dāng)海馬內(nèi)的BDNF表達(dá)下調(diào)時(shí)，可以引起B(yǎng)DNF逆行性運(yùn)輸減少，對(duì)基底節(jié)區(qū)膽堿能神經(jīng)元的支持作用下降，促進(jìn)膽堿能神經(jīng)元形成進(jìn)行性凋亡，加重記憶功能障礙的發(fā)生。SOD可以直接清除超氧自由基，防止氧應(yīng)激引發(fā)的神經(jīng)細(xì)胞損傷。部分神經(jīng)細(xì)胞損傷后SOD基因突變或活性失常，引起體內(nèi)超氧陰離子在基因水平發(fā)生變化，并形成較多的活性氧，引起生物膜上的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，對(duì)核酸進(jìn)行破壞，對(duì)蛋白的合成形成明顯的影響，并引起DNA的氧化損傷，發(fā)生基因突變及神經(jīng)細(xì)胞的凋亡〔18〕。本文結(jié)果提示BDNF和SOD無(wú)明顯協(xié)同作用。雖然BDNF和SOD均與神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)有關(guān)，但是二者的作用方式可能完全不同，其具體機(jī)制有待更多研究證實(shí)。

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